Laboratorio clinico

1. Practica de Laboratorio N°6
Microorganismos de muestras biológicas
Objetivos:
1. Reconocer morfología de bacterias presentes en muestras de orina.
2. Conocer las características bioquímicas de la orina y sus modificaciones ocasionadas por
bacterias.
3. Realizar tenciones diferenciales de bacterias.
Introducción:
La orina (del latín urina) es un líquido acuoso transparente y amarillento, de olor característico,
secretado por los riñones y eliminado al exterior por el aparato urinario. La orina puede servir para
determinar la presencia de algunas enfermedades.
El cuadro hemático y el parcial de orina son dos de los exámenes de laboratorio más comunes que se
realizan para el enfoque diagnóstico de algunas enfermedades, el análisis adecuado de estos puede
ayudar a identificar muchas de las patologías que frecuentemente se presentan en las personas que
asisten la consulta médica. Los principales parámetros de naturaleza físico-química medidos en el
análisis de orina son: el aspecto, el color, el pH y la densidad. El aspecto, por lo normal transparente,
puede variar por la presencia de fosfatos o sales del ácido úrico y del ácido oxálico; o bien por la
presencia de pus y bacterias. El color normalmente amarillo pardo con tonalidad más o menos intensa
por la presencia de urobilinógeno (pigmento urinario) puede cambiar en algunas condiciones
patológicas, volviéndose, por ejemplo, más rosado (color “agua de lavar carne”), como en los casos
de hemoglobinuria o de hematuria (presencia de hemoglobina o sangre en la orina, respectivamente),
o más oscuro (color vino), como en los casos más graves de ictericia. El valor del pH proporciona datos
sobre la eficiencia de los sistemas tampón del organismo, dedicados al mantenimiento de valores
constantes en el pH de las soluciones intra y extracelulares; el pH de la orina por lo común ligeramente
ácido por la presencia de ácido úrico puede resultar más alto en caso de insuficiencia renal o, al
contrario, tender hacia valores ácidos en caso de diabetes. La densidad indica la capacidad del riñón
para concentrar la orina. En condiciones fisiológicas, oscila entre valores de 1015 y 1025.
Metodología:
ANÁLISIS FÍSICO
 Medir en un envase debidamente marcado en ml el total de orina en 12 horas.
 En el laboratorio, en un envase estéril tomar una muestra y registrar los aspectos físicos.
Volumen (700 a 2000 ml/día) normal
≥2500 ml/día- poliuria
≤500 ml/día – oliguria
≤100 ml/día - anuria
Valor obtenido Posible respuesta al valor obtenido
Aspecto (transparente o turbio)
Color (ámbar o naranja, azul-verdosa,
amarillo -naranja, amarillo – verdosa,
rojo-rosado, negro)
Olor (normal o a amoniaco)

2. ASPECTO CITOQUIMICO
 Verter 25 ml de orina en una probeta y utilizar las tiras para pruebas bioquímicas.
 De no tener tira de orina se realizarán pruebas manuales, poner a centrifugar 10ml de la orina
a 3000 revoluciones en 10 a 15 minutos.
 Eliminar liquido excedente y trabajar con el precipitado.
 Examinar precipitado al microscopio a un aumento de 100 x y luego 400x. Contar los elementos
observados.
 Utilizar métodos de tinción:
Tinción de la grasa con Sudan III: identifica la grasa contenida en células o cilindros.
Tinción con Lugol: para la identificación de leucocitos.
Tinción de Eosina: tiñe eritrocitos de color rosa, logrando diferenciarlos de otros elementos.
Doble tinción con eosina y azul de metileno: otorga color rojizo a los hematíes y cilindros
eritrocitarios, diferenciándolo del color azul que toman otros elementos.
Tinción con rojo neutro y violeta de metilo de Schugt.
Parámetros Valor obtenido Interpretación de resultados
Sedimento urinario
Leucocitos
Cel. Epiteliales planas
Hematíes
mucinas
Piocitos
Nitritos
Urobilinógenos
Proteínas
PH
Sangre
Gravedad especifica
Cuerpos cetónicos
Bilirrubina
Glucosa
Ácido ascórbico
EXAMEN MICROSCOPICO DEL SEDIMENTO
 Tomamos una muestra de precipitado con el haza bacteriológica y la colocamos en un
portaobjetos.
 Realizar tinción de Gram:
Paso 1.
_ Colocar una gota de agua destilada en el portaobjetos, secar con mechero.
_ Cubrir la muestra con cristal violeta por 1 min.
_ Lavar con agua corriente.
_ Agregar Lugol a toda la muestra por 1 min y lavar.
_ Cubrir la muestra con alcohol cetona durante 15 a 30 segundos y lavar.
_ Agregar safranina de 15 segundos a 1 minuto y lavar.
 Observar al microscipio.

3. UROCULTIVO

6. CUESTIONARIO OBLIGATORIO
1. ¿Cuáles son los elementos que conforman a la orina humana?
2. Describa paso a paso el metabolismo de la urea.
3. ¿Qué son las bacterias Gram + y Gram -??
4. ¿Qué enfermedades pueden ser detectadas por examen de orina?
5. Define cada parámetro fisicoquímico analizado en la orina.
6. Identificar como se produce la orina.
7. ¿Cómo afectan las bacterias la composición química de la orina?
8. ¿Cuáles son las bacterias del tracto urogenital?
9. ¿Qué bacterias afectan el tracto urogenital y como se diagnostican?
10.Pruebas hormonales en la orina, diagnóstico y método.