Este documento describe un procedimiento de laboratorio para determinar los niveles de bilirrubina total, directa e indirecta en sangre. Explica que la bilirrubina es un subproducto de la degradación de la hemoglobina y que puede estar elevada en diversas afecciones hepáticas o que impliquen destrucción de glóbulos rojos. El método utiliza reacciones de diazotación para cuantificar cada fracción de bilirrubina de forma separada y así diagnosticar posibles problemas hepáticos o hematológicos.

1. Pontificia Universidad Católica del EcuadorLaboratorio ClínicoPaúl VacaDamián Vargas

2. ObjetivosDeterminar los valores de bilirrubina directa, total e indirecta en suero sanguíneo.Diferenciar los tipos de bilirrubina según su solubilidad y mediante la reacción de diazotación.

3. ¿Qué es la bilirrubina?La bilirrubina es un pigmento amarillento que se encuentra en la bilis, un líquido producido por el hígado.

4. Determinación de bilirrubina total y directaLa bilirrubina es un producto derivado del metabolismo de la hemoglobina en el Sistema Retículo Endotelial.El 80-85% de la bilirrubina se origina de la degradación de la hemoglobina con un 15-20% que es derivada del citocromo, mioglobina y catalasas.Los hematíes al degradarse liberan la hemoglobina que es metabolizada a dos moléculas el grupo hemo y el grupo globina, el grupo hemo se transforma en biliverdina y esta en bilirrubina a la cual se le llama no conjugada o indirecta.

5. La bilirrubina no conjugada se liga a la albúmina del plasmaAl pasar por el hígado esta bilirrubina se conjuga con ácido glucurónido transformándose en bilirrubina conjugada o directa. Los ensayo de bilirrubina son posible para evaluar el grado de severidad de los síntomas clínicos de la ictericia así como para evaluar la función y el estado del hígado.

6. ¿Para qué se realiza este estudio?Se utiliza para evaluar problemas o alteraciones del hígado y vías biliares.En los pacientes con ictericia se mide la bilirrubina total la directa y la indirecta. Cuando la fracción conjugada o directa está elevada, más de un 50% de la bilirrubina total, es que hay un problema en la vía biliar por cálculos, inflamación o tumores.Cuando la bilirrubina directa o conjugada es menor del 20%, la hipebilirubinemia es del tipo indirecto o no conjugada y puede ser debido a hepatitis ó a un aumento de destrucción de hematíes (hemólisis).

7. Resultados anormalesIctericiaEs una coloración amarillenta en la piel, las membranas mucosas o los ojos.Ocurre cuando la bilirrubina se acumula en la sangre a un nivel mayor a 2.5 mg/dL aproximadamente.El pigmento amarillo proviene de la bilirrubina, un subproducto de los glóbulos rojos viejos. La ictericia también es un síntoma de otros trastornos.

9. El aumento de la bilirrubina indirecta o bilirrubina total pueden ser un signo de:

10. Síndrome de Crigler-NajjarSe caracteriza por ictericia y daño cerebral y es ocasionada por deficiencia de la glucuronil transferasa en el hígado lo que produce un defecto en la conjugación de la bilirrubina.

11. Eritoblastosis fetal También llamada enfermedad hemolítica del recién nacido es un trastorno sanguíneo en la que una madre produce anticuerpos durante el embarazo que atacan los glóbulos rojos de su propio feto, cuando la madre y el bebé tienen tipos de sangre diferentes

12. Enfermedad de GilbertEs un trastorno común transmitido de padres a hijos. Dicho trastorno afecta la forma como la bilirrubina es procesada por el hígado y causa ictericia.

13. Anemia hemolíticaLa anemia hemolítica es un grupo de trastornos hemolíticos (sea intravascular como extravascular), que causan la disminución de la masa de glóbulos rojos sanguíneos.

14. Hepatitis Es la hinchazón e inflamación del hígado. No es una afección, pero con frecuencia se utiliza para referirse a una infección viral del hígado.

15. Anemia drepanocíticaEs una enfermedad que se transmite de padres a hijos y en la cual los glóbulos rojos presentan una forma semilunar anormal.

16. Reacción a una transfusiónEs un problema que ocurre después de que un paciente recibe una transfusión de sangre. El propio sistema inmunitario del paciente destruye los glóbulos rojos que se le administraron.

17. Anemia perniciosaEs una disminución en los glóbulos rojos que ocurre cuando el cuerpo no puede absorber apropiadamente la vitamina B12 del tubo digestivo. Esta vitamina es necesaria para el desarrollo apropiado de los glóbulos rojos.

18. El aumento de la bilirrubina directa puede indicar:

19. Obstrucción de las vías biliaresEs un bloqueo en los conductos que transportan la bilis desde el hígado hasta la vesícula biliar y el intestino delgado.

20. CirrosisEs la cicatrización y el funcionamiento deficiente del hígado: la fase final de la enfermedad hepática crónica.

21. Síndrome de Dubin-JohnsonEs un trastorno que se transmite de padres a hijos (hereditario) en el cual una persona presenta ictericia leve a lo largo de toda la vida.

22. Colestasis intrahepáticaEs cualquier afección en la que se obstruye el flujo de la bilis del hígado.

23. Fundamento Del MétodoEn presencia del acelerador cafeína, la bilirrubina total se acopla con el ácido sulfónico para formar un complejo azobilirrubinado rojo (la intensidad del color es proporcional a la concentración de la bilirrubina)La determinación de la bilirrubina directa es desarrollada sin aditivo de cafeína.La adición de tartrato alcalino causa una transformación del complejo rojo de la azobilirrubina a un complejo azul Las lecturas de las absorvancias son entre 546-578 nm.

24. Esquema de la reacción

25. Materiales y reactivos

27. Esquema de pipeteo

29. Cálculos:Bilirrubina total: C (mg/dl)= 10.8 x ∆A bilirrubina totalBilirrubina directa: C (mg/dl)= 13.7 x ∆A bilirrubina directaBilirrubina indirecta: BI= Bilirrubina total (BT) - bilirrubina directa (BD)

31. Resultados:Bilirrubina total: 10.8 x 0,070 = 0,75 mg/dlBilirrubina directa: 13.7 x 0,032 = 0,43 mg/dlBilirrubina indirecta: 0,75 mg/dl - 0,43 mg/dl = 0,32mg/dl

32. Valores de referencia:Bilirrubina total: hasta 1.0 mg/dlBilirrubina directa: hasta 0.25 mg/dl

33. BIBLIOGRAFIA:http://es.scribd.com/doc/8510425/Tecnica-de-bilirrubinahttp://es.scribd.com/doc/3596192/DETERMINACION-DE-BILIRRUBINA-EN-SUEROhttp://www.tuotromedico.com/temas/bilirrubina.htmhttp://www.medlineplus.com

34. Gracias Por Su Atención