1. GUÍA TÉCNICA GTC
COLOMBIANA 125
2005-10-26
GUÍA DE REFERENCIAS DE MÉTODOS
HORIZONTALES DE ANÁLISIS MICROBIOLÓGICOS
PARA BEBIDAS, ALIMENTOS Y ALIMENTOS PARA
ANIMALES
E: REFERENCES GUIDE FOR HORIZONTAL
MICROBIOLOGYCAL METHODS FOR BEVERAGE, FOOD
AND ANIMAL FEEDING STUFFS
CORRESPONDENCIA:
DESCRIPTORES: microbiología de alimentos – métodos
horizontales; microbiología de
alimentos – alimentos para animales;
microbiología de alimentos – bebidas.
I.C.S.: 07.100.30
Editada por el Instituto Colombiano de Normas Técnicas y Certificación (ICONTEC)
Apartado 14237 Bogotá, D.C. - Tel. 6078888 - Fax 2221435
Prohibida su reproducción Editada 2005-11-08

2. PRÓLOGO
El Instituto Colombiano de Normas Técnicas y Certificación, ICONTEC, es el organismo
nacional de normalización, según el Decreto 2269 de 1993.
ICONTEC es una entidad de carácter privado, sin ánimo de lucro, cuya Misión es fundamental
para brindar soporte y desarrollo al productor y protección al consumidor. Colabora con el
sector gubernamental y apoya al sector privado del país, para lograr ventajas competitivas en
los mercados interno y externo.
La representación de todos los sectores involucrados en el proceso de Normalización Técnica
está garantizada por los Comités Técnicos y el período de Consulta Pública, este último
caracterizado por la participación del público en general.
La GTC 125 fue ratificada por el Consejo Directivo de 2005-10-26
Esta guía está sujeta a ser actualizada permanentemente con el objeto de que responda en
todo momento a las necesidades y exigencias actuales.
A continuación se relacionan las empresas que colaboraron en el estudio de esta guía a través
de su participación en el Comité Técnico 25 Microbiología.
3M COLOMBIA -DIVISIÓN DE MICROBIOLOGÍA- FARMACOOP
ACEITES Y GRASAS VEGETALES S.A. FRIGORÍFICO GUADALUPE S.A.
ALGARRA S.A. FRIGORÍFICOS COLOMBIANOS S.A.
ALPINA S.A. GASEOSAS COLOMBIANAS S.A.
AQUALAB LTDA. HOSPITAL DE SAN CRISTÓBAL
ASESORÍAS MICROBIOLÓGICAS HOSPITAL SAN JOSÉ
ASINAL LTDA INSTITUTO NACIONAL DE SALUD
ASOCIACIÓN COLOMBIANA DE MICROBIOLOGÍA IVONNE BERNIER LABORATORIO LTDA.
AVESCO Y KLIK S.A. -LABFARVE- LABORATORIO DE
BIANÁLISIS FARMACOLOGÍA VEGETAL
BIOCONTROL LTDA. LABORATORIO A.B.B.A.
BIOIMÁGEN LABORATORIO DE CONTROL DE
BIOMERIUX S.A. CALIDAD DEL EJÉRCITO
BIOQUILAB LTDA. LABORATORIO LABCONTROL
BIOTRENDS LABORATORIOS LABORATORIOS GRAM
CALIDAD MICROBIOLÓGICA LARKIN
CARULLA VIVERO S.A. LESNIAK E.U.
CERCAL LTDA. LEVAPÁN S.A.
COLEGIO MAYOR DE CUNDINAMARCA MERCADEO DE ALIMENTOS DE
COMPAÑÍA NACIONAL DE CHOCOLATES S.A. COLOMBIA S.A.
CONGELAGRO MERCK S.A.
CREPES & WAFLES S.A. MICROBIÓLOGOS ASOCIADOS
EMPRESA DE ACUEDUCTO Y NULAB LTDA.
ALCANTARILLADO DE BOGOTÁ –E.S.P.– PONTIFICIA UNIVERSIDAD JAVERIANA
ENZIPAN DE COLOMBIA LTDA.
FÁBRICA DE ESPECIAS Y CONDIMENTOS
EL REY S.A.

3. QUÍMICOS Y REACTIVOS LTDA. -QUIMIREL- SECRETARÍA DISTRITAL DE SALUD
REPRESENTACIONES BIOTECNOLÓGICAS SUIZO S.A.
LTDA. SURTIQUÍMICOS LTDA.
ROCHE DIAGNOSTICS UNIVERSIDAD DE LOS ANDES
Además de las anteriores, en Consulta Pública el Proyecto se puso a consideración de las
siguientes empresas:
ASESORÍAS MICROBIOLÓGICAS MERCK S.A.
BAVARIA S.A. MINISTERIO DE PROTECCIÓN SOCIAL.
CASA LUKER NESTLÉ DE COLOMBIA S.A.
CENICAÑA PASIFLORA COLOMBIANA S.A.
CONGELAGRO PRODUCTORA DE CONCENTRADOS Y
CONSULTORÍAS MICROBIOLÓGICAS JUGOS DE FRUTA
COOPERATIVA DE GANADEROS DE PURIFICACIÓN Y ANÁLISIS DE FLUIDOS
CARTAGENA LTDA. LTDA.
EJÉRCITO QUALA S.A.
FRIGORÍFICO SUIZO S.A. QUIOS LTDA.
INGENIO PICHICHI S.A. -RICA RONDO- INDUSTRIA NACIONAL
INGENIO RIOPAILA DE ALIMENTOS S.A.
INSTITUTO COLOMBIANO TECNIMICRO LABORATORIO DE
AGROPECUARIO -ICA- ANÁLISIS
-INVIMA- INSTITUTO NACIONAL DE UNIDAD ADMINISTRATIVA DE SALUD
VIGILANCIA MEDICAMENTOS Y PÚBLICA
ALIMENTOS UNIVERSIDAD CATÓLICA INGECAL
LABORATORIO MICROBIOLÓGICO SIS VIKINGOS
LLOREDA GRASAS S.A.
ICONTEC cuenta con un Centro de Información que pone a disposición de los interesados
normas internacionales, regionales y nacionales y otros documentos relacionados.
DIRECCIÓN DE NORMALIZACIÓN

4. GUÍA TÉCNICA COLOMBIANA GTC 125
GUÍA DE REFERENCIAS DE MÉTODOS HORIZONTALES DE ANÁLISIS
MICROBIOLÓGICOS PARA BEBIDAS, ALIMENTOS Y ALIMENTOS PARA ANIMALES
1. OBJETO
1.1 Esta guía brinda información sobre los métodos horizontales propuestos por diferentes
entidades oficiales para el análisis de los alimentos. Son criterios mínimos que todos los
laboratorios deberían considerar al establecer sus técnicas de análisis.
1.2 Esta guía fue diseñada para que la utilicen quienes son responsables de realizar los
análisis microbiológicos de alimentos.
1.3 Esta guía presenta las características de los medios de cultivo, tiempos, temperatura y
forma de expresión de los resultados para cada método horizontal propuesto.
1.4 Esta guía no pretende limitar solo el uso de los métodos horizontales, sino por el
contrario presentar también las alternativas de las metodologías propuestas por entidades
oficialmente reconocidas.
2. RESUMEN DE LA GUÍA
Esta guía describe las directrices más importantes a tener en cuenta en la aplicación de un
método horizontal, como son los medios de cultivo, los rangos de temperatura y los tiempos
límites de incubación según el microorganismo a detectar.
Aunque esta guía está prevista para aplicarla a todos los alimentos de consumo humano
incluidos los productos lácteos, y alimentos de consumo animal, pueden existir ciertos
alimentos a los cuales los métodos de ensayos descritos no aplican debido a la naturaleza de
la muestra.
3. IMPORTANCIA Y USO
La escogencia de un método horizontal para la evaluación de un alimento determinando su
inocuidad o rechazo para consumo humano o animal y los resultados de los análisis, se usan
para control de los procesos o evaluación de la conformidad con la reglamentación que
establece los límites de aceptabilidad para un producto.
1

5. GUÍA TÉCNICA COLOMBIANA GTC 125
Los laboratorios que llevan a cabo muestreo de alimentos y generan datos estadísticos, y las
personas que tienen la responsabilidad de seleccionar un laboratorio para realizar estudios de
la calidad de los alimentos, necesitan utilizar criterios, directrices y recomendaciones de
métodos oficiales para la evaluación de sus productos.
La demostración y documentación por parte de un laboratorio de que hubo una selección
apropiada del método para el análisis del alimento, incrementa la credibilidad de los datos
producidos y promueve su aceptación.
Por lo tanto, la guía proporciona recomendaciones para la selección de los diferentes métodos
horizontales utilizados tanto a nivel internacional, como a nivel nacional para cada uno de los
microorganismos que se pueden presentar en una muestra para analizar.
2

6. GUÍA TÉCNICA COLOMBIANA GTC 125
Tabla 1. Métodos horizontales para hongos y levaduras
Entidad Principio de la Incubación
Método Alimentos Medio cultivo Expresión de resultados
oficial técnica
Temperatura Tiempo
Filtración por
Número más probable
25 C ± 1 C
o o
membrana 995.21 Todos los alimentos Agar YM - 11 50 h ± 2 h
(NMP)
AOAC 2000 hidrofóbica
Capítulo 17 Membrana hidrofóbicas
Recuento en o o
997.02 Todos los alimentos Yeast and Mold Count 20 C a 25 C 5d Contar cajas hasta 150 Colonias
placa
Plate
Recuento en
1 OGY
STANDARD placa
METHODS Recuento en
Dairy 2 DRBC
placa o o
Todos los alimentos 25 C ± 1 C 5d Se cuenta entre 15 y 150 colonias
Products Recuento en
1992 16th 3 SMA + Clortetraciclina
placa
Capítulo 8.10 Recuento en
4 PDA
placa
Oxitetraciclina Se cuenta entre 30 y 300 colonias.
Recuento en o o
ICMSF 1984 1 Todos los alimentos Gentamicina Extracto de 20 C a 24 C 3da5d Calcular mohos y levaduras por
placa
levadura Glucosa (YGC) aparte
Recuento en o o
INVIMA 1998 1 Todos los alimentos OGY 22 C ± 2 C 5da7d Se cuenta entre 20 y 100 colonias
placa
Continúa . . .
3

7. GUÍA TÉCNICA COLOMBIANA GTC 125
Tabla 1. (Continuación)
Entidad Principio de la Incubación
Método Alimentos Medio cultivo Expresión de resultados
oficial técnica Temperatura Tiempo
DRBC (M183)
DG18 ( M184)
PCA (M124)+
Recuento en Cloranfenicol
Capítulo 18 Todos los alimentos Agar maltosa (M185) 25 °C ± 1 °C 5d
placa/dilución
Agar extracto Malta
(M182) Contar cajas entre 10 - 150 colonias
Agar Papa Dextrosa
(M127)
FDA - BAM
2001 Habas, nueces,
condimentos, café, DRBC (M183)
Recuento en
Capítulo 18 coco, etc. Alimentos 25°C ± 1 °C 5d
placa directo
que deben ser
DG18 ( M184)
abiertos con pinzas
Microscopia
Fluorescencia
Cuantificación Bebidas y muestras
Capítulo 18 Azul de Anilina NaOH
levaduras liquidas
viables y no
viables
4

8. GUÍA TÉCNICA COLOMBIANA GTC 125
Tabla 1. (Continuación)
Incubación
Entidad Principio de la
Método Alimentos Medio cultivo Expresión de resultados
oficial técnica Temperatura Tiempo
Agar Plate o Contar entre 15 - 150 colonias.
20.52 Todos los alimentos 22 °C a 25 C 5d
count+Cloramfenicol Reportar como UFC por g o ml
Cereales, arroz, o Contar entre 15 - 150 colonias.
20.53 Agar DG18 22 °C a 25 C 5d
nueces y condimentos Reportar como UFC por g o ml
o
20.541 Mohos acidofílicos Agar ADYS 25 C 5da7d
Mohos o
20.542 Agar AFPA 32 C 42 h a 48 h
Aflatosxigénicos
APHA o
Recuento 20.543 Especies de Fusarium Agar CZID 25 C 7d
Capítulo 20
o
20.545 Especies De Mucor Agar MYCK 25 C 5d
Contar entre 15 - 150 colonias.
Especies De o
Reportar como UFC por g o ml
20.546 Agar DRYES 20 C 7da8d
Penicilium
Levaduras resistentes o
20.547 Agar Agar MAA o TGY 25 °C a 30 C 3da5d
a preservantes
o
20.548 Hongos Xerofílicos Agar DG18 o MY50G 25 C ± 1 °C 7d
Levaduras dominantes o
20.549 Agar MEA o TGY 25 C ± 1 °C 3d
en alimentos
5

9. GUÍA TÉCNICA COLOMBIANA GTC 125
Tabla 1. (Final)
Entidad Principio de la Incubación
Método Alimentos Medio cultivo Expresión de resultados
oficial técnica
Temperatura Tiempo
Recuento en NTC 4132 Agar extracto Contar entre 15 - 150 colonias.
o
ICONTEC Todos los alimentos levadura, dextrosa, 25 C ± 1 °C 3da5d
placa ISO 7954 Reportar como UFC por g o ml
cloranfenicol
PDA
Recuento en o Contar entre 15 - 150 colonias.
AACC AACC 4250 Todos los alimentos PLATE COUNT 22 °C a 25 C 3da5d
placa Reportar como UFC por g o ml
AGAR MALTA
6

10. GUÍA TÉCNICA COLOMBIANA GTC 125
Tabla 2. Métodos horizontales para listeria monocytogenes
Preenriquecimiento Enriquecimiento Aislamiento Bioquímicas
Principio
Entidad Tiempo y Tiempo y Tiempo y Expresión de
de la Método Alimentos Medio (s) Medio (s) Medio (s) de Tiempo y Medio (s) de
oficial Tempera- Tempera- Tempera- resultados
técnica de cultivo de cultivo cultivo Temperatura °C cultivo
tura °C tura °C tura °C
OXA, Iluminación de Henry
o
35 C/24 h a 48 h
Coloración Gram,
PALCAM,
Catalasa, Oxidasa
Prueba
o
CAMP Agar 35 C/48 h
sangre
LPM+esculin/ TSBYE*(A
3+,
Fe partir de este
o
30 C/24 h a 48 h se inoculan 35 C/24 h
o
EB+acrifla-
vina, ácido las
FDA-BAM Todos los o o bioquímicas Presencia
Detección Capítulo 10 Caldo EB 30 C 4 h nalidixico y 30 C 44 h
2001 alimentos ó ausencia
ciclohexam Reducción de
LPM y pasar
ida Nitrato (Caldo 35 oC/5 d
a:
Nitrato M108)
o
TSAYE 30 C/24 h a 48 h SIM o MTM Amb/7 d
Caldo
carbohidratos
+: Dextrosa,
Esculina, o
35 C/7 d
Maltosa,
Ramnosa,
Manitol,
Xilosa
Continúa...
* Hacer pruebas bioquímicas de acuerdo a cada entidad oficial
7

11. GUÍA TÉCNICA COLOMBIANA GTC 125
Tabla 2. (Continuación)
Preenriquecimiento Enriquecimiento Aislamiento Bioquímicas
Principio Expresión
Entidad Tiempo y
de la Método Alimentos Medio (s) Tiempo y Medio (s) Tiempo y Medio (s) de Medio (s) de Tiempo y de
oficial Temperatura
técnica de cultivo Temperatura °C de cultivo Temperatuta °C cultivo cultivo Temperatura °C resultados
°C
EB+acrifla-
FDA- vina, ácido Kits para Elisa
Capítulo Todos los o
BAM Detección Caldo EB 30 °C 4h nalidixico y 30 C 44 h
10 alimentos
2001 ciclohexami
da
Serología
Agar Oxford y o o
35 C ± 2 C/
Agar Palcam. Método Iluminación Henry
24 h ± 48 h
Pasar a:
Agar Triptosa
ácido Coloración Gram, Catalasa,
Productos
o o
30 C ± 2 C/24 h - nalidixico. Oxidasa
Caldo EB Pasar a:
Lácteos 48 h
Agar
movilidad-
Temperatura
nitrato
ambiente / 2 d -
modificado
INVIMA Detección No. 20 o o 5d
35 C ± 2 C/ Hatano
Agar tripticasa 18 h a 24 h Schuch
soya extracto o
Levadura Hemólisis 35 C ± 2 C/24 h
TSA-YE
Caldo CAMP
Caldo LEB o o o o
Productos 30 C ± 2 C/18 h LEB2+ 30 C ± 2 C/18 h - o o
+ acriflavina 35 C ± 2 C/24 h
cárnicos -24 h acriflavina 24 h Xilosa,
1% - 48 h
0,2 % Ramnosa,
Manitol
Serología
8

12. GUÍA TÉCNICA COLOMBIANA GTC 125
Tabla 2. (Continuación)
Principio Preenriquecimiento Enriquecimiento Aislamiento Bioquímicas Expresión
Entidad
de la Método Alimentos Tiempo y de
oficial Medio (s) Tiempo y Medio (s) Tiempo y Medio (s) de Medio (s) de Tiempo y
técnica Temperatura resultados
de cultivo Temperatura °C de cultivo Temperatura °C cultivo cultivo Temperatura °C
°C
Agar sangre 48 h 37 ºC
Lácteos, Caldo TSYE:
Medio de
derivados Utilización de 7 d 37 ºC
Enriqueci- enriqueci-
lácteos, Medio Oxford carbohidratos
miento y 993.12 miento 48 h 30º C 48 h 37 ºC
cárnicos, medio TSYE Agar para
Aislamiento selectivo 2 d -7 d 25 ºC
derivados motilidad
completo
cárnicos. Medio de test
18 h -24 h 37 ºC
CAMP
Productos
lácteos,
carnes
rojas, Presencia ó
AOAC
cerdo, ausencia
aves y
derivados, caldo MFB
Inmunopre productos +Lic. O
997.03 28 h ±2 h 30 ºC BLEB 24±2h 30ºC INMUNOPRECIPITACIÓN
cipitación marinos, Caldo
frutas, Frazer
vegetales,
pastas,
chocolate,
huevos y
harina de
hueso
9

13. GUÍA TÉCNICA COLOMBIANA GTC 125
Tabla 2. (Continuación)
Principio Preenriquecimiento Enriquecimiento Aislamiento Bioquímicas
Entidad Expresión de
de la Método Alimentos Tiempo y
oficial Medio (s) Tiempo y Medio (s) Tiempo y Medio (s) de Medio (s) de Tiempo y resultados
técnica Temperatura
de cultivo Temperatura °C de cultivo Temperatura °C cultivo cultivo Temperatura °C
°C
Coloración Gram, Catalasa
Caldo 25 ºC ± 2 ºC 2 d -
Caldo Motilidad
Fraser 24 h - 48 h a 5d
Fraser +
media Agar Oxford 35 ºC ± 2 ºC Agar sangre 35 ºC ± 2 ºC 24 h
Detección agentes
ISO todos los concentra- 24 h -48 h a 30 ºC Agar Palcam y para de cordero ±2h Presencia ó
NTC 4666 y aisla- 24 h 30 ºC ± 2 ºC selectivos.
11290-1 alimentos ción. Caldo ± 2 ºC pasar a TSYEA:18 h - Fermenta- ausencia
miento Caldo Leb
Leb 1 TSYEA 24 h a 35 ºC ± ción de
2 Caldo 35 ºC ± 2 ºC
Caldo 2 ºC carbohidra-
Palcam 24 h - 48 h hasta
Palcam tos: ramnosa,
5d
xilosa,
manitol
Serología, CAMP
Agar Oxford y 24 h a 48 h 35 Coloración Gram, Catalasa,
Palcam ó ºC Oxidasa
leche y
36.511 productos Caldo M52 48 h 30 ºC
lácteos Agar LPM, y 24 h a 48 h 30
pasar a : ºC Fermentación del manitol,
Aisla- 24 h - 48 h 30 ramnosa y xilosa
APHA TSA-YE
miento e ºC Presencia ó
Capítulo
Identifica- ausencia
36
ción Caldo UVM 22 h ± 2 h 30 ºC 26 h a 48 h 35
y pasar a : ± 2 ºC ºC
Productos Hemólisis en agar sangre de
36512 Agar MOX
cárnicos caballo
26 h a 48 h
Caldo FB 26 h -48 h 35 ºC
35 ºC ± 2 ºC
10

14. GUÍA TÉCNICA COLOMBIANA GTC 125
Tabla 2. (Final)
Principio Preenriquecimiento Enriquecimiento Aislamiento Bioquímicas
Entidad Expresión de
de la Método Alimentos Tiempo y
oficial Medio (s) Tiempo y Medio (s) Tiempo y Medio (s) de Medio (s) de Tiempo y resultados
técnica Temperatura
de cultivo Temperatu-ra °C de cultivo Temperatura °C cultivo cultivo Temperatura °C
°C
24 h a 48 h 30 Coloración Gram, Catalasa,
agar LMP
ºC Oxidasa
Agar oxford 24 h a 48 h 35 Agar sangre
48 h 35 ºC
pasar a : ºC de cordero
Urea
Red de
TSA-YE 24 h 30º C 5 d 35 ºC
nitratos
TSI
7 d temperatura
Standard SIM
ambiente
Methods todos los
Detección 5,4A Caldo LEB 2 días 30 ºC MR-VP 48 h 35 ºC
for Dairy alimentos
products Fermenta-
ción
carbohidratos
TSBYE +
Dextrosa,
7 d 35 ºC
esculina,
maltosa,
ramnosa,
manitol,
xilosa
CAMP
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15. GUÍA TÉCNICA COLOMBIANA GTC 125
Tabla 3. (Métodos horizontales para Salmonella spp.
Principio Preenriquecimiento Enriquecimiento Aislamiento Bioquímicas Expresión
Entidad
de la Método Alimentos Tiempo y Tiempo y Medio (s) Tiempo y de
oficial Medio (s) Medio (s) Medio (s) Tiempo y
técnica Temperatura Temperatura de Tempera- resultados
de cultivo de cultivo de cultivo Temperatura °C
°C °C cultivo tura °C
Huevos, leche,
ponqués, bizcochos,
pan, formulas
infantiles, caseína,
Harina de soya,
PARA ALIMENTOS CON
fideos, macarrones,
ALTA CARGA
spaghetti, queso,
MICROBIANA TSI, LIA
ensaladas o
Caldo 35 C/ 24 h ± CONSULTAR NORMAS Urea o
preparadas(con 35 C/24 h ± 2 h
Lactosa 2h NTC 4491-1 conven-
jamón, huevo, pollo,
NTC 4491-2 cional
atún, pavo), frutas y
NTC 4491-3
vegetales
NTC 4491-4
deshidratados,
o
FDA - carnes, crustáceos, Agar BS, 35 C/ 24 h Presencia ó
Detección Capítulo 5 pescados, coco,
BAM XLD y HE ±2h ausencia
ancas de rana,
carcasas de conejo
Cáscara De Huevo,
Caldo o Rappaport o o o o
Huevo Liquido, Huevo 35 C/ 24 h ± 42 C ± 0,2 C/ UREA 37 C ± 0,5 C/2 h
TS+Sulfato Vassiliadis
cocido, colores, 2h 24 h ± 2 h Rápida Baño de María
Ferroso (RV) y
sabores
Solución o Caldo o o Antisuero o o
35 C/ 24 h ± 43 C ± 0,2 C/ 48 C a 50 C/1 h
Leche en polvo Verde Tetrationato flagelar
2h 24 h ± 2 h Baño de María
Brillante (TT) polivalente
o Antisuero
Levadura seca, 35 C/ 24 h ±
Caldo TS somático 1 min
especias 2h
polivalente
Continúa...
12

16. GUÍA TÉCNICA COLOMBIANA GTC 125
Tabla 3. (Continuación)
Principio Preenriquecimiento Enriquecimiento Aislamiento BioquímicasExpresión
Entidad
de la Método Alimentos Medio (s) Tiempo y Tiempo y Medio (s) Tiempo y de
oficial Medio (s) Medio (s) Tiempo y
técnica de Temperatura Temperatura de Tempera- resultados
de cultivo de cultivo Temperatura °C
cultivo °C °C cultivo tura °C
PARA ALIMENTOS CON
Caldo Rojo
ALTA CARGA
fenol
Reconsti- MICROBIANA
o dulcitol o
tuted 35 C/ 24 h ± CONSULTAR NORMAS o
Dulces Caldo Base 35 C/48 h ± 2 h
nonfat dry 2h NTC 4491-1
Púrpura
milk NTC 4491-2
con 0,5 %
NTC 4491-3
dulcitol
NTC 4491-4
Rappaport o o Caldo
42 C ± 0,2 C/
Vassiliadis Para cultivos mixtos Triptona o 35 oC/24 h ± 2 h
24 h ± 2 h
(RV) y Triptofano
o
Caldo XLD Caldo KCN 35 C/ 48 h ± 2 h
FDA - Tetrationato 35 oC ± 2,0 oC/ 35 °C/ 24 h Presencia ó
Detección Capítulo 5 (TT) 24 h ± 2 h Agar Mac ±2h Caldo o
BAM 35 C/48 h ± 2 h ausencia
Conkey Malonato
Caldo Agar HE Test Indol
Jugo Naranja Pre- o
35 C/ 24 h ± Caldo
(Pasteurizado y No enriqueci
2h Lactosa
Pasteurizado miento o
Rojo Fenol, 35 C/48 h ± 2 h
Universal
o Lactosa
Púrpura
Caldo
Sacarosa
o
Rojo Fenol, 35 C/48 h ± 2 h
o Sacarosa
Púrpura
Caldo MR- o
35 C/48 h ± 2 h
VP
13

17. GUÍA TÉCNICA COLOMBIANA GTC 125
Tabla 3. (Continuación)
Preenriquecimiento Enriquecimiento Aislamiento Bioquímicas Expresión
Entidad Principio de
Método Alimentos Tiempo y Tiempo y Tiempo y de
oficial la técnica Medio (s) Medio (s) de Medio (s) de Medio (s) de Tiempo y
Tempera- Temperatura Temperatura resultados
de cultivo cultivo cultivo cultivo Temperatura °C
tura °C °C °C
Agar Citrato o
35 C/96 h ± 2 h
Simmons
FDA - Agua De o o
Detección Capítulo 18 Todos los 35 C ± 2 C/
BAM Peptona o o
alimentos 18 h -24 h Caldo Selenito 35 C ± 0,2 C/ Coloración
Tamponada
Cistina y 18 h - 24 h Gram
LIA
Agar UREA
Agar BS, Lactosa
Agar XLD y Glucosa
Agar Verde Sacarosa 35 oC ± 2 oC/24 h
Caldo o o
35 C ± 2 C/ Lisina
Agua Tetrationato brillante - 48h
24 h ± 2 h Movilidad
destilada + (TT)+0,2 ml lactosa
sacarosa con Caldo Red
5 ml de o Solución de o o
Nitrato TSI
Leche en 35 C/18 h - 43 C ± 0,2 C/ novobiocina
INVIMA Detección solución Yodo + 0,1 ml Citrato
Polvo 24 h 18 h - 24 h
Verde Solución Simmons
Brillante acuosa de Agar
0,1% verde brillante fenilalanina
0,1 % Caldo
Triptofano
Caldo MR-
VP
Oxidasa
14

18. GUÍA TÉCNICA COLOMBIANA GTC 125
Tabla 3. (Continuación)
Preenriquecimiento Enriquecimiento Aislamiento Bioquímicas Expre-
Principio
Entidad sión de
de la Método Alimentos Tiempo y Tiempo y Tiempo y
oficial Medio (s) de Medio (s) de Medio (s) Medio (s) de Tiempo y resulta-
técnica Temperatura Tempera- Temperatura
cultivo cultivo de cultivo cultivo Temperatura °C dos
°C tura °C °C
Leche Cruda,
Caldo o
leche Caldo o 35 C/25 h ± 2 h
35 C/24 h ± 2 h Selenito TSI, LIA
pasteurizada. Lactosa y 48 h ± 2 h
Cistina y o Agar BS,
Quesos, yogurt 35 C/24 h ±
Agar XLD 35 oC/24 h ± 2 h
Leche en polvo, 2h
Solución Caldo y Agar HE
caseína, postres o UREA o
Verde 35 C/24 h ± 2 h Tetrationato 35 C/24 h ± 2 h
congelados, Convencional
Brillante (TT)
mantequilla
o o
37 C ± 0,5 C/2
UREA Rápida
h Baño de María
o o
Antisuero 48 C - 50 C/ 1
flagelar h Baño de
polivalente María
Antisuero Presenci
Standard Capítulo 5
Detección somático 1 min aó
Methods No. 5,4 B
polivalente ausencia
Agar Lisina o
Caldo o Agar BS, 35 C/48 h ± 2 h
Todos los Caldo o 35 C/24 h ± o Decarboxilasa
35 C/24 h ± 2 h Tetrationato Agar XLD 35 C/24 h ± 2 h
alimentos Lactosa 2h
(TT) y Agar HE Caldo Rojo
fenol dulcitol
o
o Caldo Base 35 C/48 h ± 2 h
Púrpura con
0,5% dulcitol
Caldo
o
Triptona o 35 C/24 h ± 2 h
Triptofano
o
Caldo KCN 35 C/48 h ± 2 h
Caldo o
35 C/48 h ± 2 h
Malonato
15

19. GUÍA TÉCNICA COLOMBIANA GTC 125
Tabla 3. (Continuación)
Preenriquecimiento Enriquecimiento Aislamiento Bioquímicas
Principio Expresión
Entidad
de la Método Alimentos Tiempo y Tiempo y de
oficial Medio (s) Tiempo y Medio (s) de Medio (s) Medio (s) de Tiempo y
técnica Tempera- Temperatura resultados
de cultivo Temperatura °C cultivo de cultivo cultivo Temperatura °C
tura °C °C
Test Indol
Caldo Lactosa
Rojo Fenol, o 35 oC/48 h ± 2 h
Lactosa
Púrpura
Caldo
Sacarosa Rojo
o
Fenol, o 35 C/48 h ± 2 h
Sacarosa
Caldo o Agar BS, o Púrpura
Standard Capítulo 5 Todos los Caldo o 35 C/24 h ± 35 C/24 h ± 2
Detección 35 C/24 h ± 2 h Tetrationato Agar XLD y o
Methods No. 5,4 B alimentos Lactosa 2h h Caldo MR-VP 35 C/48 h ± 2 h
(TT) Agar HE
Agar Citrato o
35 C/96 h ± 2 h
Simmons
Sistemas multitest Rápidos
16

20. GUÍA TÉCNICA COLOMBIANA GTC 125
Tabla 3. (Continuación)
Principio Preenriquecimiento Enriquecimiento Aislamiento Bioquímicas Expresión
Entidad
de la Método Alimentos Tiempo y Tiempo y Tiempo y de
oficial Medio (s) de Medio (s) de Tiempo y Medio (s) Medio (s) de
técnica Tempera- Tempera- Tempera- resultados
cultivo cultivo Temperatura °C de cultivo cultivo
tura °C tura °C tura °C
Presencia ó
o ausencia
35 C a 37
Agar Lisina de
ºC durante
Hierro Salmonella
24 h
en g de
producto.
Levadura
Agua destilada
desecada
Agua destilada
leche en polvo + 2 ml de
descremada y solución verde
ICMSF Detección. 1 entera brillante al
1%
Leche en polvo Caldo
caramelos y reconstituida tetrationato 43 ºC ± 0,05 ºC Agar sulfito 35 ºC a 37 ºC Agar triple
dulces con verde verde 24 h. bismuto durante 48 h azúcar hierro
brillante brillante
Caldo lactosa
+ 1 % de
Subproductos Tergitol o agua
grasos de de peptona
animales, coco tamponada
con 0,22 % de
Tergitol
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21. GUÍA TÉCNICA COLOMBIANA GTC 125
Tabla 3. (Continuación)
Principio Preenriquecimiento Enriquecimiento Aislamiento Bioquímicas Expresión
Entidad
de la Método Alimentos Medio (s) Tiempo y Tiempo y Tiempo y de
oficial Medio (s) Medio (s) Medio (s) de Tiempo y
técnica de Temperatura Temperatura Tempera- resultados
de cultivo de cultivo cultivo Temperatura °C
cultivo °C °C tura °C
PARA ALIMENTOS CON
ALTA CARGA
MICROBIANA
Agar BS o TSI
CONSULTAR NORMAS 35 C/24 h ± o
Huevos, leche, Agar XLD Urea 35 C/24 h ± 2 h
NTC 4491-1 2h
ponqués, Agar HE convencional
NTC 4491-2
bizcochos, pan, NTC 4491-3
formulas NTC 4491-4
infantiles, caseína,
Harina de soya,
fideos,
macarrones, Rappaport o
42 ºC ± 0,2 C/ o
spaghetti, queso, Vassiliadis LIA 35 C/48 h ± 2 h
24 h ± 2 h
ensaladas (RV)
Método de Caldo o o
37 ºC ± 0,5 C/ Presencia/
APHA 37.5 preparadas(con 35 C/24 h ± 2 h Caldo o
43 ºC ± 0,2 C/
Referencia Lactosa UREA Rápida 2 h Baño de ausencia
jamón, huevo, TBG 24 h ± 2 h
pollo, atún, pavo), María
o
frutas y vegetales Antisuero 48 ºC a 50 C/
deshidratados, flagelar 1 h Baño de
carnes, polivalente María
crustáceos,
pescados, coco, Antisuero
ancas de rana, somático 1 min
carcasas de polivalente
conejo Caldo Rojo
fenol dulcitol
o Caldo Base
o
Púrpura 35 C/48 h ± 2 h
bromocresol
con 0,5 %
dulcitol
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22. GUÍA TÉCNICA COLOMBIANA GTC 125
Tabla 3. (Continuación)
Principio Preenriquecimiento Enriquecimiento Aislamiento Bioquímicas Expresión
Entidad
de la Método Alimentos Tiempo y Tiempo y de
oficial Medio (s) de Tiempo y Medio (s) Medio (s) Medio (s) de Tiempo y
técnica Temperatura Tempera- resultados
cultivo Temperatura °C de cultivo de cultivo cultivo Temperatura °C
°C tura °C
PARA ALIMENTOS Caldo Triptona o
CON ALTA CARGA 35 C/24 h ± 2 h
o Triptofano
MICROBIANA
o
CONSULTAR NORMAS Caldo KCN 35 C/48 h ± 2 h
NTC 4491-1 Caldo o
NTC 4491-2 35 C/48 h ± 2 h
Malonato
NTC 4491-3
NTC 4491-4 Test Indol 35 ºC 24 h
Cáscara De
Huevo, Huevo Caldo Lactosa
o
Liquido, Huevo o 35 °C/24 h ± púrpura 35 C/24 h a
Método de Caldo TS 35 C 24 h ± 2 h Caldo SC
37.5 cocido, colores, 2h bromocresol o 48 h
Referencia sabores, rojo fenol
Levadura seca,
Caldo
APHA Solución Sacarosa Rojo
o Caldo 35 °C/24 h ± o
Leche en polvo Verde 35 C/24 h ± 2 h Fenol, o 35 C/48 h ± 2 h
TBG 2h
Brillante Sacarosa
Púrpura
especias de Caldo o o
35 C/24 h ± 2 h Caldo MR-VP 35 C/8 h ± 2 h
cebolla y ajo lactosa
Caldo o Agar Citrato o
Dulces 35 C/24 h ± 2 h 35 C/96 h ± 2 h
lactosa Simmons
leche en polvo, Agar Lisina
huevo Caldo o
y Agar HE 43 C/24 h
Filtración pulverizado, lactosa,
o ó
Por queso Caldo TS, o Caldo 35 C/6 h a
37.72 35 C/18 h a 24h
membrana pulverizado, Solución TBG 8h
Hidrofóbica pimienta, Verde o
Brillante Agar EF-18 35 C/24 h
chocolate y pollo
crudo
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