Este documento describe un medio de cultivo selectivo llamado agar sulfito de bismuto que se usa para aislar y diferenciar Salmonella typhi y otras Salmonellas a partir de muestras. Contiene nutrientes y sustancias que permiten el crecimiento de Salmonellas mientras inhiben a otros microorganismos. Las colonias de Salmonella typhi aparecen con un centro y halo negros grisáceos debido a la reducción de los iones de bismuto. El medio se presenta en varias cantidades y formatos y se debe proteger de la l
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DIBICO S.A. DE C.V. MEXICO, D.F. 3
AGAR SULFITO DE BISMUTO
USO
Medio selectivo para el aislamiento y diferenciación de Salmonella typhi y otras Salmonellas a partir de diversas muestras.
PRINCIPIO
La peptona, el extracto de carne y la dextrosa proporcionan los nutrientes necesarios para el crecimiento de los microorganismos.
El sulfato ferroso actúa como indicador en la producción de sulfuro de hidrógeno que se manifiesta en el centro de la colonia por un
precipitado negro y un halo negro grisáceo con brillo metálico por la reducción de los iones bismuto en presencia del sulfuro de
hidrógeno.
El sulfito de bismuto y el verde brillante inhiben considerablemente el crecimiento de bacterias contaminantes.
Sembrar la superficie del medio de cultivo con el material de ensayo por estría cruzada. Incubar 24 - 48 h a 35ºC.
FORMULA EN GRAMOS POR LITRO DE AGUA DESTILADA
Agar 20.0 Indicador de sulfito de bismuto 8.0
Dextrosa 5.0 Peptona especial 10.0
Extracto de carne 5.0 Sulfato ferroso 0.3
Fosfato disódico 4.0 Verde brillante 0.025
pH 7.6 ± 0.2
PREPARACION
Rehidratar 52 g del medio en un litro de agua destilada. Reposar 10 a 15 minutos. Calentar agitando frecuentemente hasta el
punto de ebullición durante 1 minuto para disolverlo por completo. NO calentarse por tiempo prolongado y evitar así que pierda su
selectividad. NO ESTERILIZAR EN AUTOCLAVE. Enfriar aproximadamente a 45ºC. El precipitado característico del medio se debe
dispersar uniformemente durante el vaciado en las cajas de Petri estériles. Una vez solidificado presenta un aspecto crema uniforme y
gradualmente un color verde pálido. ES IMPORTANTE PROTEGERLO DE LA LUZ y conservarlo en refrigeración de 2 a 8ºC. De
lo contrario, el medio de cultivo que está en forma reducida se va oxidando hasta adquirir un color francamente verde, cuando esto ocurre
se descarta el medio.
CONTROL DE ACTIVIDAD
MICROORGANISMO CEPA RESULTADO
Salmonella typhi ATCC 19430 Colonias con centro negro, bordes claros, a las 48 h con halo negro grisáceo
y brillo metálico
Salmonella typhimurium ATCC 14028 Colonias negras a verdes
Escherichia coli ATCC 25922 Crecimiento inhibido o colonias verdes
Proteus mirabilis ATCC 12453 Colonias pequeñas verde pálido a veces mucoides, sin swarming
Staphylococcus aureus ATCC 25923 Crecimiento inhibido
BIBLIOGRAFIA
American Public Health Association: Compendium of methods for the Microbiological Examination of foods. 2nd
ed,1984
Wilson and Blair, 1929, J. Pathol. Bacteriol. 29 : 310
Mac Faddin 1985 Media for isolation-cultivation-identification-maintenence of medical bacteria, vol 1. Wilkins & Wilkins,
Baltimore
USP 23 NF 18 rev. “Microbiological Tests” pp 1682, 1995
Farmacopea de los Estados Unidos Mexicanos. Limites Microbianos. Sexta Edición pp 190, 1994
PRESENTACION
No. Cat. 1026 Deshidratado 1000 g No. Cat. 1026-B Deshidratado 100 g
1026-E Deshidratado 500 g 1026-P Preparado placa 90x15 mm individual
1026-A Deshidratado 450 g 1026-PP Preparado paquete con placas