1. LINFOCITOS
Técnicas de tinción
Realizado por: Cristina Barón Lozano

2. ¿Qué son?

Células leucocitarias no granulocíticas, aunque algunos
presentan gránulos en baja concentración.

Su tamaño es menor que el resto de los leucocitos (entre 7 y 15
μm)

Representan aproximadamente del 25 al 35% de los glóbulos
blancos.

Presentan un gran núcleo esférico y escaso citoplasma.

Son células circulantes del sistema inmunitario encargadas
principalmente de la inmunidad específica y adquirida.

Citoplasma: Contiene algunas mitocondrias , ribosomas libres y
un pequeño aparato de Golgi.

Membrana plasmática: Tienen receptores para antígenos
específicos y, por tanto, pueden encargarse de la producción de
anticuerpos y de la destrucción de células anormales

Núcleo: Esférico, excéntrico, de tamaño aproximado al de un

3. TIPOS Y SUBTIPOS:
LINFOCITOS B
LINFOCITOS T
- Maduran en la - Maduran en el timo.
médula ósea.
- Mediadores de la inmunidad
- Sintetizan Acs celular
Cooperadores
CD4
LINFOCITOS NULOS
“NK”
- Destrucción células
tumorales o
infectadas por virus.
Citotóxicos CD8
Destrucción de
cels infectadas

4. TINCIONES:
1.
TINCIÓN DE WRIGHT:

Diferencia bien la morfología de los
linfocitos, tiñendo el núcleo de púrpura
y citoplasma levemente azulado.

Los agrupamientos de ácidos
nucleicos, las proteínas de los núcleos
celulares y el citoplasma inmaduro
reactivo, fijan el azur B, colorante
básico.

La eosina Y, colorante ácido, se fija a
las proteínas básicas.

5. Reactivos:

Solución de eosina-azul de metileno según Wright

Solución tampón pH 7,2

Aceite de inmersión
El colorante utilizado es una solución de eosina y una mezcla de
azul de metileno (del 50% al 75%) y azur B (del 10% al 25%) junto
con otros derivados del alcohol metílico.

6. 2.
TINCIÓN MAY GRÜNWALD-GIEMSA
TINCIÓN MAY GRÜNWALDGIEMSA

Los núcleos de los linfocitos grandes
aparecen de color púrpura.

Linfocitos B (productores de
inmunoglobulinas) y células
inmaduras, presentan un citoplasma
de color azul intenso, debido a su gran
producción de ARN.

La solución May Grünwald tiñe las
estructuras acidófilas.

La solución Giemsa, tiñe el citoplasma
de los linfocitos y la cromatina de los
núcleos.

7. Reactivos y procedimiento:
Combina los principios de coloración de May Grunwald y Giemsa,
usando dos soluciones colorantes:

Solución May Grunwald: Contiene eosina y azul de metileno,
disueltos en metanol

Solución Giemsa: Contiene eosina, azul de metileno y productos
de oxidación de este segundo compuesto.
1º Sumergir frotis en solución May Grunwald – 2minutos
2º H2Odestilada – 1minuto
3º Escurrir
4º Sumergir frotis en solución Giemsa – 15minutos
5º Escurrir y secar

8. Tinciones citoquímicas:
Otras técnicas que no nos son posible realizar en nuestro laboratorio, nos
permite la diferenciación entre los diferentes tipos de linfocitos por medio de
técnicas tintoriales basadas en la identificación de enzimas y anticuerpos
específicos.

Tinción de Feulgen

PAS (10-15% presentan gránulos PAS +)

Peroxidasa

Fosfata ácida leucocitaria

Esterasas

9. 2º Anatomía Patológica y Citología