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2017
Versión
04
AJC1, 2012
Helicobacter pylori
Bacilo gram negativo
de forma helicoidal.
Crece en
condiciones de
microaerofilia a 37°.
Productor de
catalasa, ureasa y
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Factores de
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DIMENSIÓN DE LA INFECCIÓN POR Hp
• Las tasas de infección por Hp en los países en vía
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• Tasas en los países desarrollados del 30 al 50%
• Latinoamérica : tasas son del 90%
• Colombia : 86% en mayores de 20 años y en niños del
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VÍAS DE INFECCIÓN Y FACTORES
DE RIESGO
• Los humanos son el único reservorio de Hp
• Las principales vías de transmisión ampliamente estudiadas han sido:
• oral-oral, gastro-oral y fecal-oral.
• Socioeconómico y el hacinamiento
• Las aguas contaminadas con materia fecal
• Varios estudios a nivel mundial que implican al agua potable como un posible
mecanismo de transmisión del microorganismo.
Detección de Helicobacter pylori
• Medios de cultivo
• Pruebas moleculares
• Detección , enumeración, caracterización,
determinación de la actividad microbiana y
funcionalidad de algunos genes.
OBJETIVO GENERAL
Evaluar la presencia de Helicobacter pylori en
muestras de agua y biopelículas de los grifos en las
escuelas de la ciudad de Medellín a través de una
técnica de reacción en cadena de la polimerasa
(PCR) directa convencional.
METODOLOGÍA
Tipo de estudio: de Corte
Población: 409 instituciones educativas oficiales de la Secretaria de Educación de Medellín,
Tamaño de la muestra: 199 instituciones calculada con una proporción esperada de 50%,
una confianza de 95% y un error del 5%,
Selección de la muestra: se realizó teniendo en cuenta la distribución por comunas de las
escuelas y se realizó un muestreo aleatorio simple estratificado.
Unidad de muestreo: Institución educativa
Unidad de análisis: las muestras de aguas y biopelícula de los grifos de agua de dichas
instituciones.
Tabla 1. Distribución de
las escuelas por comunas
en la ciudad de Medellín
RECOLECCIÓN DE LA INFORMACIÓN
Encuesta
Muestras de agua
Muestras de biopelículas
EVALUACIÓN PREVIA DEL MEDIO DE
CULTIVO HPSPA
RECOLECCIÓN DE LAS MUESTRAS
Se recolectaron 250 mL agua en frasco tapa azul estéril.
Con un aplicador de algodón estéril se tomó muestra de la
superficie interna de las llaves, se depositó luego en un
tubo de ensayo tapa rosca estéril que contenía 3 mL de
BHI-DENT.
Ambos tipos de muestras se mantuvieron en refrigeración
máximo durante tres horas hasta su llegada al laboratorio.
LUGARES EN LOS CUALES SE REALIZÓ LA TOMA MUESTRAS
PROCESAMIENTO DE LAS MUESTRAS
Cultivo en BHI DENT de las muestras de agua
centrifugadas.
Cultivo de las muestras de biopelicula de BHI DENT
Cultivo en el agar HPSPA
Separación de muestras para evaluar por PCR
Se emplearon los cebadores descritos por Benson y col.
específicos para el gen urea
HpR 5’ATG GAA GTG TGA GCC GAT TTG-3’ y HpF 5’ATA TTA
TGG AAG AAG CGA GAG CTG G-3’)
RECOLECCIÓN DE MUESTRAS
ANÁLISIS DE LOS DATOS
Base de datos en MS-Excel
Programa Estadístico SPSS versión 20
Análisis univariado
Análisis bivariado
Regresión logística
RESULTADOS
Se evaluaron en total 194 IEO de las cuales se
obtuvieron 194 muestras de agua y 194 de
biopelícula.
H. pylori fue determinado por cultivo en agar
HPSPA en el 11.3% de las muestras de agua
En biopelículas en el 11.3%
La frecuencia de ADN de Hp por la prueba de PCR
en agua y biopelícula fue del 2,1% en cada tipo de
muestra.
RESULTADOS
 Se pudo observar que sólo en los barrios de La
Candelaria, Laureles, La América y El Poblado no
presentaron escuelas positivas para H. pylori
 Al realizar el análisis bivariado entre variables como:
estado del grifo, la ubicación del grifo, material del cual
estaba hecho el grifo, uso de pozos, agua potable, aguas
no potables, años de edificación, no se encontró
asociación estadísticamente significativa (p>0.05) entre
estas variables.
Tabla 3. Factores de riesgo para la contaminación
con Helicobacter pylori
Ubicación de las muestras positivas para Helicobacter pylori
en la ciudad de Medellín
CONCLUSIÓN
 Fue posible detectar la presencia de Hp y de su ADN en
muestras de agua y biopelícula obtenidas en los grifos de las IEO
de la ciudad de Medellín.
 Los factores predictores de la contaminación por Hp analizados
no presentaron una asociación estadísticamente significativa.
 Esta situación refleja la existencia de la bacteria en el acueducto
y pone en evidencia la presencia de Hp en biopelícula formada
en el interior de los grifos.
GC
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08
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2017
Versión
04
REFERENCIA
Cuervo CM, Gaviria AM. Detection of helicobactery pylori in water and
biofilm samples from facets of official educational institutions. Acta
Médica Colombiana. 2017; 42(2): 121-128. Available
from: http://www.actamedicacolombiana.com/anexo/articulos/2017/02-
2017-06.pdf
 AJC1. Helicobacter pylori [Internet]. 2012 [cited 17 November 2017].
Available from: https://www.flickr.com/photos/ajc1/7164768470/

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  • 2. Helicobacter pylori Bacilo gram negativo de forma helicoidal. Crece en condiciones de microaerofilia a 37°. Productor de catalasa, ureasa y oxidasa. Factores de virulencia que le permite el daño a la mucosa gástrica: citotoxina vacuolizante VacA la proteína antigénica CagA. Isla de patogenicidad Enfermedad dispéptica Úlceras a del duodeno Linfoma de MALT Cáncer gástrico
  • 3. DIMENSIÓN DE LA INFECCIÓN POR Hp • Las tasas de infección por Hp en los países en vía desarrollo: 80 y 90% • Tasas en los países desarrollados del 30 al 50% • Latinoamérica : tasas son del 90% • Colombia : 86% en mayores de 20 años y en niños del 76% .
  • 4. VÍAS DE INFECCIÓN Y FACTORES DE RIESGO • Los humanos son el único reservorio de Hp • Las principales vías de transmisión ampliamente estudiadas han sido: • oral-oral, gastro-oral y fecal-oral. • Socioeconómico y el hacinamiento • Las aguas contaminadas con materia fecal • Varios estudios a nivel mundial que implican al agua potable como un posible mecanismo de transmisión del microorganismo.
  • 5. Detección de Helicobacter pylori • Medios de cultivo • Pruebas moleculares • Detección , enumeración, caracterización, determinación de la actividad microbiana y funcionalidad de algunos genes.
  • 6. OBJETIVO GENERAL Evaluar la presencia de Helicobacter pylori en muestras de agua y biopelículas de los grifos en las escuelas de la ciudad de Medellín a través de una técnica de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) directa convencional.
  • 7. METODOLOGÍA Tipo de estudio: de Corte Población: 409 instituciones educativas oficiales de la Secretaria de Educación de Medellín, Tamaño de la muestra: 199 instituciones calculada con una proporción esperada de 50%, una confianza de 95% y un error del 5%, Selección de la muestra: se realizó teniendo en cuenta la distribución por comunas de las escuelas y se realizó un muestreo aleatorio simple estratificado. Unidad de muestreo: Institución educativa Unidad de análisis: las muestras de aguas y biopelícula de los grifos de agua de dichas instituciones.
  • 8. Tabla 1. Distribución de las escuelas por comunas en la ciudad de Medellín
  • 9. RECOLECCIÓN DE LA INFORMACIÓN Encuesta Muestras de agua Muestras de biopelículas
  • 10. EVALUACIÓN PREVIA DEL MEDIO DE CULTIVO HPSPA
  • 11. RECOLECCIÓN DE LAS MUESTRAS Se recolectaron 250 mL agua en frasco tapa azul estéril. Con un aplicador de algodón estéril se tomó muestra de la superficie interna de las llaves, se depositó luego en un tubo de ensayo tapa rosca estéril que contenía 3 mL de BHI-DENT. Ambos tipos de muestras se mantuvieron en refrigeración máximo durante tres horas hasta su llegada al laboratorio.
  • 12. LUGARES EN LOS CUALES SE REALIZÓ LA TOMA MUESTRAS
  • 13. PROCESAMIENTO DE LAS MUESTRAS Cultivo en BHI DENT de las muestras de agua centrifugadas. Cultivo de las muestras de biopelicula de BHI DENT Cultivo en el agar HPSPA Separación de muestras para evaluar por PCR Se emplearon los cebadores descritos por Benson y col. específicos para el gen urea HpR 5’ATG GAA GTG TGA GCC GAT TTG-3’ y HpF 5’ATA TTA TGG AAG AAG CGA GAG CTG G-3’)
  • 15. ANÁLISIS DE LOS DATOS Base de datos en MS-Excel Programa Estadístico SPSS versión 20 Análisis univariado Análisis bivariado Regresión logística
  • 16. RESULTADOS Se evaluaron en total 194 IEO de las cuales se obtuvieron 194 muestras de agua y 194 de biopelícula. H. pylori fue determinado por cultivo en agar HPSPA en el 11.3% de las muestras de agua En biopelículas en el 11.3% La frecuencia de ADN de Hp por la prueba de PCR en agua y biopelícula fue del 2,1% en cada tipo de muestra.
  • 17. RESULTADOS  Se pudo observar que sólo en los barrios de La Candelaria, Laureles, La América y El Poblado no presentaron escuelas positivas para H. pylori  Al realizar el análisis bivariado entre variables como: estado del grifo, la ubicación del grifo, material del cual estaba hecho el grifo, uso de pozos, agua potable, aguas no potables, años de edificación, no se encontró asociación estadísticamente significativa (p>0.05) entre estas variables.
  • 18.
  • 19. Tabla 3. Factores de riesgo para la contaminación con Helicobacter pylori
  • 20. Ubicación de las muestras positivas para Helicobacter pylori en la ciudad de Medellín
  • 21. CONCLUSIÓN  Fue posible detectar la presencia de Hp y de su ADN en muestras de agua y biopelícula obtenidas en los grifos de las IEO de la ciudad de Medellín.  Los factores predictores de la contaminación por Hp analizados no presentaron una asociación estadísticamente significativa.  Esta situación refleja la existencia de la bacteria en el acueducto y pone en evidencia la presencia de Hp en biopelícula formada en el interior de los grifos.
  • 22. GC - FR – 006 08 - 02 – 2017 Versión 04 REFERENCIA Cuervo CM, Gaviria AM. Detection of helicobactery pylori in water and biofilm samples from facets of official educational institutions. Acta Médica Colombiana. 2017; 42(2): 121-128. Available from: http://www.actamedicacolombiana.com/anexo/articulos/2017/02- 2017-06.pdf  AJC1. Helicobacter pylori [Internet]. 2012 [cited 17 November 2017]. Available from: https://www.flickr.com/photos/ajc1/7164768470/