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República Bolivariana de Venezuela
       Ministerio del Poder Popular para la Educación
   Unidad Educativa Maestro “Orlando Enrique Rodríguez”
                  Los Cortijos - Estado Zulia




  EXTRACCIÓN DE ALFA AMINOÁCIDOS A PARTIR DE
       LA REFINACIÓN DE PASTA DE MANGO
               (MANGIFERA INDICA)




                     INTEGRANTES:

       Briceño Vera, María Gabriela. CI: 24.897.559
       Boscán Acosta, Kevin Alberto. CI: 24.241.520
       Chávez Morillo, Roiner José. CI: 24.252.289
     González Martínez, Daniel Alberto. CI: 23.459.907
        Ríos Torres, Carlos Alfredo. CI: 23.887.326
       Vence Reverol, Yeritza Paola. CI: 24.604.180
      Vera Bastidas, Daniela Carolina. CI: 25.439.717




Químico P. Alfonso Vivas             Mgs.Tammy Rodríguez
  Tutor de Contenido                 Tutor Metodológico

               San Francisco, Junio de 2012.
VEREDICTO

   El jurado calificador nombrado por la Unidad Educativa “Maestro Orlando
Enrique Rodríguez” aprueba el trabajo de grado titulado:


  EXTRACCIÓN DE ALFA AMINOÁCIDOS A PARTIR DE LA REFINACIÓN DE
              PASTA DE MANGO (MANGIFERA INDICA)


   Requisito para la aprobación de la asignatura Técnicas de Investigación por
los alumnos:


                          Briceño Vera, María Gabriela.
                          Boscán Acosta, Kevin Alberto.
                          Chávez Morillo, Roiner José.
                        González Martínez, Daniel Alberto.
                           Ríos Torres, Carlos Alfredo.
                          Vence Reverol, Yeritza Paola.
                         Vera Bastidas, Daniela Carolina




   El jurado emite el siguiente veredicto:




                      Los Cortijos      de          de 2012
DEDICATORIA

       Tenemos el honor de dedicar el presente trabajo a quien inspira nuestros
pensamientos y por quien fluyen nuestras ideas, a nuestro señor Jesucristo; por
iluminarnos en el camino que debemos seguir, por enseñarnos que con fe y
paciencia se logra todo lo que uno se propone en esta vida.
       A nuestros padres, quienes incondicionalmente están allí y día a día nos
apoyan; brindándonos su sabiduría para poder superarnos y dándonos la
educación, han hecho de nosotros personas de bien, comprensivas, respetables y
cuidadosas al momento de enfrentarnos a cualquier clase de retos.
       A nuestro eje de formación académica la U. E. “Maestro Orlando E.
Rodríguez”. A nuestros amigos incondicionales por el viaje de la vida y finalmente
a nuestros compañeros que estuvieron siempre apoyándonos.
       Sentimos la necesidad infinita de agradecer la satisfacción por haber
culminado con éxito este trabajo, primeramente a Dios Todopoderoso quien nos
ilumina y llena de sabiduría para llevar a cabo nuestra labor y no dejarnos caer en
los momentos difíciles.
       A nuestros padres, hermanos y demás familiares, por apoyarnos
incondicionalmente sin exigirnos nada; nos han proporcionado su tiempo y
conocimiento puesto que han sido de gran ayuda.
       A nuestro tutor de contenido Alfonso Vivas, ya que nos brindo su tiempo,
apoyo, conocimientos y las herramientas necesarias para darle forma para la
realización de este trabajo; gracias a sus asesorías que fueron de gran ayuda.
       A nuestros tutores metodológicos: Oswaldo Romero y Tammy Rodríguez,
por haber estado allí para brindarnos sus conocimientos y la paciencia necesaria
en las diversas correcciones de nuestro trabajo de investigación.
       A la U. E. “Maestro Orlando E. Rodríguez” por brindarnos su apoyo.
       A nuestros compañeros por haber estado allí con nosotros apoyándonos
cuando pensábamos que no podíamos seguir.
       Y a todas aquellas personas que de alguna u otra forma colaboraron con la
culminación de esta meta.


                                                                    Atentamente:
                                                    Briceño Vera, María Gabriela.
                                                    Boscán Acosta, Kevin Alberto.
                                                     Chávez Morillo, Roiner José.
                                                González Martínez, Daniel Alberto.
                                                      Ríos Torres, Carlos Alfredo.
                                                    Vence Reverol, Yeritza Paola.
                                                  Vera Bastidas, Daniela Carolina.
EXTRACCIÓN DE ALFA AMINOÁCIDOS A PARTIR DE LA REFINACIÓN DE
             PASTA DE MANGO (MANGIFERA INDICA)
Lic. Alfonso Vivas y otros. U.E.”MAESTRO ORLANDO RODRIGUEZ” en cooperación con Facultad
                     de Ciencias. Universidad del Zulia. Zulia. Venezuela 2012.


                                    RESUMEN

Se logró extraer alfa aminoácidos a partir del mango mediante un proceso de
digestión de pulpa y por destilación con arrastre de vapor el cual resulto en una
suspensión en polvo de color blanco que se caracterizó por espectroscopia
infrarroja resultando, el espectro correspondiente de los alfa aminoácidos: alanina,
glicina y lisina; los parámetros químicos indican que los compuestos obtenidos
tienen un 95% de pureza y en la evaluación de digestión y solubilidad se encontró
que es espontánea. Finalmente los rendimientos fueron del 80% lo que se traduce
en producción exclusiva de aminoácidos sustituidos en alfa y en cuanto a la
comparación de la conveniencia de costos de producción resulta competitivo pues
es mucho más económico el producto aquí presentado, en virtud de que la materia
prima utilizada es 100% nacional. Además por ser productos obtenidos de forma
natural no presentan efectos secundarios, igualmente representa una utilización
magnifica para el mango muy abundante en la región Zuliana.



Palabras claves: Mango (mangifera indica), alfa aminoácidos, nutrientes.
INDICE GENERAL


VEREDICTO                                                 ii
DEDICATORIA                                               iii
RESUMEN                                                   iv
INTRODUCCION                                              v

EL PROBLEMA

1.1.- Planteamiento del Problema.                           6
1.2.- Formulación del Problema.                             6
1.3.- Objetivo General.                                     7
1.4.- Objetivos Específicos.                                7
1.5.- Justificación del Problema.                           7
1.6.- Delimitación.                                         7

MARCO TEÓRICO

2.1.- Antecedentes de la Investigación.                    8
2.2.- Bases Teóricas.                                      9
       2.2.1.- Taxonomía del Mango.                        9
       2.2.2.- El Mango.                                   9
       2.2.3.- Alfa Aminoácidos.                           9
       2.2.4.- Alfa Aminoácidos del Mango.                10
       2.2.5.- Fármacos.                                  10
       2.2.6.- Proteínas.                                 10
       2.2.7.- Etileno.                                   11
       2.2.8.- Pasta de Mango.                            11
2.3.- Sistema de Variables.                               11
       2.3.1.- Definición Conceptual de Variables.        11
       2.3.2.- Definición Operacional de las Variables.   12
       2.3.3.- Cuadro Operacional de Variables.           12
       2.3.4.- Hipótesis.                                 12
2.4.- Definición de Términos Básicos.                     13

MARCO METODOLOGICO.

3.1.- Tipo de Investigación.                              14
3.2.- Diseño de la Investigación.                         14
3.3.- Población.                                          14
       3.3.1.- Muestra.                                   14
3.4.- Técnicas e Instrumentos de Recolección de Datos.    15
3.5.- Metodología Experimental.                           15
       3.5.1.- Tratamiento Primario del Mango.            15
       3.5.2.- Aislamiento y Separación de Fases.         15
       3.5.3.- Extracción de los Alfa Aminoácidos.        15
3.5.4.- Caracterización de los Alfa Aminoácidos y Prueba de Pureza.   15
      3.5.5.- Prueba de Calidad del Producto.                               15
             3.5.5.1.- Punto Fusión.                                        16
             3.5.5.2.- Formación de Aminas.                                 16
             3.5.5.3.- Solubilidad en Acido Acético al 5%.                  16

RESULTADOS Y DISCUSION

4.1.- Tratamiento Primario del Mango.                                       17
4.2.- Aislamiento y Separación de Fases.                                    17
4.3.- Caracterización del Alfa Aminoácido.                                  18
4.4.- Prueba de Calidad.                                                    19

CONCLUSIONES.                                                               20
RECOMENDACIONES.                                                            21
LITERATURA CITADA.                                                          22
INTRODUCCION


       Las actividades humanas de la época actual han creado necesidades entre
las cuales se encuentran el consumo de vitaminas y complementos dietéticos. En
la mayoría de los casos estos productos son elaborados de manera artificial, lo
cual causa efectos colaterales; en otros caos existen alternativas naturales pero
que resultan costosas y de muy baja concentración de nutrientes. De igual manera
los productos naturales que aportan nutrientes resultan poco digestivos o son
inestables los valores proteicos pues dependen del proceso de maduración de
frutas, este es el caso del mango que tiene importantes valores alimenticios pero
estos dependen de su frescura la cual es muy efímera.

       El mango, fruto rico en antioxidantes y otros compuestos medicinales, crece
espontáneamente en la zona intertropical americana (introducido a fines del siglo
XVIII en el Brasil por los portugueses), es de color amarillo, más pequeño que las
variedades de injerto, de sabor exquisito y muy dulce, su época de cosecha
presenta un "pico" o máximo en el mes de mayo en las latitudes subecuatoriales
del hemisferio norte, lo cual resulta paradójico, ya que en este mes es cuando se
inician las lluvias en estas latitudes, por lo que toda la maduración de los frutos se
produce en los meses de mayor sequía. También el sabor es muy diferente entre
una variedad y otra. Por ejemplo, una variedad de mango de gran tamaño tiene un
sabor y olor similares al del melocotón en almíbar, aunque con una textura menos
hidratada (mango melocotón).

       Casi todas estas variedades de mango injerto se derivan de una variedad
obtenida por evolución natural que muchas personas denominan "mangas" en
Venezuela, Canarias y en la costa atlántica de Colombia y que no es sino la
adaptación de la planta durante varios siglos a un clima mucho más favorable que
el que tenían en la zona de procedencia de esta planta.

        En este trabajo se pretende aprovechar el contenido de alfa aminoácidos
esenciales que contiene el mango, mediante la extracción de estos con la finalidad
de elaborar con este producto un complemento dietético estable que pueda ser
consumido por individuos sin efectos secundarios. Para lograr este propósito se
utiliza un proceso simple que permite la obtención de los productos nutritivos sin
utilizar aditivos químicos adicionales. El producto es una mezcla de alfa
aminoácidos esenciales que resulta ser tolerado en la mayoría de los individuos.
EL PROBLEMA

1.1.- Planteamiento del problema.

      Es evidente que la acumulación de basura representa una grave amenaza
a la ecología del planeta, este fenómeno se manifiesta en diversas partes del
mundo y se acentúa en los países subdesarrollados, como los de África, Centro
América y Sur América.

        En Venezuela los problemas se agudizan, pues además de los hábitos
consumistas del hombre moderno, se le suman las deficiencias en los servicios de
recolección y tratamientos de desechos. En el caso específico del Estado Zulia se
verifica de manera alarmante la situación planteada con la mirada indiferente de
las autoridades locales.

       Adicionalmente a lo expuesto, se tiene que gran parte del desperdicio
doméstico, lo constituyen las enormes cantidades de mango que por no dársele
una utilidad incrementan en forma exponencial la basura producida, por otro lado
la síntesis u obtención de productos generan contaminantes tóxicos difíciles de
manejar, considerando todos estos aspectos y debido a lo complejo de
instalaciones y el costo de producción por la utilización de infraestructura y
equipos en las síntesis de vitaminas y de otros fármacos, es una necesidad
imperante desarrollar alternativas que faciliten la obtención de medicinas,
incluyendo los aminoácidos que de hecho puedan ser tolerados por los individuos
y sean manufacturados con materia prima abundante y por ahora contaminante
como lo es el mango (Mangifera Indica).

        Por lo tanto, se hace necesario el presente trabajo de investigación, debido
a que se desea la obtención de un producto natural y además resulta conveniente
utilizar métodos que no involucren sustancias que le confieran carácter artificial;
justamente, es en este sentido, que el producto de síntesis utilizando el mango,
cobra vigencia; debido a la espontaneidad de la reacciones que lo caracteriza,
pero la dificultad radica en que dicha transformaciones no son predecibles e
involucran todo un análisis secuencial para que el trabajo pueda realizarse.

       De manera concreta un alfa aminoácido es un componente esencial en los
seres vivos, debido a que participa en los procesos metabólicos y síntesis de
proteínas.

       La obtención de estos compuestos se realiza a partir de la fermentación del
etileno de ciertos tipos de vegetales, pero presenta la dificultad de que los
productos primarios de los cuales se derivan son inestables químicamente.
1.2.- Formulación del Problema.

       Considerando lo antes expuesto se llega a la siguiente formulación: ¿Será
posible obtener alfa aminoácidos a partir de la refinación de la pasta de Mango
(Mangifera Indica)?

1.3.- Objetivo General.

       Extraer alfa aminoácidos a partir de la refinación de la pasta de Mango
(Mangifera Indica)
1.4.- Objetivos Específicos.

         Extraer alfa aminoácidos a partir de la refinación de la pasta del mango
         (Mangifera Indica).
         Identificar los productos obtenidos junto a los alfa aminoácidos.
         Evaluar la calidad y efectividad de los productos obtenidos en la síntesis.

1.5.- Justificación del Problema.

       La presente investigación constituye un método innovador para la obtención
de productos medicinales como proteínas, derivados fenolicos, aspirina,
ibuprofeno, acetaminofén entre otros; que además utiliza como materia prima un
recurso natural y abundante como los es el mango (Mangifera Indica). Este fruto
es rico en azúcares y carbohidratos además de otras sustancias que pueden ser
aprovechadas para los fines descritos.

      Por otro lado, el recurso en cuestión, es decir el mango, representa un
problema de contaminación en nuestro entorno, razón por la cual el procedimiento
para el aprovechamiento del mismo toma más conveniencia e importancia.

       Finalmente, resulta obvio que una sustancia obtenida a partir de un
producto 100% natural como el del presente estudio, sea bien tolerado por la
mayoría de los individuos. Si tomamos en cuenta el trabajo, involucra la utilización
de materia que se desperdicia, es de considerar que contribuye a mejorar la
calidad de vida de los individuos, abre la posibilidad de aprovechar los recursos
que se descartan y se obtiene un producto que no genera residuo; lo cual
contribuye en un amplio sentido a mejorar, incluso el tratamiento que se le da hoy
en día a los residuos urbanos. Todo esto, en conjunto hace de esta investigación,
una alternativa de vanguardia al servicio de la farmacología donde estaríamos a la
puerta de una generación de producto medicinales naturales.

1.6.- Delimitación.

      La presente investigación se realizará en la localidad de Los Cortijos,
Municipio San Francisco del Estado Zulia; utilizando mangos nativos de esta
comunidad en el tiempo comprendido desde Octubre de 2011 hasta Abril de 2012.
MARCO TEÓRICO


2.1.- Antecedentes de la Investigación.

       La primera vez que se intento sintetizar aminoácidos fue en el año (2000),
por Fieders a partir de la corteza de la uva, aprovechando para ello los diferentes
tipos de lucidos que posee. De igual modo, en 2001 varios investigadores de la
Universidad de Pensilvania publicaron un articulo llamado “Proteínas Sintéticas”,
en el desarrollo una proteína semisintética mediante la fermentación de uvas
injertables. En este trabajo se verifico la importancia de controlar el proceso de
fermentación para obtener compuestos con buen rendimiento (Cantidad) y de
excelente calidad.

        Por otra parte, en la ciudad de México en el año (2003), González aisló
unas proteínas y tres aminoácidos al realizar cromatografía en una nuez originaria
del desierto de Yucatán. Aunque estos compuestos eran inestables se evidencia
una novedad técnica para la obtención y diversificación del compuesto mediante la
técnica de la post-fermentación. En el mismo orden de ideas, en 2005 un grupo
venezolano-argentino encabezado por Gonzales y Viera, considerando la
posibilidad de obtener aminoácidos, probaron con varias uvas y frutas tropicales
pero solo se tuvo éxito con la papaya y el cacao. Sin embargo se verificó una vía
de síntesis que permitió considerar la obtención de aminoácidos a partir de
compuestos derivados del almidón.

       No obstante, González (2006) utilizó el cacao buscando mejorar los
rendimientos en la producción de aminoácidos, pero sin éxito. Sin embargo con
esto motivó las pruebas que entre 2007 y 2008 incluyeron al mango con el que los
resultados fueron positivos. Este precedente permitió esta fruta en diversos
trabajos que incluía procesos de fermentación y post-fermentación. Por su parte
González, Huerta y Vivas (2009) destilaron etanol a partir de la fermentación
espontánea de mango, en consideración a las altas concentraciones de etileno
que posee esta fruta. El etanol puede fermentarse y auto regularse por lo que
puede entenderse que puede dar el lugar o la formación de aminoácidos.

       Así mismo, Granadillo (2010) publicó: “Caracterización de los aminoácidos
producido a partir de la fermentación”; en este trabajo se evaluaron diferentes
productos como: Mango, Papaya, Papa y Maíz, donde la constitución de
aminoácidos era similar. Esto evidenció la relación de los aminoácidos con la
síntesis de otros compuestos y que lo mismo puede ser obtenido de casi cualquier
vegetal. Por las consideraciones anteriores, Vivas (2011) realizo un trabajo de
investigación titulado “Obtención de un polímero biodegradable a partir del
mango”. En este trabajo aisló varios productos del mango incluido el polietileno y
otros sub-productos estables. Los productos estables garantizan la producción
derivados como la amina y aminoácidos fácilmente degradable en otro sistema.
2.2.- Bases teóricas:

2.2.1.- Taxonomía del mango: Según Gómez, (2007), este fruto está clasificado
de la siguiente manera:

      División: Angiospermaea
      Clase: Dicotiledónea
      Sub Clase: Archyelamydeae
      Orden: Sapindales.
      Sub Orden: Anacardineae
      Familia: Anacardiaceae
      Tribu: Anacardieae
      Género : Mangifera
      Sub Genero: Limus (Marchand) Kost
      Especie: Mangifera indica L

2.2.2.- El mango.

       Según Fernández (1998), “Mangifera indica L” es un frutal de amplia
diseminación y consumo a nivel nacional. Es un árbol de tamaño mediano de 10 a
30 mts de altura, tronco más o menos recto, de corteza color gris café, con grietas
longitudinales o surcos reticulados poco profundos que a veces contienen góticas
de resina, hojas alternas, sub-coriáceas de color verde oscuro brillante por el haz y
verde amarillento por el envés.




2.2.3.- Alfa aminoácidos.

       Según Gonzalo (1999), son sustancias obtenidas por la combinación de
ácidos orgánicos esenciales y proteínas, los cuales sirven para la formación de
tejidos y otras reacciones vitales en los seres humanos. Un aminoácido típico se
puede obtener en condiciones de laboratorios combinando azucares con diversos
tipos de carbohidratos.
2.2.4- Alfa Aminoácidos del mango

       Para Handbook (2008), de Farmacología en la Universidad de
Pennsylvania, el mango contiene leucina, lisina, metionina, prolina, serina, tirosina,
teonina, triptófano y valina; éstos en conjunto constituyen el grupo de los alfa
aminoácidos que conforman un complejo que se agrupa para dar lugar a los
denominados alfa aminoácidos esenciales. Estos se combinan para formar
proteínas. Las proteínas del mango son usadas por nuestro organismo para
formar nuestros músculos y también son necesarias para mantener la masa
muscular. El cuadro adjunto muestra el contenido específico de estos nutrientes
cuantificados a partir de 100 gramos de fruta fresca.




2.2.5- Fármacos.

      Según Larousse (2009, tomo II, pág. 305) es un productos medicinales
específicos para tratamientos localizados de algún trastorno orgánico incluyendo
complementos dietéticos y vitaminas.

2.2.6- Proteínas.

       Según Lexus (2000, tomo1, pag:337), son biomoléculas formadas por
cadenas lineales de aminoácidos, las cuales por sus propiedades físico-químicas;
se pueden clasificar en proteínas simples (holoproteidos), que por hidrólisis dan
solo aminoácidos o sus derivados; proteínas conjugadas (heteroproteidos), que
por hidrólisis dan aminoácidos acompañados de sustancias diversas, y proteínas
derivadas, sustancias formadas por desnaturalización y desdoblamiento de las
anteriores. Las proteínas son indispensables para la vida, sobre todo por su
función plástica (constituyen el 80% del protoplasma deshidratado de toda célula),
pero también por sus funciones biorreguladora (forma parte de las enzimas) y de
defensa (los anticuerpos son proteínas).
2.2.7.- Etileno.

      Según Villegas (2001), es un compuesto químico orgánico formado por dos
átomos de carbono enlazados mediante un doble enlace. Es uno de los productos
químicos más importantes de la industria química. Se halla de forma natural en las
plantas. A partir del etileno por fermentación se obtiene el alcohol y por post-
fermentación amina y aminoácidos.


     CH2=CH2  CH2=CH* CH3-CH2-OH

     ETENO          ETILENO         FERMENTACION              PROCESO
                                                              BIOLOGICO

                                  (OXIDACION)          PROCESO QUIMICO


                                          CH3 NH2       AMINA


                                       AMINOACIDOS


2.2.8. Pasta de mango.

      A. Vivas (Usos del mango), preparado especial a partir del mango tratado
con acido acético y gluten de trigo.

2.3.- Sistemas de variables:

       Variable Independiente: El mango.

       Variable Dependiente: Obtención de alfa Aminoácidos.

2.3.1.- Definición conceptual de variables:

       Variable Independiente: Según Fernández (1998), el mango es un fruto
rico en carbohidratos y azucares; tiene como particularidad la reacción que puede
tener con factores biológicos y químicos por lo que produce fácilmente otras
sustancias.

       Variable Dependiente: Según Gonzalo (1999), los afa aminoácidos son las
sustancias producidas que se van a obtener por descomposición y recombinación
de los compuestos químicos propios del mango.
2.3.2.- Definición operacional de las variables:

       Variable independiente: el mango, este fruto es muy reactivo al poseer
diversos tipos de sustancias químicas puede obtener mediante recombinación
molecular diversos productos entre los cuales están los alfa aminoácidos.

       Variable dependiente: los alfa aminoácidos, son sustancias que se pueden
obtener por descomposición de material orgánico en condiciones anaeróbicas y
también por síntesis complejas a partir de la destilación de caldo de cultivo
diversos.

2.3.3.- Cuadro operacional de variables.

      Objetivo General: Obtener alfa aminoácidos y otros fármacos a través de la
refinación de pasta de mango.

     Objetivos           Variable        Dimensiones        Indicadores        Items
    Específicos
     1.- Sintetizar
          alfa                            Preparación y
                       V.I.: El mango                        Estabilidad y
     aminoácidos                           obtención de
                                                            homogeneidad
     a partir de la                         una pasta a
                       V.D.: Los alfa                           de los
     refinación de                       partir del mango
                       aminoácidos                           compuestos
      la pasta de                         y reacción por
                        obtenidos.                            obtenidos.
        mango.                                reflujo.

                                                                 Valores
     2.- Identificar
                       V.I.: El mango.                      específicos de
    los productos                         Evaluación y
                                                              Ph, punto de
       obtenidos                         análisis físico-
                       V.D.: Los alfa                            fusión y
      junto a los                          químicos
                       aminoácidos                              espectro
           alfa                           específicos.
                        obtenidos.                              infrarrojo
    aminoácidos.
                                                             característico.
                                                                 Valores
                                                             específicos y
     3.- Evaluar la
                       V.I.: El mango.                          espectro
       calidad y                         Análisis físico-
                                                                infrarrojo
    efectividad de                         químicos
                       V.D.: Los alfa                        característico.
    los productos                         estándar de
                       aminoácidos                             Además de
    en la síntesis.                         calidad.
                        obtenidos.                                efecto
                                                            farmacológico.



2.3.4.- Hipótesis:

       Considerando la capacidad reactiva del mango y sus descomposiciones en
diversos compuestos orgánicos, en virtud además de los numerosos estudios
realizados sobre este fruto y constituyendo los alfa aminoácidos parte de los
compuestos orgánicos que contiene el mango se puede obtener aminoácidos
específicos de excelente calidad y alto grado de pureza; desde luego logrando
estabilizar la reactividad de las moléculas del mango. El producto obtenido
además de buenos parámetros de calidad será estable y con buenos resultados
en cuanto a su efecto farmacológico.

2.4.-Definición de términos básicos

      PH: Según A. Vivas (2009), es un valor que se usa para indicar la acidez o
       alcalinidad de una sustancia. La escala de PH es una escala logarítmica de
       crecimiento exponencial oscila entre los valores de 0 (mas acido) y 14 (más
       básico), 7 es neutro; “el factor PH” se define como el potencial de hidrogeno
       calculado como el logaritmo de la actividad o concentración molar de los
       iones hidrogeno (H + O hidrogeno H30+).PH=-log[H].
      Acidez titulable o normalidad del acido: Según A. Vivas (2009), se
       determina por titulación o valoración, mediante una base de normalidad
       conocida. En otras palabras la acidez titulable se puede determinar
       añadiendo suficiente álcali de normalidad conocida hasta neutralizar toda la
       acidez o llevar el PH al punto neutro. La acidez titulable no se puede
       predecir a partir de la concentración actual de iones de hidrogeno que se
       determina con el PH.
      2.4.3.- Grados Brix: Según Suarez (2010), miden la cantidad de sólidos
       solubles presentes en un jugo o pulpa expresados en porcentaje de
       sacarosa. Los sólidos soluble s están compuestos por los azucares, ácidos,
       sales y demás compuestos solubles en agua presente en los solubles en la
       célula de una fruta. Se determinan empleando un refractómetro calibrado y
       a 20 ºC. si la pulpa o jugo se halla a diferente temperatura se podrá realizar
       un ajuste ºBrix, según la temperatura en la que se realiza la lectura.
      2.4.4.- Variedad: Según Suarez (2010), cada uno de los grupos en que se
       dividen algunas especies de plantas y animales y que se distinguen entre sí
       por ciertos caracteres que se subsisten por la herencia.
MARCO METODOLOGICO


3.1. TIPO DE INVESTIGACIÓN.

      La presente investigación es experimental, pues en ella se plantea la
extracción o síntesis de un compuesto con propiedades particulares, utilizando
para ello técnicas y procedimientos propios de la química farmacéutica.

       Para este propósito se sigue una fundamentación con base a principios de
síntesis orgánica y por ello se rige por la demostración de leyes propias de esta
área del conocimiento; logrando de esta manera verificar la hipótesis planteada.

       Es además un trabajo de campo, pues supone la recolección de muestra
como un indicador de variable, esto es el mango (mangifera indica) en función de
esto se deberá el éxito del producto a elaborar en este trabajo.

        En líneas generales este trabajo se fundamenta en la extracción,
purificación y tratamiento químico de componentes del mango, específicamente
los alfa aminoácidos, en lo cual, nos apoyaremos en condensación de estos
componentes, siguiendo un procedimiento que a la vez, es de inventiva propia y
ha sido estandarizado en este mismo estudio.

3. 2. DISEÑO DE LA INVESTIGACIÓN.

      Por tratarse de un trabajo experimental fundamentado en las ciencias
puras, cuenta con una metodología propia, es decir un diseño en donde los
procedimientos utilizados son inéditos, claro está, cumpliendo los prerrequisitos
que están contenidos en los fundamentos teóricos que propone la bibliografía en
cuanto a la síntesis, extracción y purificación de compuestos. Dicha metodología
se describe más adelante en este mismo capítulo.

3.3. POBLACIÓN.

      La población de mangifera indica en el sector los cortijos, mil (1000)
plantas, de tipología diversa, todos nativos de la región Zuliana.

3.3.1. MUESTRA.

        El tratamiento   de la muestra es intencional sistemático, pues se
corresponde a una selección de tipo con características muy particulares tal que a
partir de la población de mangifera indica señalada, se realiza un muestreo de
veinte (20) plantas de manera aleatoria, de cada una se toman diez (10) piezas de
fruto: cinco (5) mango maduro y cinco (5) mango biche.
3.4. TECNICAS E INSTRUMENTOS DE RECOLECCION DE DATOS

      Por constituirse, el presente trabajo bajo un esquema experimental puro,
Según Chávez (1992), el instrumento de recolección de datos es la observación;
esta se realiza mediante el seguimiento y registro de cada una de las etapas del
proceso; utilizando la tabulación, la recolección de información y la interpretación
de análisis y rutinas de laboratorio.

3.5. METODOLOGIA EXPERIMENTAL.

3.5.1. TRATAMIENTO PRIMARIO DEL MANGO.

       Se selecciona un aproximado a 50 kilogramos de mango maduro y 30
kilogramos de mango en proceso intermedio (biche). Seguidamente se procede a
remover la corteza del fruto (de los dos grupos del mismo), luego se mezcla y
digieren con 10 litros de solución al 5% de acido acético (CH3COoH) mediante
procedimiento mecánico hasta lograr una pasta, lo más homogénea posible.

3.5.2. AISLAMIENTO Y SEPARACION DE FASES.

       Luego del procedimiento anterior, se deja reposar la pasta por dos días;
luego se toma esta y se somete a la acción de microondas por espacio de cinco
(5) minutos, el contenido se deja reposar hasta la aparición de una sustancia
liquida homogénea (contiene los alfa aminoácidos), esta debe ser separada del
remanente el cual puede ser utilizado para otros propósitos.

3.5.3. EXTRACCION DE LOS ALFA AMINOACIDOS.

      Junto con los alfa aminoácidos coexisten en la solución algunos
carbohidratos y azucares que son eliminados por purificación,     esta consiste en
una destilación por arrastre con vapor a 80 ºC, el contenido residual contiene los
alfa aminoácidos. Este se somete a cristalización mediante la deshidratación en
una cámara de secado.

3.5.4. CARACTERIZACIÓN DE LOS ALFA AMINOACIDOS                      Y PRUEBA DE
PUREZA.

        Se somete una muestra de material obtenido a la acción de espectroscopia
infrarroja (IR) para identificar el producto y evaluar su pureza; el espectro obtenido
debe ser idéntico al patrón establecido en la bibliografía correspondiente.

3.5.5. PRUEBAS DE CALIDAD DEL PRODUCTO OBTENIDO POLIMERO.

        El material es analizado según la normativa ASTM COVENIN; para ello es
sometido a pruebas estándar de punto de fusión, formación de aminas y
solubilidad en acido ACETICO AL 5%.
3.5.5.1. PUNTO FUSION.

        Para realizarse esta prueba se toman unos cinco gramos de muestra y se
colocan en una tubo capilar donde se somete a la acción de temperatura, esta
verificación es de suma importancia por lo que el procedimiento debe realzarse
cinco veces (5) y todos los resultados deben coincidir.

3.5.5.2. FORMACION DE AMINAS.

       Se calienta una muestra de 20 gramos a 60 °C y se somete a acción de
una solución de cloruro de amonio concentrado, dejar enfriar y observar la
aparición de un precipitado azul característico, esta es la amina formada.

3.5.5.3. SOLUBILIDAD EN ACIDO ACETICO AL 5 %.

       Esta prueba cosiste en verificar la acción del acido acético diluido sobre
muestras aleatorias de alfa aminoácidos en porciones de 250 miligramos, 500
miligramos, un gramo y cinco gramos de producto en un (1) mililitro de solución.
Para esto se toman las porciones descritas y se llevan a tubos de ensayo con el
acido, la buena absorción y ausencia de residuos garantiza que este es de buena
digestión y puede ser metabolizado por el organismo humano de allí la importancia
de esta prueba
RESULTADOS Y DISCUSIÓN

4.1. TRATAMIENTO PRIMARIO DEL MANGO

     El procedimiento inicial permitió la obtención de 25 kilogramos de pasta de
mango, que luego de un proceso mecánico; digestión en acido acético y
maceración permitieron obtener un complejo homogéneo en suspensión de
mango. La secuencia del proceso se puede verificar en las imágenes 1 a la 3
anexas.




 Imagen 1. Apariencia inicial de la mezcla          Imagen 2. Inicio de la reacción




                         Imagen 3 En la imagen se observa una mezcla
                             homogénea de mango en suspensión.

4.2. AISLAMIENTO Y SEPARACION DE FASES.

        Cumplido el proceso de condensación inicial se pudo verificar la formación
en solución de una fase acuosa o soluble en agua y otra orgánica (esta contiene
los alfa aminoácidos y azucares) las cuales se dejan reposar por quince días para
su separación final. Esta es sometida a una destilación por arrastre con vapor tal
como se muestra en la figura 4, en la cual se utilizo una disolución con cáscaras
del mango para favorecer la concentración acida esencial del mango.
Figura 4. Destilación por arrastre con vapor para separar las últimas fracciones del
                   mango, previo a la obtención de aminoácidos.


4.3. CARACTERIZACIÓN DEL ALFA AMINOACIDO.

       Para caracterizar el compuesto obtenido se le realizo un espectro infrarrojo
directo sobre la pasta de mango resultando la información espectroscópica de la
figura 4. la cual indica inequívocamente la presencia de los aminoácidos
esenciales del mango.




  Imagen 5. Espectro IR de la muestra obtenido por condensación del mango, realizado en un
   espectrofotómetro Marca Philips, bajo el auspicio del C.E.S.U. de la Universidad del Zulia.
4.4 PRUEBAS DE CALIDAD

        La suspensión obtenida que se observa en las figuras 6 y 7, fue sometida a
la verificación del punto de fusión el cual resulto ser de 84 ºC y el valor fue
repetitivo en las pruebas lo que garantiza la precisión del ensayo, además se
puede apreciar su solubilidad absoluta en acido acético lo cual garantiza que
puede ser metabolizado y finalmente la formación de aminas (color azul) que se
aprecia en la figura 8. garantizan un producto de buena calidad y excelente
propiedades farmacológicas.




Figuras 6 y 7. Se observa a la izquierda el producto obtenido por destilación de
color blanco el cual fue recristalizado y purificado obteniéndose el producto de la
derecha.




                    Figura 8. Prueba de verificación de aminas
                        resultó el color azul característico.
CONCLUSIONES

   Es posible obtener alfa aminoácidos aprovechables a partir del mango
    tropical (mangifera indica), de hecho estos compuestos en la especie
    tratada resultan abundantes.
   El proceso de condensación inherente propia del mango es completamente
    espontáneo, para lograr dicho propósito no fue necesario utilizar
    condiciones drásticas de reacción ni catalizadores.
   Debido a que el producto obtenido tiene como característica física que es
    un polvo ligero, puede ser utilizado en capsulas, suspensión para
    soluciones y comprimidos.
   El procedimiento por el cual se consiguió extraer el producto resulto ser
    sencillo y de bajo costo de manufactura, debido a que la materia prima es
    abundante y accesible
   Aunque los rendimientos, es decir la cantidad de alfa aminoácidos es
    limitada se estima que esto se debe a que las condiciones de reacción no
    fueron controladas, pueden ser mejoradas en función de la reacción.
   Las metodologías para obtener fármacos a partir de extractos naturales
    pueden rediseñarse de acuerdo a las necesidades que se susciten en la
    marcha, en otras palabras pueden ser optimizadas cuando así sea
    requerido.
RECOMENDACIONES

   En caso de que se desee profundizar en el estudio síntesis orgánica de
    fármacos a partir del mango debería utilizarse como patrón de referencia
    los resultados aquí obtenidos, utilizando técnicas convencionales para
    mejorar rendimientos.
   Dado que se obtienen varios alfa aminoácidos se podría profundizar en la
    obtención de una nueva generación de productos nutricionales.
   En el caso de extracción de productos naturales nunca debe darse por
    sentado cualquier resultado, pues en el entorno natural se hace necesario
    estudiar la evolución que puede ocurrir en las especies y las variaciones
    que perciben estos recursos naturales en función del tiempo y de los
    cambios ambientales.
Literatura Citada

1) Fisher “Organic Struture” 1990
2) Karl Lewis “Basic Structure Chemical Stutding” 1995.
3) H. Boylt “Química Orgánica Avanzada” 1978
4) H. Merk “Handbook de Química Moderna” 1986.
5) J.J. Works “New Structures in Chemical Industries” 2008.
6) Skoog and Leary “Química Analítica Instrumental” 1998.
7) R. Fernández “Química General Moderna Actualizada” 1998.
8) Feders y colaboradores. “Síntesis y Caracterización de Moléculas a partir de
   Biomasas”. 2002.
9) Rodríguez y L. González “Fermentación y Otros Productos del Mango” 2009.
10) L. Wososk “The New Structure of Macromolec Visión”. 2006.

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Extraccion de alfa aminoacidos a partir de la refinacion de pasta de mango

  • 1. República Bolivariana de Venezuela Ministerio del Poder Popular para la Educación Unidad Educativa Maestro “Orlando Enrique Rodríguez” Los Cortijos - Estado Zulia EXTRACCIÓN DE ALFA AMINOÁCIDOS A PARTIR DE LA REFINACIÓN DE PASTA DE MANGO (MANGIFERA INDICA) INTEGRANTES: Briceño Vera, María Gabriela. CI: 24.897.559 Boscán Acosta, Kevin Alberto. CI: 24.241.520 Chávez Morillo, Roiner José. CI: 24.252.289 González Martínez, Daniel Alberto. CI: 23.459.907 Ríos Torres, Carlos Alfredo. CI: 23.887.326 Vence Reverol, Yeritza Paola. CI: 24.604.180 Vera Bastidas, Daniela Carolina. CI: 25.439.717 Químico P. Alfonso Vivas Mgs.Tammy Rodríguez Tutor de Contenido Tutor Metodológico San Francisco, Junio de 2012.
  • 2. VEREDICTO El jurado calificador nombrado por la Unidad Educativa “Maestro Orlando Enrique Rodríguez” aprueba el trabajo de grado titulado: EXTRACCIÓN DE ALFA AMINOÁCIDOS A PARTIR DE LA REFINACIÓN DE PASTA DE MANGO (MANGIFERA INDICA) Requisito para la aprobación de la asignatura Técnicas de Investigación por los alumnos: Briceño Vera, María Gabriela. Boscán Acosta, Kevin Alberto. Chávez Morillo, Roiner José. González Martínez, Daniel Alberto. Ríos Torres, Carlos Alfredo. Vence Reverol, Yeritza Paola. Vera Bastidas, Daniela Carolina El jurado emite el siguiente veredicto: Los Cortijos de de 2012
  • 3. DEDICATORIA Tenemos el honor de dedicar el presente trabajo a quien inspira nuestros pensamientos y por quien fluyen nuestras ideas, a nuestro señor Jesucristo; por iluminarnos en el camino que debemos seguir, por enseñarnos que con fe y paciencia se logra todo lo que uno se propone en esta vida. A nuestros padres, quienes incondicionalmente están allí y día a día nos apoyan; brindándonos su sabiduría para poder superarnos y dándonos la educación, han hecho de nosotros personas de bien, comprensivas, respetables y cuidadosas al momento de enfrentarnos a cualquier clase de retos. A nuestro eje de formación académica la U. E. “Maestro Orlando E. Rodríguez”. A nuestros amigos incondicionales por el viaje de la vida y finalmente a nuestros compañeros que estuvieron siempre apoyándonos. Sentimos la necesidad infinita de agradecer la satisfacción por haber culminado con éxito este trabajo, primeramente a Dios Todopoderoso quien nos ilumina y llena de sabiduría para llevar a cabo nuestra labor y no dejarnos caer en los momentos difíciles. A nuestros padres, hermanos y demás familiares, por apoyarnos incondicionalmente sin exigirnos nada; nos han proporcionado su tiempo y conocimiento puesto que han sido de gran ayuda. A nuestro tutor de contenido Alfonso Vivas, ya que nos brindo su tiempo, apoyo, conocimientos y las herramientas necesarias para darle forma para la realización de este trabajo; gracias a sus asesorías que fueron de gran ayuda. A nuestros tutores metodológicos: Oswaldo Romero y Tammy Rodríguez, por haber estado allí para brindarnos sus conocimientos y la paciencia necesaria en las diversas correcciones de nuestro trabajo de investigación. A la U. E. “Maestro Orlando E. Rodríguez” por brindarnos su apoyo. A nuestros compañeros por haber estado allí con nosotros apoyándonos cuando pensábamos que no podíamos seguir. Y a todas aquellas personas que de alguna u otra forma colaboraron con la culminación de esta meta. Atentamente: Briceño Vera, María Gabriela. Boscán Acosta, Kevin Alberto. Chávez Morillo, Roiner José. González Martínez, Daniel Alberto. Ríos Torres, Carlos Alfredo. Vence Reverol, Yeritza Paola. Vera Bastidas, Daniela Carolina.
  • 4. EXTRACCIÓN DE ALFA AMINOÁCIDOS A PARTIR DE LA REFINACIÓN DE PASTA DE MANGO (MANGIFERA INDICA) Lic. Alfonso Vivas y otros. U.E.”MAESTRO ORLANDO RODRIGUEZ” en cooperación con Facultad de Ciencias. Universidad del Zulia. Zulia. Venezuela 2012. RESUMEN Se logró extraer alfa aminoácidos a partir del mango mediante un proceso de digestión de pulpa y por destilación con arrastre de vapor el cual resulto en una suspensión en polvo de color blanco que se caracterizó por espectroscopia infrarroja resultando, el espectro correspondiente de los alfa aminoácidos: alanina, glicina y lisina; los parámetros químicos indican que los compuestos obtenidos tienen un 95% de pureza y en la evaluación de digestión y solubilidad se encontró que es espontánea. Finalmente los rendimientos fueron del 80% lo que se traduce en producción exclusiva de aminoácidos sustituidos en alfa y en cuanto a la comparación de la conveniencia de costos de producción resulta competitivo pues es mucho más económico el producto aquí presentado, en virtud de que la materia prima utilizada es 100% nacional. Además por ser productos obtenidos de forma natural no presentan efectos secundarios, igualmente representa una utilización magnifica para el mango muy abundante en la región Zuliana. Palabras claves: Mango (mangifera indica), alfa aminoácidos, nutrientes.
  • 5. INDICE GENERAL VEREDICTO ii DEDICATORIA iii RESUMEN iv INTRODUCCION v EL PROBLEMA 1.1.- Planteamiento del Problema. 6 1.2.- Formulación del Problema. 6 1.3.- Objetivo General. 7 1.4.- Objetivos Específicos. 7 1.5.- Justificación del Problema. 7 1.6.- Delimitación. 7 MARCO TEÓRICO 2.1.- Antecedentes de la Investigación. 8 2.2.- Bases Teóricas. 9 2.2.1.- Taxonomía del Mango. 9 2.2.2.- El Mango. 9 2.2.3.- Alfa Aminoácidos. 9 2.2.4.- Alfa Aminoácidos del Mango. 10 2.2.5.- Fármacos. 10 2.2.6.- Proteínas. 10 2.2.7.- Etileno. 11 2.2.8.- Pasta de Mango. 11 2.3.- Sistema de Variables. 11 2.3.1.- Definición Conceptual de Variables. 11 2.3.2.- Definición Operacional de las Variables. 12 2.3.3.- Cuadro Operacional de Variables. 12 2.3.4.- Hipótesis. 12 2.4.- Definición de Términos Básicos. 13 MARCO METODOLOGICO. 3.1.- Tipo de Investigación. 14 3.2.- Diseño de la Investigación. 14 3.3.- Población. 14 3.3.1.- Muestra. 14 3.4.- Técnicas e Instrumentos de Recolección de Datos. 15 3.5.- Metodología Experimental. 15 3.5.1.- Tratamiento Primario del Mango. 15 3.5.2.- Aislamiento y Separación de Fases. 15 3.5.3.- Extracción de los Alfa Aminoácidos. 15
  • 6. 3.5.4.- Caracterización de los Alfa Aminoácidos y Prueba de Pureza. 15 3.5.5.- Prueba de Calidad del Producto. 15 3.5.5.1.- Punto Fusión. 16 3.5.5.2.- Formación de Aminas. 16 3.5.5.3.- Solubilidad en Acido Acético al 5%. 16 RESULTADOS Y DISCUSION 4.1.- Tratamiento Primario del Mango. 17 4.2.- Aislamiento y Separación de Fases. 17 4.3.- Caracterización del Alfa Aminoácido. 18 4.4.- Prueba de Calidad. 19 CONCLUSIONES. 20 RECOMENDACIONES. 21 LITERATURA CITADA. 22
  • 7. INTRODUCCION Las actividades humanas de la época actual han creado necesidades entre las cuales se encuentran el consumo de vitaminas y complementos dietéticos. En la mayoría de los casos estos productos son elaborados de manera artificial, lo cual causa efectos colaterales; en otros caos existen alternativas naturales pero que resultan costosas y de muy baja concentración de nutrientes. De igual manera los productos naturales que aportan nutrientes resultan poco digestivos o son inestables los valores proteicos pues dependen del proceso de maduración de frutas, este es el caso del mango que tiene importantes valores alimenticios pero estos dependen de su frescura la cual es muy efímera. El mango, fruto rico en antioxidantes y otros compuestos medicinales, crece espontáneamente en la zona intertropical americana (introducido a fines del siglo XVIII en el Brasil por los portugueses), es de color amarillo, más pequeño que las variedades de injerto, de sabor exquisito y muy dulce, su época de cosecha presenta un "pico" o máximo en el mes de mayo en las latitudes subecuatoriales del hemisferio norte, lo cual resulta paradójico, ya que en este mes es cuando se inician las lluvias en estas latitudes, por lo que toda la maduración de los frutos se produce en los meses de mayor sequía. También el sabor es muy diferente entre una variedad y otra. Por ejemplo, una variedad de mango de gran tamaño tiene un sabor y olor similares al del melocotón en almíbar, aunque con una textura menos hidratada (mango melocotón). Casi todas estas variedades de mango injerto se derivan de una variedad obtenida por evolución natural que muchas personas denominan "mangas" en Venezuela, Canarias y en la costa atlántica de Colombia y que no es sino la adaptación de la planta durante varios siglos a un clima mucho más favorable que el que tenían en la zona de procedencia de esta planta. En este trabajo se pretende aprovechar el contenido de alfa aminoácidos esenciales que contiene el mango, mediante la extracción de estos con la finalidad de elaborar con este producto un complemento dietético estable que pueda ser consumido por individuos sin efectos secundarios. Para lograr este propósito se utiliza un proceso simple que permite la obtención de los productos nutritivos sin utilizar aditivos químicos adicionales. El producto es una mezcla de alfa aminoácidos esenciales que resulta ser tolerado en la mayoría de los individuos.
  • 8. EL PROBLEMA 1.1.- Planteamiento del problema. Es evidente que la acumulación de basura representa una grave amenaza a la ecología del planeta, este fenómeno se manifiesta en diversas partes del mundo y se acentúa en los países subdesarrollados, como los de África, Centro América y Sur América. En Venezuela los problemas se agudizan, pues además de los hábitos consumistas del hombre moderno, se le suman las deficiencias en los servicios de recolección y tratamientos de desechos. En el caso específico del Estado Zulia se verifica de manera alarmante la situación planteada con la mirada indiferente de las autoridades locales. Adicionalmente a lo expuesto, se tiene que gran parte del desperdicio doméstico, lo constituyen las enormes cantidades de mango que por no dársele una utilidad incrementan en forma exponencial la basura producida, por otro lado la síntesis u obtención de productos generan contaminantes tóxicos difíciles de manejar, considerando todos estos aspectos y debido a lo complejo de instalaciones y el costo de producción por la utilización de infraestructura y equipos en las síntesis de vitaminas y de otros fármacos, es una necesidad imperante desarrollar alternativas que faciliten la obtención de medicinas, incluyendo los aminoácidos que de hecho puedan ser tolerados por los individuos y sean manufacturados con materia prima abundante y por ahora contaminante como lo es el mango (Mangifera Indica). Por lo tanto, se hace necesario el presente trabajo de investigación, debido a que se desea la obtención de un producto natural y además resulta conveniente utilizar métodos que no involucren sustancias que le confieran carácter artificial; justamente, es en este sentido, que el producto de síntesis utilizando el mango, cobra vigencia; debido a la espontaneidad de la reacciones que lo caracteriza, pero la dificultad radica en que dicha transformaciones no son predecibles e involucran todo un análisis secuencial para que el trabajo pueda realizarse. De manera concreta un alfa aminoácido es un componente esencial en los seres vivos, debido a que participa en los procesos metabólicos y síntesis de proteínas. La obtención de estos compuestos se realiza a partir de la fermentación del etileno de ciertos tipos de vegetales, pero presenta la dificultad de que los productos primarios de los cuales se derivan son inestables químicamente.
  • 9. 1.2.- Formulación del Problema. Considerando lo antes expuesto se llega a la siguiente formulación: ¿Será posible obtener alfa aminoácidos a partir de la refinación de la pasta de Mango (Mangifera Indica)? 1.3.- Objetivo General. Extraer alfa aminoácidos a partir de la refinación de la pasta de Mango (Mangifera Indica) 1.4.- Objetivos Específicos.  Extraer alfa aminoácidos a partir de la refinación de la pasta del mango (Mangifera Indica).  Identificar los productos obtenidos junto a los alfa aminoácidos.  Evaluar la calidad y efectividad de los productos obtenidos en la síntesis. 1.5.- Justificación del Problema. La presente investigación constituye un método innovador para la obtención de productos medicinales como proteínas, derivados fenolicos, aspirina, ibuprofeno, acetaminofén entre otros; que además utiliza como materia prima un recurso natural y abundante como los es el mango (Mangifera Indica). Este fruto es rico en azúcares y carbohidratos además de otras sustancias que pueden ser aprovechadas para los fines descritos. Por otro lado, el recurso en cuestión, es decir el mango, representa un problema de contaminación en nuestro entorno, razón por la cual el procedimiento para el aprovechamiento del mismo toma más conveniencia e importancia. Finalmente, resulta obvio que una sustancia obtenida a partir de un producto 100% natural como el del presente estudio, sea bien tolerado por la mayoría de los individuos. Si tomamos en cuenta el trabajo, involucra la utilización de materia que se desperdicia, es de considerar que contribuye a mejorar la calidad de vida de los individuos, abre la posibilidad de aprovechar los recursos que se descartan y se obtiene un producto que no genera residuo; lo cual contribuye en un amplio sentido a mejorar, incluso el tratamiento que se le da hoy en día a los residuos urbanos. Todo esto, en conjunto hace de esta investigación, una alternativa de vanguardia al servicio de la farmacología donde estaríamos a la puerta de una generación de producto medicinales naturales. 1.6.- Delimitación. La presente investigación se realizará en la localidad de Los Cortijos, Municipio San Francisco del Estado Zulia; utilizando mangos nativos de esta comunidad en el tiempo comprendido desde Octubre de 2011 hasta Abril de 2012.
  • 10. MARCO TEÓRICO 2.1.- Antecedentes de la Investigación. La primera vez que se intento sintetizar aminoácidos fue en el año (2000), por Fieders a partir de la corteza de la uva, aprovechando para ello los diferentes tipos de lucidos que posee. De igual modo, en 2001 varios investigadores de la Universidad de Pensilvania publicaron un articulo llamado “Proteínas Sintéticas”, en el desarrollo una proteína semisintética mediante la fermentación de uvas injertables. En este trabajo se verifico la importancia de controlar el proceso de fermentación para obtener compuestos con buen rendimiento (Cantidad) y de excelente calidad. Por otra parte, en la ciudad de México en el año (2003), González aisló unas proteínas y tres aminoácidos al realizar cromatografía en una nuez originaria del desierto de Yucatán. Aunque estos compuestos eran inestables se evidencia una novedad técnica para la obtención y diversificación del compuesto mediante la técnica de la post-fermentación. En el mismo orden de ideas, en 2005 un grupo venezolano-argentino encabezado por Gonzales y Viera, considerando la posibilidad de obtener aminoácidos, probaron con varias uvas y frutas tropicales pero solo se tuvo éxito con la papaya y el cacao. Sin embargo se verificó una vía de síntesis que permitió considerar la obtención de aminoácidos a partir de compuestos derivados del almidón. No obstante, González (2006) utilizó el cacao buscando mejorar los rendimientos en la producción de aminoácidos, pero sin éxito. Sin embargo con esto motivó las pruebas que entre 2007 y 2008 incluyeron al mango con el que los resultados fueron positivos. Este precedente permitió esta fruta en diversos trabajos que incluía procesos de fermentación y post-fermentación. Por su parte González, Huerta y Vivas (2009) destilaron etanol a partir de la fermentación espontánea de mango, en consideración a las altas concentraciones de etileno que posee esta fruta. El etanol puede fermentarse y auto regularse por lo que puede entenderse que puede dar el lugar o la formación de aminoácidos. Así mismo, Granadillo (2010) publicó: “Caracterización de los aminoácidos producido a partir de la fermentación”; en este trabajo se evaluaron diferentes productos como: Mango, Papaya, Papa y Maíz, donde la constitución de aminoácidos era similar. Esto evidenció la relación de los aminoácidos con la síntesis de otros compuestos y que lo mismo puede ser obtenido de casi cualquier vegetal. Por las consideraciones anteriores, Vivas (2011) realizo un trabajo de investigación titulado “Obtención de un polímero biodegradable a partir del mango”. En este trabajo aisló varios productos del mango incluido el polietileno y otros sub-productos estables. Los productos estables garantizan la producción derivados como la amina y aminoácidos fácilmente degradable en otro sistema.
  • 11. 2.2.- Bases teóricas: 2.2.1.- Taxonomía del mango: Según Gómez, (2007), este fruto está clasificado de la siguiente manera:  División: Angiospermaea  Clase: Dicotiledónea  Sub Clase: Archyelamydeae  Orden: Sapindales.  Sub Orden: Anacardineae  Familia: Anacardiaceae  Tribu: Anacardieae  Género : Mangifera  Sub Genero: Limus (Marchand) Kost  Especie: Mangifera indica L 2.2.2.- El mango. Según Fernández (1998), “Mangifera indica L” es un frutal de amplia diseminación y consumo a nivel nacional. Es un árbol de tamaño mediano de 10 a 30 mts de altura, tronco más o menos recto, de corteza color gris café, con grietas longitudinales o surcos reticulados poco profundos que a veces contienen góticas de resina, hojas alternas, sub-coriáceas de color verde oscuro brillante por el haz y verde amarillento por el envés. 2.2.3.- Alfa aminoácidos. Según Gonzalo (1999), son sustancias obtenidas por la combinación de ácidos orgánicos esenciales y proteínas, los cuales sirven para la formación de tejidos y otras reacciones vitales en los seres humanos. Un aminoácido típico se puede obtener en condiciones de laboratorios combinando azucares con diversos tipos de carbohidratos.
  • 12. 2.2.4- Alfa Aminoácidos del mango Para Handbook (2008), de Farmacología en la Universidad de Pennsylvania, el mango contiene leucina, lisina, metionina, prolina, serina, tirosina, teonina, triptófano y valina; éstos en conjunto constituyen el grupo de los alfa aminoácidos que conforman un complejo que se agrupa para dar lugar a los denominados alfa aminoácidos esenciales. Estos se combinan para formar proteínas. Las proteínas del mango son usadas por nuestro organismo para formar nuestros músculos y también son necesarias para mantener la masa muscular. El cuadro adjunto muestra el contenido específico de estos nutrientes cuantificados a partir de 100 gramos de fruta fresca. 2.2.5- Fármacos. Según Larousse (2009, tomo II, pág. 305) es un productos medicinales específicos para tratamientos localizados de algún trastorno orgánico incluyendo complementos dietéticos y vitaminas. 2.2.6- Proteínas. Según Lexus (2000, tomo1, pag:337), son biomoléculas formadas por cadenas lineales de aminoácidos, las cuales por sus propiedades físico-químicas; se pueden clasificar en proteínas simples (holoproteidos), que por hidrólisis dan solo aminoácidos o sus derivados; proteínas conjugadas (heteroproteidos), que por hidrólisis dan aminoácidos acompañados de sustancias diversas, y proteínas derivadas, sustancias formadas por desnaturalización y desdoblamiento de las anteriores. Las proteínas son indispensables para la vida, sobre todo por su función plástica (constituyen el 80% del protoplasma deshidratado de toda célula), pero también por sus funciones biorreguladora (forma parte de las enzimas) y de defensa (los anticuerpos son proteínas).
  • 13. 2.2.7.- Etileno. Según Villegas (2001), es un compuesto químico orgánico formado por dos átomos de carbono enlazados mediante un doble enlace. Es uno de los productos químicos más importantes de la industria química. Se halla de forma natural en las plantas. A partir del etileno por fermentación se obtiene el alcohol y por post- fermentación amina y aminoácidos. CH2=CH2  CH2=CH* CH3-CH2-OH ETENO ETILENO FERMENTACION PROCESO BIOLOGICO (OXIDACION) PROCESO QUIMICO CH3 NH2 AMINA AMINOACIDOS 2.2.8. Pasta de mango. A. Vivas (Usos del mango), preparado especial a partir del mango tratado con acido acético y gluten de trigo. 2.3.- Sistemas de variables: Variable Independiente: El mango. Variable Dependiente: Obtención de alfa Aminoácidos. 2.3.1.- Definición conceptual de variables: Variable Independiente: Según Fernández (1998), el mango es un fruto rico en carbohidratos y azucares; tiene como particularidad la reacción que puede tener con factores biológicos y químicos por lo que produce fácilmente otras sustancias. Variable Dependiente: Según Gonzalo (1999), los afa aminoácidos son las sustancias producidas que se van a obtener por descomposición y recombinación de los compuestos químicos propios del mango.
  • 14. 2.3.2.- Definición operacional de las variables: Variable independiente: el mango, este fruto es muy reactivo al poseer diversos tipos de sustancias químicas puede obtener mediante recombinación molecular diversos productos entre los cuales están los alfa aminoácidos. Variable dependiente: los alfa aminoácidos, son sustancias que se pueden obtener por descomposición de material orgánico en condiciones anaeróbicas y también por síntesis complejas a partir de la destilación de caldo de cultivo diversos. 2.3.3.- Cuadro operacional de variables. Objetivo General: Obtener alfa aminoácidos y otros fármacos a través de la refinación de pasta de mango. Objetivos Variable Dimensiones Indicadores Items Específicos 1.- Sintetizar alfa Preparación y V.I.: El mango Estabilidad y aminoácidos obtención de homogeneidad a partir de la una pasta a V.D.: Los alfa de los refinación de partir del mango aminoácidos compuestos la pasta de y reacción por obtenidos. obtenidos. mango. reflujo. Valores 2.- Identificar V.I.: El mango. específicos de los productos Evaluación y Ph, punto de obtenidos análisis físico- V.D.: Los alfa fusión y junto a los químicos aminoácidos espectro alfa específicos. obtenidos. infrarrojo aminoácidos. característico. Valores específicos y 3.- Evaluar la V.I.: El mango. espectro calidad y Análisis físico- infrarrojo efectividad de químicos V.D.: Los alfa característico. los productos estándar de aminoácidos Además de en la síntesis. calidad. obtenidos. efecto farmacológico. 2.3.4.- Hipótesis: Considerando la capacidad reactiva del mango y sus descomposiciones en diversos compuestos orgánicos, en virtud además de los numerosos estudios realizados sobre este fruto y constituyendo los alfa aminoácidos parte de los compuestos orgánicos que contiene el mango se puede obtener aminoácidos
  • 15. específicos de excelente calidad y alto grado de pureza; desde luego logrando estabilizar la reactividad de las moléculas del mango. El producto obtenido además de buenos parámetros de calidad será estable y con buenos resultados en cuanto a su efecto farmacológico. 2.4.-Definición de términos básicos  PH: Según A. Vivas (2009), es un valor que se usa para indicar la acidez o alcalinidad de una sustancia. La escala de PH es una escala logarítmica de crecimiento exponencial oscila entre los valores de 0 (mas acido) y 14 (más básico), 7 es neutro; “el factor PH” se define como el potencial de hidrogeno calculado como el logaritmo de la actividad o concentración molar de los iones hidrogeno (H + O hidrogeno H30+).PH=-log[H].  Acidez titulable o normalidad del acido: Según A. Vivas (2009), se determina por titulación o valoración, mediante una base de normalidad conocida. En otras palabras la acidez titulable se puede determinar añadiendo suficiente álcali de normalidad conocida hasta neutralizar toda la acidez o llevar el PH al punto neutro. La acidez titulable no se puede predecir a partir de la concentración actual de iones de hidrogeno que se determina con el PH.  2.4.3.- Grados Brix: Según Suarez (2010), miden la cantidad de sólidos solubles presentes en un jugo o pulpa expresados en porcentaje de sacarosa. Los sólidos soluble s están compuestos por los azucares, ácidos, sales y demás compuestos solubles en agua presente en los solubles en la célula de una fruta. Se determinan empleando un refractómetro calibrado y a 20 ºC. si la pulpa o jugo se halla a diferente temperatura se podrá realizar un ajuste ºBrix, según la temperatura en la que se realiza la lectura.  2.4.4.- Variedad: Según Suarez (2010), cada uno de los grupos en que se dividen algunas especies de plantas y animales y que se distinguen entre sí por ciertos caracteres que se subsisten por la herencia.
  • 16. MARCO METODOLOGICO 3.1. TIPO DE INVESTIGACIÓN. La presente investigación es experimental, pues en ella se plantea la extracción o síntesis de un compuesto con propiedades particulares, utilizando para ello técnicas y procedimientos propios de la química farmacéutica. Para este propósito se sigue una fundamentación con base a principios de síntesis orgánica y por ello se rige por la demostración de leyes propias de esta área del conocimiento; logrando de esta manera verificar la hipótesis planteada. Es además un trabajo de campo, pues supone la recolección de muestra como un indicador de variable, esto es el mango (mangifera indica) en función de esto se deberá el éxito del producto a elaborar en este trabajo. En líneas generales este trabajo se fundamenta en la extracción, purificación y tratamiento químico de componentes del mango, específicamente los alfa aminoácidos, en lo cual, nos apoyaremos en condensación de estos componentes, siguiendo un procedimiento que a la vez, es de inventiva propia y ha sido estandarizado en este mismo estudio. 3. 2. DISEÑO DE LA INVESTIGACIÓN. Por tratarse de un trabajo experimental fundamentado en las ciencias puras, cuenta con una metodología propia, es decir un diseño en donde los procedimientos utilizados son inéditos, claro está, cumpliendo los prerrequisitos que están contenidos en los fundamentos teóricos que propone la bibliografía en cuanto a la síntesis, extracción y purificación de compuestos. Dicha metodología se describe más adelante en este mismo capítulo. 3.3. POBLACIÓN. La población de mangifera indica en el sector los cortijos, mil (1000) plantas, de tipología diversa, todos nativos de la región Zuliana. 3.3.1. MUESTRA. El tratamiento de la muestra es intencional sistemático, pues se corresponde a una selección de tipo con características muy particulares tal que a partir de la población de mangifera indica señalada, se realiza un muestreo de veinte (20) plantas de manera aleatoria, de cada una se toman diez (10) piezas de fruto: cinco (5) mango maduro y cinco (5) mango biche.
  • 17. 3.4. TECNICAS E INSTRUMENTOS DE RECOLECCION DE DATOS Por constituirse, el presente trabajo bajo un esquema experimental puro, Según Chávez (1992), el instrumento de recolección de datos es la observación; esta se realiza mediante el seguimiento y registro de cada una de las etapas del proceso; utilizando la tabulación, la recolección de información y la interpretación de análisis y rutinas de laboratorio. 3.5. METODOLOGIA EXPERIMENTAL. 3.5.1. TRATAMIENTO PRIMARIO DEL MANGO. Se selecciona un aproximado a 50 kilogramos de mango maduro y 30 kilogramos de mango en proceso intermedio (biche). Seguidamente se procede a remover la corteza del fruto (de los dos grupos del mismo), luego se mezcla y digieren con 10 litros de solución al 5% de acido acético (CH3COoH) mediante procedimiento mecánico hasta lograr una pasta, lo más homogénea posible. 3.5.2. AISLAMIENTO Y SEPARACION DE FASES. Luego del procedimiento anterior, se deja reposar la pasta por dos días; luego se toma esta y se somete a la acción de microondas por espacio de cinco (5) minutos, el contenido se deja reposar hasta la aparición de una sustancia liquida homogénea (contiene los alfa aminoácidos), esta debe ser separada del remanente el cual puede ser utilizado para otros propósitos. 3.5.3. EXTRACCION DE LOS ALFA AMINOACIDOS. Junto con los alfa aminoácidos coexisten en la solución algunos carbohidratos y azucares que son eliminados por purificación, esta consiste en una destilación por arrastre con vapor a 80 ºC, el contenido residual contiene los alfa aminoácidos. Este se somete a cristalización mediante la deshidratación en una cámara de secado. 3.5.4. CARACTERIZACIÓN DE LOS ALFA AMINOACIDOS Y PRUEBA DE PUREZA. Se somete una muestra de material obtenido a la acción de espectroscopia infrarroja (IR) para identificar el producto y evaluar su pureza; el espectro obtenido debe ser idéntico al patrón establecido en la bibliografía correspondiente. 3.5.5. PRUEBAS DE CALIDAD DEL PRODUCTO OBTENIDO POLIMERO. El material es analizado según la normativa ASTM COVENIN; para ello es sometido a pruebas estándar de punto de fusión, formación de aminas y solubilidad en acido ACETICO AL 5%.
  • 18. 3.5.5.1. PUNTO FUSION. Para realizarse esta prueba se toman unos cinco gramos de muestra y se colocan en una tubo capilar donde se somete a la acción de temperatura, esta verificación es de suma importancia por lo que el procedimiento debe realzarse cinco veces (5) y todos los resultados deben coincidir. 3.5.5.2. FORMACION DE AMINAS. Se calienta una muestra de 20 gramos a 60 °C y se somete a acción de una solución de cloruro de amonio concentrado, dejar enfriar y observar la aparición de un precipitado azul característico, esta es la amina formada. 3.5.5.3. SOLUBILIDAD EN ACIDO ACETICO AL 5 %. Esta prueba cosiste en verificar la acción del acido acético diluido sobre muestras aleatorias de alfa aminoácidos en porciones de 250 miligramos, 500 miligramos, un gramo y cinco gramos de producto en un (1) mililitro de solución. Para esto se toman las porciones descritas y se llevan a tubos de ensayo con el acido, la buena absorción y ausencia de residuos garantiza que este es de buena digestión y puede ser metabolizado por el organismo humano de allí la importancia de esta prueba
  • 19. RESULTADOS Y DISCUSIÓN 4.1. TRATAMIENTO PRIMARIO DEL MANGO El procedimiento inicial permitió la obtención de 25 kilogramos de pasta de mango, que luego de un proceso mecánico; digestión en acido acético y maceración permitieron obtener un complejo homogéneo en suspensión de mango. La secuencia del proceso se puede verificar en las imágenes 1 a la 3 anexas. Imagen 1. Apariencia inicial de la mezcla Imagen 2. Inicio de la reacción Imagen 3 En la imagen se observa una mezcla homogénea de mango en suspensión. 4.2. AISLAMIENTO Y SEPARACION DE FASES. Cumplido el proceso de condensación inicial se pudo verificar la formación en solución de una fase acuosa o soluble en agua y otra orgánica (esta contiene los alfa aminoácidos y azucares) las cuales se dejan reposar por quince días para su separación final. Esta es sometida a una destilación por arrastre con vapor tal como se muestra en la figura 4, en la cual se utilizo una disolución con cáscaras del mango para favorecer la concentración acida esencial del mango.
  • 20. Figura 4. Destilación por arrastre con vapor para separar las últimas fracciones del mango, previo a la obtención de aminoácidos. 4.3. CARACTERIZACIÓN DEL ALFA AMINOACIDO. Para caracterizar el compuesto obtenido se le realizo un espectro infrarrojo directo sobre la pasta de mango resultando la información espectroscópica de la figura 4. la cual indica inequívocamente la presencia de los aminoácidos esenciales del mango. Imagen 5. Espectro IR de la muestra obtenido por condensación del mango, realizado en un espectrofotómetro Marca Philips, bajo el auspicio del C.E.S.U. de la Universidad del Zulia.
  • 21. 4.4 PRUEBAS DE CALIDAD La suspensión obtenida que se observa en las figuras 6 y 7, fue sometida a la verificación del punto de fusión el cual resulto ser de 84 ºC y el valor fue repetitivo en las pruebas lo que garantiza la precisión del ensayo, además se puede apreciar su solubilidad absoluta en acido acético lo cual garantiza que puede ser metabolizado y finalmente la formación de aminas (color azul) que se aprecia en la figura 8. garantizan un producto de buena calidad y excelente propiedades farmacológicas. Figuras 6 y 7. Se observa a la izquierda el producto obtenido por destilación de color blanco el cual fue recristalizado y purificado obteniéndose el producto de la derecha. Figura 8. Prueba de verificación de aminas resultó el color azul característico.
  • 22. CONCLUSIONES  Es posible obtener alfa aminoácidos aprovechables a partir del mango tropical (mangifera indica), de hecho estos compuestos en la especie tratada resultan abundantes.  El proceso de condensación inherente propia del mango es completamente espontáneo, para lograr dicho propósito no fue necesario utilizar condiciones drásticas de reacción ni catalizadores.  Debido a que el producto obtenido tiene como característica física que es un polvo ligero, puede ser utilizado en capsulas, suspensión para soluciones y comprimidos.  El procedimiento por el cual se consiguió extraer el producto resulto ser sencillo y de bajo costo de manufactura, debido a que la materia prima es abundante y accesible  Aunque los rendimientos, es decir la cantidad de alfa aminoácidos es limitada se estima que esto se debe a que las condiciones de reacción no fueron controladas, pueden ser mejoradas en función de la reacción.  Las metodologías para obtener fármacos a partir de extractos naturales pueden rediseñarse de acuerdo a las necesidades que se susciten en la marcha, en otras palabras pueden ser optimizadas cuando así sea requerido.
  • 23. RECOMENDACIONES  En caso de que se desee profundizar en el estudio síntesis orgánica de fármacos a partir del mango debería utilizarse como patrón de referencia los resultados aquí obtenidos, utilizando técnicas convencionales para mejorar rendimientos.  Dado que se obtienen varios alfa aminoácidos se podría profundizar en la obtención de una nueva generación de productos nutricionales.  En el caso de extracción de productos naturales nunca debe darse por sentado cualquier resultado, pues en el entorno natural se hace necesario estudiar la evolución que puede ocurrir en las especies y las variaciones que perciben estos recursos naturales en función del tiempo y de los cambios ambientales.
  • 24. Literatura Citada 1) Fisher “Organic Struture” 1990 2) Karl Lewis “Basic Structure Chemical Stutding” 1995. 3) H. Boylt “Química Orgánica Avanzada” 1978 4) H. Merk “Handbook de Química Moderna” 1986. 5) J.J. Works “New Structures in Chemical Industries” 2008. 6) Skoog and Leary “Química Analítica Instrumental” 1998. 7) R. Fernández “Química General Moderna Actualizada” 1998. 8) Feders y colaboradores. “Síntesis y Caracterización de Moléculas a partir de Biomasas”. 2002. 9) Rodríguez y L. González “Fermentación y Otros Productos del Mango” 2009. 10) L. Wososk “The New Structure of Macromolec Visión”. 2006.