Este documento trata sobre la prevención de riesgos biológicos en laboratorios de investigación. Describe los diferentes tipos de agentes biológicos, fuentes de contaminación biológica, vías de entrada de material infeccioso en el cuerpo humano, operaciones que aumentan el riesgo biológico y factores que modifican o aumentan el riesgo. Además, explica la clasificación de agentes biológicos, los laboratorios de bioseguridad y las barreras de contención primaria, secundaria

1. “PREVENCIÓN DEL RIESGO BIOLÓGICO EN
LABORATORIOS DE INVESTIGACIÓN”
SERVICIO DE PREVENCION DE RIESGOS LABORALES DE MADRID
14 de abril de 2010
INSTITUTO DE BIOLOGÍA Y GENÉTICA MOLECULAR

2. • Agentes biológicos - RD 664 / 97
“Microorganismos, con inclusión de los genéticamente
modificados (OMG), cultivos celulares y endoparásitos
humanos, susceptibles de originar cualquier tipo de infección,
alergia o toxicidad”

3. CONTAMINANTES
BIOLÓGICOS
• ORGANISMOS VIVOS:
- Agentes biológicos (Virus, Bacterias,
Protozoos, Hongos, Endoparásitos, etc)
- organismos modificados genéticamente
- y cultivos celulares.
• SUBPRODUCTOS: Productos derivados de
estos organismos, p.ej. Esporas, escamas
de piel, pelo, heces, micotoxinas, etc.

4. FUENTES DE CONTAMINACIFUENTES DE CONTAMINACIÓÓNN
Personas o animales infectados.Personas o animales infectados.
Fluidos y muestras biolFluidos y muestras biolóógicasgicas
contaminadas.contaminadas.
El suelo, agua,El suelo, agua, etcetc
Contaminantes de alimentos y derivados.Contaminantes de alimentos y derivados.
ContaminaciContaminacióón de desechos y residuos.n de desechos y residuos.
ContaminaciContaminacióón de los climatizadores den de los climatizadores de
aire, etc.aire, etc.
Catarro
Zoonosis (Hidatidosis)
Muestras animales, Muestras de origen
clínico (sangre, orina, heces...)
Tétanos Botulismo
Brucelosis
Salmonella
Oportunistas
(Control plagas)
Legionella, ácaros del polvo, etc
(Manipuladores de alimentos)

5. Tipos de exposiciTipos de exposicióónn aa
CONTAMINANTESCONTAMINANTES
BIOLBIOLÓÓGICOSGICOS
ExposiciExposicióón con intencin con intencióón deliberadan deliberada
ExposiciExposicióón incidentaln incidental
ExposiciExposicióón no derivada de la actividadn no derivada de la actividad
laborallaboral
Investigación
Gestión
residuos
Gripe, Legionelosis,
Ácaros del polvo, etc
“CALIDAD DE AMBIENTE”
Personal investigador, auxiliar, de limpieza, de mantenimiento, etc

6. •• InhalaciInhalacióón de aerosolesn de aerosoles
•• AbsorciAbsorcióónn a trava travéés de la piel o mucosass de la piel o mucosas por:por:
salpicaduras o produccisalpicaduras o produccióón de aerosolesn de aerosoles
contacto con material contaminado y vcontacto con material contaminado y vííscerassceras
••AbsorciAbsorcióónn a trava travéés des de heridasheridas preexistentespreexistentes
••AbsorciAbsorcióónn a trava travéés de las heridass de las heridas causadas porcausadas por::
abrasiabrasióónn
CortesCortes
AraAraññazosazos
MordedurasMordeduras
••Picaduras de insectosPicaduras de insectos
••AutoinoculaciAutoinoculacióónn o pinchazoso pinchazos
•• IngestiIngestióón por:n por:
salpicadurassalpicaduras
derramesderrames
pipeteopipeteo bucalbucal
VÍAS DE ENTRADA DEL MATERIAL INFECCIOSO
micoplasmas
Rabia
Brucelosis
tuberculosis, gripe, etc
Botulismo
Brucelosis
Salmonella
Hepatits A
Hábitos higiénicas inadecuados, onicofagia, fumadores, etc
-RESPIRATORIA
-DÉRMICA
(PARENTERAL)
-DIGESTIVA
flora
gangrena
Fiebre Q (garrapata)
Sida, Hepatitis B y C
Control de la formación de aerosoles
Utilización de EPI´s

7. RIESGOS DERIVADOS DE LA EXPOSICIRIESGOS DERIVADOS DE LA EXPOSICIÓÓNN
A AGENTES BIOLA AGENTES BIOLÓÓGICOSGICOS
1.1. IInflamacinflamacióónn (inflamaciones locales y cr(inflamaciones locales y cróónicas).nicas).
2.2. IInfeccinfeccióónn (infecciones agudas y enfermedades(infecciones agudas y enfermedades
crcróónicas).nicas).
3.3. SSensibilizaciensibilizacióónn y posterior desarrollo dey posterior desarrollo de alergiasalergias..
4.4. PPortadoresortadores sanossanos..
5.5. IIntoxicacionesntoxicaciones o envenenamientos.o envenenamientos.
6.6. EEfectosfectos sobre la reproduccisobre la reproduccióón.n. Toxoplasmosis, citomegalovirus
EFECTOS TERATOGÉNICOS
Tétanos, botulismo
Estaphilococus aureus – gastroenteritis;
Salmonelosis
Paperas
Hepatitis C y B; Tuberculosis
Acaros,
“cualquier cosa”
Paperas

8. CONTAMINANTESCONTAMINANTES
BIOLBIOLÓÓGICOSGICOS
Para que se produzca enfermedad han dePara que se produzca enfermedad han de
darsedarse simultsimultááneamenteneamente::
Presencia de Agente infecciosoPresencia de Agente infeccioso
VVíía de transmisia de transmisióón apropiadan apropiada
Presencia de huPresencia de huéésped susceptiblesped susceptible
ConcentraciConcentracióón suficiente del agenten suficiente del agente
infecciosoinfeccioso

9. OPERACIONES EN LABORATORIOS QUEOPERACIONES EN LABORATORIOS QUE
PRODUCEN AUMENTO DEL RIESGO BIOLPRODUCEN AUMENTO DEL RIESGO BIOLÓÓGICOGICO
TRANSPORTE DE MATERIAL BIOLÓGICO
INTERNO: Caída y rotura de contenedores, frascos, viales y jaulas
Vertidos Salpicaduras
Aerosoles Escape de animales
EXTERNO: Inexistencia de sistemas de contención.
Implicación de terceras personas y medioambiente
INFECCIÓN EXPERIMENTAL: Recogida de muestras clínicas,
sacrificio de animales, biopsias y necropsias
• Toma de muestras de fluídos, excretas y tejidos corporales.
• Operaciones que implican utilización de material cortante y punzante.
• Proximidad al individuo enfermo (exposición a aerosoles, contacto cutáneo
directo y con fluídos corporales y vísceras)

10. OPERACIONES EN LAS QUE SE PRODUCEOPERACIONES EN LAS QUE SE PRODUCE
AUMENTO DEL RIESGO BIOLAUMENTO DEL RIESGO BIOLÓÓGICO (Cont.)GICO (Cont.)
TÉCNICAS DE SUBCULTIVO Y CARACTERIZACIÓN
TÉCNICAS DE FRACCIONAMIENTO
Trasvase de medios de cultivo
Mezclado y agitación
Inoculaciones
Pipeteos repetitivos y rápidos
Derrames y salpicaduras
Producción de aerosoles
Autoinoculación
Corte y abrasión
Trituración
Homogenización
Sonicación
Centrifugación
Derrames y salpicaduras
Producción de aerosoles

11. Factores personales
- las condiciones del trabajador (sexo, edad, raza, peso,...)
- factores hereditarios
- enfermedades padecidas y crónicas
- inmunocomprometidos
- alergias a agentes y/o medicamentos
- tratamientos médicos, vacunaciones, estados especiales (embarazo, lactancia, etc).
Factores laborales
-la experiencia y conocimientos de los trabajadores
- Tipo de laboratorios / actividades (infraestructura y equipamiento)
- frecuencia de la exposición
- procedimientos de trabajo
- comodidad e impacto estético de los equipos de protección individual; ergonomía;
estado general de los equipos y máquinas, condiciones medioambientales, etc.
OTROS FACTORES ADICIONALES QUEOTROS FACTORES ADICIONALES QUE
MODIFICAN O AUMENTAN EL RIESGOMODIFICAN O AUMENTAN EL RIESGO
TIPO DE LABORATORIO
TIPO OPERACIONES

12. FACTORES ADICIONALES QUE MODIFICAN O AUMENTAN EL RIESGOFACTORES ADICIONALES QUE MODIFICAN O AUMENTAN EL RIESGO
•Factores psicológicos y de la organización del trabajo
- penosidad o dificultad del trabajo
- condiciones del contrato de trabajo (precariedad, contratos basura, etc)
- carga de trabajo (nivel de exigencia, intensidad, monotonía)
- nivel de responsabilidad del trabajador sobre su propio puesto
- grado de motivación
- características de los lugares de trabajo, etc.
•Factores medioambientales
- humedad,
- temperatura,
- iluminación,
- renovaciones del aire (ventilación),
- sinergismo de contaminantes, etc

13. CLASIFICACIÓN A.BIOLÓGICOS
A.B. del Grupo de Riesgo 1 GR 1
A.B. del Grupo de Riesgo 2 GR 2
A.B. del Grupo de Riesgo 3 GR 3
A.B. del Grupo de Riesgo 4 GR 4
Anexo II del RD 664/97: Lista de agentes biológicos
(modificada por la Orden de 25 de marzo de 1998)
A: posibles efectos alérgicos,
D: conservar lista de personal más de 10 años después de la última Exposición,
T: producción de toxinas,
V: si existe vacuna eficaz disponible,
(*): normalmente no infeccioso a través del aire,
“spp”: otras especies del género, además de las indicadas, pueden constituir riesgo para la salud
Mayor peligrosidad
Menor peligrosidad
Notificación de primer uso (art.10 RD 664/97) P1, P2, P3 y P4

14. CLASIFICACIÓN (Art.3, RD 664/97)
No conocido en
la actualidad
ElevadoProvocan
enf.grave grave y
constituir serio
ppeligro para
trabajadores
4
Posible
generalmente
ProbablePuede causar enf.
Grave y
constituir serio
problema para
trabajadores
3
Posible
generalmente
Poco probablePuede causar enf.
y constituir
peligro para
trabajadores
2
InnecesarioNoPoco probable1
Profilaxis o
tratamiento
eficaz
Riesgo de
propagación a
la colectividad
Riesgo
infeccioso
Agente
biológico del
grupo de
riesgo
Se establece en función de:
Capacidad patógena del microorganismo
Modo de transmisión
Disponibilidad de medidas de prevención eficaces:
Profilaxis por administración de vacunas o sueros, lucha
contra los reservorios animales o artrópodos vectores…
Disponibilidad de tratamiento eficaz
+
-

15. LABORATORIOS DE BIOSEGURIDAD EN EL IC:
• 1 LABORATORIOS P-2 / CSB II
Ejemplos A.B. nivel II:
¡¡ NUNCA SANGRE
PROPIA!!
Cultivos celulares de origen humano o simio
Muestras de origen humano (sangre, tejidos, líquido cefalorraquídeo, etc)
Tejidos de origen animal, procedentes de mataderos
VIRUS HUMANOS
• Vaccinia virus 2
• Herpes simplex 2
• Virus Sindbis 2
• Virus de la estomatitis vesicular 2
• Adenovirus 2
• Virus de la gripe 2
• Poliovirus 2
• Encefalovirus 2
• Citomegalovirus humano 2
• Retrovirus: anfotrópicos, ecotrópicos,
xenotrópicos 2
• Reovirus tipo 3 2
• Virus Epstein Barr 2
• Baculovirus 1
PARASITOS
Leishmania infantum 2
Leishmania major 2
BACTERIAS
Legionella pneumophila 2
Salmonella ssp. 2
Pseudomonas aeruginosa 2
Escherichia coli (EPEC) 2
Enterococcus faecium 2
HONGOS
Saccharomyces cerevisiae 1
Saccharomyces pombe 1
Schizosaccharomyces pombe 1
LINEAS CELULARES ESTABLECIDAS 2
HeLa /HMy2-C1r (humanas)/ Daudi (humana)/
143B (humana)/ Hibridomas /T2 (humana) HEK293
(humana)/CV-1/Cos (simio)/U-937 (humana)/RMA y
RMA/s (ratón)/T2 (humana)Células COS7/ Jurkat
(humana)
MUESTRAS HUMANAS 2
Timo
Liquido cefaloraquideo (Corea Huntington)
Células endoteliales humanas de cordón umbilical
(HUVECs)
Linfocitos humanos de sangre periférica (PBLs)

16. EL TERMINO CONTENCIÓN EN BIOSEGURIDAD
CONTENCIÓN PRIMARIA
CONTENCIÓN SECUNDARIA
ELIMINACIÓN
O REDUCCIÓN
DEL RIESGO
”Se utiliza para describir los métodos de seguridad necesarios para la
correcta gestión de la utilización y almacenamiento en los laboratorios de
agentes biológicos infecciosos y organismos modificados genéticamente”.
CONTENCIÓN TERCIARIA
• Equipos de protección colectivo - CSB
• Diseño de la instalación
• Protección sobre el individuo

17. BARRERAS PRIMARIASBARRERAS PRIMARIAS
Equipos de protección colectiva
Cabinas de Seguridad Biológica (NTP 233)
Objetivo: confinamiento del agente biológico
Clase I
Clase II
Clase III

18. Clase I Clase II Clase III
Utilizarlas en aquellas operaciones que:
- puedan producir aerosoles,
- trituración,
- manipulación de material susceptible de estar contaminado
IIA, recircula el 70 %
IIB, recircula el 30 %

19. BARRERAS SECUNDARIASBARRERAS SECUNDARIAS
Objetivo: prevenir fallos en barreras primarias
Materiales de suelos y paredes
Puertas de cierre automático y exclusas
Tomas de aire y presiones negativas
Depuración del aire expulsado
BARRERAS TERCIARIASBARRERAS TERCIARIAS
Objetivo: actuar directamente sobre el trabajador
EPI´s
Vigilancia médica, inmunización
Higiene personal
Buenas prácticas de laboratorio - BPL (NTP 376)

20. Buenas prácticas de laboratorio BPL (NTP 376)
Prohibir comer, beber y fumar (almacenar alimentos)
Orden y limpieza escrupuloso en el lugar de trabajo
Cuartos de aseo apropiados que dispongan de
productos antisépticos para ojos y piel (10 min)
Almacenamiento y mantenimiento de EPI´s
Utilizar ropa de protección adecuada y evitar ir con
ella a zonas comunes u otros servicios
Después del trabajo lavar escrupulosamente las manos
Prohibir la limpieza de ropa de trabajo
en el domicilio particular
Evitar materiales punzantes,
¡no reencapsular agujas!
Procedimientos de trabajo seguros

21. CONTROL DE CONTAMINANTESCONTROL DE CONTAMINANTES
ProtecciProteccióón individualn individual ((EPIEPI´´ss))
- Marcado CE, certificados según legislación vigente
- Instrucciones de uso y mantenimiento
- Caducidad
MANTENIMIENTO EPI´s DE ACUERDO A
LAS INSTRUCCIONES DEL FABRICANTE
Protección respiratoria
P1 P 2 P 3
¡ Sustitución periódica !
¡ Desechables ! ¡Látex!
No tocar cara, ojos, etc
BATA
¡¡ Lavado de manos !!

22. NORMAS ESCRITAS DENORMAS ESCRITAS DE ACTUACIACTUACIÓÓNN
ANTE UNA EMERGENCIAANTE UNA EMERGENCIA
• Tener previsto un Plan de emergencia para cada AB
• Organización de recursos humanos (identificados) y sus
responsabilidades
• Localización de zonas de riesgo elevado. Señalización.
• Vigilancia médica de las personas expuestas
• Lista de las instalaciones donde puedan recibir asistencia
las personas expuestas
• Transporte de personas expuestas

23. ACTUACIACTUACIÓÓN ANTE UNAN ANTE UNA
EMERGENCIAEMERGENCIA
• Tratamiento médico de emergencia para las personas
expuestas y lesionadas
• Lista de depositarios de suero inmune, vacunas,
medicamentos necesarios, material y suministros
especiales
• Provisión y ubicación del material de emergencia: ropa
de protección, desinfectantes, equipos de
desinfección…
• Normas y procedimientos de descontaminación

24. ¿alguna pregunta?

25. Riesgo biológico prácticamente nulo
Características de diseño básicas
Los sistemas especiales de contención no
son necesarios
Aplicación de las buenas prácticas del
laboratorio
LABORATORIOS DE NIVEL 1

26. Riesgo biológico moderado para el personal expuesto
Riesgo biológico muy bajo para el público y el medio
ambiente
AB GR2
Sangre, tejidos y cultivos
de origen humano
OMG en ACT2
LABORATORIOS DE NIVEL 2
“Es necesario establecer barreras entre el material biológico y el personal
expuesto, manteniendo ciertas medidas de contención que impidan escapes
significativos de material biológico al medio ambiente externo”

27. Aspectos a tener en cuanta en la CONCEPCIÓN GENERAL
•Confinar el riesgo biológico
•Control de acceso
•Cambio de ropa de trabajo
•Gestión de residuos biosanitarios
•Procedimientos de trabajo seguros
Sectorización del laboratorio
Esclusa de acceso
Cabinas de bioseguridad
Autoclave
LABORATORIOS DE NIVEL 2

28. •Construcción:
uniones suelo-pared en escocia
ventanas herméticas
control de acceso, enclavamiento
•Tratamiento de aire:
unidad de tratamiento independiente
sin recirculación o con ésta y filtración HEPA
depresión en determinados casos
•Aparataje de seguridad:
cabinas de bioseguridad clase II
autoclave de bioseguridad
SAS
•Descontaminación:
pila, ducha y lavaojos de emergencia en zona
•Sistema contraincendios:
detección, telefonía y extintores
CARACTERÍSTICAS ESPECIFICAS:
LABORATORIOS DE NIVEL 2