Incrementos relativos de 1940 a 2000
mediante la utilización de programas de mejora
(selección) en especies animales y vegetales
SELECCIÓN DE
REPRODUCTORES
-Desde hace mucho tiempo
utilizada en animales
“terrestres” y vegetales; -
Incrementos espectaculares:
Nº huevos por gallina: 2,6%
anual ( de 165 a 235 en 20
años)
Lana de oveja: 11% anual
Litros de leche en vacuno: 2%
relativamente nueva en
acuicultura.
Agua dulce
marinos
Mazorca de maíz
primitivo (2000 a.C.)
«Cueva de los
murciélagos» de Méjico
en comparación con una
de maíz híbrido obtenido
por mejora genética
(Mangelsdorf. 1950.
Scientific American)
-Selección asistida por
marcadores moleculares
-Manipulación cromosómica
-Biotecnología
Un transgénico (u Organismo Modificado Genéticamente, OMG): organismo al que
se le incluye en su genoma gene/s de su misma u otra especie
Los genes deben llevar su propio promotor para garantizar su expresión y el lugar
específico de ella.
Para conocer que células han sido
modificadas (transformadas) se suele
agregar un gen marcador selectivo.
(GPF-geen fluorescence protein-
resistencia a antibióticos,..)
DISEÑO DE GENES PARA LA TRANSFERENCIA
(PLÁSMIDOS VECTORES)
Planta de
tabaco
con el GFP
Factor IX
(hemofilia B
Humano)
Promotor de la
b-lactoglobin de
oveja( expresión
en glándula mamaria)
MÉTODOS
Modificación de
células madre
Clonación
MICRO INYECCIÓN
Inyectar un huevo fertilizado (esperma)
con moléculas del ADN vector
óvulo
Inyección del
vector
Individuo “heterocigoto”.Por cruzamientos se obtendrán homocigotos transgénicos
cubrir pequeñas partículas de
tungsteno (1 micrón) con el plásmido
plásmido micropartículas
percutor
Cartucho de polvora
Proyec
til
válvula
Micropartículas
Callos,
células
hembriones,
…
TRANSFORMACIÓN POR ACELERADOR DE PARTÍCULAS
(Bombardeo-Gene Gun)
Disparar
las partículas
sobre los
tejidos.
Introducción en
un embrión en
desarrollo
Nacimiento de
quimeras.
cruzamientos
No transgénico
UTILIZACIÓN DE CÉLULAS MADRE
Modificación de
células madre
100% transgénico
UTILIZACIÓN DE LA CLONACIÓN
descendiente
100%
transgénico
Células modificadas Introducción
del núcleo
de las células
modificadas
en un óvulo
anucleoado
Estimulación “in vitro”
del desarrollo del óvulo
implantación en
madre
ADN T
Genes vir
Se infectan hojas con
la bacteria
Se fragmenta la hoja y se transfiera
a placas de cultivo
Medio de cultivo con
hormonas del
crecimiento y
kanamicina
Gen Bt
Gen Kan-R
Gen Bt
terminadores
Ti recombinante
Plásmido Ti
sin T-DNA
Plantas en crecimiento
portadoras de los genes Bt y
Kan-R
PLASMIDO RI (Agrobacterium ryzobium) produce multiples raices
País Cultivo
USA Soja, maiz,algodón,canola
Argentina Soja maiz,algodón
Canada soja, maiz,canola
China algodón
Sudafri maiz,algodón
Australi algodón
Mexico algodón
Bulgaria maiz
Rumania soja, patata
España maiz
Alemania maiz
Francia maiz
Uruguay maiz
ESPECIESVEGETALES
TRANSGÉNICAS
-resistencia a plagas de insectos
-resistencia a herbicidas
-fijación N en no leguminosas
-aumento valor nutritivo
-maduración controlada
ALGUNOS TIPOS DE PLANTAS TRANSGENICAS COMERCIALIZADAS
RESISTENCIA (Bt) A INSECTOS
Origen Genes Tóxico para
Bacillus Cry(A)a,b y c, Cry1B y D, CryA1C Ledidópteros
thuringiensis. CryII, CryV Lepidópteros y coleopteros
CryIII Coleoóteros
CryIV Dípteros
Efectos de la infestación por insectos en copos
de algodón Bt (derecha) y no Bt (izquierda).
Fuente: USDA
Maíz híbrido Bt (izquierda) y un híbrido sensible al
barrenador europeo del maíz (derecha). (Monsanto)
Patatas y tomates
transgenicos (Bt)
SS SS SS RS SS SS
SS SS
SS RS SS SS
SS SS
SS RS SS SS
Susceptibilidad y Resistencia
La mayoría de las larvas
son homocigotas para el
gen de la sensibilidad
(SS) y no se
desarrollaran en maiz
transgénico. Sin
embargo un % de ellas
serán heterocigotas
(RS) para el gen de la
resistencia e infectarán
y se desarrollarán en el
maiz transgénico
RS
RS
RS SS RR
Maiz Bt sin “refugio”
RS
SS SS SS
SS SS RS
SS SS
SS SS SS
RS
RS
SS
Cruzamiento más
probable de RS
RS SS
SS
RS
No RRs
Maiz Bt Maiz no-Bt (Refugio)
Tolerancia a Glifosato
Objetivo: Transformar plantas sensibles en
altamente tolerantes, para su aplicación directa
5-enolpiruvil-sikimato-3fosfato sintetasa
Glifosato (Roud up) Tabaco, algodón
Glifosinato (Basta) Maíz, Soja
-plantas con gen ESPS
mutante que produce enzima
herbicida resistente
Otras posibilidades:
-introducir gen capaz de
degradar herbicida
(fosfonotricina acteil
transferasa (gen bar de
Striptomyces hygroscopicus)
inhibe acción de glufosinato
que a su vez inhibe síntesis
de glutamina)
-amplificar expresión del gen
normal.
TOLERANCIA A HERBICIDAS
ALGUNOS TIPOS DE PLANTAS TRANSGENICAS COMERCIALIZADAS
TOLERANCIA A HERBICIDAS
Origen Genes Tolerancia a
Agrobacterium sp cepa CP4 CP4 EPSPS glifosato
Streptomyces hygroscopius Bar PPT (Phosphinothricin)
Bt + HERBICIDAS
soja infestada por malezas
(izquierda)
y soja Roundup Ready®
(Monsanto)
RESISTENCIA A LAS HELADAS
Proteína codificada por pez antártico Zoarces americanus que impide congelación
de su plasma
La maduración del tomate se produce por un proceso
en el que se genera etileno y, en respuesta, se
produce una enzima (poligalacturonasa) que es la
responsable del ablandamiento progresivo de la piel del
tomate.
La empresa Calgene han producido un tomate
patentado, FlavrSavr™,en el que se ha introducido un
gen que codifica una copia antisentido de esta enzima,
así reducen en un 90% su acción, ya que el efecto de
la copia antisentido es anularla:
otra alternativa: inhibir la producción de etileno, por lo que la enzima no se
sintetizará como reacción al etileno. Esto permite poder decidir cuándo
queremos que maduren los tomates, suministrándoles etileno externamente.
Se produce una unión
llave-cerradura
entre la enzima y su
copia antisentido,
inutilizando ambas,
Arboles
Alamo, eucalipto, abeto, frutales
-resistencia insectos
-resistencia herbicidas
-menos lignina
!!!!Tabaco sin nicotina!!!!!
Resistencia a
enfermedades
calidad de las uvas para
vino y de mesa
Te y café
-Maduración simultánea de los granos
-!!descafeinados!! en forma natural
Variedades transgénicas de petunia con
modificaciones en el color y la
distribución de la pigmentación en las
flores (Jorgensen, 1955. Science, 268)
TRANSGÉNICOS: la otra forma de mejorar
fecundación
Introducción del ADN foráneo
opAFP GHcDNA opAFP3’
Elección de mosaicos
en línea germinal
Salmón patentado “Adquadventage”
h. crecimiento+ p. anticongelante
Especie Gen introducido Efecto deseado y comentarios País
S.Atlántico
AFP
AFP Salmón GH
Tolerancia a bajas temperaturas
Crecimiento potenciado y eficiencia en
función del alimento
USA,
Canadá
Salmón plateado
(Coho)
GH + AFP de salmón
real
Después de 1 año, aumento del
crecimiento de entre 10 y 30 veces
Canadá
Tilapia AFP Salmón GH
Crecimiento potenciado y eficiencia en
función del alimento; herencia estable
Canadá,
U.K.
Tilapia GH de tilapia +Crecimiento y herencia estable Cuba
Salmón
lisosoma arco iris y
gen pleurocidina de
lenguado
Resistencia a enfermedades, aún en etapa
de desarrollo
USA,
Canadá
Róbalo listado
(Striped Bass)
Genes provenientes
de insectos
Resistencia a las enfermedades, primeras
etapas de investigación
USA
Siluro o Coto
punteado
GH
Potenciación del crecimiento del 33% en
condiciones de cría piscícola
USA
Carpa
GH de salmón y
humanos
Potenciación del crecimiento del 150% en
condiciones de cría piscícola; mayor
resistencia a las enfermedades; tolerancia
a bajos niveles de oxígeno
China,
USA
Oreja de mar
GH de salmón
plateado + varios
promotores
Crecimiento potenciado USA
Ostras
GH de salmón
plateado + varios
promotores
Crecimiento potenciado USA
MG_Transgenicos.ppt

MG_Transgenicos.ppt

  • 1.
    Incrementos relativos de1940 a 2000 mediante la utilización de programas de mejora (selección) en especies animales y vegetales SELECCIÓN DE REPRODUCTORES -Desde hace mucho tiempo utilizada en animales “terrestres” y vegetales; - Incrementos espectaculares: Nº huevos por gallina: 2,6% anual ( de 165 a 235 en 20 años) Lana de oveja: 11% anual Litros de leche en vacuno: 2% relativamente nueva en acuicultura. Agua dulce marinos Mazorca de maíz primitivo (2000 a.C.) «Cueva de los murciélagos» de Méjico en comparación con una de maíz híbrido obtenido por mejora genética (Mangelsdorf. 1950. Scientific American) -Selección asistida por marcadores moleculares -Manipulación cromosómica -Biotecnología
  • 2.
    Un transgénico (uOrganismo Modificado Genéticamente, OMG): organismo al que se le incluye en su genoma gene/s de su misma u otra especie Los genes deben llevar su propio promotor para garantizar su expresión y el lugar específico de ella. Para conocer que células han sido modificadas (transformadas) se suele agregar un gen marcador selectivo. (GPF-geen fluorescence protein- resistencia a antibióticos,..) DISEÑO DE GENES PARA LA TRANSFERENCIA (PLÁSMIDOS VECTORES) Planta de tabaco con el GFP Factor IX (hemofilia B Humano) Promotor de la b-lactoglobin de oveja( expresión en glándula mamaria)
  • 3.
  • 4.
    MICRO INYECCIÓN Inyectar unhuevo fertilizado (esperma) con moléculas del ADN vector óvulo Inyección del vector Individuo “heterocigoto”.Por cruzamientos se obtendrán homocigotos transgénicos
  • 5.
    cubrir pequeñas partículasde tungsteno (1 micrón) con el plásmido plásmido micropartículas percutor Cartucho de polvora Proyec til válvula Micropartículas Callos, células hembriones, … TRANSFORMACIÓN POR ACELERADOR DE PARTÍCULAS (Bombardeo-Gene Gun) Disparar las partículas sobre los tejidos.
  • 6.
    Introducción en un embriónen desarrollo Nacimiento de quimeras. cruzamientos No transgénico UTILIZACIÓN DE CÉLULAS MADRE Modificación de células madre 100% transgénico
  • 7.
    UTILIZACIÓN DE LACLONACIÓN descendiente 100% transgénico Células modificadas Introducción del núcleo de las células modificadas en un óvulo anucleoado Estimulación “in vitro” del desarrollo del óvulo implantación en madre
  • 8.
  • 9.
    Se infectan hojascon la bacteria Se fragmenta la hoja y se transfiera a placas de cultivo Medio de cultivo con hormonas del crecimiento y kanamicina Gen Bt Gen Kan-R Gen Bt terminadores Ti recombinante Plásmido Ti sin T-DNA Plantas en crecimiento portadoras de los genes Bt y Kan-R PLASMIDO RI (Agrobacterium ryzobium) produce multiples raices
  • 10.
    País Cultivo USA Soja,maiz,algodón,canola Argentina Soja maiz,algodón Canada soja, maiz,canola China algodón Sudafri maiz,algodón Australi algodón Mexico algodón Bulgaria maiz Rumania soja, patata España maiz Alemania maiz Francia maiz Uruguay maiz ESPECIESVEGETALES TRANSGÉNICAS -resistencia a plagas de insectos -resistencia a herbicidas -fijación N en no leguminosas -aumento valor nutritivo -maduración controlada
  • 12.
    ALGUNOS TIPOS DEPLANTAS TRANSGENICAS COMERCIALIZADAS RESISTENCIA (Bt) A INSECTOS Origen Genes Tóxico para Bacillus Cry(A)a,b y c, Cry1B y D, CryA1C Ledidópteros thuringiensis. CryII, CryV Lepidópteros y coleopteros CryIII Coleoóteros CryIV Dípteros Efectos de la infestación por insectos en copos de algodón Bt (derecha) y no Bt (izquierda). Fuente: USDA Maíz híbrido Bt (izquierda) y un híbrido sensible al barrenador europeo del maíz (derecha). (Monsanto) Patatas y tomates transgenicos (Bt)
  • 13.
    SS SS SSRS SS SS SS SS SS RS SS SS SS SS SS RS SS SS Susceptibilidad y Resistencia La mayoría de las larvas son homocigotas para el gen de la sensibilidad (SS) y no se desarrollaran en maiz transgénico. Sin embargo un % de ellas serán heterocigotas (RS) para el gen de la resistencia e infectarán y se desarrollarán en el maiz transgénico RS RS RS SS RR Maiz Bt sin “refugio” RS
  • 14.
    SS SS SS SSSS RS SS SS SS SS SS RS RS SS Cruzamiento más probable de RS RS SS SS RS No RRs Maiz Bt Maiz no-Bt (Refugio)
  • 15.
    Tolerancia a Glifosato Objetivo:Transformar plantas sensibles en altamente tolerantes, para su aplicación directa 5-enolpiruvil-sikimato-3fosfato sintetasa Glifosato (Roud up) Tabaco, algodón Glifosinato (Basta) Maíz, Soja -plantas con gen ESPS mutante que produce enzima herbicida resistente Otras posibilidades: -introducir gen capaz de degradar herbicida (fosfonotricina acteil transferasa (gen bar de Striptomyces hygroscopicus) inhibe acción de glufosinato que a su vez inhibe síntesis de glutamina) -amplificar expresión del gen normal. TOLERANCIA A HERBICIDAS
  • 16.
    ALGUNOS TIPOS DEPLANTAS TRANSGENICAS COMERCIALIZADAS TOLERANCIA A HERBICIDAS Origen Genes Tolerancia a Agrobacterium sp cepa CP4 CP4 EPSPS glifosato Streptomyces hygroscopius Bar PPT (Phosphinothricin) Bt + HERBICIDAS soja infestada por malezas (izquierda) y soja Roundup Ready® (Monsanto)
  • 18.
    RESISTENCIA A LASHELADAS Proteína codificada por pez antártico Zoarces americanus que impide congelación de su plasma
  • 19.
    La maduración deltomate se produce por un proceso en el que se genera etileno y, en respuesta, se produce una enzima (poligalacturonasa) que es la responsable del ablandamiento progresivo de la piel del tomate. La empresa Calgene han producido un tomate patentado, FlavrSavr™,en el que se ha introducido un gen que codifica una copia antisentido de esta enzima, así reducen en un 90% su acción, ya que el efecto de la copia antisentido es anularla: otra alternativa: inhibir la producción de etileno, por lo que la enzima no se sintetizará como reacción al etileno. Esto permite poder decidir cuándo queremos que maduren los tomates, suministrándoles etileno externamente. Se produce una unión llave-cerradura entre la enzima y su copia antisentido, inutilizando ambas,
  • 20.
    Arboles Alamo, eucalipto, abeto,frutales -resistencia insectos -resistencia herbicidas -menos lignina !!!!Tabaco sin nicotina!!!!! Resistencia a enfermedades calidad de las uvas para vino y de mesa Te y café -Maduración simultánea de los granos -!!descafeinados!! en forma natural
  • 21.
    Variedades transgénicas depetunia con modificaciones en el color y la distribución de la pigmentación en las flores (Jorgensen, 1955. Science, 268)
  • 22.
    TRANSGÉNICOS: la otraforma de mejorar fecundación Introducción del ADN foráneo opAFP GHcDNA opAFP3’ Elección de mosaicos en línea germinal Salmón patentado “Adquadventage” h. crecimiento+ p. anticongelante Especie Gen introducido Efecto deseado y comentarios País S.Atlántico AFP AFP Salmón GH Tolerancia a bajas temperaturas Crecimiento potenciado y eficiencia en función del alimento USA, Canadá Salmón plateado (Coho) GH + AFP de salmón real Después de 1 año, aumento del crecimiento de entre 10 y 30 veces Canadá Tilapia AFP Salmón GH Crecimiento potenciado y eficiencia en función del alimento; herencia estable Canadá, U.K. Tilapia GH de tilapia +Crecimiento y herencia estable Cuba Salmón lisosoma arco iris y gen pleurocidina de lenguado Resistencia a enfermedades, aún en etapa de desarrollo USA, Canadá Róbalo listado (Striped Bass) Genes provenientes de insectos Resistencia a las enfermedades, primeras etapas de investigación USA Siluro o Coto punteado GH Potenciación del crecimiento del 33% en condiciones de cría piscícola USA Carpa GH de salmón y humanos Potenciación del crecimiento del 150% en condiciones de cría piscícola; mayor resistencia a las enfermedades; tolerancia a bajos niveles de oxígeno China, USA Oreja de mar GH de salmón plateado + varios promotores Crecimiento potenciado USA Ostras GH de salmón plateado + varios promotores Crecimiento potenciado USA