Cromosoma bacteriano
Genética microbiana
Replicación ocurre
bidireccionalmente
Doble hélice
superenrollada
Antiparalela
Tenedor de replicación
Ambas hebras de DNA se replican de forma distinta
Hebra “lagging” o discontinua
Se polimeriza en contra
del tenedor de
rep...
Ambas hebras de DNA se replican de forma distinta
Hebra “leading” o continua
DnaG: Primasa o RNA polimerasa coloca un “pri...
Replicación del cromosoma bacteriano
1. DNA es circular (no todos)
2. Uno por célula (no todos)
3. Proteínas similares a h...
Separación de ambas cadenas en el tenedor de replicación
DnaB : helicasa
Mantener ambas cadenas separadas
SSB
Proteínas
de...
La replicación es un proceso concertado:
http://cmgm.stanford.edu/biochem201/Slides/DNA%20Replication/
http://www.mun.ca/b...
Requerimientos para el Proceso de Replicación
 Molde de DNA preexistente
 – Cadena (o fragmento de cadena) simple
 Ceba...
Proteína Composición Contenido por
células Semejanza con eucariontes
HU Dímero subunidades a y b de 9.000 d.
40.000 dímero...
Replicación de DNA:
Involucra polimerización: unión de nucleótidos en
cadenas largas o hebras usando la secuencia de la ot...
Superenrrollamiento:
DNA Polimerasas de E. coli
 Characterística  Polimerasa I  Polimerasa II  Polimerasa III
 Gen  polA  polB  polC
 Peso Mole...
DNA  polimerasa I (polA):
DNA polimerasa I
DNA polimerasa I:
DNA polimerasa III
Productos de los siguientes genes
de gran importancia para función
1. dnaN – “sliding clamp”
Mecanismos de replicación de DNA en distintos organismos
5 cromosoma
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5 cromosoma

  1. 1. Cromosoma bacteriano Genética microbiana
  2. 2. Replicación ocurre bidireccionalmente Doble hélice superenrollada Antiparalela Tenedor de replicación
  3. 3. Ambas hebras de DNA se replican de forma distinta Hebra “lagging” o discontinua Se polimeriza en contra del tenedor de replicación Se forman fragmentos de Okasaki 1. “primer” 10 - 12 nts 2. Ocurre cada 2 kilobases 3. DNA polimerasa 1 (polA) remueve el “primer” de RNA y lo reemplaza por DNA. 4. Los fragmentos de Okasaki son unidos por la DNA ligasa.
  4. 4. Ambas hebras de DNA se replican de forma distinta Hebra “leading” o continua DnaG: Primasa o RNA polimerasa coloca un “primer” de RNA DNA polimerasa III inicia polimerización usando el “primer”
  5. 5. Replicación del cromosoma bacteriano 1. DNA es circular (no todos) 2. Uno por célula (no todos) 3. Proteínas similares a histonas llamadas: HU, HN-S, Fis, IHF I. Origen de replicación (oriC) 5’- TTATCCACA-3’ 5’-GATCTNTTNTTTT-3’ DnaA: proteína iniciadora, primosoma
  6. 6. Separación de ambas cadenas en el tenedor de replicación DnaB : helicasa Mantener ambas cadenas separadas SSB Proteínas desestabilizadoras de DNA
  7. 7. La replicación es un proceso concertado: http://cmgm.stanford.edu/biochem201/Slides/DNA%20Replication/ http://www.mun.ca/biochem/courses/3107/Topics/DNA_polymerases.html
  8. 8. Requerimientos para el Proceso de Replicación  Molde de DNA preexistente  – Cadena (o fragmento de cadena) simple  Cebador (“primer”)  – Pequeño fragmento de RNA (~5 nucleótidos) con el grupo 3’-OH libre, unido al DNA molde (sintetizado por la primasa del primosoma)  Precursores activados – Desoxinucleótidos 5’-trifosfato (dATP, dGTP, dTTP, dCTP)  • DNA-polimerasas – Catalizan la formación de enlaces fosfodiéster dirigida por un molde de DNA (actividad polimerasa 5’ 􀃆 3’) y la corrección de errores (exonucleasa 3’ 􀃆 5’) Requieren Mg2+ y un cebador con su extremo 3’-OH libre Tres tipos:  DNA polimerasa I (Pol I): Elimina el cebador mediante una actividad exonucleasa 5’ 􀃆 3’ y sintetiza DNA en su lugar  DNA polimerasa II (Pol II): Función desconocida (quizá similar a la Pol I)  DNA polimerasa III (Pol III): Síntesis de la nueva cadena de DNA a partir del cebador  • Otras enzimas – Primasa: RNA polimerasa que sintetiza el cebador. Forma parte del primosoma – Helicasa (Dna B): Separa las dos hebras del DNA dúplex. Requiere ATP – Girasa (topoisomerasa II): Genera superenrollamiento negativo. Requiere ATP – Ligasa: Une fragmentos nuevos sintetizados
  9. 9. Proteína Composición Contenido por células Semejanza con eucariontes HU Dímero subunidades a y b de 9.000 d. 40.000 dímeros Histona H2A H Dímero subunidades idénticas de 28.000 d. 30.000 dímero Histona H2B IHF Subunidad a de 10.500 d. Subunidad b de 9.500 d. Desconocido Desconocida H1 Subunidad de 15.000 d. 10.000 copias Desconocida HLP1 Monómero de 15.000 d. 20.000 copias Desconocida P Sububnidad de 3.000 d. Desconocido Protaminas
  10. 10. Replicación de DNA: Involucra polimerización: unión de nucleótidos en cadenas largas o hebras usando la secuencia de la otra hebra como guía Componentes: 1. dNTP’s (dATP, dTTP, dGTP, dCTP) 2. Enzimas que realicen polimerización 3. Hebra guía
  11. 11. Superenrrollamiento:
  12. 12. DNA Polimerasas de E. coli  Characterística  Polimerasa I  Polimerasa II  Polimerasa III  Gen  polA  polB  polC  Peso Molecular  103,000  90,000  130,000 moléculas/célula  400  100  10  Exonucleasa 3’  Sí  Sí  Sí Función Biológica Reparación de DNA,  excisión de primer  de RNA  Respuesta SOS  reparación DNA (?)  replicación  Exonucleasa 5’  Sí  no  no  Procesividad  3 - 200  1000  500,000  Sub-unidades  1  ~4  ~10  Razón polimerización  16 - 20 5 - 10  250 - 1000
  13. 13. DNA  polimerasa I (polA):
  14. 14. DNA polimerasa I
  15. 15. DNA polimerasa I:
  16. 16. DNA polimerasa III Productos de los siguientes genes de gran importancia para función 1. dnaN – “sliding clamp”
  17. 17. Mecanismos de replicación de DNA en distintos organismos

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