Tatiana Zamora

1. ANÁLISIS INSTRUMENTAL
SESIÓN 4
ASIMETRÍA DE PICOS.
MEJORAMIENTO DE LA SEPARACIÓN
CROMATOGRÁFICA.
UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS
CARRERA DE QUÍMICAY FARMACIA
Dra. Tatiana Zamora Z.
Docente de la asignatura

2. UNIDAD 1
• Factor de asimetría.
• Asimetría de picos.
• Mejoramiento de la separación cromatográfica.
CONTENIDO DE LA SESIÓN
• Analizar el fundamento de las técnicas de
separación cromatográfica para el desarrollo y
optimización de métodos analíticos de
separación.
OBJETIVO DE LA UNIDAD

3. FACTOR DE ASIMETRÍA
En la teoría: el sistema cromatográfico se comporta como un operador
gaussiano, con una distribución normal de la banda según pasa el
compuesto a través de la columna.
En la práctica: los picos cromatográficos raramente son gaussianos;
pudiendo conducir a errores significativos cuantitativos al trabajar con
picos distorsionados.
La asimetría de banda se puede describir con un único parámetro que
se define en función del FACTOR DE SIMETRÍA.
La asimetría de pico puede deberse a factores tanto instrumentales como
cromatográficos.
Dra. Tatiana Zamora Z.

4. FACTOR DE ASIMETRÍA
Donde:
As = factor de asimetría de pico
b = distancia desde el punto medio del pico el
punto de salida o caída del mismo (medido al 10%
de altura del pico)
a = distancia desde el inicio del pico hacia el punto
medio
(medido al 10% de altura del pico) Dra. Tatiana Zamora Z.

5. ASIMETRÍA DE PICOS
PICOS CON COLA
 Las propiedades de equilibrio describen sistemáticamente la aparición de frentes y
colas a través del uso de isotermas (origen termodinámico), y la forma de los picos
cromatográficos se parametrizan con una simetría.
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Fronting
Peak…..
FRONTING
O PICO CON
DISTORSION
FRONTAL
TAILING
O PICO CON
COLA
PICO
GAUSSIAN
O
Asimetría
negativa
(As < 1)
Simetría
(As > 1)
Asimetría
positiva
(As > 1)

6. ASIMETRÍA DE PICOS
 K, CS=concentración del soluto en la F.E.; Cm=concentración del soluto en la
F.M.
 La sobrecarga produce picos que aumentan gradualmente y acaban de forma
abrupta.
La representación
de CS en función
de Cm (a una
temperatura dada) se
llama una ISOTERMA
* Skoog, D. A. (2008), Principios del
Análisis Instrumental, Cengage
Learning Editores, México.
Dra. Tatiana Zamora Z.

7. ASIMETRÍA DE PICOS
FACTORES QUE GENERAN LA
ASIMETRÍA DE PICO:
Resolución
incompleta de
dos bandas
Presencia de
puntos de
gran actividad
en las fases
estacionarias
Reacciones
químicas del
compuesto en
la columna
Volúmenes
muertos en el
sistema
cromatográf.
Técnicas de
inyección
incorrectas,
etc.
Dra. Tatiana Zamora Z.

8. ASIMETRÍA DE PICOS
 Hay dos formas de disminuir
la sobrecarga:
Reducir la muestra
Aumentar el área de la
superficie disponible
 Si la detección es fácil y
sensible entonces una forma
sencilla de mejorar la
separación de disminuir el
tamaño de muestra.
 Si la detección no es sensible
se necesitan muestras de
mayor tamaño y volúmenes
de fase estacionaria
mayores.
SOBRECARGA DE
MUESTRA
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9. MEJORAMIENTO DE LA SEPARACIÓN CROMATOGRÁFICA
Mezcla de
compuestos
semivolátile
s
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10. MEJORAMIENTO DE LA SEPARACIÓN CROMATOGRÁFICA
Separaciones ineficientes y
asimétricas
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11. MEJORAMIENTO DE LA SEPARACIÓN CROMATOGRÁFICA
OPTIMIZACIÓN DE LA
SEPARACIÓN
CROMATOGRÁFICA
AUMENTAR LA
SEPARACIÓN ENTRE
BANDAS
Modificar variables
termodinámicas (K, k´,
α) modificando F.M., F.E.
y temperatura.
DISMINUIR EL ANCHO
DE BANDAS
Modificar variables que
permiten H y N
(ecuación de Van
Deemter)
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12. FACTORES A SELECCIONAR PARA SEPARACIONES Y
CUANTIFICACIÓN A TRAVÉS DE COLUMNAS CROMATOGRÁFICAS
1. Fase estacionaria:
a) Forma y tamaño
b) Longitud
c) Morfología de la fase estacionaria
d) Composición del material
2. Fase móvil
a) Composición
b) Caudal
3. Temperatura
4. Tamaño de la muestra (volumen, concentración)
5. Detector
MEJORAMIENTO DE LA SEPARACIÓN CROMATOGRÁFICA
Dra. Tatiana Zamora Z.

13. MEJORAMIENTO DE LA SEPARACIÓN CROMATOGRÁFICA
Variación del factor de
retención
* Cambio de temperatura:
GC
* Cambio de composición
de fase móvil: LC
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14. MEJORAMIENTO DE LA SEPARACIÓN CROMATOGRÁFICA
Variación
del factor
de
selectivida
d
• Cuando k´ se
aproxima a la unidad,
se ha de buscar un
procedimiento para
aumentar .
• Se dispone de varias
opciones, en orden
decreciente de
conveniencia:
• Cambiar la
composición de la
fase móvil
• Cambiar la
temperatura de la
columna
• Cambiar la
composición de la
fase estacionaria
• Utilizar efectos
químicos Dra. Tatiana Zamora Z.

15. MEJORAMIENTO DE LA SEPARACIÓN CROMATOGRÁFICA
El problema general de la
elución cromatográfica
• LC, elución con
gradiente
• GC,
programación de
temperatura
Dra. Tatiana Zamora Z.

16. MEJORAMIENTO DE LA SEPARACIÓN CROMATOGRÁFICA
El problema general de la
elución cromatográfica
• LC, elución con
gradiente
• GC, programación
de temperatura
Dra. Tatiana Zamora Z.

17. CONCLUSIONES
La manera más fácil de
modificar , k´ es variando la
temperatura o la composición
de la fase móvil. “Aunque
relativamente es menos
conveniente”, se puede
cambiar el relleno de la
columna.
Dra. Tatiana Zamora Z.

18. BIBLIOGRAFÍA RECOMENDADA
Dra. Tatiana Zamora Z.
 Harris, D. (2001), Análisis Químico
Cuantitativo, Editorial Reverté S.A.,
Barcelona-España.
 Rubinson, K. A., Rubinson, J.F. (2001),
Análisis Instrumental, Pearson Educación,
Madrid-España.
 Skoog, D. A. (2008), Principios del Análisis
Instrumental, Cengage Learning Editores,
México