El documento describe los procedimientos para obtener y cultivar la mosca Drosophila melanogaster en el laboratorio. Se capturaron moscas adultas usando una trampa con fruta y se preparó un medio de cultivo para que las larvas se desarrollen. Las moscas se anestesiaron con éter y se observaron bajo una lupa, identificando las diferencias morfológicas entre machos y hembras. Los resultados demostraron que es posible obtener y cultivar con éxito D. melanogaster siguiendo los procedimientos descritos.
1. METODOLOGIA
Procedimiento 1: Obtención de Drosophila melanogaster
- Tomar una botella plástica y cortar una porción de la parte superior e invertirla
formando un embudo.
- En el interior de la botella se debe colocar fruta madura, preferiblemente banano, y
agregar agua destilada o mineral.
- Tapar la botella con una torunda y asegurarla con cinta de enmascarar.
- Perforar la torunda con un aplicador de algodón humedecido con vinagre.
- Dejar la botella en un lugar oscuro durante 24 horas para permitir que las moscas
depositen sus huevos.
- Luego, retirar la torunda y dejar la botella destapada para que las larvas puedan salir.
Procedimiento 2: Cultivo de Drosophila melanogaster
1. Hacer un concentrado líquido y homogéneo licuando 1 banano en 200 mL de agua.
2. Calentar la mezcla de banano a temperatura alta hasta punto de ebullición.
3. Agregar 15 g de harina de maíz, 20 g de gelatina sin sabor, 15 g de sacarosa, 7 g de
levadura y 15 mL de vinagre.
4. Revolver constantemente para homogeneizar los ingredientes.
5. Servir en un frasco limpio 1/4 de su volumen del medio mientras todavía esté caliente,
evitando chorrear las paredes del frasco.
6. Dejar enfriar a temperatura ambiente.
7. Tapar con las torundas de algodón.
8. Los medios se pueden almacenar en el refrigerador, bien tapados hasta que se utilicen.
- Colocar una pequeña cantidad del medio de cultivo preparado en la caja de Petri.
- Con la ayuda del pincel delgado, transferir algunas moscas adultas a la caja de Petri.
- Tapar la caja con una torunda humedecida con cloroformo o éter etílico para evitar la
contaminación externa.
- Dejar las moscas en la caja de Petri durante 24 horas a temperatura ambiente.
2. - Luego, retirar las moscas adultas y observar las características morfológicas y genéticas
de las larvas obtenidas.
- Frascos limpios con tapa
- Torundas de algodón
Procedimiento 3: anestesia de Drosophila melanogaster:
1. Tomar uno de los frascos de cultivo con individuos de Drosophila melanogaster y un
frasco vacío para pasar las moscas.
2. Golpear el frasco con cultivo sobre una superficie firme pero protegiendo el frasco de
quebrarse, puede usarse una toalla doblada o un pedazo de espuma.
3. Cuando las moscas caigan al fondo del frasco, quitar la torunda y poner el frasco vacío
encima (invertido) para que las mosca puedan pasar de un frasco al otro.
4. Dar vuelta a los frascos unidos y volver a golpear sobre la superficie firme hasta que las
moscas pasen al frasco vacío (tener precaución de no dejar caer el medio de cultivo).
5. Una vez las moscas estén en el frasco sin medio, retirar el frasco con medio y tapar con
una torunda de algodón.
6. Finalmente, por uno de los bordes con cuidado poner un aplicador de algodón
humedecido con éter etílico o cloroformo hasta que las moscas caigan anestesiadas.
Procedimiento 4: observación de Drosophila melanogaster
Una vez las moscas estén anestesiadas, ponerlas en una caja de Petri y con la ayuda de un
pincel, observarlas bajo la lupa.
Identificar las principales estructuras morfológicas, principalmente aquellas que son
características asociadas al dimorfismo sexual en la especie.
Separar las hembras de los machos.
Vigilar el despertar de las moscas y, si es necesario, se puede acercar cuidadosamente el
aplicador humedecido con éter etílico para volver a anestesiarlas.
4. RESULTADOS
Los resultados obtenidos hasta el momento son los siguientes:
- Se capturó una cantidad significativa de moscas adultas utilizando la trampa con fruta
madura.
- Las moscas depositaron sus huevos en el medio de la botella, lo que resultó en la
aparición de larvas después de un período (24 horas) de incubación adecuado.
- El medio de cultivo se preparó correctamente utilizando los ingredientes mencionados.
- Las moscas adultas transferidas a la caja de Petri se adaptaron al nuevo entorno y
comenzaron a alimentarse del medio de cultivo.
- Las moscas fueron anestesiadas con éxito en el tercer intento utilizando éter etílico o
cloroformo.
- Se transfirieron las moscas anestesiadas a un frasco vacío sin medio de cultivo.
- Las moscas colocadas en la caja de Petri fueron observadas bajo la lupa.
- Se identificaron las principales estructuras morfológicas
- Las hembras y los machos fueron separados correctamente para su posterior análisis y se
observo que la estructura morfológica de la mosca Drosophila melanogaster presenta
algunas diferencias entre las hembras y los machos, como en el tamaño ya que la hembra
es ligeramente más grandes y su abdomen redondeado y más grande en comparación con el
macho que es generalmente más pequeños que la hembra y su abdomen es más estrecho y
alargado
Estos resultados demuestran que se logró obtener y cultivar Drosophila melanogaster con
éxito
5. Hembras de Drosophilia Melanogaster Machos de Drosphilia Melanogaster
Pupa
Larva
CONCLUSION
En este laboratorio se logró obtener y cultivar la mosca Drosophila melanogaster, lo que
permitió observar y analizar sus características morfológicas y fisiológicas, ya que se
capturó una cantidad significativa de moscas adultas utilizando una trampa con fruta
madura, y se preparó correctamente el medio de cultivo para el crecimiento de las larvas en
donde se observó que el período de incubación de los huevos de Drosophila melanogaster
es de aproximadamente 24 horas, y que las larvas que emergieron y se alimentaron del
medio en el que se encontraban, en donde tardaron 5 días en desarrollarse, y
posteriormente pasaron a pupa en 4 días aproximadamente y otros 4 dias en desarrollarse
completamente a adultos que dependieron de las condiciones ambientales de
Barrancabermeja que en el momento contaba con una temperatura de 36 grado y una
humedad del 93%.
Se identificaron las principales estructuras morfológicas de las moscas, se observó que las
hembras tienen un abdomen redondeado y más grande en comparación con los machos, y
un ovipositor que utilizan para depositar los huevos en su entorno. Por otro lado, se observó
que los machos tienen un abdomen más estrecho y alargado, y una estructura genital
especializada llamada "clásperes" en la parte inferior del abdomen.