Gtc125normasmicrobiologicasdealimentos

GUÍA TÉCNICA GTC
COLOMBIANA 125

2005-10-26

GUÍA DE REFERENCIAS DE MÉTODOS
HORIZONTALES DE ANÁLISIS MICROBIOLÓGICOS
PARA BEBIDAS, ALIMENTOS Y ALIMENTOS PARA
ANIMALES

E: REFERENCES GUIDE FOR HORIZONTAL
MICROBIOLOGYCAL METHODS FOR BEVERAGE, FOOD
AND ANIMAL FEEDING STUFFS

CORRESPONDENCIA:

DESCRIPTORES: microbiología de alimentos – métodos
horizontales; microbiología de
alimentos – alimentos para animales;
microbiología de alimentos – bebidas.

I.C.S.: 07.100.30

Editada por el Instituto Colombiano de Normas Técnicas y Certificación (ICONTEC)
Apartado 14237 Bogotá, D.C. - Tel. 6078888 - Fax 2221435

Prohibida su reproducción Editada 2005-11-08

PRÓLOGO

El Instituto Colombiano de Normas Técnicas y Certificación, ICONTEC, es el organismo
nacional de normalización, según el Decreto 2269 de 1993.

ICONTEC es una entidad de carácter privado, sin ánimo de lucro, cuya Misión es fundamental
para brindar soporte y desarrollo al productor y protección al consumidor. Colabora con el
sector gubernamental y apoya al sector privado del país, para lograr ventajas competitivas en
los mercados interno y externo.

La representación de todos los sectores involucrados en el proceso de Normalización Técnica
está garantizada por los Comités Técnicos y el período de Consulta Pública, este último
caracterizado por la participación del público en general.

La GTC 125 fue ratificada por el Consejo Directivo de 2005-10-26

Esta guía está sujeta a ser actualizada permanentemente con el objeto de que responda en
todo momento a las necesidades y exigencias actuales.

A continuación se relacionan las empresas que colaboraron en el estudio de esta guía a través
de su participación en el Comité Técnico 25 Microbiología.

3M COLOMBIA -DIVISIÓN DE MICROBIOLOGÍA- FARMACOOP
ACEITES Y GRASAS VEGETALES S.A. FRIGORÍFICO GUADALUPE S.A.
ALGARRA S.A. FRIGORÍFICOS COLOMBIANOS S.A.
ALPINA S.A. GASEOSAS COLOMBIANAS S.A.
AQUALAB LTDA. HOSPITAL DE SAN CRISTÓBAL
ASESORÍAS MICROBIOLÓGICAS HOSPITAL SAN JOSÉ
ASINAL LTDA INSTITUTO NACIONAL DE SALUD
ASOCIACIÓN COLOMBIANA DE MICROBIOLOGÍA IVONNE BERNIER LABORATORIO LTDA.
AVESCO Y KLIK S.A. -LABFARVE- LABORATORIO DE
BIANÁLISIS FARMACOLOGÍA VEGETAL
BIOCONTROL LTDA. LABORATORIO A.B.B.A.
BIOIMÁGEN LABORATORIO DE CONTROL DE
BIOMERIUX S.A. CALIDAD DEL EJÉRCITO
BIOQUILAB LTDA. LABORATORIO LABCONTROL
BIOTRENDS LABORATORIOS LABORATORIOS GRAM
CALIDAD MICROBIOLÓGICA LARKIN
CARULLA VIVERO S.A. LESNIAK E.U.
CERCAL LTDA. LEVAPÁN S.A.
COLEGIO MAYOR DE CUNDINAMARCA MERCADEO DE ALIMENTOS DE
COMPAÑÍA NACIONAL DE CHOCOLATES S.A. COLOMBIA S.A.
CONGELAGRO MERCK S.A.
CREPES & WAFLES S.A. MICROBIÓLOGOS ASOCIADOS
EMPRESA DE ACUEDUCTO Y NULAB LTDA.
ALCANTARILLADO DE BOGOTÁ –E.S.P.– PONTIFICIA UNIVERSIDAD JAVERIANA
ENZIPAN DE COLOMBIA LTDA.
FÁBRICA DE ESPECIAS Y CONDIMENTOS
EL REY S.A.

QUÍMICOS Y REACTIVOS LTDA. -QUIMIREL- SECRETARÍA DISTRITAL DE SALUD
REPRESENTACIONES BIOTECNOLÓGICAS SUIZO S.A.
LTDA. SURTIQUÍMICOS LTDA.
ROCHE DIAGNOSTICS UNIVERSIDAD DE LOS ANDES

Además de las anteriores, en Consulta Pública el Proyecto se puso a consideración de las
siguientes empresas:

ASESORÍAS MICROBIOLÓGICAS MERCK S.A.
BAVARIA S.A. MINISTERIO DE PROTECCIÓN SOCIAL.
CASA LUKER NESTLÉ DE COLOMBIA S.A.
CENICAÑA PASIFLORA COLOMBIANA S.A.
CONGELAGRO PRODUCTORA DE CONCENTRADOS Y
CONSULTORÍAS MICROBIOLÓGICAS JUGOS DE FRUTA
COOPERATIVA DE GANADEROS DE PURIFICACIÓN Y ANÁLISIS DE FLUIDOS
CARTAGENA LTDA. LTDA.
EJÉRCITO QUALA S.A.
FRIGORÍFICO SUIZO S.A. QUIOS LTDA.
INGENIO PICHICHI S.A. -RICA RONDO- INDUSTRIA NACIONAL
INGENIO RIOPAILA DE ALIMENTOS S.A.
INSTITUTO COLOMBIANO TECNIMICRO LABORATORIO DE
AGROPECUARIO -ICA- ANÁLISIS
-INVIMA- INSTITUTO NACIONAL DE UNIDAD ADMINISTRATIVA DE SALUD
VIGILANCIA MEDICAMENTOS Y PÚBLICA
ALIMENTOS UNIVERSIDAD CATÓLICA INGECAL
LABORATORIO MICROBIOLÓGICO SIS VIKINGOS
LLOREDA GRASAS S.A.

ICONTEC cuenta con un Centro de Información que pone a disposición de los interesados
normas internacionales, regionales y nacionales y otros documentos relacionados.

DIRECCIÓN DE NORMALIZACIÓN

GUÍA TÉCNICA COLOMBIANA GTC 125

GUÍA DE REFERENCIAS DE MÉTODOS HORIZONTALES DE ANÁLISIS
MICROBIOLÓGICOS PARA BEBIDAS, ALIMENTOS Y ALIMENTOS PARA ANIMALES

1. OBJETO

1.1 Esta guía brinda información sobre los métodos horizontales propuestos por diferentes
entidades oficiales para el análisis de los alimentos. Son criterios mínimos que todos los
laboratorios deberían considerar al establecer sus técnicas de análisis.

1.2 Esta guía fue diseñada para que la utilicen quienes son responsables de realizar los
análisis microbiológicos de alimentos.

1.3 Esta guía presenta las características de los medios de cultivo, tiempos, temperatura y
forma de expresión de los resultados para cada método horizontal propuesto.

1.4 Esta guía no pretende limitar solo el uso de los métodos horizontales, sino por el
contrario presentar también las alternativas de las metodologías propuestas por entidades
oficialmente reconocidas.

2. RESUMEN DE LA GUÍA

Esta guía describe las directrices más importantes a tener en cuenta en la aplicación de un
método horizontal, como son los medios de cultivo, los rangos de temperatura y los tiempos
límites de incubación según el microorganismo a detectar.

Aunque esta guía está prevista para aplicarla a todos los alimentos de consumo humano
incluidos los productos lácteos, y alimentos de consumo animal, pueden existir ciertos
alimentos a los cuales los métodos de ensayos descritos no aplican debido a la naturaleza de
la muestra.

3. IMPORTANCIA Y USO

La escogencia de un método horizontal para la evaluación de un alimento determinando su
inocuidad o rechazo para consumo humano o animal y los resultados de los análisis, se usan
para control de los procesos o evaluación de la conformidad con la reglamentación que
establece los límites de aceptabilidad para un producto.

1


Los laboratorios que llevan a cabo muestreo de alimentos y generan datos estadísticos, y las
personas que tienen la responsabilidad de seleccionar un laboratorio para realizar estudios de
la calidad de los alimentos, necesitan utilizar criterios, directrices y recomendaciones de
métodos oficiales para la evaluación de sus productos.

La demostración y documentación por parte de un laboratorio de que hubo una selección
apropiada del método para el análisis del alimento, incrementa la credibilidad de los datos
producidos y promueve su aceptación.

Por lo tanto, la guía proporciona recomendaciones para la selección de los diferentes métodos
horizontales utilizados tanto a nivel internacional, como a nivel nacional para cada uno de los
microorganismos que se pueden presentar en una muestra para analizar.

2


Tabla 1. Métodos horizontales para hongos y levaduras

Entidad Principio de la Incubación
Método Alimentos Medio cultivo Expresión de resultados
oficial técnica
Temperatura Tiempo
Filtración por
Número más probable
25 C ± 1 C
o o
membrana 995.21 Todos los alimentos Agar YM - 11 50 h ± 2 h
(NMP)
AOAC 2000 hidrofóbica
Capítulo 17 Membrana hidrofóbicas
Recuento en o o
997.02 Todos los alimentos Yeast and Mold Count 20 C a 25 C 5d Contar cajas hasta 150 Colonias
placa
Plate
Recuento en
1 OGY
STANDARD placa
METHODS Recuento en
Dairy 2 DRBC
placa o o
Todos los alimentos 25 C ± 1 C 5d Se cuenta entre 15 y 150 colonias
Products Recuento en
1992 16th 3 SMA + Clortetraciclina
placa
Capítulo 8.10 Recuento en
4 PDA
placa
Oxitetraciclina Se cuenta entre 30 y 300 colonias.
Recuento en o o
ICMSF 1984 1 Todos los alimentos Gentamicina Extracto de 20 C a 24 C 3da5d Calcular mohos y levaduras por
placa
levadura Glucosa (YGC) aparte

Recuento en o o
INVIMA 1998 1 Todos los alimentos OGY 22 C ± 2 C 5da7d Se cuenta entre 20 y 100 colonias
placa
Continúa . . .

3


Tabla 1. (Continuación)

oficial técnica Temperatura Tiempo
DRBC (M183)
DG18 ( M184)
PCA (M124)+
Recuento en Cloranfenicol
Capítulo 18 Todos los alimentos Agar maltosa (M185) 25 °C ± 1 °C 5d
placa/dilución
Agar extracto Malta
(M182) Contar cajas entre 10 - 150 colonias
Agar Papa Dextrosa
(M127)
FDA - BAM
2001 Habas, nueces,
condimentos, café, DRBC (M183)
Recuento en
Capítulo 18 coco, etc. Alimentos 25°C ± 1 °C 5d
placa directo
que deben ser
DG18 ( M184)
abiertos con pinzas
Microscopia
Fluorescencia
Cuantificación Bebidas y muestras
Capítulo 18 Azul de Anilina NaOH
levaduras liquidas
viables y no
viables

4



Incubación
Entidad Principio de la
oficial técnica Temperatura Tiempo

Agar Plate o Contar entre 15 - 150 colonias.
20.52 Todos los alimentos 22 °C a 25 C 5d
count+Cloramfenicol Reportar como UFC por g o ml

Cereales, arroz, o Contar entre 15 - 150 colonias.
20.53 Agar DG18 22 °C a 25 C 5d
nueces y condimentos Reportar como UFC por g o ml

o
20.541 Mohos acidofílicos Agar ADYS 25 C 5da7d

Mohos o
20.542 Agar AFPA 32 C 42 h a 48 h
Aflatosxigénicos
APHA o
Recuento 20.543 Especies de Fusarium Agar CZID 25 C 7d
Capítulo 20
o
20.545 Especies De Mucor Agar MYCK 25 C 5d
Contar entre 15 - 150 colonias.
Especies De o
Reportar como UFC por g o ml
20.546 Agar DRYES 20 C 7da8d
Penicilium
Levaduras resistentes o
20.547 Agar Agar MAA o TGY 25 °C a 30 C 3da5d
a preservantes
o
20.548 Hongos Xerofílicos Agar DG18 o MY50G 25 C ± 1 °C 7d
Levaduras dominantes o
20.549 Agar MEA o TGY 25 C ± 1 °C 3d
en alimentos

5


Tabla 1. (Final)

oficial técnica
Temperatura Tiempo

Recuento en NTC 4132 Agar extracto Contar entre 15 - 150 colonias.
o
ICONTEC Todos los alimentos levadura, dextrosa, 25 C ± 1 °C 3da5d
placa ISO 7954 Reportar como UFC por g o ml
cloranfenicol
PDA
Recuento en o Contar entre 15 - 150 colonias.
AACC AACC 4250 Todos los alimentos PLATE COUNT 22 °C a 25 C 3da5d
placa Reportar como UFC por g o ml
AGAR MALTA

6


Tabla 2. Métodos horizontales para listeria monocytogenes

Preenriquecimiento Enriquecimiento Aislamiento Bioquímicas
Principio
Entidad Tiempo y Tiempo y Tiempo y Expresión de
de la Método Alimentos Medio (s) Medio (s) Medio (s) de Tiempo y Medio (s) de
oficial Tempera- Tempera- Tempera- resultados
técnica de cultivo de cultivo cultivo Temperatura °C cultivo
tura °C tura °C tura °C

OXA, Iluminación de Henry
o
35 C/24 h a 48 h
Coloración Gram,
PALCAM,
Catalasa, Oxidasa
Prueba
o
CAMP Agar 35 C/48 h
sangre
LPM+esculin/ TSBYE*(A
3+,
Fe partir de este
o
30 C/24 h a 48 h se inoculan 35 C/24 h
o
EB+acrifla-
vina, ácido las
FDA-BAM Todos los o o bioquímicas Presencia
Detección Capítulo 10 Caldo EB 30 C 4 h nalidixico y 30 C 44 h
2001 alimentos ó ausencia
ciclohexam Reducción de
LPM y pasar
ida Nitrato (Caldo 35 oC/5 d
a:
Nitrato M108)
o
TSAYE 30 C/24 h a 48 h SIM o MTM Amb/7 d
Caldo
carbohidratos
+: Dextrosa,
Esculina, o
35 C/7 d
Maltosa,
Ramnosa,
Manitol,
Xilosa
Continúa...
* Hacer pruebas bioquímicas de acuerdo a cada entidad oficial

7



Principio Expresión
Entidad Tiempo y
de la Método Alimentos Medio (s) Tiempo y Medio (s) Tiempo y Medio (s) de Medio (s) de Tiempo y de
oficial Temperatura
técnica de cultivo Temperatura °C de cultivo Temperatuta °C cultivo cultivo Temperatura °C resultados
°C

EB+acrifla-
FDA- vina, ácido Kits para Elisa
Capítulo Todos los o
BAM Detección Caldo EB 30 °C 4h nalidixico y 30 C 44 h
10 alimentos
2001 ciclohexami
da
Serología
Agar Oxford y o o
35 C ± 2 C/
Agar Palcam. Método Iluminación Henry
24 h ± 48 h
Pasar a:
Agar Triptosa
ácido Coloración Gram, Catalasa,
Productos
o o
30 C ± 2 C/24 h - nalidixico. Oxidasa
Caldo EB Pasar a:
Lácteos 48 h
Agar
movilidad-
Temperatura
nitrato
ambiente / 2 d -
modificado
INVIMA Detección No. 20 o o 5d
35 C ± 2 C/ Hatano
Agar tripticasa 18 h a 24 h Schuch
soya extracto o
Levadura Hemólisis 35 C ± 2 C/24 h
TSA-YE
Caldo CAMP
Caldo LEB o o o o
Productos 30 C ± 2 C/18 h LEB2+ 30 C ± 2 C/18 h - o o
+ acriflavina 35 C ± 2 C/24 h
cárnicos -24 h acriflavina 24 h Xilosa,
1% - 48 h
0,2 % Ramnosa,
Manitol
Serología

8



Principio Preenriquecimiento Enriquecimiento Aislamiento Bioquímicas Expresión
Entidad
de la Método Alimentos Tiempo y de
oficial Medio (s) Tiempo y Medio (s) Tiempo y Medio (s) de Medio (s) de Tiempo y
técnica Temperatura resultados
de cultivo Temperatura °C de cultivo Temperatura °C cultivo cultivo Temperatura °C
°C
Agar sangre 48 h 37 ºC
Lácteos, Caldo TSYE:
Medio de
derivados Utilización de 7 d 37 ºC
Enriqueci- enriqueci-
lácteos, Medio Oxford carbohidratos
miento y 993.12 miento 48 h 30º C 48 h 37 ºC
cárnicos, medio TSYE Agar para
Aislamiento selectivo 2 d -7 d 25 ºC
derivados motilidad
completo
cárnicos. Medio de test
18 h -24 h 37 ºC
CAMP
Productos
lácteos,
carnes
rojas, Presencia ó
AOAC
cerdo, ausencia
aves y
derivados, caldo MFB
Inmunopre productos +Lic. O
997.03 28 h ±2 h 30 ºC BLEB 24±2h 30ºC INMUNOPRECIPITACIÓN
cipitación marinos, Caldo
frutas, Frazer
vegetales,
pastas,
chocolate,
huevos y
harina de
hueso

9



Principio Preenriquecimiento Enriquecimiento Aislamiento Bioquímicas
Entidad Expresión de
de la Método Alimentos Tiempo y
oficial Medio (s) Tiempo y Medio (s) Tiempo y Medio (s) de Medio (s) de Tiempo y resultados
técnica Temperatura
de cultivo Temperatura °C de cultivo Temperatura °C cultivo cultivo Temperatura °C
°C

Coloración Gram, Catalasa

Caldo 25 ºC ± 2 ºC 2 d -
Caldo Motilidad
Fraser 24 h - 48 h a 5d
Fraser +
media Agar Oxford 35 ºC ± 2 ºC Agar sangre 35 ºC ± 2 ºC 24 h
Detección agentes
ISO todos los concentra- 24 h -48 h a 30 ºC Agar Palcam y para de cordero ±2h Presencia ó
NTC 4666 y aisla- 24 h 30 ºC ± 2 ºC selectivos.
11290-1 alimentos ción. Caldo ± 2 ºC pasar a TSYEA:18 h - Fermenta- ausencia
miento Caldo Leb
Leb 1 TSYEA 24 h a 35 ºC ± ción de
2 Caldo 35 ºC ± 2 ºC
Caldo 2 ºC carbohidra-
Palcam 24 h - 48 h hasta
Palcam tos: ramnosa,
5d
xilosa,
manitol
Serología, CAMP

Agar Oxford y 24 h a 48 h 35 Coloración Gram, Catalasa,
Palcam ó ºC Oxidasa
leche y
36.511 productos Caldo M52 48 h 30 ºC
lácteos Agar LPM, y 24 h a 48 h 30
pasar a : ºC Fermentación del manitol,
Aisla- 24 h - 48 h 30 ramnosa y xilosa
APHA TSA-YE
miento e ºC Presencia ó
Capítulo
Identifica- ausencia
36
ción Caldo UVM 22 h ± 2 h 30 ºC 26 h a 48 h 35
y pasar a : ± 2 ºC ºC
Productos Hemólisis en agar sangre de
36512 Agar MOX
cárnicos caballo
26 h a 48 h
Caldo FB 26 h -48 h 35 ºC
35 ºC ± 2 ºC

10


Tabla 2. (Final)

Principio Preenriquecimiento Enriquecimiento Aislamiento Bioquímicas
Entidad Expresión de
de la Método Alimentos Tiempo y
oficial Medio (s) Tiempo y Medio (s) Tiempo y Medio (s) de Medio (s) de Tiempo y resultados
técnica Temperatura
de cultivo Temperatu-ra °C de cultivo Temperatura °C cultivo cultivo Temperatura °C
°C
24 h a 48 h 30 Coloración Gram, Catalasa,
agar LMP
ºC Oxidasa
Agar oxford 24 h a 48 h 35 Agar sangre
48 h 35 ºC
pasar a : ºC de cordero
Urea
Red de
TSA-YE 24 h 30º C 5 d 35 ºC
nitratos
TSI
7 d temperatura
Standard SIM
ambiente
Methods todos los
Detección 5,4A Caldo LEB 2 días 30 ºC MR-VP 48 h 35 ºC
for Dairy alimentos
products Fermenta-
ción
carbohidratos
TSBYE +
Dextrosa,
7 d 35 ºC
esculina,
maltosa,
ramnosa,
manitol,
xilosa
CAMP

11


Tabla 3. (Métodos horizontales para Salmonella spp.

Entidad
de la Método Alimentos Tiempo y Tiempo y Medio (s) Tiempo y de
oficial Medio (s) Medio (s) Medio (s) Tiempo y
técnica Temperatura Temperatura de Tempera- resultados
de cultivo de cultivo de cultivo Temperatura °C
°C °C cultivo tura °C
Huevos, leche,
ponqués, bizcochos,
pan, formulas
infantiles, caseína,
Harina de soya,
PARA ALIMENTOS CON
fideos, macarrones,
ALTA CARGA
spaghetti, queso,
MICROBIANA TSI, LIA
ensaladas o
Caldo 35 C/ 24 h ± CONSULTAR NORMAS Urea o
preparadas(con 35 C/24 h ± 2 h
Lactosa 2h NTC 4491-1 conven-
jamón, huevo, pollo,
NTC 4491-2 cional
atún, pavo), frutas y
NTC 4491-3
vegetales
NTC 4491-4
deshidratados,
o
FDA - carnes, crustáceos, Agar BS, 35 C/ 24 h Presencia ó
Detección Capítulo 5 pescados, coco,
BAM XLD y HE ±2h ausencia
ancas de rana,
carcasas de conejo
Cáscara De Huevo,
Caldo o Rappaport o o o o
Huevo Liquido, Huevo 35 C/ 24 h ± 42 C ± 0,2 C/ UREA 37 C ± 0,5 C/2 h
TS+Sulfato Vassiliadis
cocido, colores, 2h 24 h ± 2 h Rápida Baño de María
Ferroso (RV) y
sabores
Solución o Caldo o o Antisuero o o
35 C/ 24 h ± 43 C ± 0,2 C/ 48 C a 50 C/1 h
Leche en polvo Verde Tetrationato flagelar
2h 24 h ± 2 h Baño de María
Brillante (TT) polivalente
o Antisuero
Levadura seca, 35 C/ 24 h ±
Caldo TS somático 1 min
especias 2h
polivalente
Continúa...

12



Principio Preenriquecimiento Enriquecimiento Aislamiento BioquímicasExpresión
Entidad
de la Método Alimentos Medio (s) Tiempo y Tiempo y Medio (s) Tiempo y de
oficial Medio (s) Medio (s) Tiempo y
técnica de Temperatura Temperatura de Tempera- resultados
de cultivo de cultivo Temperatura °C
cultivo °C °C cultivo tura °C
PARA ALIMENTOS CON
Caldo Rojo
ALTA CARGA
fenol
Reconsti- MICROBIANA
o dulcitol o
tuted 35 C/ 24 h ± CONSULTAR NORMAS o
Dulces Caldo Base 35 C/48 h ± 2 h
nonfat dry 2h NTC 4491-1
Púrpura
milk NTC 4491-2
con 0,5 %
NTC 4491-3
dulcitol
NTC 4491-4
Rappaport o o Caldo
42 C ± 0,2 C/
Vassiliadis Para cultivos mixtos Triptona o 35 oC/24 h ± 2 h
24 h ± 2 h
(RV) y Triptofano

o
Caldo XLD Caldo KCN 35 C/ 48 h ± 2 h
FDA - Tetrationato 35 oC ± 2,0 oC/ 35 °C/ 24 h Presencia ó
Detección Capítulo 5 (TT) 24 h ± 2 h Agar Mac ±2h Caldo o
BAM 35 C/48 h ± 2 h ausencia
Conkey Malonato
Caldo Agar HE Test Indol
Jugo Naranja Pre- o
35 C/ 24 h ± Caldo
(Pasteurizado y No enriqueci
2h Lactosa
Pasteurizado miento o
Rojo Fenol, 35 C/48 h ± 2 h
Universal
o Lactosa
Púrpura
Caldo
Sacarosa
o
Rojo Fenol, 35 C/48 h ± 2 h
o Sacarosa
Púrpura
Caldo MR- o
35 C/48 h ± 2 h
VP

13



Preenriquecimiento Enriquecimiento Aislamiento Bioquímicas Expresión
Entidad Principio de
Método Alimentos Tiempo y Tiempo y Tiempo y de
oficial la técnica Medio (s) Medio (s) de Medio (s) de Medio (s) de Tiempo y
Tempera- Temperatura Temperatura resultados
de cultivo cultivo cultivo cultivo Temperatura °C
tura °C °C °C
Agar Citrato o
35 C/96 h ± 2 h
Simmons

FDA - Agua De o o
Detección Capítulo 18 Todos los 35 C ± 2 C/
BAM Peptona o o
alimentos 18 h -24 h Caldo Selenito 35 C ± 0,2 C/ Coloración
Tamponada
Cistina y 18 h - 24 h Gram

LIA
Agar UREA
Agar BS, Lactosa
Agar XLD y Glucosa
Agar Verde Sacarosa 35 oC ± 2 oC/24 h
Caldo o o
35 C ± 2 C/ Lisina
Agua Tetrationato brillante - 48h
24 h ± 2 h Movilidad
destilada + (TT)+0,2 ml lactosa
sacarosa con Caldo Red
5 ml de o Solución de o o
Nitrato TSI
Leche en 35 C/18 h - 43 C ± 0,2 C/ novobiocina
INVIMA Detección solución Yodo + 0,1 ml Citrato
Polvo 24 h 18 h - 24 h
Verde Solución Simmons
Brillante acuosa de Agar
0,1% verde brillante fenilalanina
0,1 % Caldo
Triptofano
Caldo MR-
VP
Oxidasa

14



Preenriquecimiento Enriquecimiento Aislamiento Bioquímicas Expre-
Principio
Entidad sión de
de la Método Alimentos Tiempo y Tiempo y Tiempo y
oficial Medio (s) de Medio (s) de Medio (s) Medio (s) de Tiempo y resulta-
técnica Temperatura Tempera- Temperatura
cultivo cultivo de cultivo cultivo Temperatura °C dos
°C tura °C °C
Leche Cruda,
Caldo o
leche Caldo o 35 C/25 h ± 2 h
35 C/24 h ± 2 h Selenito TSI, LIA
pasteurizada. Lactosa y 48 h ± 2 h
Cistina y o Agar BS,
Quesos, yogurt 35 C/24 h ±
Agar XLD 35 oC/24 h ± 2 h
Leche en polvo, 2h
Solución Caldo y Agar HE
caseína, postres o UREA o
Verde 35 C/24 h ± 2 h Tetrationato 35 C/24 h ± 2 h
congelados, Convencional
Brillante (TT)
mantequilla
o o
37 C ± 0,5 C/2
UREA Rápida
h Baño de María
o o
Antisuero 48 C - 50 C/ 1
flagelar h Baño de
polivalente María
Antisuero Presenci
Standard Capítulo 5
Detección somático 1 min aó
Methods No. 5,4 B
polivalente ausencia

Agar Lisina o
Caldo o Agar BS, 35 C/48 h ± 2 h
Todos los Caldo o 35 C/24 h ± o Decarboxilasa
35 C/24 h ± 2 h Tetrationato Agar XLD 35 C/24 h ± 2 h
alimentos Lactosa 2h
(TT) y Agar HE Caldo Rojo
fenol dulcitol
o
o Caldo Base 35 C/48 h ± 2 h
Púrpura con
0,5% dulcitol
Caldo
o
Triptona o 35 C/24 h ± 2 h
Triptofano
o
Caldo KCN 35 C/48 h ± 2 h
Caldo o
35 C/48 h ± 2 h
Malonato

15



Principio Expresión
Entidad
de la Método Alimentos Tiempo y Tiempo y de
oficial Medio (s) Tiempo y Medio (s) de Medio (s) Medio (s) de Tiempo y
técnica Tempera- Temperatura resultados
de cultivo Temperatura °C cultivo de cultivo cultivo Temperatura °C
tura °C °C
Test Indol
Caldo Lactosa
Rojo Fenol, o 35 oC/48 h ± 2 h
Lactosa
Púrpura
Caldo
Sacarosa Rojo
o
Fenol, o 35 C/48 h ± 2 h
Sacarosa
Caldo o Agar BS, o Púrpura
Standard Capítulo 5 Todos los Caldo o 35 C/24 h ± 35 C/24 h ± 2
Detección 35 C/24 h ± 2 h Tetrationato Agar XLD y o
Methods No. 5,4 B alimentos Lactosa 2h h Caldo MR-VP 35 C/48 h ± 2 h
(TT) Agar HE
Agar Citrato o
35 C/96 h ± 2 h
Simmons

Sistemas multitest Rápidos

16



Entidad
de la Método Alimentos Tiempo y Tiempo y Tiempo y de
oficial Medio (s) de Medio (s) de Tiempo y Medio (s) Medio (s) de
técnica Tempera- Tempera- Tempera- resultados
cultivo cultivo Temperatura °C de cultivo cultivo
Presencia ó
o ausencia
35 C a 37
Agar Lisina de
ºC durante
Hierro Salmonella
24 h
en g de
producto.
Levadura
Agua destilada
desecada
Agua destilada
leche en polvo + 2 ml de
descremada y solución verde
ICMSF Detección. 1 entera brillante al
1%
Leche en polvo Caldo
caramelos y reconstituida tetrationato 43 ºC ± 0,05 ºC Agar sulfito 35 ºC a 37 ºC Agar triple
dulces con verde verde 24 h. bismuto durante 48 h azúcar hierro
brillante brillante
Caldo lactosa
+ 1 % de
Subproductos Tergitol o agua
grasos de de peptona
animales, coco tamponada
con 0,22 % de
Tergitol

17



Entidad
de la Método Alimentos Medio (s) Tiempo y Tiempo y Tiempo y de
oficial Medio (s) Medio (s) Medio (s) de Tiempo y
técnica de Temperatura Temperatura Tempera- resultados
de cultivo de cultivo cultivo Temperatura °C
cultivo °C °C tura °C

PARA ALIMENTOS CON
ALTA CARGA
MICROBIANA
Agar BS o TSI
CONSULTAR NORMAS 35 C/24 h ± o
Huevos, leche, Agar XLD Urea 35 C/24 h ± 2 h
NTC 4491-1 2h
ponqués, Agar HE convencional
NTC 4491-2
bizcochos, pan, NTC 4491-3
formulas NTC 4491-4
infantiles, caseína,
Harina de soya,
fideos,
macarrones, Rappaport o
42 ºC ± 0,2 C/ o
spaghetti, queso, Vassiliadis LIA 35 C/48 h ± 2 h
24 h ± 2 h
ensaladas (RV)
Método de Caldo o o
37 ºC ± 0,5 C/ Presencia/
APHA 37.5 preparadas(con 35 C/24 h ± 2 h Caldo o
43 ºC ± 0,2 C/
Referencia Lactosa UREA Rápida 2 h Baño de ausencia
jamón, huevo, TBG 24 h ± 2 h
pollo, atún, pavo), María
o
frutas y vegetales Antisuero 48 ºC a 50 C/
deshidratados, flagelar 1 h Baño de
carnes, polivalente María
crustáceos,
pescados, coco, Antisuero
ancas de rana, somático 1 min
carcasas de polivalente
conejo Caldo Rojo
fenol dulcitol
o Caldo Base
o
Púrpura 35 C/48 h ± 2 h
bromocresol
con 0,5 %
dulcitol

18



Entidad
de la Método Alimentos Tiempo y Tiempo y de
oficial Medio (s) de Tiempo y Medio (s) Medio (s) Medio (s) de Tiempo y
técnica Temperatura Tempera- resultados
cultivo Temperatura °C de cultivo de cultivo cultivo Temperatura °C
°C tura °C
PARA ALIMENTOS Caldo Triptona o
CON ALTA CARGA 35 C/24 h ± 2 h
o Triptofano
MICROBIANA
o
CONSULTAR NORMAS Caldo KCN 35 C/48 h ± 2 h
NTC 4491-1 Caldo o
NTC 4491-2 35 C/48 h ± 2 h
Malonato
NTC 4491-3
NTC 4491-4 Test Indol 35 ºC 24 h
Cáscara De
Huevo, Huevo Caldo Lactosa
o
Liquido, Huevo o 35 °C/24 h ± púrpura 35 C/24 h a
Método de Caldo TS 35 C 24 h ± 2 h Caldo SC
37.5 cocido, colores, 2h bromocresol o 48 h
Referencia sabores, rojo fenol
Levadura seca,
Caldo
APHA Solución Sacarosa Rojo
o Caldo 35 °C/24 h ± o
Leche en polvo Verde 35 C/24 h ± 2 h Fenol, o 35 C/48 h ± 2 h
TBG 2h
Brillante Sacarosa
Púrpura
especias de Caldo o o
35 C/24 h ± 2 h Caldo MR-VP 35 C/8 h ± 2 h
cebolla y ajo lactosa
Caldo o Agar Citrato o
Dulces 35 C/24 h ± 2 h 35 C/96 h ± 2 h
lactosa Simmons
leche en polvo, Agar Lisina
huevo Caldo o
y Agar HE 43 C/24 h
Filtración pulverizado, lactosa,
o ó
Por queso Caldo TS, o Caldo 35 C/6 h a
37.72 35 C/18 h a 24h
membrana pulverizado, Solución TBG 8h
Hidrofóbica pimienta, Verde o
Brillante Agar EF-18 35 C/24 h
chocolate y pollo
crudo

19



Método Alimentos Tiempo y Tiempo y de
oficial técnica Medio (s) de Tiempo y Medio (s) Tiempo y Medio (s) de Medio (s) de
Tempera- Tempera- resultados
cultivo Temperatura °C de cultivo Temperatura °C cultivo cultivo
tura °C tura °C
Caldo lactosa,
o
Todos los Caldo TS, o 35 C/6 h a
35 C/24 h ± 2 h Caldo TBG
alimentos Solución 8h
Verde Brillante 1-2 TEST o
Inmunodifusion 37.73 35 C/14 h
Caldo lactosa, system
o o
Caldo TS, o 42 C ± 0,5 C/
Carnes crudas 35 C/24 h ± 2 h Caldo TGB
Solución 6ha8h
o
Verde Brillante Caldo -M 35 C/6 h

o
Inmunoensayo Todos los Medio no o Caldo SC o 35 C/18 h a
37.74 35 C/24 h ± 2 h
Enzimático alimentos selectivo TGB 24 h

APHA

Métodos multitest aprobados
por la AOAC
Test Rápidos Todos los
para la alimentos y
37.8
detección de muestras
Salmonella ambientales

20



Método Alimentos Medio (s) Tiempo y Tiempo y Medio (s) Tiempo y Medio (s) de
oficial la técnica Medio (s) Tiempo y
de Temperatura Tempera- de Tempera- de resultados
de cultivo Temperatura °C
cultivo °C tura °C cultivo tura °C cultivo

Caldo 24 h ± 2 h a Agar TSI
Huevos deshidradatos, 24 h ± 2 h a 35 ºC
lactosa 35 ºC y LIA
Caldo
Agua + selenito
1% cistina + 1-
solución 10 ml caldo
24 h ± 2 h a Test de Baño de maría 2 h
Leche entera en polvo de tetrationato o
35 ºC ureasa a 35 C ± 0,5 ºC
coloración
verde
brillante
Caldo
Caldo Caldo XLD,
Levadura activa 24 h ± 2 h a lactosa
tripticasa selenito Agar 48 h ± 2 h a 35 ºC
desecada 35 ºC rojo de
de soya cistina Sulfito
24 h ± 2 h 24 h ± 2 h a fenol
Detección. 967.25 Bismuto,
a 35 ºC 35 ºC Caldo
Caldo Agar para
24 h ± 2 h a sucrosa Presencia ó
AOAC Ajo y cebolla en polvo tripticasa entéricos 48 h ± 2 h a 35 ºC
35 ºC rojo de ausencia
de soya Hektoen
fenol
Caldo
lactosa+ Caldo
% selenito
Chocolates de leche y solución 24 h ± 2 h a cistina + 1- Medio
10 ml caldo 48 h± 2 h a 35 ºC
caseína de 35 ºC MR/VP
coloración tetrationato
verde
brillante
Leche en polvo Solución Agar
24 h ± 2 h a
instantánea libre de verde citrato de 96 h ± 2 h a 35 ºC
35 ºC
grasa brillante Simmons
Kit de Métodos multitest aprobados
identificación 978,24 (a) Todos los alimentos por la AOAC
bioquímica

21



Método Alimentos Tiempo y Tiempo y Medio (s) Tiempo y Medio (s) de
oficial la técnica Medio (s) Medio (s) Tiempo y
Temperatura Tempera- de Tempera- de resultados
°C tura °C cultivo tura °C cultivo

Test
Aglutinación Todos los alimentos
Serológicos

Positivo ó
AOAC
negativo

Método de
búsqueda por
975.54 Todos los alimentos
anticuerpos
fluorescentes
ISO-GRID 991.12 Todos los alimentos
Método de
búsqueda
monoclonal 986.35 Todos los alimentos
calorimétrico
EIA

22



Método Alimentos Tiempo y Tiempo y Medio (s) Tiempo y Medio (s) de
oficial técnica Medio (s) Medio (s) Tiempo y
Temperatura Tempera- de Tempera- de resultados
°C tura °C cultivo tura °C cultivo
Método de Todo tipo de alimentos
búsqueda excepto materias
monoclonal 987.11 primas de alimentos o
calorimétrico alimentos con alta
EIA carga microbiana
Inmunoensayo
enzimático
policlonal para
salmonellas
Positivo ó
AOAC mótiles y no
negativo
mótiles
Ensayo de
inmunofluores-
cencia unido a
una enzima
Inmunodifusión
para
salmonellas
mótiles

23



Método Alimentos Tiempo y Tiempo y Tiempo y Tiempo y de
oficial técnica Medio (s) de Medio (s) de Medio (s) Medio (s)
Tempera- Tempera- Tempera- Temperatura resultados
cultivo cultivo de cultivo de cultivo
tura °C tura °C tura °C °C
MSRV 993.07 Cocoa y chocolate
Productos lácteos
MSRV 995.07
deshidratados
Método de
conductancia
Pollo, ostras, setas, Agar
medio
camarones, alimento Baño de Sulfito
Caldo 24 h ± 2 h a Rappaport-
para aves y alimentos maría Bismuto,
lactosa 35 ºC Vassiliadis 24 h ± 2 h a 24 h ± 2 h a
Detección. 995.2 altamente 24 h ± 2 h agar para TSI y LIA
+1-10 ml o 35 ºC 35 ºC
contaminados a 42 C ± entéricos
caldo Positivo ó
AOAC Caldo 24 h ± 2 h a 0,2 ºC Hektoen y
Ancas de rana tetrationato negativo
lactosa 35 ºC XLD
Inmunoensayo
enzimático
policlonal con 998.09 Todos los alimentos
caldo RV y caldo
tetrationato
INMUNOPRECIPI
TACIÓN para
salmonelas 999.09 Todos los alimentos
mótiles y no
mótiles

24


Tabla 3. (Final)

Entidad
de la Método Alimentos Tiempo y Tiempo y Tiempo y de
oficial Medio (s) Medio (s) de Tiempo y Medio (s) Medio (s) de
técnica Tempera- Tempera- Tempera- resultados
de cultivo cultivo Temperatura °C de cultivo cultivo

Agar
Rambach,
medio agar
Rappaport- Hektoen,
Vassiliadis/ 16 h a 18 h a 42,5 ºC agar TSI, LIA y Presencia
Agua medio verde ± 0,5 ºC McConkey, Urea
Alimentos de ó ausencia
peptonada agar sulfito 24 h a 48 h
consumo 18 h - 24 h a malaquita o 24 h - 48 h a de
NTC Detección 4574 tamponada, bismuto, a 35 ºC ± 2
humano y para 35 ºC ± 2 ºC Tetrationate 35 ºC ± 2 ºC Salmonella
Caldo agar ºC
animales en 25 g de
lactosado salmonella-
producto.
shiguella
(SS), agar
verde
brillante Serología:
Medio 16-18 H a 35 ºC ± 2
A. XLD sueros poli-
Selenito/cistina ºC
monovalentes

Agar
Agar TSI, LIA
Todos los Caldo 24 h ± 2 h a Selenito cistina Hektoen,
AACC 4225A 24 h ± 2 h a 42 ºC 24 h 35ºC y serológico 24 h 35 ºC
alimentos nutritivo 35 ºC tetrationato XLD, SB,
en BHI
McConkey

25


Tabla 4. Métodos horizontales para aerobios

Entidad Principio de Medio Incubación Expresión de
Método Alimentos
oficial la técnica cultivo Temperatura Tiempo resultados
Desmenuzados,
congelados,
Conteo: 30 - 300 UFC
Recuento en precocidos, Agar Plate o
966.23 35 C ± 2 ºC 48 h ± 2 h Reportar como:
placa preparados, count
UFC/g
nueces y
carnes
Leche
Filtración por
Pasterizada, o Total de bacterias/g o
AOAC 2000 membrana 986.32 TSFA 32 C 48 h ± 2 h
Huevos en ml
Capítulo 17 Hidrofóbica
polvo y cremas
Recuento en Productos Gel de o
988.18 32 C ± 1 ºC 48 h ± 3 h Reportar como:
Placa Lácteos pectina
UFC/g
Membrana
Conteo 30-300 UFC
Recuento en Todos los hidrofóbicas o
990.12 35 C ± 1 ºC 48 h ± 3 h Reportar como UFC/g
Placa alimentos Aerobic
o ml
Count
Standard Conteo: 25 - 250 UFC
STANDARD Recuento en 6,2 Class O Productos o
Placa Lácteos Methods 32 C ± 1 ºC 48 h ± 3 h Reportar como:
METHODS
Agar UFC/g o ml
Diary
products Membrana Conteo: 25 - 250 UFC
1992 16th Recuento en 6.3
Productos hidrofóbicas 32 oC ± 2 ºC 48 h ± 3 h Reportar como:
Capítulo 6 placa Lácteos Aerobic UFC/g
Count
Recuento Conteo: 30 - 300 UFC
Todos los Agar Plate o o 48 h
estándar en Método 1 29 C a 31 C Reportar como:
alimentos Count 3d
placa UFC/g
Recuento en
placa de Conteo: 30 - 300 UFC
Todos los Agar Plate o o
siembra por Método 2 29 C a 31 C Reportar como:
alimentos count 72 h
extensión en UFC/g
superficie
Recuento en
ICMS 1984 placa por
siembra de Conteo: 30 - 300 UFC
Todos los Agar Plate o o
gotas en Método 3 29 C a 31 C 48 h Reportar como:
alimentos count
superficie UFC/g
con asa
calibrada
Recuento en
placa por Todos los Agar Plate o o
Método 4 29 C a 31 C 48 h Reportar como:
siembra con alimentos count
UFC/g
asa calibrada
Recuento en Todos los Agar Plate o o
INVIMA 1998 No. 2 35 C ± 2 C 48 h ± 2 h Reportar como:
placa alimentos Count
UFC/g
Todos los o o
35 C ± 2 C 48 h ± 2 h Reportar como:
alimentos
FDA - BAM Recuento en Agar Plate UFC/g o ml
Capítulo 3
2001 Placa count Conteo: 25 - 250 UFC
o o
Lácteos 32 C ± 1 C 48 h ± 2 h Reportar como:
UFC/g
Continúa . . .

26


Tabla 4. (Final)

Entidad Principio Medio Incubación Expresión de
de la Método Alimentos
oficial cultivo Temperatura Tiempo resultados
técnica

Recuento Todos los Agar Plate
7.62
en placa alimentos count

Recuento
Todos los Agar Plate
directo en 7.63
alimentos count Conteo: 30 - 300
placa
UFC Reportar como:
Filtración
Todos los Agar Plate UFC/g o ml
por 7.71
alimentos count
membrana
Membrana
Recuento Todos los hidrofóbicas
7.72
en placa alimentos Aerobic
Count
Método
7.73 Redi-gel
Pectin gel
APHA Método
Capítulo 7 Aerobic 25 °C a 35 ºC 48 h ± 2 h Conteo: 25 - 250
Membrana 7.74 Productos
2001 count hgmf UFC Reportar como:
hidrofobica lácteos
UFC/g o ml
Método
Agar Plate
placa en 7.75
count
espiral
Método de
asa 7.76
alimentos count
calibrada
Recuento
en placa Conteo: 30 - 300
por siembra UFC Reportar
de gotas en 7.77 como: UFC/g o ml
alimentos count
superficie
con asa
calibrada
Todos los
7.78 Simplate
alimentos
Conteo: 30 - 300
NTC
Recuento Todos los Standard o o UFC
ICONTEC 4519/ISO 35 C ± 2 C 48 h ± 2 h
Placa alimentos Plate Count Reportar como:
4833
UFC/g
Agar Plate
Conteo: 30 - 300
Count
Recuento Todos los o o UFC
AACC AACC 4211 Buffer 35 C ± 2 C 48 h ± 2 h
Placa alimentos Reportar como:
fosfato UFC/g
(diluciones)

27


Tabla 5. Métodos horizontales para Staphylococcus. Aureus

Expresión
Principio de Medio (s) Tiempo y Tiempo y Medio (s)
Entidad oficial Medio (s) de Tiempo y Medio (s) Tiempo y de
la técnica Método Alimentos de Tempera- Tempera- de
cultivo Temperatura °C de cultivo Temperatura °C resultados
cultivo tura °C tura °C cultivo

o
Caldo 1. Caldo 35 C - 37°C/
tripticasa Agar o BHI 18 h -24 h Reportar el
Número Más Todos los o 35 ºC - 37 C/
987.09 soya + 10 % 35 C/48 h Baird NMP según
Probable alimentos 48 h
NaCl + 1 % Parker o
Tabla
Piruvato Na 35 C - 37 °C/
AOAC 2000 2.
4 h -18 h máx 48
Capítulo 17.5.02 Coagulasa*
h
o Contar las
1. Caldo 35 C - 37°C/ 18
Aislamiento y Agar BHI h - 24 h cajas que
Todos los o
enumeración 975.55 Baird 35 ºC-37 C/48 h tengan entre
alimentos o
en superficie Parker 2. 35 C - 37 °C/ 20 y 200
Coagulasa* 4h -18 h máx 48 h colonias

STANDARD
Contar cajas
METHOS Aislamiento y Agar
Todos los 1. Caldo o entre 20 -
Diary products enumeración 5.4 (f)
alimentos
Baird 35 ºC/45 h - 48 h
BHI
35 C/18 h - 24 h
200 colonias
Cap 5 en superficie Parker

Continúa . . .


28



Expresión
Principio de Medio (s) Tiempo y Tiempo y Medio (s) Tiempo y
Entidad oficial Medio (s) Tiempo y Medio (s) de de
la técnica Método Alimentos de Tempera- Tempera- de Temperatura
de cultivo Temperatura °C cultivo resultados
cultivo tura °C tura °C cultivo °C

2. Coagulasa* 35 ºC/6 h

3. Catalasa
Caldo 4. Glucosa 37 ºC/5 d
tripticasa Agar 5. Manitol 37 ºC/5 d Número más
Numero mas Todos los o
5.4 (f.4) soya + 35 C/48 h Baird 35 ºC/48 h probable
probable alimentos 6. Sensibilidad
cloruro de Parker 35 ºC < 2 h (NMP)
sodio Lisostafina

STANDARD 7. Nucleasa
35 ºC/4 h
METHOS Termoestable
Diary products
Cap 5 8. Produccion 35 ºC - 37 ºC/
de enterotoxin 18 h -24 h
Agar
Aislamiento y Contar cajas
Productos Manitol o
enumeración 37 C/24 h Similar al anterior entre 20 -
lácteos agar
en superficie 200 colonias
S110
5.4 (f.5) Caldo
Giolitti Número más
Número Más cantoni o
Leches 37 C/24 h Similar al anterior probable
Probable Caldo (NMP)
Lactosa
salado


29



Expresión
Principio de Medio (s) Tiempo y Tiempo y
Entidad oficial Medio (s) de Medio (s) Tiempo y Medio (s) Tiempo y de
la técnica Método Alimentos de Tempera- Temperatura
cultivo de cultivo Temperatura °C de cultivo Temperatura °C resultados
cultivo tura °C °C
o o
35 C/18 h - Agar Baid Caldo BHI 35 C/18 h -24 h
1 Caldo BHI o o
35 C-37 C/30 h
24 h Parker
-48 h Coagulasa* 35 ºC/4 h -24 h
Agar yema
Contar cajas
de huevo o
2 Caldo BHI 35 C/18 h -24 h entre 20 -
Aislamiento y polimixina
o o 200
enumeración telurito 35 C-37 C/24 h
o o colonias/
en superficie Todos los Agar 35 C-37 C/30 h
ICMSF 1984 3 alimentos Coagulasa* 35 ºC/4 h -24 h UFC por g o
Kranep -48 h ml
Agar
difosfato de o o
35 C-37 C/24 h o
4 fenolftaleina Caldo BHI 35 C/18 h -24 h
-48 h
con
polimixina
Caldo telurito Número
Numero mas o o Agar leche o
5 manitol 35 C - 37 C/ 37 C/24 h Coagulasa* 35 ºC/4 h -24 h más
probable sal
glicina 24 h -48 h probable
1. Caldo 35 C ± 2 C/18 h Contar cajas
o o

BHI -24 h entre 20 -
Capítulo 2 Todos los Agar Baid o o
200
INVIMA 1998 35 C ± 2 C/48 h o o colonias.
Numeral 8 alimentos Parker 35 C ± 2 C/
2.
6 h y descartar a REPORTAR
Coagulasa* como UFC
las 24 h
por g o ml


30



Principio Tiempo Expresión
Entidad oficial de la Tiempo y de
Método Alimentos Medio (s) y Medio (s) de Medio (s) Tiempo y Medio (s) de Tiempo y
técnica Tempera-
de cultivo Tempe- cultivo de cultivo Temperatura °C cultivo Temperatura °C resultados
tura °C
ratura °C
o o
35 C ± 2 C/
1. Caldo BHI
18 h -24 h
o o
35 C ± 2 C/6 h
2. Coagulasa* y descartar a las
24 h
3. Catalasa
Contar cajas
Agar Baid o
Recuento 35 ºC/45 h - 48 h 4. Glucosa 37 C/7 d entre 20 -
Parker
o 200 colonias
5. Manitol 37 C/7 d
6.
Sensibilidad 35 ºC/2 h
Lisostafina
Capítulo 7. Nucleasa
FDA -BAM 2001 35 ºC/4 h
12 Termoestable
Productos en
los que se
o o
espere un 35 C ± 2 C/
pequeño 1. Caldo BHI
18 h -24 h
numero de Caldo
Reportar el
S.aureus y Tripticasa o
35 C/48 h Agar Baird NMP según
NMP alimentos Soya+NaCl+ 35 ºC/48 h
±2h Parker Tabla de
que Piruvato de
NMP
contengan sodio o
35 C ± 2 C/6 h
o

una gran 2. Coagulasa* y descartar a las
población de 24 h
especies
competitivas


31



Expresión
Entidad Principio de la Tiempo y Tiempo y
Medio (s) Medio (s) Tiempo y Medio (s) Tiempo y Medio (s) de
oficial técnica Método Alimentos Temperatura Temperatura
de cultivo de cultivo Temperatura °C de cultivo Temperatura °C de cultivo resultados
°C °C
Alimentos 1. Caldo 35 ºC - 37 ºC/
Procedimiento que Caldo BHI 18 h - 24 h
contienen Contar cajas
de Tripticasa 35 ºC - 37 ºC/ Agar Baird 35 ºC - 37 ºC/
39.51 una pequeña 3. entre 20 -
Enriquecimiento Soya + 24 h ± 2 h Parker 46 h ± 2 h o o
selectivo población de NaCl Coagulasa: 35 C-37 C/ 200 colonias
células plasma + 6h
injuriadas EDTA
Ingredientes 1. Caldo
o o
35 C - 37 C/
alimenticios BHI 18 h -24 h
crudos y
alimentos no
procesado Caldo
Procedimiento Reportar
de de los cuales Tripticasa 35 ºC -37 ºC/ Caldo
35 ºC - 37 ºC/
o o
Agar Bard 35 C-37 C/48 h NMP de
Enriquecimiento
39.52 se espera Soya+NaCl 48 h ± 2 h
Giolitti
24 h - 48 h Parker ±2h
3.
Estafilococos
o o
que +Piruvato Cantoni Coagulasa: 35 C - 37 C/
selectivo Coag /g
APHA 2000 contenga de sodio plasma + 6h
Capítulo 39 grandes EDTA
poblaciones
de especies
competitivas
o o
1. Caldo 35 C - 37 C/
Agar Baird BHI 18 h - 24 h
Alimentos Parker Contar cajas
39.53 crudos y no sembrar 3. entre 20 -
o o
procesados 0,3 ml en 3 Coagulasa: 35 C - 37 C/ 200 colonias
Conteo en cajas 35 ºC-37 ºC/45 h plasma + 6h
Superficie - 48 h EDTA
Enumeración Quesos, REPORTAR
Agar
directa de leche y como # de
Fibrinoge-
S.aureus 39.57 postres a 35 ºC-37 ºC/48 h S.aureus por
no Plasma
Coagulasa base de g o ml de
de conejo
Positiva leche producto

32


Tabla 5. (Final)

Expresión
Entidad Principio de la Tiempo y Tiempo y de
oficial técnica Método Alimentos Medio (s) Tempera- Medio (s) de
Temperatura
Medio (s) Tiempo y Medio (s) de Tiempo y
de cultivo cultivo de cultivo Temperatura °C cultivo Temperatura °C resultados
tura °C °C
Agar Baid
o o
Parker sin 35 C - 37 C/
yema de 48 h
Enumeración
huevo
APHA directa de Contar entre
Alimentos Agar Baird
2000 S.aureus 10-100
39.58 crudos y Parker +
Capítulo Coagulasa y colonias
procesados Plasma Agar DNA
39 Termonucleasa o o o o típicas
positiva Telurito 35 C - 37 C/8 h Azul de 35 C - 37 C/4 h
fibrinogeno toluidina
+piruvato
de sodio
Agar Baid o o
35 C ± 2 C/24 h
Parker
Coagulasa:
Todos los Medio o Contar entre
ICONTEC NTC 4779 plasma + 35 C/4 h -24 h
alimentos o
plasma de 35 C ± 2 C/18 h
o 20-200
EDTA
conejo - 72 h colonias
fibrinogeno
o o
35 C -37 C/
1. Caldo BHI
18 h - 24 h
Agar Baid o o Positivo o
Todos los 35 C - 37 C/48 h 2.
AACC Parker negativo
alimentos o
Coagulasa: 35 C-37 C/18 h
o

plasma + - 24 h
EDTA

33


Tabla 6. Métodos horizontales para Bacillus cereus

Principio Incubación Expresión de
Entidad oficial de la Método Alimentos Medio cultivo Tempera-
Tiempo resultados
técnica tura
Conteo: 15-
150 colonias
Recuento Todos los
980.31 D Agar MYP 30 ºC 24 h a 48 h típicas con
en placa alimentos
halo de
AOAC 2000 lecitinasa
Capítulo 17 NMP para Caldo NMP de B
alimentos tripticasa soya 30 ºC 48 h ± 2 h cereus
Todos los confirmados
que 980.31 E polimixina/
alimentos
contienen confirmar en
3
10 UFC/g MYP 30 ºC 24 h a 48 h

Agar yema de
Recuento huevo Reportar como
en placa polimixina o presuntos de
siembra Todos los yema de B cereus las
ICMSF 1984 35 ºC -37 ºC 24 h
por estria alimentos huevo sal colonias
en polimixina típicas. Hacer
superficie cloruro de confirmación
trifeniltrtrazolio
Recuento Reportar como
en placa presuntos de
siembra Agar selectivo
Todos los o o B cereus las
INVIMA 1998 0,1 ml en 9 para Cereus 35 C ± 2 C 18 h a 24 h
alimentos colonias
superficie según Mossel
típicas. Hacer
con varilla confirmación
de hockey
Recuento Agar manitol Reportar
en placa Todos los yema de UFC/g7ml de
siembra de D huevo 30 ºC 24 h B cereus las
alimentos
FDA - BAM 0,1 ml en polimixina colonias
2001 Capítulo superficie MYP típicas.
14 Caldo Hacer
Todos los tripticasa soya 30 ºC 48 h ± 2 h confirmación
NMP E polimixina
alimentos Hacer lectura
Agar MYP 30 ºC 24 h tabla NMP

APHA Agar MYP y
Recuento Todos los Conteo: 30-
Capítuloítulo 32 32.21 Agar KG (Kin- 30 oC -32 ºC 20 h a 24 h
en placa alimentos 300
2001 Goepfert)

Caldo
Todos los Hacer lectura
NMP 32.22 tripticasa soya 30 ºC 48 h
alimentos NMP
polimixina
Recuento
Placa Conteo entre
Todos los o
ICONTEC siembra de NTC 4679 Agar MYP 30 ºC ± 2 C 18 h a 24 h 15-150
alimentos
0,1 ml en colonias
superficie
Recuento Todos los
AACC
Placa alimentos
o
Standard SMA + 0,1 % 79 C - 80 ºC 12 min Esporas
methods Diary Esporas de 8.9
Leche
almidón aerobias
Products Bacillus cruda o
30 ºC ± 1 C 48 ºC
soluble mesófilas/ ml
Capítulo 8
* Hacer confirmación mediante pruebas bioquímicas

34


Tabla 7. Métodos horizontales para Clostridium

Entidad Principio de la Medio Incubación Pruebas Incubación Expresión de
Método Alimentos
oficial técnica cultivo Temperatura Tiempo confirmativas T
O
Tiempo resultados
Medio de
TSC sin tioglicolato 35 ºC 18 h a 24 h
yema de 35 ºC 20 h fluido
huevo caldo de
35 ºC 24 h
esporulación
Recuento en Todos los
976.3 Medio gelatina 20- 200 UFC/ g o ml
placa alimentos
lactosa y 35 ºC 24 h
AOAC 2000 TSC con
nitrato motility
Capítulo 17 yema de 35 ºC 24 h
huevo Caldo PY para
colonias 35 ºC 24 h
atípicas

Medio
Número más 45 ºC en baño
993.10 Mariscos IMM 16 h a 18 h modificado de 45 ºC 24 h NMP Bacterias/g o ml
probable de maría
C. perfringens

Agar leche
o
lactosa yema 35 C - 37 ºC
de huevo + en 18 h a 24 h
antitoxina anaerobiosis
polivalente
Tipificación
o serológica
35 C a 37 ºC
Recuento en Agar Fermentación
Todos los en o
ICMSF placa e 1 británico sangre de 48 h de 35 C - 37 ºC 30 - 300 UFC/g o ml
alimentos anaerobiosis y
identificación caballo carbohidratos/ en 18 h a 24 h
aerobiosis
medio de carne anaerobiosis
cocida
caldo peptona
o
+ lactosa, 35 C - 37 ºC
glucosa, en 48 h
sacarosa, anaerobiosis
maltosa
Continúa . . .

35



Entidad Principio de la Medio Incubación Pruebas Incubación Expresión de
Método Alimentos
oficial técnica cultivo Temperatura Tiempo confirmativas Temperatura Tiempo resultados
Todos los o
35 C - 37 ºC
alimentos Medio de
Detección por o Agar sangre de en
de baja carne 35 C a 37 ºC 18 h a 24 h 24 h Presencia ó ausencia
enriquecimiento* caballo anaerobiosis
carga cocida
y aerobiosis
microbiana
o o
Medio de 35 C a 37 ºC 35 C - 37 ºC
Número más Todos los Agar sangre de NMP Bacterias/ g o
carne en 24 h en 48 h
probable * alimentos caballo ml
cocida anaerobiosis anaerobiosis
Agar sulfito
cicloserina/
Agar movilidad
Agar
nitrato
ICMSF triptosa o
35 C a 37 ºC suplementado
Recuento en Todos los sulfito o
en 20 h a 24 h Caldo gelatina 35 C - 37 ºC 24 h 20 - 200 UFC/ g o ml
placa alimentos cicloserina
anaerobiosis lactosa Yema
Agar
de huevo
2 perfringens
Hemólisis
norteamericano de Shahidi-
Ferguson
Agar yema de
Todos los
huevo de o
alimentos medio o 35 C - 37 ºC
Detección por 46 ºC ± 0,5 C 4 h a 6 h McClung y
de baja fluido o en 24 h Presencia ó ausencia
enriquecimiento 37 ºC ± 0,5 C 18 h a 24 h Toabe Agar
carga tioglicolato anaerobiosis
sangre de
microbiana
oveja
Agar SPS
Recuento de Todos los o
No. 10 Agar sulfito 35 ºC ± 2 C 72 h 5 - 50 colonias
esporas alimentos
cicloserina
Caldo
INVIMA tioglicolato 35 ºC 24 a 48 h
Agar SPS Caldo de carne
1998 Agar
Recuento en Todos los o 20 - 200 UFC/ g o ml
No. 11 triptosa 35 ºC ± 2 C 48 h
placa alimentos
sulfito
cicloserina
Bioquímicas: Catalasa, movilidad nitrato, lactosa y gelatina

36


Tabla 7. (Final)

Entidad Principio de la Incubación Pruebas Incubación Expresión de
Método Alimentos Medio cultivo confirmativas/
oficial técnica Temperatura Tiempo Temperatura Tiempo resultados
bioquímicas
medio de carne
24 h a 48 h
cocida
35 ºC
Agar TSC sin Caldo de
FDA- BAM Recuento en Todos los 35 ºC en 18 h a 24 h
Capítulo 16 yema de 20 h a 24 h tioglicolato fluido 20-200 UFC/g o ml
2001 placa alimentos anaerobiosis
huevo
medio leche- 46 ºC en baño
2h
hierro modificado de maría
Caldo hígado
Caldo
Recuento en Todos los peptona- Agar TSC + yema
APHA 34.71 35 ºC a 37 ºC 20 h a 24 h 35 ºC 18 h a 24 h UFC/g ó ml
placa alimentos glucosa de huevo
Capítulo 34 extracto de
2001 levadura
Recuento en Todos los Agar TSC sin
34.72 Agar TSC 35 ºC a 37 ºC 18 h a 24 h 35 ºC - 37 ºC 18 h a 24 h 20-200 UFC/g ó ml
placa alimentos yema de huevo

35 ºC ± 2 ºC
Medio fluido de
Agar triptosa en 18 h a 24 h
tioglicolato
sulfito anaerobiosis
cicloserina 35 ºC ± 2 ºC
ICONTEC NTC 4834 libre de yema en 24 h a 72 h 15-150 UFC/g ó ml
placa alimentos
de huevo Agar anaerobiosis
SPS Método A. Medio 46 ºC en baño
18 h a 24 h
Agar TSN SL de agua
Método B. Caldo
fluido de 46 ºC ± 0,5 ºC 3ha4h
tioglicolato Caldo 35 ºC 24 h a 48 h
de carne cocida
* Hacer las pruebas bioquímicas indicadas en el recuento en placa e identificación

37


Tabla 8. Métodos horizontales para Coliformes

Prueba presuntiva Prueba confirmativa
Entidad Principio de la Expresión de
Método Alimentos Incubación Medio Incubación
oficial técnica Medio cultivo resultados
Temperatura Tiempo cultivo Temperatura Tiempo
recuento en gel
de pectina
989.11 Productos lácteos VRB redigel 32 ºC ± 1 ºC 24 h ± 2 h 25-250 UFC/g o ml
Película Placa membrana
rehidratable 986,33 leche y productos hidrofóbicas para
Membrana recuento de
32 ºC ± 1 ºC 24 h ± 2 h 15-150 UFC/ml
989,10 lácteos
hidrofóbicas coliformes
Película
rehidratable
Membrana
996.02 Productos lácteos HSCC 32 ºC ± 1 ºC 24 h ± 2 h > 150 UFC/g o ml
AOAC hidrofóbicas
2000 Película
Membrana
Capítulo 17 rehidratable Todos los
Membrana
991.14 hidrofóbicas E. coli 35 ºC ± 1 ºC 24 h ± 2 h 15-150 UFC/ml
alimentos count plate
hidrofóbicas
Todos los Discos SSD Presencia / ausencia
Discos 992.30 Caldo LST 35 ºC ± 1 ºC 24 h ± 2 h 35 ºC 24 h a 48 h
alimentos + MUG E. coli

Filtración por m-FC 35 ºC TSAM 44,5 ºC ± 0,5 ºC 24 h ± 2 h Coliformes/ ml o g
Todos los
membrana 983.25 24 h ± 2 h Coliformes fecales/ ml
hidrofóbica alimentos TBA para E. coli 44,5 ºC ± 0,5 ºC
og
Recuento en
placa
7.8 VRBA 32 ºC ± 1 ºC 24 h ± 2 h Caldo BGB 32 ºC ± 1 ºC 48 h ± 3 h >150 UFC/g o ml
Número más
probable
7.9 caldo LST 35 ºC ± 1 ºC 24 h ± 2 h Caldo BGB 35 ºC ± 1 ºC 48 h ± 3 h NMP/ g ó ml
Productos lácteos
L- EMB
Test Completo 35 ºC ± 1 ºC 24 h ± 2 h
7.10 caldo LST 35 ºC ± 1 ºC 24 h ± 2 h Tubo SMA Presencia ó ausencia
Standard en medio líquido
Methods Tubo LST 35 ºC ± 1 ºC 48 h ± 2 h
Capítulo 7 Medio Membrana
rehidratable
7.13 Productos lácteos hidrofóbicas VRBA
32 ºC ± 1 ºC 24 h ± 2 h >150 UFC/g o ml
Gel de pectina 7.14 Productos lácteos VRB redigel 32 ºC ± 1 ºC 24 h ± 2 h Caldo BGB 32 ºC ± 1 ºC 48 h ± 3 h 25-250 UFC/g o ml
Impedancia para Leche, materia Medio caldo para Recuento por
35 ºC 3h
detección de 7.15 prima, crema y coliformes Caldo BGB 32 ºC 48 h impedancia de
coliformes mezcla de helado coliformes/ ml
Impedancia 35 ºC 14 h

38



Método Incubación Incubación
oficial técnica Alimentos Medio cultivo Medio cultivo resultados
Temperatura Tiempo Temperatura Tiempo
Caldo lactosa
bilis verde
Número más 1 Nortea- Todos los Caldo lauril sulfato brillante 2 % ó NMP Coliformes/
35 ºC a 37 ºC 24 h y 48 h 35 ºC a 37 ºC 24 h a 48 h
probable mericano alimentos triptosa Agar eosina ml o g
azul de metileno
ó Agar Endo
Número más 2 Todos los NMP Coliformes/
Caldo MacConkey 35 ºC a 37 ºC 24 h y 48 h
probable británico alimentos ml o g
Agar bilis
Número más Todos los Caldo lactosa bilis lactosa rojo NMP Coliformes/
3 35 ºC a 37 ºC 24 h y 48 h 35 ºC a 37 ºC 24 h y 48 h
probable alimentos verde brillante neutro ó Agar ml o g
ICMSF
Endo
Agar bilis lactosa
Todos los < 150 colonias
Recuento en placa 4 rojo neutro verde 35 ºC a 37 ºC 24 h
alimentos UFC/ml o g
brillante
Número más 1
Todos los Caldo lauril sulfato NMP Coliformes/
probable norteame 35 ºC a 37 ºC 24 h y 48 h Caldo EC 44,5 ºC ± 0,2 ºC 24 h y 48 h
alimentos triptosa ml o g
coliformes fecales ricano
Caldo lactosa
Número más
2 Todos los bilis verde NMP Coliformes/
probable Caldo MacConkey 35 ºC a 37 ºC 24 h y 48 h 44 ºC ± 0,1 ºC 24 h y 48 h
Europeo alimentos brillante 2% e ml o g
coliformes fecales
Indol
Caldo lactosado Agar EMB Agar
Número más Todos los NMP de
No. 13 bilis verde brillante 35 ºC ± 2 ºC 24 h a 48 h VRBA 35 ºC ± 2 ºC 24 h y 48 h
probable alimentos coliformes/ g ó ml
2% Agar Endo
INVIMA
1998 Caldo lactosado
Número más Caldo lactosado
Todos los bilis verde 44,5 ºC ± 0,5 ºC NMP de coliformes
probable de No. 14 bilis verde brillante 35 ºC ± 2 ºC 24 h a 48 h 48 h
alimentos brillante 2 % y en baño de agua fecales/g ó ml
coliformes fecales 2%
Caldo triptófano

39



T
o
Tiempo cultivo T
o
Tiempo
Número más Caldo NMP de coliformes /g
Caldo lauril triptosa 35 ºC ± 1 ºC 48 h ± 2 h 35 ºC 48 h ± 2 h
probable BGLB ó ml
Todos los
Recuento en alimentos 35º C 32ºC para Caldo 24 h - 48 ±
FDA - BAM VRBA 18 h a 24 h 35 ºC 25- 250 UFC/ g ó ml
placa Capítulo 4 prod. lácteos BGLB 2h
2001
Número más Caldo EC 45,5 ºC ± 0,2 ºC 48 h ± 2 h
probable para NMP de coliformes
Mariscos Caldo lauril triptosa 35 ºC 48 h ± 2 h Caldo L- 18 h - 24 ±
coliformes 35 ºC fecales /g ó ml
fecales EMB 2h

Caldo bilis
Número más Caldo lauril sulfato 24 h - 48 h NMP de coliformes /g
8,71- 8,72 35º C ± 0,5 ºC verde 35 ºC ± 0,5 ºC 48 h ± 2 h
probable triptosa ±2h ó ml
brillante
Recuento en
Sugiere
placa para
Caldo bilis
microorganis- 8.73 VRBA 35 ºC 18 h - 24 h 35 ºC ± 0,5 ºC 48 h ± 2 h 15-150 UFC/g ó ml
verde
mos no
brillante
estresados

Temperatura
APHA Recuento en TSA 2 h ± 0,5 h
Todos los ambiente
Capítulo 8 placa para
8.74 alimentos 15-150 UFC/g ó ml
2001 microorg
estresados 35º C 32 ºC para
VRBA 18 h - 24 h
productos lácteos

Recuento en
35º C 32 ºC para
Membrana 8.75 VRBA 24 h ± 2 h UFC/g ó ml
productos lácteos
hidrofóbicas

35 ºC 32 ºC
Gel de pectina
8.76 Medio VRB Redigel para productos 24 h ± 2 h UFC/g ó ml
Redigel
lácteos

40


Tabla 8. (Final)

Temperatura Tiempo cultivo Temperatura Tiempo
Membrana NMP coliformes/g ó
8.77 Agar m-FC 35 ºC 24 h ± 2 h
hidrofóbica ml
Número más
Caldo lauril sulfato 24 h -48 h ± NMP de coliformes
probable para 8.81 35 ºC ± 0,5 ºC Caldo EC 45,5 ºC ± 0,2 ºC 48 h ± 2 h
triptosa 2h fecales /g ó ml
coliformes fecales
Número más
Todos los 18 h a 24 ± NMP de coliformes/g
probable para 8.931 Caldo LST+ MUG 35 ºC 24 h h± 2 h L-EMB 35 ºC
alimentos 2h ó ml
coliformes y E. coli
Recuento en placa
APHA Todos los
para coliformes y E. 8.933 Agar VRBA+MUG 35 ºC 18 h a 24 h 15-150 UFC/g ó ml
Capítulo 8 alimentos
coli
2001
Recuento en placa
Todos los NMP de coliformes/g
HGMF+ MUG para 8.934 LMG+MUG 35 ºC 24 h ± 2 h
alimentos ó ml
Recuento en Membrana
Todos los
Membrana 8.935 hidrofóbicas E.coli 35 ºC 24 h ± 2 h 15-150 UFC/g ó ml
alimentos
hidrofóbicas count plate
35º C 32 ºC
8.936 Redigel colichrome para productos 24 h - 48 h 15-150 UFC/g ó ml
Colichrome alimentos
lácteos
Número más
Todos los NMP de coliformes/g
AACC probable para 4215 Caldo LST 35 ºC 48 h ± 2 h Caldo BGLB 35 ºC 48 h ± 2 h
alimentos ó ml

41


BIBLIOGRAFÍA

Official methods of Analysis of AOAC International. 17th Edition. Dr. William Horwitz, Volume I y
II. 2000. USA.

STANDARD METHODS for the Examination of Dairy Products 16th Edition. Pul. Health
Association, INC, Washington, D.C. Mc Gugan, W.A.1992.

ICMSF, 1984, Ecología microbiana de los alimentos. Volumen 2. Productos alimenticios. Ed.
Acribia, Zaragoza.

Ministerio de Salud. INVIMA. Manual de Técnicas de Análisis para Control de Calidad
Microbiológico de Alimentos para Consumo Humano. Bogotá Colombia. 1998.

Bacteriological Analytical Manual.. U.S. Food and Drug Administration Laboratories for
Detection in Food and Cosmetic Products. FDA - BAM 2001

NTC 4132:1997, Microbiología. Guía general para el recuento de mohos y levaduras. técnica
de recuento de colonias a 25°C.

ISO 7954:1987, Microbiology. General Guidance for Enumeration of Yeasts and Moulds.
Colony count technique at 25°C.

American Association of Cereal Chemists. AACC 4250. 2004

ISO-GRID. For Detection and Confirmation of Salmonella spp. Method AOAC 991.12. 2000.
NTC 4666 - ISO 11290-1: 1999, Microbiología de alimentos y alimentos para animales. Método
horizontal para la detección de Listeria monocytogenes. Parte 1. Método de detección.

ICMSF, 1986. Ecología microbiana de los alimentos. Volumen 1. Significado y métodos de
Recuento. Ed. Acribia, Zaragoza.

NTC 4574:1999, Microbiología de alimentos y de alimentos para animales. Guía general sobre
métodos para detección de Salmonella.

NTC 4491-1:2005, Microbiología de alimentos y alimentos para animales. Preparación de
muestras para ensayo, suspensión inicial y diluciones decimales para análisis microbiológico.
Parte 1. Reglas generales para la preparación de la suspensión inicial y de diluciones
decimales.

muestras para ensayo. Suspensión inicial y diluciones decimales para análisis microbiológico.
Parte 2. reglas especificas para la preparación de carne y productos carnicos.

Parte 3. Reglas especificas para preparación de muestras de pescado y productos de la pesca.

Parte 4: Reglas especificas para la preparación de productos diferentes de leche, productos
lácteos, carne, productos cárnicos, pescados y productos de la pesca.

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