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Dogma central de la biología molecular Mónica L. Giraldo R. 2010 Diapositivas modificadas de  Alberts, Johnson,Lewis, et al Molecular Biologyofthecell Fifthedition. Garland Science. 2008.
La información hereditaria determina las características de un organismo completo
El ADN  es la molécula que emplean todas las células  para almacenar su información genética: Genomas basados en ADN
Experimento Avery-McLeod-McCarty Factor transformante Inyeccion Raton muere Bacterias encapsuladas vivas
Bacterias no encapsuladas vivas Raton vive
calor Bacterias encapsuladas  vivas Bacterias encapsuladas  muertas Raton vive
Bacteria virulenta muerta por calor Bacterias  no encapsuladas  vivas Mezcla de bacetrias Virulentes muertas y  bacterias  no encapsuladas  vivas Raton muere
Bacteria no virulenta viva DNA aislado de bacteria virulenta  Muerta por calor TRNSFORMACION Bacterias  no virulentas Bacterias  Virulentas encapsuladas Raton muere
Experimento de la  licuadora Hershey Chase 32P 35S Cubierta no radioactiva Cubierta radioactiva bacteriófago DNA no radioactivo DNA radioactivo Celula  bacteriana inyeccion
Agitación en licuadora
Separación por centrifugación No radioactivo radioactivo radioactivo No radioactivo El ADN es el material genético
Patrón de difracción de rayos X del ADN
Uso educativo. Prohibida su venta Reglas de Chargaff El ADN es la molécula portadora del código genético El código genético es el mismo en todas las especies La secuencia de bases del ADN varía entre especies La secuencia de bases del ADN es igual en todos los tejidos de una especie La secuencia de bases del ADN se mantiene estable en un organismo La el contenido de A es igual al contenido de T y  el contenido de C es igual al contenido de G, de forma que  A+G=T+C (la suma de las purinas es igual al de las pirimidinas)
Uso educativo. Prohibida su venta
Uso educativo. Prohibida su venta El ADN esunahélicedoble Complementariayantiparalela. El contenido de A igual a T  y el contenido de C igual a G
En los eucariotes el ADN se encuentra en el núcleo
Configuración de la membrana nuclear
El NPC (complejo de poro nuclear) está constituido por nucleoporinas
Existe un tráfico bidireccional de moléculas entre el núcleo y el citosol
Ran GTPasa y transporte por el complejo de poro nuclear
Ran GTPasa define la direccionalidad del transporte
Los nucleótidos son la unidad constitutiva del ADN
La cadena simple de ADN está constituida por nucleótidos con enlaces fosfodiester
La síntesis de la cadena de ADN se realiza a partir de un molde
El ADN es una hélice de  doble cadena Complementaria y  antiparalela
La información genética se copia por REPLICACIÓN SEMICONSERVATIVA del ADN
El dogma central de  La biología molecular Implica que la información Genética se TRANSCRIBE  desde el ADN a ARN y  Se TRADUCE a proteínas
El ADN sirve como molde para la síntesis de ARN
Existe una estrecha relación entre las proteínas y los ácidos nucleicos
El ADN de los eucariotes se empaca en grupos de cromosomas
El cariotipo permite Visualizar el patrón  De bandas de los  Cromosomas en mitosis
Información general El DNA eucariote se empaca en cromosomas 44 cromosomas somáticos 2 cromosomas sexuales Un cromosoma corresponde a DNA lineal y proteínas: cromatina Cada cromosoma es portador de múltiples genes Gen es la unidad funcional de la herencia:  Es un segmento de DNA que contiene la información  para sintetizar una proteína específica o un RNA funcional
La secuencia de nucleótidos en el ADN determina el genoma
Estadísticas del genoma humano Tamaño: 3,2 x 109 pares de nucleótidos Número de genes: aproximadamente 25,000 Gen más grande: 2,4 x 106 pares de nucleótidos Tamaño promedio de los genes: 27,000 pares de nucleótidos Menor número de exones por gen: 1 Mayor número de exones por gen: 178 Promedio de exones por gen: 10,4 Exón más grande: 17,106 pares de nucleótidos Tamaño promedio de los exones: 145 pares de nucleótidos Número de seudogenes: Más de 20,000 DNA en exones: 1,5% DNA en secuencias altamente conservadas: 3,5% DNA en secuencias altamente repetitivas: 50%
Genomas de organismos diferentes están relacionados
Comparación de tamaños de genomas
Los cromosomas tienen diferente formas durante el ciclo de vida de una célula
Cromosoma interfásico Cromosoma mitótico
El AND de un cromosoma lineal requiere varias regiones para la replicación
El ADN tiene secuencias funcionales de nucleótidos para la duplicación de los cromosomas Origen de replicación:  secuencias de ADN donde se inicia la duplicación  Centrómero:  Secuencia de ADN que permite unir el ADN duplicado  Y garantizar su segregación equitativa en las células hijas  El kinetocoro es una proteína que une los cromosomas  duplicados al huso mitótico Telómeros:  secuencias de ADN en los extremos del cromosoma
Los nucleosomas son la unidad estructural básica del cromosoma Cromatina de núcleo interfásico Cromatina experimentalmente descondensada
El ADN está altamente condensando en los cromosomas Los cromosomas eucariotes están  formados por cromatina La cromatina es ADN asociado a proteínas (Histonas y no histonas) Las histonas se encargan del empaquetamiento inicial del cromosoma: Nucleosoma Cada nucleosoma está formado por ocho histonas (H2A, H2B, H3, H4) y  Una cadena de ADN de 147 pares de nucleótidos El octámero de histonasforma un centro proteico alrededor del cual se empaqueta el ADN Los nucleosomas están separados entre sí por ≅200 pares de nucleótidos En el genoma humano hay ≅30 millones de nucleosomas
Formación del  Octámero de histonas
Algunos aminoácidos de las histonas tienen modificaciones covalentes
La modificación de los nucleosomas origina un “CÓDIGO DE HISTONAS”
Código de histonas Modificaciones covalentes reversibles de las histonas Mono, di, trimetilación de lisinas (metiltransferasas/demetilasas) Acetilación de lisinas (acetiltransferasas/deacetilasas) Combinaciones específicas de las modificaciones marcan cada nucleosoma Proteínas lectoras del código de histonas regulan funciones de la cromatina La hererocromatinaes cromatina altamente condensada La heterocromatina se localiza principalmente en centrómero y telómeros, pero Hay heterocromatina dispersa.  Generalmente, la heterocromatina implica silenciamiento de genes. La Eucromatina es cromatina menos condensada y corresponde al resto
Organización  Estructural  Del  Nucleosoma
La formación de Tetranucleosomas Contribuye al Empaquetamiento de La cromatina (fibras de 30nm)
Algunas regiones  de la cromatina se descondensan para que los genes se expresen
La cromatina puede moverse a sitios específicos del núcleo  para modificar la expresión génica
Cambios en la localización nuclear de la cromatina dependientes de la expresión génica
La cromatina es una estructura dinámica
[object Object]
El ADN replicado se separa para producir cromátides hermanas que se mantienenunidas en el centrómero
Ciclo celular La única manera de obtener una célula nueva es duplicar una célula que ya existe Proliferación de  fibroblastos en cultivo
Ciclo celular
Síntesis de ADN 10-12hr Mitosis (división nuclear) Citokinesis (división celular 1hr
Mitosis (Profase) Replicación de cromosomas. Dos copias de cada cromosoma Cromátides hermanas asociadas, condensadas Ensamblaje del huso mitótico por fuera del núcleo
Mitosis (Prometafase) Fragmentación de la membrana nuclear Asociación de los cromosomas al kinetocoro Movimiento activo de los cromosomas
Mitosis (Metafase) Alineación de cromosomas en el eje ecuatorial del huso mitótico Direccionamiento de cromátides hermanas hacia los polos opuestos del kinetocoro
Mitosis (Anafase) Separación de cromátides hermanas  Acortamiento de microtúbulos del kinetocoro Se inicia la segregación de los cromosomas
Mitosis (Telofase) Llegada de los dos grupos de cromosomas hermanos a los polos Ensamblaje de una envoltura nuclear en torno a cada grupo de cromosomas hermanos Inicia la división del citoplasma a partir del anillo contráctil
Mitosis (citokinesis) División del citoplasma por el anillo contráctil de filamentos actina-miosina Separación de las células hijas con núcleo independiente
El ciclo celular tiene fases de control interno y externo
Control del Ciclo celular
S M G2 G1 G0 6-12 h DNA 2n 6-8 h DNA 2n-4n 3-4 h DNA 4n 1 h DNA 2n x 2 Fin  mitosis Inicio ciclo Inicio Síntesis DNA Inicio mitosis Fin  Síntesis DNA Control Para división Control Integridad DNA Control DNA No replicado
Complejo ciclinaCdk de control del ciclo celular Ciclina G1/S: activa Cdk al final de G1. Promueve el inicio del ciclo celular. Ciclina S: Estimula la duplicación de los cromosomas Ciclina M: estimula la entrada en mitosis desde G2/M
Las Proteína kinasas dependientes de ciclina regulan le ciclo celular
Cromosoma mitótico
La meiosis es una forma de división celular involucrada en la reproducción sexual Células somáticas: Diploides Gametos: Haploides El ciclo reproductivo finaliza con la formación del zigoto  Con potencial para formar un individuo nuevo La meiosis comienza con un ciclo de duplicación de los cromosomas: Fase S meiosis Luego ocurren dos ciclos de segregación de cromosomas:  Meiosis I Segrega cromosomas cromosomas homólogos Meiosis II: Segrega las cromátides hermanas de cada cromosoma El producto final es la formación de cuatro células haploides
Regulación del ciclo celular Mitógenos: estimulan la división celula por inducción de la actividad de G1/S-Cdk Factor de crecimiento derivado de plaquetas Factor de crecimiento epidérmico eritopoyetina Factor de crecimiento de colonias granulocitos y macrófagos Activación de la vía Ras
Control del ciclo celular Factores de crecimiento: Estimulan el crecimiento celular Factor de crecimineto de nervios
Inhibición del ciclo celular dependiente de densidad
En las células cancerosas se pierde el control de la inhibición del ciclo por contacto
Control del ciclo celular Factores de supervivencia: Suprimen las señales de apoptosis
Deprivación de  factores de crecimiento Daño del DNA p53 Activación de  receptores de muerte Señales de muerte celular BCL2 Activación de proteasas Activación de  endocucleasas Cambios celulares Reorganización del  citoesqueleto Fagocitosis

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Genes y genoma

  • 1. Dogma central de la biología molecular Mónica L. Giraldo R. 2010 Diapositivas modificadas de Alberts, Johnson,Lewis, et al Molecular Biologyofthecell Fifthedition. Garland Science. 2008.
  • 2. La información hereditaria determina las características de un organismo completo
  • 3. El ADN es la molécula que emplean todas las células para almacenar su información genética: Genomas basados en ADN
  • 4. Experimento Avery-McLeod-McCarty Factor transformante Inyeccion Raton muere Bacterias encapsuladas vivas
  • 5. Bacterias no encapsuladas vivas Raton vive
  • 6. calor Bacterias encapsuladas vivas Bacterias encapsuladas muertas Raton vive
  • 7. Bacteria virulenta muerta por calor Bacterias no encapsuladas vivas Mezcla de bacetrias Virulentes muertas y bacterias no encapsuladas vivas Raton muere
  • 8. Bacteria no virulenta viva DNA aislado de bacteria virulenta Muerta por calor TRNSFORMACION Bacterias no virulentas Bacterias Virulentas encapsuladas Raton muere
  • 9. Experimento de la licuadora Hershey Chase 32P 35S Cubierta no radioactiva Cubierta radioactiva bacteriófago DNA no radioactivo DNA radioactivo Celula bacteriana inyeccion
  • 11. Separación por centrifugación No radioactivo radioactivo radioactivo No radioactivo El ADN es el material genético
  • 12. Patrón de difracción de rayos X del ADN
  • 13. Uso educativo. Prohibida su venta Reglas de Chargaff El ADN es la molécula portadora del código genético El código genético es el mismo en todas las especies La secuencia de bases del ADN varía entre especies La secuencia de bases del ADN es igual en todos los tejidos de una especie La secuencia de bases del ADN se mantiene estable en un organismo La el contenido de A es igual al contenido de T y el contenido de C es igual al contenido de G, de forma que A+G=T+C (la suma de las purinas es igual al de las pirimidinas)
  • 15. Uso educativo. Prohibida su venta El ADN esunahélicedoble Complementariayantiparalela. El contenido de A igual a T y el contenido de C igual a G
  • 16. En los eucariotes el ADN se encuentra en el núcleo
  • 17.
  • 18.
  • 19.
  • 20. Configuración de la membrana nuclear
  • 21.
  • 22.
  • 23. El NPC (complejo de poro nuclear) está constituido por nucleoporinas
  • 24.
  • 25. Existe un tráfico bidireccional de moléculas entre el núcleo y el citosol
  • 26. Ran GTPasa y transporte por el complejo de poro nuclear
  • 27. Ran GTPasa define la direccionalidad del transporte
  • 28. Los nucleótidos son la unidad constitutiva del ADN
  • 29. La cadena simple de ADN está constituida por nucleótidos con enlaces fosfodiester
  • 30. La síntesis de la cadena de ADN se realiza a partir de un molde
  • 31. El ADN es una hélice de doble cadena Complementaria y antiparalela
  • 32.
  • 33.
  • 34.
  • 35. La información genética se copia por REPLICACIÓN SEMICONSERVATIVA del ADN
  • 36. El dogma central de La biología molecular Implica que la información Genética se TRANSCRIBE desde el ADN a ARN y Se TRADUCE a proteínas
  • 37. El ADN sirve como molde para la síntesis de ARN
  • 38. Existe una estrecha relación entre las proteínas y los ácidos nucleicos
  • 39.
  • 40.
  • 41. El ADN de los eucariotes se empaca en grupos de cromosomas
  • 42. El cariotipo permite Visualizar el patrón De bandas de los Cromosomas en mitosis
  • 43. Información general El DNA eucariote se empaca en cromosomas 44 cromosomas somáticos 2 cromosomas sexuales Un cromosoma corresponde a DNA lineal y proteínas: cromatina Cada cromosoma es portador de múltiples genes Gen es la unidad funcional de la herencia: Es un segmento de DNA que contiene la información para sintetizar una proteína específica o un RNA funcional
  • 44. La secuencia de nucleótidos en el ADN determina el genoma
  • 45. Estadísticas del genoma humano Tamaño: 3,2 x 109 pares de nucleótidos Número de genes: aproximadamente 25,000 Gen más grande: 2,4 x 106 pares de nucleótidos Tamaño promedio de los genes: 27,000 pares de nucleótidos Menor número de exones por gen: 1 Mayor número de exones por gen: 178 Promedio de exones por gen: 10,4 Exón más grande: 17,106 pares de nucleótidos Tamaño promedio de los exones: 145 pares de nucleótidos Número de seudogenes: Más de 20,000 DNA en exones: 1,5% DNA en secuencias altamente conservadas: 3,5% DNA en secuencias altamente repetitivas: 50%
  • 46.
  • 47. Genomas de organismos diferentes están relacionados
  • 49. Los cromosomas tienen diferente formas durante el ciclo de vida de una célula
  • 51. El AND de un cromosoma lineal requiere varias regiones para la replicación
  • 52. El ADN tiene secuencias funcionales de nucleótidos para la duplicación de los cromosomas Origen de replicación: secuencias de ADN donde se inicia la duplicación Centrómero: Secuencia de ADN que permite unir el ADN duplicado Y garantizar su segregación equitativa en las células hijas El kinetocoro es una proteína que une los cromosomas duplicados al huso mitótico Telómeros: secuencias de ADN en los extremos del cromosoma
  • 53. Los nucleosomas son la unidad estructural básica del cromosoma Cromatina de núcleo interfásico Cromatina experimentalmente descondensada
  • 54. El ADN está altamente condensando en los cromosomas Los cromosomas eucariotes están formados por cromatina La cromatina es ADN asociado a proteínas (Histonas y no histonas) Las histonas se encargan del empaquetamiento inicial del cromosoma: Nucleosoma Cada nucleosoma está formado por ocho histonas (H2A, H2B, H3, H4) y Una cadena de ADN de 147 pares de nucleótidos El octámero de histonasforma un centro proteico alrededor del cual se empaqueta el ADN Los nucleosomas están separados entre sí por ≅200 pares de nucleótidos En el genoma humano hay ≅30 millones de nucleosomas
  • 55. Formación del Octámero de histonas
  • 56.
  • 57. Algunos aminoácidos de las histonas tienen modificaciones covalentes
  • 58. La modificación de los nucleosomas origina un “CÓDIGO DE HISTONAS”
  • 59. Código de histonas Modificaciones covalentes reversibles de las histonas Mono, di, trimetilación de lisinas (metiltransferasas/demetilasas) Acetilación de lisinas (acetiltransferasas/deacetilasas) Combinaciones específicas de las modificaciones marcan cada nucleosoma Proteínas lectoras del código de histonas regulan funciones de la cromatina La hererocromatinaes cromatina altamente condensada La heterocromatina se localiza principalmente en centrómero y telómeros, pero Hay heterocromatina dispersa. Generalmente, la heterocromatina implica silenciamiento de genes. La Eucromatina es cromatina menos condensada y corresponde al resto
  • 60. Organización Estructural Del Nucleosoma
  • 61. La formación de Tetranucleosomas Contribuye al Empaquetamiento de La cromatina (fibras de 30nm)
  • 62.
  • 63.
  • 64. Algunas regiones de la cromatina se descondensan para que los genes se expresen
  • 65. La cromatina puede moverse a sitios específicos del núcleo para modificar la expresión génica
  • 66. Cambios en la localización nuclear de la cromatina dependientes de la expresión génica
  • 67. La cromatina es una estructura dinámica
  • 68.
  • 69. El ADN replicado se separa para producir cromátides hermanas que se mantienenunidas en el centrómero
  • 70. Ciclo celular La única manera de obtener una célula nueva es duplicar una célula que ya existe Proliferación de fibroblastos en cultivo
  • 72. Síntesis de ADN 10-12hr Mitosis (división nuclear) Citokinesis (división celular 1hr
  • 73. Mitosis (Profase) Replicación de cromosomas. Dos copias de cada cromosoma Cromátides hermanas asociadas, condensadas Ensamblaje del huso mitótico por fuera del núcleo
  • 74. Mitosis (Prometafase) Fragmentación de la membrana nuclear Asociación de los cromosomas al kinetocoro Movimiento activo de los cromosomas
  • 75. Mitosis (Metafase) Alineación de cromosomas en el eje ecuatorial del huso mitótico Direccionamiento de cromátides hermanas hacia los polos opuestos del kinetocoro
  • 76. Mitosis (Anafase) Separación de cromátides hermanas Acortamiento de microtúbulos del kinetocoro Se inicia la segregación de los cromosomas
  • 77. Mitosis (Telofase) Llegada de los dos grupos de cromosomas hermanos a los polos Ensamblaje de una envoltura nuclear en torno a cada grupo de cromosomas hermanos Inicia la división del citoplasma a partir del anillo contráctil
  • 78. Mitosis (citokinesis) División del citoplasma por el anillo contráctil de filamentos actina-miosina Separación de las células hijas con núcleo independiente
  • 79.
  • 80.
  • 81.
  • 82. El ciclo celular tiene fases de control interno y externo
  • 83. Control del Ciclo celular
  • 84. S M G2 G1 G0 6-12 h DNA 2n 6-8 h DNA 2n-4n 3-4 h DNA 4n 1 h DNA 2n x 2 Fin mitosis Inicio ciclo Inicio Síntesis DNA Inicio mitosis Fin Síntesis DNA Control Para división Control Integridad DNA Control DNA No replicado
  • 85. Complejo ciclinaCdk de control del ciclo celular Ciclina G1/S: activa Cdk al final de G1. Promueve el inicio del ciclo celular. Ciclina S: Estimula la duplicación de los cromosomas Ciclina M: estimula la entrada en mitosis desde G2/M
  • 86. Las Proteína kinasas dependientes de ciclina regulan le ciclo celular
  • 88. La meiosis es una forma de división celular involucrada en la reproducción sexual Células somáticas: Diploides Gametos: Haploides El ciclo reproductivo finaliza con la formación del zigoto Con potencial para formar un individuo nuevo La meiosis comienza con un ciclo de duplicación de los cromosomas: Fase S meiosis Luego ocurren dos ciclos de segregación de cromosomas: Meiosis I Segrega cromosomas cromosomas homólogos Meiosis II: Segrega las cromátides hermanas de cada cromosoma El producto final es la formación de cuatro células haploides
  • 89.
  • 90. Regulación del ciclo celular Mitógenos: estimulan la división celula por inducción de la actividad de G1/S-Cdk Factor de crecimiento derivado de plaquetas Factor de crecimiento epidérmico eritopoyetina Factor de crecimiento de colonias granulocitos y macrófagos Activación de la vía Ras
  • 91.
  • 92. Control del ciclo celular Factores de crecimiento: Estimulan el crecimiento celular Factor de crecimineto de nervios
  • 93. Inhibición del ciclo celular dependiente de densidad
  • 94. En las células cancerosas se pierde el control de la inhibición del ciclo por contacto
  • 95.
  • 96. Control del ciclo celular Factores de supervivencia: Suprimen las señales de apoptosis
  • 97. Deprivación de factores de crecimiento Daño del DNA p53 Activación de receptores de muerte Señales de muerte celular BCL2 Activación de proteasas Activación de endocucleasas Cambios celulares Reorganización del citoesqueleto Fagocitosis
  • 98. Daños en el DNA inhiben el ciclo celular