Este documento describe la situación mundial, nacional y regional del cólera causado por la bacteria Vibrio cholerae. Explica las características clínicas de la infección intestinal aguda por cólera y proporciona detalles sobre brotes recientes en Perú, incluida la ciudad de Piura. También cubre temas como la patogenia, diagnóstico y pruebas de laboratorio para la identificación de V. cholerae.

1. INTEGRANTES:
 BONILLA LEON, JHON KEVIN
 NEYRA VILLAREYES, AMANDA JACKELYNE
 REQUELME ALCÁNTARA, FIORELLAANTUANUET
2023

3. ANTRAX O CARBUNCO
Situación Mundial, nacional y regional de
las siguientes enfermedades y pruebas
diagnósticas para su identificación de
laboratorio

4. INTRODUCCION
El ántrax es una enfermedad
infecciosa producida por el
bacilo antracis rara ocasionada
por la bacteria Bacillus
anthracis una de las más
importantes zoonosis de países
en desarrollo.
Se ha determinado que las
diferentes cepas de ántrax A y B
tienen un ancestro filogenético
común debido que amabas
cepas se encuentran en África
llegando a la conclusión los
científicos de que el origen de
ántrax es en África.

5. Cuando el ántrax afecta a los seres
humanos, se debe generalmente a una
exposición laboral a animales infectados o
a sus productos.
Sin embargo, el ántrax se considera uno
de varios agentes potenciales para el uso
en el terrorismo biológico.

6. SITUACION MUNDIAL
NACIONAL Y REGIONAL

7. CARACTERISTICAS
• Bacteria aeróbica facultativa
• Grampositiva
• Encapsulada
• Formadora de esporas
• Con extremos achatados
• Inmóvil
• Unidos en cadena
• No hemolítica
• Crece en agar sangre cordero
5% a 35-37°C Apariencia de la
colonia como vidrio
molido

8. Cadena epidemiológica
Suelo
Cadáveres
Carne contaminada
Otros animales
Piel, ingerirse o
inhaladas
Tejidos
Sangre
Piel, pelo, lana
Melena y
hematemesis

9. PERIODOS DE INCUBACIÓN
Forma cutánea 5-7 días
Forma gastrointestinal 1-6 días
Forma pulmonar 1-7 días
VÍAS DE CONTAGIO
1.- INHALACION : entra el organismo por inhalación de
partículas.
2.- CONTACTO CUTÁNEO: se produce cuando la piel entra en
contacto con el Antrax.
3.- INGESTION: Al comer carne mal cocida infectada.

10. PATOGENIA DE LA FORMA CUTÁNEA E
INTESTINAL
Unión a los receptores celulares
Actividad adenilciclasa y reacción
edematosa
Causante de muerte

11. PATOGENIA PULMONAR
Hemorragia masiva
Mediastinitis
Linfadenitis edemanecrotica

12. DIAGNOSTICO BACTERIOLÓGICO
Antrax o Carbunco cutáneo
Antrax GI
Antrax pulmonar
Meningitis
Vesículas, pústulas, escaras,
Heces, aspirados gástricos
Líquido pleural, esputo,Aspirados
broncopulmonares, ganglios
mesentéricos
LCR

13. PRUEBAS DIAGNOSTICAS
Teñido con Técnica de Gram
Cultivo agar sangre
Serología: se estudia la presencia de anticuerpos
antotoxina mediante Técnica ELISA o
inmunoprecipitacón.
Detección de antígenos mediante electroforesis de
Transblot.

14. AISLAMIENTO POR CULTIVO DE ÁNTRAX
Tipo de muestra
Pruebas Muestras
Período de
Cantidad Transporte Conservación
Toma de muestra
Cultivo
Vesículas
(Hisopado)
1-5 días de inicio de
enfermedad Hisopo
Tubo seco deplástico Temperatura
ambiente
Escaras
(Hisopado) 1-5 días Hisopo Tubo seco
Temperatura
ambiente
Sangre total con
EDTA 1-5 días 3 mL
Tubo conEDTA Temperatura
ambiente
Hisopado faringeo 1-5 días Hisopo Tubo seco
Temperatura
ambiente
Heces 1-5 días 2-3 g En frasco Cadena de frío
LCR 1-5 días 1-2 mL Temperaturaambiente Congelado
Esputos 1-5 días 1-2 mL
Temperatuta ambiente
cuandoel tiempo es menor a
1 hora en frasco estéril tapa
rosca
Cadena de frio cuando el
tiempoes mayor de 1
hora
Cepa
Sospechosa -------
Colonias
sembradas en un
víal con medio de
cultivo TSA
Contenedor tripleempaque Temperatura
ambiente

15. MEDIO DE CULTIVO
Para aislar patógenos y sus esporas, selectivo para la detección y reencuetro de
Bacillus anthracis en todo tipo de muestras (lana, tierra, superficies, aire, heridas, etc)
Medios: Agar Mueller Hinton, Agar Cary Blair, Agar Sangre, Agar Tripticasa Soya, Agar
SIM, caldo glicerol al 10%, Agar Mueller Hinton.
PBS 1X.
Coloración Gram.
- Cepa control positivo Bacillus antrhacis (+) y cepa
control interno (CI), según ITT-CNSP-325: Control de
Calidad Interno de Aislamiento por Cultivo de Ántrax.
- Escherichia coli ATCC® 25922.
- Staphylococcus aureus ATCC® 25923.

16. TENER EN CUENTA:
1. Las interferencias y reacciones cruzadas
a. Muestras congeladas durante el transporte.
b. Muestras que contengan preservantes (cloroformo, formol u otros
solventes alcohólicos).
1. Las fuentes potenciales y variabilidad
a. Inadecuado almacenamiento de los reactivos.
b. Inadecuada preparación de reactivo, medios de cultivo, solución
salina.
c. Temperatura ambiental fuera del rango establecido (18 – 25°C).
d. Personal no entrenado.

17. BIOSEGURIDAD

18. EJECUCIÓN DEL MÉTODO
1. Siembra por tipo de muestra:
A partir de muestras de piel (escara)
a. Retirar el hisopo con muestra del tubo seco.
b. En un extremo de cada una de las placas con medio TSA y Agar Sangre rotar el hisopo con la
muestra, sembrar por agotamiento e incubar a 37ºC en atmósfera normal por 18 horas.
c. Realizar extendidos y la coloración Gram.
A partir de muestras de vesícula
a. Retirar el hisopo con muestra del tubo seco.
b. En un extremo de la placa con medio TSA Y Agar Sangre rotar el hisopo con la muestra,
sembrar por agotamiento e incubar a 37ºC en atmósfera normal por 18 horas.
c. Realizar extendidos y la coloración Gram.

19. EJECUCIÓN DEL MÉTODO
Siembra por tipo de muestra:

A partir de muestras de piel (escara)
A partir de muestras de vesícula
A partir de muestras de sangre
A partir de muestras de heces
A partir de muestra de Líquido Céfalo Raquídeo (LCR)
A partir de Hisopado faríngeo
A partir de muestra de Esputo
A partir de cepa sospechosa.

20. Bacilos grandes y rectos de extremos
rectangulares en muestras clínicas y son
endosporas, ovoides, subterminales
formando largas cadenas en medios de
cultivos
TINCIÓN DE GRAM
CULTIVO Agar sangre

21. PRUEBAS DE IDENTIFICACIÓN E INTERPRETACIÓN
◦ Prueba de la Oxidasa
◦ Prueba de la Catalasa
◦ Coloración Gram
◦ Movilidad en Agar SIM

22. ◦ Presencia de la cápsula
◦ Sensibilidad a la penicilina
◦ Identificación y caracterización de Bacillus anthracis
PCR
◦ Conservación de Bacillus sp.

23. IDENTIFICACIÓN

24. SENSIBILIDAD ANTIMICROBIANA

28. INTRODUCCION
La peste ha alcanzado un protagonismo transcendental en la historia de la humanidad, a lo largo de los
siglos la peste ha comportado un escenario de muerte, sufrimiento y calamidad para aquellas personas
que vivían la epidemia.
La Peste, es una infección bacteriana de animales y
humanos causada por Yersinia pestis. El bacilo de la
Peste fue descubierto por el bacteriólogo francés
Alexander Yersin, en 1894, en Hong Kong. Se le llamó
Pasteurella pestis hasta 1970.
Yersinia pestis, pertenece la Familia Enterobacteriaceae,
y es un bacilo Gramnegativo aerobio oxidasa negativa,
que cuenta con gran número de antígenos y toxinas que
desempeñan papeles importantes en la virulencia y
patogenicidad de la enfermedad.

29. SITUACION MUNDIAL
La epidemia más devastadora de la historia de la
humanidad, la peste negra, terminó con la vida de
entre 75 y 200 millones de personas en el siglo XIV. El
brote repentino de esta enfermedad afectó, según
estiman modelos de predicción actuales, entre 75 y
200 millones de personas, que traducido a porcentaje
se encuentra entre un 30 y un 60 por ciento de la
población de Europa.

30. En el Perú, desde que ingresa a su territorio,
en 1903, por los puertos de Pisco y Callao,
se fue extendiendo, afectando los principales
puertos del litoral y sus ciudades a todo lo
largo de la costa; posteriormente abandona
el área urbana en razón a las mejoras de las
condiciones sanitarias en las grandes
ciudades y puertos del país.

31. CARACTERÍSTICAS
La peste es una enfermedad infecciosa causada por Yersinia pestis, una
bacteria zoonótica que suele encontrarse en pequeños mamíferos y en las
pulgas que los parasitan, la transmisión entre los animales se hace a través
de las pulgas.
La Yersinia pestis es un microorganismo virulento, gramnegativo, móvil cuando se
le aisla del medio ambiente, pero que se torna inmóvil en los tejidos del huésped.
Tres especies de Yersinia pueden ocasionar enfermedades en el hombre: Yersinia
enterocolítica, Yersinia pseudotuberculosis y Yersinia pestis.

32. La peste es una enfermedad infecciosa causada por Yersinia pestis, una bacteria zoonótica que suele
encontrarse en pequeños mamíferos y en las pulgas que los parasitan, la transmisión entre los animales se
hace a través de las pulgas.
El ser humano puede contaminarse por:
 La picadura de pulgas infectadas
 Contacto directo con líquidos corporales infectados o materiales contaminados;
 La inhalación de gotículas respiratorias o pequeñas partículas de pacientes con peste neumónica.

33. Diagnóstico:
Captación
Evaluación Clínica
Peste Bubónica
Peste Septicémica
Peste septicémica primaria
Peste septicémica secundaria
Peste Neumónica
Peste septicémica primaria
Peste septicémica secundaria
VIDEO
La Peste Negra o Bubónica: una
infección por Yersinia Pestis,
diagnóstico y tratamiento - YouTube

34. NORMAS DE BIOSEGURIDAD

35. OBTENCION DE LA MUESTRA DE CASOS DE HUMANOS
Aspirado de Bubón Sangre Esputo
Órganos de pacientes
fallecidos – Caso
sospechoso de Peste
Preparación del frotis de esputo
Inoculación de la muestra en Medio de Transporte

36. OBTENCION DE MUESTRAS DE ESPECIMENES ANIMALES
Despulgue
Biometría
Obtención de sangre
Disección
Obtención de muestra de Órganos
Roedores vivos
Roedores muertos
Animales Centinelas

37. DIAGNOSTICO LABORATORIAL
METODOLOGÍA
Las pruebas de laboratorio que se utilizan para el diagnóstico son:
 Aislamiento de Y. pestis por cultivo y/o inoculación en animales de laboratorio e identificación confirmatoria mediante
caracterización bioquímica y lisis por bacteriófago.
 Detección de la bacteria o antígeno por inmunofluorescencia directa.
 Detección de ADN de Y. pestis por reacción en cadena de la polimerasa (PCR).
 Detección de anticuerpos anti Y. pestis mediante las técnicas de hemoaglutinación/ inhibición, ELISA IgG y ELISA IgM.
 Detección de antígeno F1 de Y. pestis por pruebas de inmunocromatográfica.
Yersinia Pestis "La bacteria de la muerte Negra" - YouTube

38. AISLAMIENTO POR CULTIVO E IDENTIFICACIÓN DE Yersenia pestis (EN EL MEDIO
AGAR SANGRE)
Yersinia Pestis "La bacteria de la muerte Negra" - YouTube
SEMBRADO Y MORFOLOGIA DE LAS COLONIAS DE Yersinia pestis en cultivo.
CRECIMIENTO EN AGAR SANGRE
CRECIMIENTO EN CALDO INFUSION CEREBRO
CORAZON (BHI)
AISLAMIENTO A PARTIR DE HEMOCULTIVOS
PRUEBAS DE IDENTIFICACION PRESUNTIVA
PRUEBA DE OXIDASA
PRUEBA DE CATALASA
MOVILIDAD EN AGAR
Para la lectura utilice los siguientes criterios:
- Organismo móvil
- Organismo no móvil

39. Fermentación de Azúcares

42. INTRODUCCIÓN
Infección intestinal
aguda causada por la
ingestión de Vibrio
cholerae. una bacteria
presente en aguas y
alimentos
contaminados por
heces fecales
Clínicamente, se
caracteriza por
presentar comienzo
repentino, diarrea
acuosa, profusa,
generalmente, sin dolor
abdominal, náuseas y
vómitos, luego, las
heces adquieren el
típico aspecto de "agua
de arroz".

44. SITUACIÓN MUNDIAL, NACIONAL Y REGIONAL DEL
CÓLERA – V. cholerae:
Se estima que, cada año, se producen aproximadamente 1,3 - 4 millones de casos, y 21.000- 143.000 muertes
por cólera en todo el mundo.

45. La ciudad de Piura pertenece al escenario costeño de la epidemia de cólera. Esta se inició
documentadamente en la semana epidemiológica N.º4 (SE 4), prácticamente en forma
simultánea con el brote de Chancay y tuvo crecimiento.
Al momento del estudio (SE 8),
se había notificado alrededor de
4,500 casos, alcanzando una
tasa de incidencia acumulada de
1.3 por ciento y una tasa de
letalidad global de 0.7 por ciento.

46. La ciudad de Trujillo pertenece también al escenario costeño de la epidemia de cólera.
Esta se inició documentadamente en la SE 5 y tuvo crecimiento explosivo.
Al momento del estudio,
(SE 11), se había
notificado alrededor de
10,000 casos, alcanzando
una tasa de incidencia
acumulada de 3.1 por
ciento y una tasa de
letalidad global de 0.5 por
ciento.

47. La ciudad de Iquitos
pertenece al
escenario
amazónico de la
epidemia de cólera.
Esta se inició
documentadamente
en la SE 8 y tuvo
crecimiento
prolongado.
Al momento del
estudio, (SE 20),
se había
notificado
alrededor de
2,500 casos,
alcanzando una
tasa de
incidencia
acumulada de 0.9
por ciento.

48. OBTENCIÓN Y TRANSPORTE DE LAS MUESTRAS DE PACIENTES
OBTENCIÓN DE LAS MUESTRAS

49. EQUIPO BÁSICO
PARA
RECOLECCIÓN
DE MUESTRAS
CLÍNICAS

50. TRANSPORTE DE LAS MUESTRAS
Colocar cada muestra
en un envase primario
apropiado
Colocar los recipientes
primarios en un recipiente
secundario no desechable,
impermeable y con suficiente
material absorbente para
absorber cualquier posible
derrame del recipiente
primario.
Las muestras pueden
refrigerarse si se
colocan en una caja
junto con bolsas de
material refrigerante
congelado.
Las muestras
congeladas solo
pueden mantenerse en
ese estado si se
empacan en hielo seco
(CO2 sólido).
Empacar las muestras en
hielo seco o hielo ordinario
fijándolas de manera tal
que no puedan rodar
dentro del recipiente una
vez que se haya acabado el
hielo.
Las muestras que no
se refrigeran ni se
congelan también
deben protegerse
contra la posibilidad de
calor o frío extremos.
Seleccionar los medios
de transporte más
rápidos y confiables
para evitar retrasos en
el envío.
Si las muestras se
despachan por correo,
empacarlas según los
requisitos postales
nacionales o
internacionales

51. AISLAMIENTO DE Vibrio cholerae A PARTIR DE MUESTRAS FECALES
AGAR CON TIOSULFATO, CITRATO,
SALES BILIARES Y SACAROSA:
El agar TCBS es verde cuando se
prepara, El crecimiento de un día para
otro (18 a 24 horas) de V: cholerae
producirá colonias grandes (2 a 4 mm de
diámetro), ligeramente aplanadas,
amarillas, con el centro opaco y la
periferia translúcida
MEDIOS SELECTIVOS EN PLACA

52. AGAR TAUROCOLATO-TELURITO-GELATINA (AGAR TTG O MEDIO DE MONSUR):
El crecimiento de un día para
otro (18 a 24 horas) de V:
cholerae en agar TTG se
caracteriza por colonias
pequeñas y opacas con el
centro ligeramente oscuro. Al
cabo de 24 horas, el centro de
la colonia se hace más oscuro
y, al final, toda ella toma un
color de “acero pavonado”.

53. AGAR DE MACCONKEY:
Las colonias de este bacilo
incubadas de un día para otro
en agar de MacConkey tienden
a ser pequeñas o medianas (1 a
3 mm) y por lo general se ven
como lactosa negativas o
ligeramente rosadas; con
frecuencia recuerdan a las
colonias de microorganismos
que producen fermentación
tardía” o “lenta” de la lactosa.

54. MEDIOS NO SELECTIVOS EN
PLACA
AGAR GELATINA
Las colonias de V. cholerae en el agar gelatina
son lisas, opacas, blancas y de 2 a 4 mm de
diámetro tras la incubación de 18-24 horas a
una temperatura de 35° a 37°C.
AGAR DE EXTRACTO DE CARNE
(AGAR NUTRITIVO ALCALINO)
Al cabo de la incubación de 18 a 24 horas, las
colonias de V. cholerae en agar de extracto de
carne son de 2 a 4 mm de diámetro, lisas,
opacas y de color crema.

55. IDENTIFICACIÓN DE Vibrio cholerae EN EL LABORATORIO
IDENTIFICACIÓN SEROLÓGICA DE V. cholerae O1

56. AGLUTINACIÓN EN LÁMINA
Si se observa aglutinación, el cultivo se considerará
“rugoso” y por lo tanto no se puede serotipificar. Si
la suspensión es lisa (turbia y fluida), se le agrega
una pequeña gota de antisuero.

57. IDENTIFICACIÓN BIOQUÍMICA DE V. cholerae

58. PRUEBA
DE
LA
OXIDASA
PRUEBA
DEL
HILO
MUCOIDE
Los microorganismos de los géneros Vibrio, Neissería, Campylobacter,
Aeromonas, Plesiomonas, Pseudomonas y Alcaligenes son oxidasa
positivos; los de la familia Enterobacteriaceae son oxidasa negativos.
La prueba de la hebra o hilo mucoide se puede realizar
en un portaobjetos o en una caja de Petri de plástico,
donde se suspenden colonias en una gota de solución
acuosa de desoxicolato de sodio al 0,5%.

59. AGAR
HIERRO
DE
KLIGLER
O
AGAR
HIERRO
DE
TRES
AZÚCARES
CARBOHIDRATOS
Las reacciones de V: cholerae en KIA, que contiene
glucosa y lactosa, son similares a las de los miembros de
la familia Enterobacteriaceae que no fermentan la lactosa
Los caldos se incuban a una temperatura de
35° a 37°C y se observan a las 24 horas.

60. REACCIONES DE DESCARBOXILASA Y
DIHIDROLASA
Se incuba a una temperatura de 35° a 37°C y
se lee a las 24 y 48 horas, pero si la prueba
es negativa se incuba hasta 7 días.

61. CALDOS CON SAL
Los caldos se incuban a una temperatura de 35% a 37 “C y
se leen a las 18 a 24 horas no hay crecimiento de un día
para otro, se incuban hasta 7 días.
PRUEBA DE VOGES-PROSKAUER
El microorganismo de prueba se incuba en el
caldo de MR-VP durante 48 horas antes de que
se agreguen los reactivos A y B. Un color rojo
cereza indica una reacción positiva

62. PRUEBAS DE HEMÓLISIS
HEMÓLISIS
EN
PLACA
Las placas se incuban a una temperatura
de 35° a 37°C durante 18 a 24 horas.
Las colonias hemolíticas presentan zonas
claras alrededor cuando se han lisado por
completo los eritrocitos, y una cepa
hemolítica presuntivamente se debe
comparar con una cepa testigo
intensamente hemolítica.

63. HEMÓLISIS EN TUBO
Se utilizan dos cepas bien caracterizadas de V. cholerae; una debe ser acentuadamente hemolítica, y la otra, no hemolítica.

65. PRUEBAS PARA DETERMINAR LOS BIOTIPOS DE V. cholerae O1

66. PRUEBA
DE
VOGES-
PROSKAUER
SENSIBILIDAD
A
LA
POLIMIXINA
B
Para diferenciar entre los biotipos
El Tor y clásico de V. Cholerae O1,
se utiliza la prueba de Voges-
Proskauer, Por lo común, los
biotipos clásicos dan resultados
negativos, mientras que los
aislamientos de El Tor
generalmente son positivos. El biotipo El Tor suele ser resistente a
esta concentración de polimixina B y no
da una zona de inhibición.

67. HEMAGLUTINACION
(PRUEBA
DIRECTA)
SENSIBILIDAD
A
LOS
BACTERIÓFAGOS
Cuando la prueba es positiva, la aglutinación de los
eritrocitos ocurre en 30 a 60 segundos. Con cada nueva
suspensión de eritrocitos se deben utilizar cepas testigo
hemaglutinante (El Tor) y no hemaglutinante (clásica).
El aislamiento que se va a someter a
prueba proviene de un cultivo puro de 18
a 24 horas en un medio no inhibitorio. La
muestra se inocula en caldo de infusión
de cerebro y corazón (o caldo con
tripticasa de soja) y se incuba durante 6
horas a una temperatura de A
continuación, se siembra una muestra del
aislamiento en la fase exponencial
(logarítmica) del crecimiento (densidad
óptica= 0,1) en una placa de agar de
infusión de cerebro y corazón; para ese
efecto, se humedece un hisopo de
algodón en el caldo de 6 horas y se frota
ligeramente toda la superficie.