1) El estudio investigó la presencia de mutaciones en los genes pvdhfr/pvdhps asociadas con resistencia a sulfadoxina/pirimetamina en aislamientos de Plasmodium vivax de Venezuela. 2) Se analizaron 100 aislamientos de P. vivax de los estados Bolívar y Sucre, encontrando varias mutaciones asociadas con resistencia a sulfadoxina/pirimetamina. 3) Los resultados sugieren que debido a la presencia de estas mutaciones, la combinación sulfadoxina-pirimetamina no sería una buena

1. Pesquisa
de
mutaciones
puntuales
en
los
genes
pvdhfr/pvdhps
relacionadas
con
resistencia
a
sulfadoxina/pirimetamina
en
aislados
venezolanos
de
Plasmodium
vivax
Mariana
Hidalgo
&
Hilda
A.
Pérez
Laboratorio
de
Inmunoparasitología,
Centro
de
Microbiología
y
Biología
Celular,
Ins:tuto
Venezolano
de
Inves:gaciones
Cien>ficas
mhidalgo@ivic.gob.ve
INTRODUCCIÓN
Aproximadamente
40%
de
la
población
mundial
está
en
situación
de
riesgo
de
malaria
por
Plasmodium
vivax.
Este
parásito
provoca
la
mayoría
de
los
casos
de
B
malaria
que
son
registrados
en
Asia,
America
del
Sur
y
Mesoamérica
y
el
Pacífico
Occidental.
Asimismo,
más
de
80%
de
los
casos
de
malaria
diagnos:cados
en
Venezuela
se
deben
a
P.
vivax.
Hasta
la
década
de
los
años
80,
la
cloroquina
(CQ)
había
sido
el
tratamiento
de
primera
línea
para
eliminar
los
estadios
eritrocí:cos
de
P.
vivax.
Sin
embargo,
a
par:r
de
1989
hubo
informes
de
casos
de
P.
vivax
resistente
a
cloroquina
(Pv-­‐CQr).
Desde
entonces,
los
reportes
acerca
de
la
presencia
de
Pv-­‐CQr
en
Asia,
Nueva
Guinea
han
aumentado
y
hay
mención
de
algunos
casos
en
América
La:na.
La
expansión
de
Pv-­‐CQr
en
el
mundo
supone
un
vacío
terapéu:co
que
obliga
conocer
y
evaluar
otras
opciones
terapéu:cas.
Una
opción
es
la
combinación
sulfadoxina-­‐pirimetamina
(S/P)
que
inhibe
dos
enzimas
de
la
biosíntesis
del
ácido
fólico
del
parásito:
la
dihidropteroato
sintetasa
(DHPS)
y
la
dihidrofolato
reductasa
(DHFR).
A
finales
de
los
70,
la
combinación
S/P
fue
u:lizada
en
muchos
países
para
el
tratamiento
de
la
malaria
por
P.
falciparum.
Pero,
la
expansión
progresiva
de
P.
falciparum
resistente
a
los
an:palúdicos
ha
complicado
el
tratamiento
de
la
malaria
y
actualmente
aislados
de
P.
falciparum
y
P.
vivax
resistentes
a
S/P
RESULTADOS
circulan
en
Asia,
América
del
Sur
y
África.
Estudios
clínicos
y
epidemiológicos
han
demostrado
que
la
resistencia
de
los
² La
prevalencia
de
los
geno:pos
mutados
58R
y
117N
del
gen
pv-­‐dhfr
fue
13
y
parásitos
Plasmodium
a
la
combinación
S/P
resulta
de
mutaciones
puntuales
15%,
respec:vamente.
(Figura
2)
específicas
en
los
genes
dhps
y
dhfr
del
parásito,
las
cuales,
causan
alteraciones
en
residuos
del
si:o
ac:vo
de
dichas
enzimas,
que
reduce
la
afinidad
por
la
² Los
geno:pos
mutados
383G
y
553G
del
gen
pvdhfr
se
encontraron
en
10
y
droga.
La
búsqueda
de
estas
mutaciones
en
muestras
de
sangre
parasitada
por
P.
7%,
de
la
muestra
total
(Figura
3).
vivax
colectadas
en
regiones
con
transmisión
de
P.
vivax
en
Venezuela,
deviene
en
un
recurso
valioso
para
explorar
la
resistencia
de
P.
vivax
resistente
a
S/P
y
² El
mayor
número
de
mutaciones
acumuladas
relevantes
a
la
resistencia
a
S/P
determinar
si
esta
combinación
resulta
una
opción
terapéu:ca
adecuada
en
la
estuvo
en
los
aislados
del
estado
Bolívar.
eventualidad
de
ingreso
de
Pv-­‐CQr
el
área
endémica
de
Venezuela.
Figura
2.
Determinación
de
mutaciones
puntuales
en
pv-­‐dhfr
OBJETIVO
Investigar la presencia de mutaciones puntuales asociadas con Codón 58 Codón 117
resistencia a S/P en los genes pv-dhps y pv-dhfr, en aislados de P. vivax
provenientes de los estados Sucre y Bolívar.
MATERIALES
Y
MÉTODOS
² Se obtuvieron 100 aislados de P. vivax, provenientes de los estados
Bolívar (n=50) y Sucre (n=50) de pacientes sintomáticos y con
diagnóstico microscópico y molecular positivo para P. vivax
exclusivamente.
² Se realizó un análisis de restricción alelo-específico (ASRA) para Figura
3.
Determinación
de
mutaciones
puntuales
en
pv-­‐dhps
determinar mutaciones puntuales asociadas a la resistencia a S/P en
los genes pv-dhps (codones 383 y 553) y pv-dhfr (codones 117 y 58) Codón 58 Codón 117
(Figura 1)
Figura
1.
Representación
esquemáTca
del
ensayo
ASRA
para
determinar
mutaciones
puntuales
en
pv-­‐dhps
(A)
y
pv-­‐dhfr
(B)
A
CONCLUSIÓN
Las mutaciones puntuales en los genes dhfr (codones: 58, 117) y dhps
(codones: 383 y 553), caracterizan la resistencia a S/P. Por lo tanto, estos
resultados sugieren que en la eventualidad del ingreso de Pv-CQr a
Venezuela, la combinación S/P no sería una opción terapéutica.
REFERENCIAS
Antimicrob. Agents Chemother. 2003, 47(5):1514.
Antimicrob. Agents Chemother. 2005, 49(10):439.