DETERMINACION DE COLIFORMES FECALES. TRABAJO DE INVESTIGACION FORMATIVA. LA DETERMINACION DE COLIFORMES FECALES ES IMPORTANTE. PARA LA SALUD DE LA POBLACION. PARA ELLO SE USA UNO DE LAS TANTAS TECNICAS EXISTENTES. TECNICA DE FILTRACION POR MEMBRANA TRABAJO DESARROLLADO POR: ESPINOZA MALCA, ALEJANDRO COCHACHES ALVARES, GABI CANCINO CALDERON, SALLY DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO FACULTAD DE CIENCIAS BIOLOGICAS ESCUELA ACADEMICO PROFESIONAL DE MICROBIOLOGIA Y PARASITOLOGIA EXPERIENCIA CURRICULAR: QUIMICA ANALITICA

1. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO
DETERMINAC
N DE

2. COLIFORMES
FECALES
E.A. MICROBIOLOGIA Y PARASITOLOGIA
Espinoza Malca,
Alejandro
Cancino Calderón,
Sally
Cochaches
Alvares, Gabriela

3. INTRODUCCION:
El agua es esencial para la vida y todas las personas deben disponer de un suministro
satisfactorio (suficiente, inocuo y accesible), esto solo se puede obtener gracias a una
adecuada vigilancia microbiológica.
La mejora del acceso al agua potable puede proporcionar beneficios tangibles para la
salud.
Debe realizarse el máximo esfuerzo para lograr que la inocuidad del agua de consumo
sea la mayor posible.
En la gran mayoría de los países en “vías de desarrollo” un gran porcentaje del agua
destinada para el consumo humano, no está bajo control o una vigilancia sanitaria
sistemática. O también debido a la falta de inversión por parte del estado. Esto agrava la
situación médica de poblaciones exponiéndolas a enfermedades infecciosas transmitidas
a través del agua.
El agua de consumo inocua (agua potable), no ocasiona ningún riesgo significativo para
la salud cuando se consume durante toda una vida, teniendo en cuenta las diferentes
vulnerabilidades que pueden presentar las personas en las distintas etapas de su vida.
Las personas que presentan mayor riesgo de contraer enfermedades transmitidas por el
agua son los lactantes y los niños de corta edad, las personas debilitadas o que viven en
condiciones antihigiénicas y los ancianos. El agua potable es adecuada para todos los
usos domésticos habituales, incluida la higiene personal. No obstante, puede necesitarse
agua de mayor calidad para algunos fines especiales, como la diálisis renal y la limpieza
de lentes de contacto, y para determinados usos farmacéuticos y de producción de
alimentos. Las personas con inmunodeficiencia grave posiblemente deban tomar
precauciones adicionales, como hervir el agua, debido a su sensibilidad a
microorganismos cuya presencia en el agua de consumo normalmente no sería
preocupante.
La aplicación de un enfoque integral a la evaluación y la gestión de los riesgos de los
sistemas de abastecimiento de agua de consumo aumenta la confianza en la inocuidad

4. del agua. Este enfoque conlleva la evaluación sistemática de los riesgos en la totalidad
de un sistema de abastecimiento de agua de consumo —desde el agua de origen y la
cuenca de captación al consumidor— y la determinación de las medidas que pueden
aplicarse para gestionar estos riesgos, así como de métodos para garantizar el
funcionamiento eficaz de las medidas de control. Incorpora estrategias para abordar la
gestión cotidiana de la calidad del agua y hacer frente a las alteraciones y averías.
La gran mayoría de los problemas de salud relacionados de forma evidente con el agua
se deben a la contaminación por microorganismos (bacterias, virus, protozoos u otros
organismos). En este caso nos enfocaremos en los Coliformes fecales (bacterias del
tracto intestinal).
Para poder determinar Coliformes Fecales en aguas, se usa la TECNICA DE
FILTRACION POR MEMBRANA. Que en el desarrollo del informe se ira
describiendo.

5. TECNICADE FILTRACION POR MEBRANA
Para la detección de coliformes totales y coliformes fecales es utilizado el método de
filtración por membrana, el cual es un método altamente reproducible, puede usarse para
analizar volúmenes de muestra relativamente grandes y se obtienen resultados en menor
tiempo que con el NMP. Sin embargo, no puede aplicarse a cualquier tipo de muestra y
tiene sus limitaciones. También se encuentra entre los métodos standards. A los efectos
de la filtración por membrana debe replantearse la definición de coliformes: bastones
Gram. (-), aerobios o anaerobios facultativos, que dan colonias oscuras con brillo
metálico en medio Endo, luego de 24 horas de incubación a 35ºC +/- 2°C. La
determinación de coliformes fecales por filtración puede hacerse a partir de las colonias
desarrolladas en Endo o directamente incubando la membrana en medio m-FC e
incubando a 44,5ºC.
Fundamento
La muestra de agua se hace pasar mediante vacío por un filtro de celulosa de 0.45 micras
de tamaño de poro, para que queden retenidas en él, las bacterias de tipo coniforme y las
mesofílicos. El filtro es colocado en un medio de cultivo específico para lo que se desea
determinar en la muestra (coliformes totales, coliformes fecales y microorganismos
mesofílicos), incubando a 35ºC +/- 2ºC durante 18 a 20 horas. (PALMA, 1999).
La presencia de bacterias patógenas en el agua destinada al consumo humano es un
riesgo siempre presente, que se incrementa en las áreas de mayor densidad de la
población. La técnica de filtración por membrana (MF) se basa en hacer pasar la
muestra de agua problema a través de un filtro de membrana microporosa, en cuya
superficie quedan retenidos los microorganismos. Se utilizan membranas que tienen un
tamaño de poro de 0.45 micras ya que la mayoría de los microorganismos tienen un
tamaño superior (diámetro).
La normativa para abastecimiento y control de calidad de agua potable de consumo
público establece como análisis microbiológicos a realizar las determinaciones de:
coliformes totales, Coliformes fecales, gérmenes totales, estreptococos fecales y
clostridios sulfito-reductores. El número de determinaciones se establece para cada tipo
de análisis, si este es mínimo, normal o completo.

6. Característicasdel filtro de membrana
Se debe utilizar filtro de membrana con un diámetro de poro que permita una completa
retención de las bacterias coliformes. Se debe tener en cuenta que estos filtros estén libres de
químicos susceptibles de inhibir el crecimiento y desarrollo bacteriano, que posean una
velocidad de filtración satisfactoria. (MILLIPORE, 2 0 0 5 ).
Ventajas y desventajas del método de filtración por membrana
El método de filtración por membrana es un método ágil y poco dispendioso. La lectura de
resultados se da en un menor tiempo (24 horas) a comparación del método NMP, además se
puede utilizar en pruebas de campo, empleando accesorios adecuados. El análisis se dificulta
en muestras de aguas muy turbias o con abundante carga bacteriana. Este inconveniente es
posible remediarlo, haciendo diluciones de la muestra o haciendo inóculos muy pequeños
de acuerdo con el tipo de muestra a analizar. (PALMA, 1999).

7. IMPORTANCIA SANITARIA DEL ESTUDIO MICROBIOLÓGICO DEL
AGUA.
El agua para consumo humano puede estar contaminada por microorganismos
patógenos de origen fecal como virus, bacterias, y parásitos. Muchas enfermedades
importantes se asocian a contaminación del agua por desechos humanos. Algunas de
estas enfermedades, como las gastrointestinales, ocupan lugares preponderantes como
causa de mortalidad infantil en lugares donde la pobreza y la desnutrición son comunes,
siendo los niños el grupo de la población más afectado. Las enfermedades parasitarias
causan debilidad crónica llevando al individuo a un mayor riesgo de sufrir infecciones
por otros microorganismos.
La materia fecal contiene una gran cantidad de bacterias, casi siempre inofensivas,
algunas de éstas son utilizadas como indicadores de contaminación fecal. En la mayoría
de infecciones por bacterias entéricas patógenas existe el estado de portador sano, por lo
que en las comunidades donde estas infecciones son comunes, una proporción de
individuos sanos serán foco de excreción de bacterias patógenas, este estado de portador
puede variar de unas semanas hasta toda la vida del individuo.
La contaminación fecal por Coliformes, bacterias, serán nuestro material de estudio.

8. INDICADORES BACTERIOLÓGICOS DE CALIDAD DEL AGUA
En los diferentes tipos de agua, pueden encontrarse diversas bacterias, de las cuales
algunas son indígenas o nativas y por lo tanto pueden ser benéficas, ya que de éstas
depende en gran medida el proceso de auto-purificación de los cuerpos de agua y, otras
que tienen su origen en las excretas de humanos y animales de sangre caliente (animales
domésticos, silvestres y aves) que contaminan el agua.
En la evaluación microbiológica de la calidad del agua, sistemáticamente se realizan
pruebas de laboratorio que permiten estimar la magnitud de la contaminación. Estas
pruebas sistemáticas consisten en la determinación de los indicadores bacteriológicos de
contaminación o de calidad del agua.
Los indicadores bacteriológicos, son organismos de un grupo específico, el cual por su
sola presencia demuestra que ocurrió contaminación y en ocasiones, sugiere el origen de
dicha contaminación.
La cantidad y variedad de bacterias patógenas y potencialmente patógenas, difiere de
acuerdo al área geográfica, estado de salud de la comunidad, naturaleza y grado de
tratamiento de los desechos, capacidad de auto-purificación de los cuerpos de agua y
características físicas y químicas del agua.
Debido a los altos costos que representa la caracterización bacteriológica de las aguas,
es necesario realizar pruebas que permitan evidenciar la magnitud y origen de la
contaminación bacteriana, esto es, la determinación de indicadores bacteriológicos de
contaminación. Tradicionalmente, los Coliformes totales, Coliformes fecales y
estreptococos fecales, son los grupos de bacterias indicadoras que se consideran en los
estudios y trabajos de evaluación de calidad del agua.
De manera general, idealmente un indicador de contaminación por excretas humanas y
de animales de sangre caliente debe poseer las siguientes características:
- Ser aplicable a todo tipo de agua.
- Estar presente cuando existen bacterias patógenas de origen fecal.

9. - La cantidad de bacterias estar directamente relacionada con el grado de contaminación
fecal.
- El tiempo de sobrevivencia debe ser más prolongado que el de los patógenos entéricos.
- Desaparecer rápidamente del agua, una vez que han desaparecido los patógenos
durante los procesos de auto-purificación o de tratamiento.
- No reproducirse en el ambiente.
-No deben estar presentes en agua potable.
- Poder ser determinado cuantitativamente en forma rutinaria, sin interferencia por otras
bacterias-
- No ser patógeno al hombre o animales
Determinación de indicadores es de utilidad en múltiples ocasiones:
- Evaluación de la calidad del agua para definir su uso (agrícola, doméstico, recreativo,
potable, riego de áreas verdes, entre otros)
- Evaluación de la eficiencia de plantas de tratamiento de aguas residuales y plantas
potabilizadoras.
- Determinación del efecto de agentes tóxicos y orgánicos en la flora bacteriana.
- Identificación de fuentes de contaminación.
- Diagnósticos relativamente rápidos de calidad bacteriológica del agua.
Los indicadores también son de utilidad cuando el laboratorio no cuenta con recursos
suficientes para realizar de manera sistemática la determinación de patógenos. De hecho
las pruebas de patógenos se justifican únicamente en investigaciones, en brotes
epidémicos y en situaciones específicas.

10. REFERENCIAS LINKOGRAFICAS
 https://www.ircwash.org/sites/default/files/245.11-91AD-9090.pdf
 http://www.who.int/water_sanitation_health/dwq/gdwq3_es_1.pdf?ua=1
 http://spanish.yamit-f.com/english/Article.aspx?Item=651
 http://coli.usal.es/Web/demo_fundacua/demo2/FiltraMembColiT_auto.html

11. ANEXOS
Figura 01. Técnica de Filtración por Membrana (FM)
Figura 02. Coliformes fecal

12. Figura 03. Métodos de identificación microbiológicas (filtración por membrana)