1. Aislamiento e
Identificación de E.Coli
Informática 2012.
Universidad Nacional de Quilmes

2. Características de la E.Coli.
 Bacteria Gram Negativa.
 Anaerobio facultativo.
 Fermenta Glucosa y Lactosa.
 Forma de bacilo.

3. En la siguiente presentación se
expondrán diversos ensayos
bioquímicos para identificación de
Escherichia coli en una muestra de
carne picada, y sus resultados.

4. Metodología:
 Se utilizó un método de aislamiento
seleccionando los componentes para
favorecer el crecimiento de bacilos
gram negativos fermentadores de
lactosa.

5. Esquema del procedimiento
 Separación de la bacteria de la carne picada.
 Crecimiento de la bacteria en el agar
selectivo y diferencial

6. Muestra de
carne
picada
Enriquecimiento en
Enriquecimiento en
caldo nutritivo
caldo nutritivo
Incubación 1 hora 37
Incubación 1 hora 37 ºC ºC
48 horas
48 horas Siembra en EMB
Siembra en EMB 48 horas
48 horas
Colonias verde
Colonias verde Colonias negras
Colonias negras
metalizadas
metalizadas grandes
grandes
Tinción Gram
Tinción Gram Siembra por
Siembra por Tinción Gram
Tinción Gram
agotamiento
agotamiento por
por estrías en
estrías en EMB
EMB
48 horas
48 horas
Pruebas bioquímicas
Pruebas bioquímicas

7. EMB con las colonias:

8. Ensayos Bioquímicos.
 Se utilizaron diferentes pruebas bioquímicas para garantizar la pureza
de la bacteria.
 Los ensayos fueron:
-Indol
- Rojo de metilo
- Vouges Proskauer
- Citrato
- TSI
- Oxidasa

9. Se agrega el reactivo de
Indol
Kovacs
48 horas
Rojo de
metilo
48 horas
Vouges
Se toma una Se agrega el reactivo
Proskauer
muestra de
una de las
colonias
Se inserta en el medio en
Citrato
línea recta y luego se
hacen estrías en la
superficie
TSI
Oxidasa

10. Resultados:
 IMViC: A partir de la muestra, se realizaron las distintas
pruebas del procedimiento arrojando los siguientes
resultados
- INDOL: Negativo. (Amarillo)
- Rojo de metilo: Positivo. (Anillo rojo en la superficie)
- Voges Proskeauer: Negativo. (amarillo)
- Citrato: Negativo. (no creció y se mantuvo verde)

11. En las imágenes se representan los
resultados obtenidos del ensayo IMViC
Rojo de Metilo Indol VP Citrato

12.  Ensayo Oxidasa: (Negativo)
 TSI (ácido/ácido):
Crecimiento en el pico de
flauta.

13. Conclusiones:
 No solo se observaron bacterias con características de
Escherichia coli (bacilos gruesos rosas) sino que también se
localizaron cocos de coloración violeta en la muestra, lo que da a
entender que la carne no solo se encontraba contaminada con
bacilos gram (-) como la Escherichia coli, sino que también con
cocos gram (+) (como podría ser alguna cepa de Staphylococus).

14.  Rojo de metilo positivo: Los productos de fermentación tienen
características ácidas.
 Procawer negativo: Indica lo mismo que el rojo de metilo aunque el
resultado sea el inverso ya que cambian los indicadores de pH.
 Citrato negativo: Indica que no poseen citrato permeasa, ya que no
crecen en un medio con citrato como única fuente de carbono.
 Oxidasa negativo: marca la inexistencia del complejo citocromo oxidasa.
 TSI ácido/ácido: la bacteria no sólo fermenta la glucosa sino que la
lactosa o sacarosa o ambas también pueden ser fermentadas.

15.  Concluimos entonces, corroborando que la
bacteria que se logró aislar pertenece a una
cepa de Escherichia coli.

16. Bibliografía:
- Guías otorgadas por los instructores en
clase.
- Mac FADDIN, J.F. "Pruebas bioquímicas para la
identificación de bacterias de importancia clínica"

17. Agradecemos su atención!
 Anabela Antonelli.
Aantonelli@gmail.com
Natalia Armando
Narmando@gmail.com