Toma y Remisión de Muestras para el Diagnóstico de Laboratorio Microbiológico Veterinario

2020 | DIAGNOSTICO MICROBIOLÓGICO- MIP

Boca: bacterias anaerobias,
bacteroides, organismos
filamentosos, corynebacterium,
espiroquetas
Piel: microorganismos Gram
positivos: Staphylococcus,
micrococcus,
Corynebacterium Y levaduras
como malassezia
Nariz:
Staphylococcsu,
streptococcus
Vagina: algunas
enterobacterias,
levadurasIntestino:
enterobacterias,
fusiformes, Clostridium,
Bacteroides, y
Enterococcus faecalis

Piel:
microorganismos
Gram positivos:
Staphylococcus
Boca: Actinomicetos y
organismos filamentosos,
corynebacterium,
bacterias anaerobias
Nariz:
Staphylococcsu,
streptococcus
Vagina: algunas
enterobacterias,
levaduras
Ubres: Staphylococcus
coagulasa negativos,
Streptococcus
Rumen:
selenomonas,
ruminococcus,
bacteroides,
clostridium
Intestino:
enterobacterias,
fusiformes, Clostridium,
Bacteroides, y
Enterococcus faecalis

Antibiótico
HuéspedBacteria
Infección-Inmunidad

FASE PRE ANALÍTICA
• Recolección de muestras
• Transporte de muestras
• Rotulado y Protocolo
• Rechazo de muestras
FASE ANALÍTICA
• Observación microscópica
• Procesamiento de la muestra
• Interpretación del cultivo
• Antibiograma
FASE POS ANALÍTICA
• Informe de los resultados
• Análisis de los resultados
• Datos epidemiológicos
DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO

IMPORTANCIA
De la toma de muestras

FASE PRE ANALÍTICA:
Toma de Muestras Clínicas
(From Jones RL. 1985. Laboratory diagnosis of bacterial infections, pp 110-147. In McCurnin DM (ed): Clinical textbook for veterinary
technicians. WB Saunders, Philadelphia.)

Requisitos Toma de Muestra:
• Antes de administrar antibióticos o después de 5 días de
suspendida su administración
• Elegir el sitio más probable de hallazgo del microorganismo
sospechoso, o en los periodos agudos o febriles de la enfermedad.
• Inmediatamente después de la muerte del animal
• Enviar cantidad suficiente de material, y si fuera más de una
muestra, cada una por separado.
• Debe llegar cuanto antes al laboratorio
• Debe estar acompañada de los datos clínicos, de necropsia o
protocolo y datos propios del material remitido.

Protocolo
• Especie
• Raza
• Sexo
• Edad
• Nombre, número de caravana u otro tipo de identificación
• Procedencia
• Día y hora de la recolección
• Diagnóstico presuntivo
• Propietario
• Profesional actuante (veterinario)dirección y teléfono
• Si se aplicó antibióticos y que antibiótico sería de elección
• ESTUDIOS SOLICITADOS (observación, cultivo, antibiograma,
autovacuna)

Antisepsia y desinfección
Dejar secar el antiséptico
2 minutos

Algunos sitios de infección y sus posibles fuentes de
contaminación con flora saprófita
Sitio de infección Fuente de contaminación
Vejiga Uretra y perineo
Sangre Sitio de punción
Cuello uterino y endometrio Vagina
Fístula Tracto gastrointestinal
Oído medio Piel del conducto auditivo externo
Tracto respiratorio bajo Nasofaringe
Infecciones subcutáneas y heridas
superficiales
Piel y mucosas
Tracto respiratorio superior Cavidad oral y nasofarínge

 Tubos De Hemólisis Estériles, Con Y Sin Anticoagulante
 Frascos De Boca Ancha, De Vidrio O De Plástico Descartables,
Con Tapa, Estériles, Con Y Sin Conservantes
 Hisopos Estériles
 Portaobjetos
 Jeringas Estériles
 Hojas De Bisturí
 Guantes

 Marcadores
 Tela Adhesiva
 Hilo Grueso
 Bandas Elásticas
 Papel De Diario
 Desinfectantes
 Saches Refrigerantes
 Cajas De Telgopor

SANGRE
Con anticoagulante EDTA

Video de labado broncoalveolar https://vimeo.com/63969803

TOMA DE MUESTRA
PARA MICOLOGÍA

GENERALIDADES
Limpieza de la zona: alcohol de 70° o solución fisiológica
estéril (gasa NO algodón)

MICOSIS SUPERFICIALES

MICOSIS PROFUNDAS

Transporte de muestras
Acondicionamiento y Remisión:

Forma Correcta:

Forma Incorrecta:

Muestras para diferentes
microorganismos
A temperatura ambiente sin medio de transporte: LCR,
líquido sinovial, líquido pleural.
Refrigeradas y sin medio de transporte en contenedores
estériles: Orina y Leche
Refrigeradas y con Medio de Stuart: todas las de
bacteriología y para cultivo de malassezia o cándida.
A temperatura ambiente en seco: micosis superficiales
(tiñas)
Refrigeradas en contenedo estéril: Las muestras de
micosis profundas
Congeladas y con glicerol: cultivo viral

Rechazo de muestras
• No coinciden los datos
• La muestra se transportó a una temperatura incorrecta
• La muestra no se transportó en un medio adecuado
• La cantidad remitida es insuficiente
• El tiempo de transporte excede el recomendado
• La muestra se conservó en un fijador
• El procedimiento por el que se toma la muestra produciría
información con un valor médico cuestionable
• El animal esta medicado
• Se pide un procesamiento que no se realiza en el laboratorio
• La muestra está claramente contaminada

Valor diagnóstico de
Observación Microscópica
Muestras clínicas y examen directo
Muestra clínica Impresión diagnóstica Examen directo
BAL (Lavado Broncoalveolar)
Tuberculosis Ziehl Neelsen
Micosis pulmonar Azul de Lactofenol
Orina
Infeccion urinaria Sedimento Gram
Leptospirosis Campo oscuro
LCR
Meningitis bacteriana. Gram
Meningitis criptocóccica Tinta China
Raspados de piel,
fragmentos de
uñas o pelos
Dermatofitosis.
KOH al 40%
Azul de lactofenol
Impronta de piel Malassezia Gram o tinción 15

FASE ANALÍTICA:
Observación microscópica
Tinción de Gram

FASE ANALÍTICA:
Tinción de ziehl neelsen

FASE ANALÍTICA:
Procesamiento de la muestra
Cultivo y Tipificación

FASE ANALÍTICA:
Interpretación del cultivo

FASE ANALÍTICA:
Antibiograma

FASE ANALÍTICA:
Tinción de Gram Para Malassezia

FASE ANALÍTICA:
Micología
Observación Directa:
•Aclaramiento con OH.K o OH.Na (20-40%)
Ectotrix Endotrix

FASE ANALÍTICA:
Micología
Tinciones:
•Azul de Lactofenol
•Giemsa
•Gram
•Tinta

FASE ANALÍTICA:
Micología

Autovacunas
FASE ANALÍTICA

FASE ANALÍTICA:
Diagnóstico Viral
Técnicas de diagnostico
Identificación de los virus
a) Inmunofluorescencia
b) Hibridación con sondas
c) PCR
Detección y cuantificación de anticuerpos virales
a) Inhibición de la hemoaglutinación
b) ELISA
c) Neutralización del virus
d) Fijación del complemento
e) Detección directa por microscopia electrónica
f) Identificación por microscopia inmunoelectronica

FASE POS ANALÍTICA:
Informe de los resultados

Análisis de los resultados

Datos epidemiológicos

¿Por qué fracasa la terapéutica?
FRACASOS QUE TIENEN QUE VER
CON EL MICROBIÓLOGO
CON EL VETERINARIO
CON EL PROPIETARIO
CON LA BACTERIA

Elección del tratamiento
EMPÍRICO:
Basado en la experiencia
RACIONAL:
Basado en la razón
Bases Racionales para el uso
Empírico de los ATB:
• Signos y Síntomas Clínicos
• Resultados de Laboratorio
• Datos epidemiológicos
TRATAMIENTO DIRIGIDO
Basado en la identificación del agente etiológico y en los
estudios de sensibilidad a antimicrobianos

CRITERIOS PARA DEFINIR EL
TRATAMIENTO EMPÍRICO
CLÍNICO:
• Signos o síntomas de infección
• Sindromes infecciosos
• Focos infecciosos evidentes
EPIDEMIOLÓGICO:
• Relación entre cuadro clínico con
agentes probables
• Flora bacteriana predominante
•Exposición previa a antibióticos
• Situación regional, brotes/resistencia
FARMACOLÓGICO:
• Efecto del ATB más adecuado a los posibles agentes etiológicos
• Considerar variables PK/PD del ATB en relación a la infección y al
estado del paciente
• Adecuar la dosis, el intervalo y la vía a la condición del paciente
MAS EFECTIVO, MENOS TÓXICO, FACIL ADMINISTRACIÓN, MÁS ECONÓMICO

No hay ESKAPE
•Enterococcus
•Staphylococcus
•Klebsiella pneumoniae
•Acinetobacter baumannii
•Pseudomonas aeruginosa
•Enterobacterias
4
1
5
2
3

UTILIDAD DEL AISLAMIENTO E
IDENTIFICACIÓN ETIOLÓGICA
Declaración de zonas libres por infecciones especificas
Detección oportuna de enfermedades transmitidas por
inseminación artificial
Transferencia de embriones
Transfusiones sanguíneas
Realización de programas de erradicación e
investigación en sanidad veterinaria
Estudio de enfermedades exóticas
Zoonosis

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