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TEMA 4. ANÁLISIS DE ORINA Y SANGRE
TEMA 4. ANALISIS DE ORINA Y SANGRE
TEMA 4. ANÁLISIS DE ORINA Y SANGRE
ANALISIS DE ORINA
Formación de la orina:
RIÑÓN NEFRONA
TEMA 4. ANÁLISIS DE ORINA Y SANGRETEMA 4. ANÁLISIS DE ORINA Y SANGRE
ANALISIS DE ORINA
1. Interés del análisis de orina
2. Recogida de la orina
3. Características y parámetros medibles en la orina: color, olor turbidez
TEMA 4. ANÁLISIS DE ORINA Y SANGRE
ANALISIS DE ORINA
4. pH
5. Relación volumen/tiempo
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ANALISIS DE ORINA
6. Densidad
a. Urinómetro o densímetro
probeta
Muestra de orina
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ANALISIS DE ORINA
6. Densidad
b. Refractometría de líquidos
Líquido
Vidrio
Líquido
Haz incidente de energía
radiante monocromática
Interfase líquido-vidrio
Interfase
Vacío i.r.=N1
Material ópticamente
Transparente con i.r. = N2
Haz refractado
Haz incidente
θ1
θ2
N2 = sen θ1 = v1
N1 sen θ2 v2
TEMA 4. ANÁLISIS DE ORINA Y SANGRE
ANALISIS DE ORINA
Refractometría de líquidos. Refractómetro de ángulo crítico
N2 = sen θ1
N1 sen θ2
θ1= 90º
θ2= θc
1.66 = 1
N1 sen θc
N1= 1.66 sen θc
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ANALISIS DE ORINA
Medidor de sólidos totales
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ANALISIS DE ORINA
Nitritos Bilirrubina
Pruebas con tiras reactivas
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ANALISIS DE ORINA
Pruebas con tiras reactivas. Fotometría de reflectancia
Reflectancia difusa Reflectómetro
Dr = - log R´ - Rnegro
Rblanco
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Sensibilidad, especificidad y eficiencia en el desarrollo de una prueba
SENSIBILIDAD: Probabilidad de que el resultado de una prueba sea positivo
cuando está presente la enfermedad que la prueba detecta
Sensibilidad = PV x 100
PV + NF
ESPECIFICIDAD: Probabilidad de que el resultado de una prueba sea negativo
cuando no está presente la enfermedad que la prueba detecta
Especificidad= NV x 100
NV + PF
EFICIENCIA: Prueba estadística que determina el valor diagnóstico de una prueba,
relacionando el nº total de resultados correctos con el nº total de participantes
Eficiencia = PV + NV x 100
PV + PF +NF + NV
PV es el nº de resultados positivos verdaderos
NF es el nº de resultados negativos falsos.
NV es el nº de resultados negativos verdaderos
PF es el nº de resultados positivos falsos.
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ANALISIS MICROSCÓPICO DE LA ORINA
1. CRISTALES.
Precipitan compuestos inorgánicos como carbonatos y fosfatos, también uratos y
cristales de cistina.
2. ORGANISMOS.
Su presencia representa anomalías en la orina.
BACTERIAS: infección del tracto urinario. Presencia de nitritos y leucocitos.
HONGOS: Diabetes, ingestión de anticonceptivos, tratamiento con antibióticos.
PARASITOS: contaminación vaginal o fecal.
CELULAS INFECTADAS POR VIRUS: cambios celulares.
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ANALISIS MICROSCÓPICO DE LA ORINA
3. CELULAS.
HEMATIES: lesión vascular, trastornos renales o del tracto urinario inferior.
LEUCOCITOS: condiciones inflamatorias o del tracto urinario.
CELULAS DEL EPITELIO TUBULAR RENAL: células viejas o enfermas o de los
túbulos del nefrón.
CUERPOS GRASOS OVALES: síndrome nefrótico y diabetes mellitus.
CELULAS DEL EPITELIO DE TRANSICIÓN: inflamación, cateterización o proceso
patológico maligno.
CELULAS EPITELIALES ESCAMOSAS: contaminación vaginal o metaplasia
escamosa de la vejiga.
FRAGMENTOS TISULARES: necrosis papilar renal o tumores de la vejiga.
ESPERMATOZOIDES: eyaculación ó coito. No se informa.
CILINDROS RENALES: pueden ser fisiológicos o patológicos (enfermedad renal).
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ANALISIS MICROSCÓPICO DE LA ORINA
El sedimento urinario será clasificado de “anormal” cuando tenga uno de los
siguientes caracteres:
1. Más de 5 hematíes por campo de elevado aumento (x400).
2. Más de 2 células tubulares renales por campo de elevado aumento (x400).
3. Más de 3 cilindros hialinos, más de 1 cilindro granuloso, o la presencia de
cualquier cilindro patológico por campo de escaso aumento (x100).
4. Más de una bacteria por campo de elevado aumento (x400).
5. Presencia de hongos, parásitos o células con inclusiones virales.
6. Presencia de cristales patológicos (como los de cistina) ó de gran nº de
cristales no patológicos (ac.úrico).
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EXAMEN MICROSCÓPICO DE LA ORINA
Se recomienda un examen microscópico de la orina donde se observe
hematuria, proteinuria o una prueba positiva de nitritos. Reconocimiento
temprano de condiciones infecciosas, inflamatorias y neoplásicas que afectan
al sistema urinario.
A. Microcopia de campo claro sin coloración
B. Microscopia de campo claro con coloración supravital
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ALGUNAS SUSTANCIAS ANALIZADAS EN ORINA
1. NITRITOS (NO2
-)
Método indirecto para la detección de bacterias en orina.
Géneros como Escherichia, Klebsiella, Proteus y Pseudomas contienen
enzimas que reducen el nitrato urinario a nitrito
a. Prueba con tira reactiva
b. Confirmación por microscopia de la presencia de bacterias
2. LEUCOCITOS
a. Prueba con tira reactiva
b. Confirmación por microscopia
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ALGUNAS SUSTANCIAS ANALIZADAS EN ORINA
3. PROTEÍNAS (Existencia de enfermedad renal)
Valor normal ≤ 0.1 g/día excretados
Proteinuria: baja < 0.5 g/ día
moderada 0.5- 4 g/ día
alta > 4 g/ día
a. Prueba con tira reactiva
b. Prueba del ácido sulfosalicílico
c. Prueba de la proteína de Bence-Jones (asociada a la presencia de
mielomas)
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ALGUNAS SUSTANCIAS ANALIZADAS EN ORINA
4. BILIRRUBINA Y UROBILINÓGENO (Existencia de enfermedad hepática)
Valores normales en orina:
Bilirrubina directa 0.02 mg / 100 mL
urobilinógeno 0.5 – 3 mg /24 horas
Valores normales en sangre:
Bilirrubina total 15 mg / L
a. Determinación de urobilinógeno por tira reactiva
b. Determinación de bilirrubina:
- Métodos químicos
- HPLC
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ALGUNAS SUSTANCIAS ANALIZADAS EN ORINA
5. GLUCOSA (Existencia de diabetes)
Glicosuria o glucosuria: presencia de cantidades detectables de glucosa
en orina. Puede deberse a:
- Condición benigna: después de una comida fuerte o estrés emocional
- Estado patológico: diabetes mellitus. Supone un aumento en sangre.
Valores normales en sangre: 600 – 1100 mg/ L
a. Métodos de reducción
b. Métodos enzimáticos
c. Sensores químicos
ESQUEMA GENERAL DE UN SENSOR QUÍMICO
MUESTRA RESPUESTA
SEÑAL
RECEPTOR
SENSOR
TRANSDUCTOR
REGIÓN DONDE TIENE LUGAR
LA REACCIÓN QUÍMICA SELECTIVA
SEÑAL PRIMARIA
ELECTROQUÍMICA
ÓPTICA
TÉRMICA
MÁSICA
CONVIERTE LA MAGNITUD DE LA SEÑAL EN UNA
MEDIDA DE LA CANTIDAD DE ANALITO
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SENSOR DE GLUCOSA
Membrana sensora:
GLUCOSA OXIDASA
Glucosa + O2 ácido glucónico + H2O2
policarbonato
Acetato de celulosa
H2O2
H2O2
Glucosa
oxidasa
Superficie electrodo (transductor)
i ∝ Cglucosa
Capa de biorreconocimiento:
Glucosa oxidasa
Transductor
disolución
Glucosa
H2O2 + 2OH- → O2 + 2H2O + 2e-
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TEMA 4. ANÁLISIS DE ORINA Y SANGRE TEMA 4. ANÁLISIS DE ORINA Y SANGRE
ALGUNAS SUSTANCIAS ANALIZADAS EN ORINA
6. CUERPOS CETÓNICOS (Problema metabolismo hidratos de carbono)
Cetonuria: presencia de cuerpos cetónicos en orina. Puede deberse a:
ayuno prolongado, presencia de diabetes, aumento en la utilización de
grasas lo que da lugar a una combustión incompleta de ac. grasos.
Aparecen ácido β- hidroxibutírico (78%), ácido acetoacético (20%) y
acetona (2%)
Valores normales en sangre: cuerpos cetónicos 1.7 – 4-2 mg / 100 mL
ac. Acetoacético < 2 mg / 100 mL
a. Métodos químicos
b. Métodos enzimáticos
c. Cromatografía de gases
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ANALISIS DE SANGRE
TEMA 4. ANÁLISIS DE ORINA Y SANGRE
ANALISIS DE SANGRE
HEMATOGRAMA COMPLETO:
HEMATOCRITO: Proporción del volumen total de glóbulos rojos ó eritrocitos
respecto al volumen sanguíneo. Suele ser del 40-45%. El 55-60% restante lo forma
el plasma ya que la contribución de glóbulos blancos y plaquetas es mínima.
Para determinarlo se centrifuga sangre entera, estabilizada con anticoagulante, en
un tubo de diámetro uniforme. La altura del paquete de células en el tubo se divide
por la altura de la sangre total. El valor resultante, mayor que cero y menor que uno
se denomina hematócrito.
ERITROCITOS: Tienen una alta concentración de hemoglobina. Transportan O2
desde los pulmones a los tejidos corporales.
La concentración de hemoglobina se determina lisando los eritrocitos de un
volumen de sangre conocido. La solución roja homogenea resultante se mide por
espectroscopía visible, expresando el resultado en g/l.
LEUCOCITOS: Existen leucocitos de diferentes tipos: linfocitos, monocitos,
neutrófilos, eosinófilos y basófilos. Controlan infecciones.
PLAQUETAS: Mantiene la hemostasia. Forman un tapón y cierran la herida para
prevenir una excesiva hemorragia.
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TEMA 4. ANÁLISIS DE ORINA Y SANGRE
ANALISIS DE SANGRE
HEMATOGRAMA COMPLETO:
RBC: Recuento de glóbulos rojos.
WBC: Recuento de glóbulos blancos.
VCM: Volumen corpuscular medio. Expresado en femtolitros.
VCM = Hematocrito
nº eritrocitos/l
HCM: Hemoglobina corpuscular media. Expresado en picogramos por célula.
HCM = Hemoglobina en g/l
nº eritrocitos/l
CHCM: Concentración de hemoglobina corpuscular media.
CHCM = Hemoglobina en g/l
Hematocrito
CBC: Recuento completo de sangre: incluye el nº de leucocitos, hematócrito,
hemoglobina, medida diferencial de leucocitos, VCM, HCM y nº de plaquetas (a
veces).
TEMA 4. ANÁLISIS DE ORINA Y SANGRE
ANALISIS DE SANGRE
Medidores ópticos del tiempo de coagulación
TEMA 4. ANÁLISIS DE ORINA Y SANGRE
ANALISIS DE SANGRE
Medidores conductimétricos del tiempo de coagulación
TEMA 4. ANÁLISIS DE ORINA Y SANGRE
ANALISIS DE SANGRE
Perfiles del tiempo de coagulación
Tiempo de tromboplastina parcial activada (TTPA) normal de 30 segundos
Tiempo de tromboplastina parcial activada (TTPA) en un plasma deficiente en facto IX: el
Tiempo de coagulación es de 102 s
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ANALISIS DE SANGRE
Contadores de células basados en medidas de la resistencia eléctrica
Recuento en millares
TEMA 4. ANÁLISIS DE ORINA Y SANGRE
ANALISIS DE SANGRE
Contadores de células basados en medidas ópticas
TEMA 4. ANÁLISIS DE ORINA Y SANGRE
ALGUNAS SUSTANCIAS ANALIZADAS EN SANGRE
1. ÁCIDO ÚRICO (Evaluación de la función renal)
Compuesto nitrogenado no proteico. Resultante del metabolismo de las
nucloeproteínas. La insuficiencia renal crónica avanzada produce un
incrementeo progresivo del nivel de ácido úrico en el plasma.
Gota: depósito de uratos en los tejidos
Valores normales en sangre: varones 36 – 77 mg / L
mujeres 25 - 68 mg / L
a. Métodos espectrofotométricos
b. Métodos enzimáticos
c. Método polarográfico
d. HPLC
TEMA 4. ANÁLISIS DE ORINA Y SANGRE
ALGUNAS SUSTANCIAS ANALIZADAS EN SANGRE
2. COLESTEROL (Evaluación de la existencia de hiperlipidemia y de riesgo
de enfermedades cardiovasculares)
Se encuentra presente en todas las lipoproteínas plasmática. Cuando un
exceso de lípidos no se elimina o utiliza, se deposita en tejidos y paredes
arteriales, obstruyendo el flujo de sangre a órganos vitales. Se obstruye
la circulación dando lugar, por ejemplo, al infarto de miocardio
Valores normales en sangre: colesterol 1.20 – 2.20 g / L
colesterol HDL hombres 0.40 – 1.10 g / L
mujeres 0.50 – 1.20 g / L
a. Métodos en 1, 2, 3 ó 4 etapas para determinar colesterol
b. Determinación del colesterol unido a las HDL
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TEMA 4. ANÁLISIS DE ORINA Y SANGRE
ALGUNAS SUSTANCIAS ANALIZADAS EN SANGRE
3. ENZIMAS (Evaluación de la función hepática)
- Alanina aminotransferasa (ALT)
- Fosfatasa alcalina (ALP)
- Aspartato aminotransferasa (AST)
- Gamma glutamiltransferasa (GGT)
Determinación de ALT
Valores normales en sangre: 0 – 55 U / L