Este documento describe el aislamiento y cultivo de microorganismos en diferentes ambientes. Se tomaron muestras de dos puntos, los Humedales de Ite y el Río Osmore. Luego se prepararon cultivos nutritivos y se realizó el aislamiento mediante diluciones seriadas y siembra en placas Petri. Tras incubar, se contaron y aislaron las colonias, observándolas al microscopio. Se logró cultivar bacterias de ambas muestras, identificándose varios tipos de colonias.
Este documento describe un procedimiento de laboratorio para aislar y cultivar microorganismos de diferentes fuentes, incluyendo material vegetal enfermo, suelo y aire. El procedimiento involucra la desinfección de las muestras, su siembra en medios de cultivo específicos y la incubación para permitir el crecimiento microbiano. Los resultados incluyeron cultivos puros de bacterias gram positivas, gram negativas y hongos.
_IDENTIFICACIÓN DE CIANOBACTERIAS DE AGUA DEL VARADERO DE LA PROVINCIA DE IL...enriquezbriana81
Este informe de laboratorio presenta los resultados del análisis de muestras de agua del varadero de Ilo utilizando el instrumento Algae Torch y microscopio óptico. Se midió el contenido de cianobacterias y clorofila en agua potable, microalgas y del varadero. El agua del varadero contenía 0.06 μg/L de cianobacterias y 8.5 μg/L de clorofila, mientras que el agua de microalgas contenía 203.1 μg/L y 776.53 μg/L respectivamente. Mediante
El documento describe una práctica de campo realizada por estudiantes de biotecnología de la Universidad Nacional de Moquegua en Titire, Puno. Los estudiantes recolectaron muestras de suelo, agua y microorganismos para analizar en el laboratorio. Identificaron diversos microorganismos como diatomeas y tricratium favus en las muestras a través de un microscopio. El lugar se encuentra altamente contaminado por la minería y afecta las actividades de la población local.
Práctica #2 Medios de cultivo y técnicas de tinciónHylaryQuistian
Esta práctica consistió en preparar un medio de cultivo selectivo para el crecimiento de Escherichia Coli en una muestra de heces fecales animales. Se utilizó el medio Agar Eosina y azul de Metileno para facilitar nutricionalmente el crecimiento de E. Coli. Se estrió la muestra en las placas de Petri y se incubó, observando luego la morfología de las colonias mediante tinción de Gram y microscopía.
Este informe presenta los resultados de la determinación de la Demanda Bioquímica de Oxígeno (DBO5) del río Titire en Moquegua, Perú. Se tomaron muestras de agua del río y se analizó el consumo de oxígeno durante 5 días para determinar la presencia de materia orgánica biodegradable y microorganismos. Los resultados mostraron cierto consumo de oxígeno, lo que podría indicar contaminación, aunque la lectura se realizó después de las 24 horas recomendadas. Se recomienda
• Preparación y dispensación de medios de cultivo para hongos y bacteriasRenato Andrade Cevallos
Este documento describe los procedimientos para preparar y dispensar medios de cultivo para hongos y bacterias. Explica cómo preparar un medio de cultivo PDA agregando agar y otros nutrientes a agua hervida, luego esterilizándolo y vertiéndolo en placas de Petri dentro de una cámara de flujo laminar para evitar contaminaciones. El objetivo es aprender técnicas para cultivar microorganismos de manera segura y estudiarlos.
Este documento describe la preparación de medios de cultivo para el cultivo de microorganismos en el laboratorio. Explica los tipos de medios de cultivo, los ingredientes comunes y las etapas para preparar medios de cultivo como pesar los ingredientes, disolverlos, esterilizar y solidificar el medio antes de almacenarlo y usarlo para cultivar microorganismos. También incluye un cuadro de resultados que muestra si los medios de cultivo preparados por estudiantes tuvieron o no crecimiento después de la incubación.
Este documento describe un procedimiento de laboratorio para aislar y cultivar microorganismos de diferentes fuentes, incluyendo material vegetal enfermo, suelo y aire. El procedimiento involucra la desinfección de las muestras, su siembra en medios de cultivo específicos y la incubación para permitir el crecimiento microbiano. Los resultados incluyeron cultivos puros de bacterias gram positivas, gram negativas y hongos.
_IDENTIFICACIÓN DE CIANOBACTERIAS DE AGUA DEL VARADERO DE LA PROVINCIA DE IL...enriquezbriana81
Este informe de laboratorio presenta los resultados del análisis de muestras de agua del varadero de Ilo utilizando el instrumento Algae Torch y microscopio óptico. Se midió el contenido de cianobacterias y clorofila en agua potable, microalgas y del varadero. El agua del varadero contenía 0.06 μg/L de cianobacterias y 8.5 μg/L de clorofila, mientras que el agua de microalgas contenía 203.1 μg/L y 776.53 μg/L respectivamente. Mediante
El documento describe una práctica de campo realizada por estudiantes de biotecnología de la Universidad Nacional de Moquegua en Titire, Puno. Los estudiantes recolectaron muestras de suelo, agua y microorganismos para analizar en el laboratorio. Identificaron diversos microorganismos como diatomeas y tricratium favus en las muestras a través de un microscopio. El lugar se encuentra altamente contaminado por la minería y afecta las actividades de la población local.
Práctica #2 Medios de cultivo y técnicas de tinciónHylaryQuistian
Esta práctica consistió en preparar un medio de cultivo selectivo para el crecimiento de Escherichia Coli en una muestra de heces fecales animales. Se utilizó el medio Agar Eosina y azul de Metileno para facilitar nutricionalmente el crecimiento de E. Coli. Se estrió la muestra en las placas de Petri y se incubó, observando luego la morfología de las colonias mediante tinción de Gram y microscopía.
Este informe presenta los resultados de la determinación de la Demanda Bioquímica de Oxígeno (DBO5) del río Titire en Moquegua, Perú. Se tomaron muestras de agua del río y se analizó el consumo de oxígeno durante 5 días para determinar la presencia de materia orgánica biodegradable y microorganismos. Los resultados mostraron cierto consumo de oxígeno, lo que podría indicar contaminación, aunque la lectura se realizó después de las 24 horas recomendadas. Se recomienda
• Preparación y dispensación de medios de cultivo para hongos y bacteriasRenato Andrade Cevallos
Este documento describe los procedimientos para preparar y dispensar medios de cultivo para hongos y bacterias. Explica cómo preparar un medio de cultivo PDA agregando agar y otros nutrientes a agua hervida, luego esterilizándolo y vertiéndolo en placas de Petri dentro de una cámara de flujo laminar para evitar contaminaciones. El objetivo es aprender técnicas para cultivar microorganismos de manera segura y estudiarlos.
Este documento describe la preparación de medios de cultivo para el cultivo de microorganismos en el laboratorio. Explica los tipos de medios de cultivo, los ingredientes comunes y las etapas para preparar medios de cultivo como pesar los ingredientes, disolverlos, esterilizar y solidificar el medio antes de almacenarlo y usarlo para cultivar microorganismos. También incluye un cuadro de resultados que muestra si los medios de cultivo preparados por estudiantes tuvieron o no crecimiento después de la incubación.
Este documento presenta los resultados de un análisis de superficies realizado como parte de una práctica de microbiología agroindustrial. Se analizaron muestras de una superficie viva (manos) y una superficie inerte (tabla de cortar) utilizando hisopos estériles y cultivos en placas de agar. Los resultados mostraron la presencia de patógenos en la muestra de la superficie viva pero ausencia de microorganismos en la superficie inerta, lo que indica que esta última cumple con los estándares
Este documento presenta el informe final de la práctica de laboratorio del curso de Microbiología realizada por tres estudiantes. El objetivo de la práctica fue dar a conocer las técnicas y procedimientos de análisis microbiológico de suelo, incluyendo recuentos microbianos, determinación de patógenos, y caracterización de microorganismos. La práctica involucró diversas actividades como preparación de muestras de suelo, siembra en medios, coloración de Gram, observación microscópica,
Práctica n° 2 reconocimiento de material deYamilee Farro
Este documento proporciona recomendaciones para estudiantes que realizan prácticas de microbiología. Describe los procedimientos de limpieza y esterilización requeridos para el material de laboratorio como tubos, placas, matraces y pipetas antes y después de su uso. También explica el manejo adecuado de equipos como el autoclave, destilador, estufa de incubación y microscopio para garantizar la esterilidad del ambiente de trabajo.
En esta práctica, estudiantes realizaron pruebas bioquímicas para identificar bacterias usando muestras de agua y tierra. Inocularon tres tipos de agar con las muestras y realizaron tinción de Gram. Luego inocularon pruebas bioquímicas con bacterias Gram negativas. Tras incubar, analizaron los resultados de las pruebas para identificar las bacterias presentes.
El documento describe tres experimentos para analizar la presencia de microorganismos en diferentes ambientes: aire, superficies y manipuladores. En el análisis del aire se encontraron hongos como Aspergillus y Penicillium en el laboratorio y terrazas, pero no en el kiosco. En las superficies no se detectaron microorganismos. Finalmente, en las manos de un manipulador se identificaron bacterias mesófilas y algunas colonias en placa MacConkey.
Este protocolo describe las fases de micropropagación de árboles de chopo a través de cultivo de tejidos y transformación genética mediante Agrobacterium. La Fase I incluye la preparación del medio de cultivo y el cultivo de brotes. La Fase II describe la PCR, ligación y transformación bacteriana. La Fase III implica la transformación vegetal. Posteriormente se llevan a cabo las fases de inoculación y fenotipado de patógenos.
Este documento presenta una guía de prácticas de bioquímica y nutrición para estudiantes de medicina. Incluye contenidos sobre bioquímica como interconversión de unidades, espectrofotometría, enzimas y digestión, y nutrición como valoración nutricional y evaluación de la masa corporal. También presenta el reglamento del laboratorio e instrucciones de seguridad para las prácticas.
Este documento describe el material de laboratorio y medidas de seguridad necesarias para la práctica de microbiología. Detalla elementos clave como matraces Erlenmeyer, probetas, cajas de Petri, asas de cultivo, pipetas bacteriológicas y más. Explica que se deben seguir estrictamente las técnicas estándar, usar equipo de seguridad como guantes y bata, y aplicar medidas como limpiar el área de trabajo y desechar residuos de forma segura. El objetivo es reconocer el material y conocer procedimientos que redu
Este documento presenta las normas generales y los procedimientos para realizar prácticas de microbiología de manera segura y estéril. En la Práctica 1, se describen los tipos de medios de cultivo, su preparación y esterilización, así como técnicas para manipular microorganismos como la esterilización de asas y la siembra en placas. El documento también incluye instrucciones detalladas para la Práctica 1 sobre la preparación de material estéril, una curva de crecimiento bacteriano y el aislamiento
Este documento presenta las normas generales y prácticas de microbiología para el laboratorio. Detalla los procedimientos para trabajar de manera estéril, incluyendo la esterilización de equipos como asas y pipetas, y la preparación y manipulación de medios de cultivo de manera estéril. También describe los diferentes tipos de medios de cultivo y su uso, así como los pasos para la Práctica 1 sobre trabajo en condiciones estériles y manipulación de microorganismos.
El documento presenta los resultados de un informe sobre medios de cultivo utilizados para cultivar Escherichia coli. Se describen dos métodos de siembra: uno en un caldo nutritivo líquido y otro en agar MacConkey sólido. Tras la incubación, se observó el crecimiento de bacilos Gram negativos característicos de E. coli en el agar.
1) El documento presenta las normas y prácticas de microbiología para el laboratorio de segundo curso de la Licenciatura de Farmacia de la Universidad Miguel Hernández. 2) Se describen los procedimientos para trabajar de forma estéril y manipular microorganismos, incluyendo la esterilización de materiales y el uso de campanas de flujo laminar. 3) También se explican conceptos como los diferentes tipos de medios de cultivo, su preparación y esterilización.
Este informe describe los equipos de biología molecular utilizados en el laboratorio de Biotecnología de la Universidad Nacional de Moquegua. Se describen nueve equipos principales, incluyendo agitadores térmicos, minicentrífugas, espectrofotómetros, termocicladores y centrifugadoras. Cada equipo se describe detallando sus funciones, características y especificaciones técnicas, así como sus aplicaciones en investigaciones biomoleculares. El objetivo del informe es proporcionar una visión general de los equipos disponibles para for
Este informe describe los equipos de biología molecular utilizados en el laboratorio de Biotecnología de la Universidad Nacional de Moquegua. Se describen nueve equipos principales, incluyendo agitadores térmicos, minicentrífugas, espectrofotómetros, termocicladores y centrifugadoras. Cada equipo se describe detallando sus funciones, características y especificaciones técnicas, así como sus aplicaciones en investigaciones biomoleculares. El objetivo del informe es proporcionar una visión general de los equipos disponibles para for
En esta práctica, los estudiantes observan halos de inhibición usando diferentes desinfectantes como jabón de cocina, Pinol, cloro y Fabuloso en muestras tomadas de trapos de cocina, manos sin lavar, baño y lavabo. No se observan halos de inhibición con Pinol y Fabuloso, lo que indica que no son efectivos para inhibir el crecimiento bacteriano. Los estudiantes también realizan tinción de Gram y morfología colonial para identificar las bacterias presentes.
INFORME DE LABORATORIO 1 - BIOTECNOLOGIA.pdfCinthiaSamanda
El documento describe los equipos de tecnología molecular disponibles en el laboratorio de la Universidad Nacional de Moquegua. Estos incluyen centrifugadoras, termocicladores, espectrofotómetros, concentradores al vacío y otros equipos necesarios para investigaciones a nivel molecular como la amplificación de ADN y electroforesis. El documento explica las características y usos de cada equipo para apoyar las investigaciones de los estudiantes.
Reporte 2 Técnicas básicas para el cultivo de microorganismos: siembra y estu...1231712
Por medio de esta práctica aprendimos a utilizar los distintos medios de cultivo y sus diferentes nutrimentos y funciones ya que en algunos crecen determinadas bacterias impidiendo el crecimiento y desarrollo de otras, también utilizamos la incubadora para acelerar el crecimiento de bacterias deseadas las cuales las obtuvimos de heces fecales.
Se llevaron a cabo anotaciones en cuadernos y bitácoras que fueron de la mano con la práctica conforme avanzábamos en ella.
Por ultimo logramos cumplir el objetivo que fue detectar la morfología de colonias y bacterias al igual que aprender técnicas y métodos básicos para la preparación de medios de cultivo en los cuales se desarrollaron nuestras bacterias.
El análisis de cianobacterias se ha vuelto una parte crucial en la gestión de recursos hídricos y en la preservación de la salud ambiental. Las cianobacterias, también conocidas como algas verde-azuladas, son organismos fotosintéticos unicelulares que pueden proliferar en cuerpos de agua dulce, salada y en ambientes terrestres.
InvestigacióN Y Recuento De Staphilococcus Aureus2lidia Olmos Vera
Este documento describe los pasos de un procedimiento para investigar y contar Staphylococcus aureus. Se requieren placas de agar, hisopos, tubos de ensayo con agua de peptona, asa en L y mechero Bunsen. Se toma una muestra nasal con hisopo y se siembra en placas de agar. Las placas se incuban a 37°C durante 30 horas y se cuentan las colonias, algunas con halo y otras sin halo. Si se observan halos a las 48 horas, se realiza una prueba de coagulasa para confirmar la presencia de S
Este documento presenta los resultados de un análisis de superficies realizado como parte de una práctica de microbiología agroindustrial. Se analizaron muestras de una superficie viva (manos) y una superficie inerte (tabla de cortar) utilizando hisopos estériles y cultivos en placas de agar. Los resultados mostraron la presencia de patógenos en la muestra de la superficie viva pero ausencia de microorganismos en la superficie inerta, lo que indica que esta última cumple con los estándares
Este documento presenta el informe final de la práctica de laboratorio del curso de Microbiología realizada por tres estudiantes. El objetivo de la práctica fue dar a conocer las técnicas y procedimientos de análisis microbiológico de suelo, incluyendo recuentos microbianos, determinación de patógenos, y caracterización de microorganismos. La práctica involucró diversas actividades como preparación de muestras de suelo, siembra en medios, coloración de Gram, observación microscópica,
Práctica n° 2 reconocimiento de material deYamilee Farro
Este documento proporciona recomendaciones para estudiantes que realizan prácticas de microbiología. Describe los procedimientos de limpieza y esterilización requeridos para el material de laboratorio como tubos, placas, matraces y pipetas antes y después de su uso. También explica el manejo adecuado de equipos como el autoclave, destilador, estufa de incubación y microscopio para garantizar la esterilidad del ambiente de trabajo.
En esta práctica, estudiantes realizaron pruebas bioquímicas para identificar bacterias usando muestras de agua y tierra. Inocularon tres tipos de agar con las muestras y realizaron tinción de Gram. Luego inocularon pruebas bioquímicas con bacterias Gram negativas. Tras incubar, analizaron los resultados de las pruebas para identificar las bacterias presentes.
El documento describe tres experimentos para analizar la presencia de microorganismos en diferentes ambientes: aire, superficies y manipuladores. En el análisis del aire se encontraron hongos como Aspergillus y Penicillium en el laboratorio y terrazas, pero no en el kiosco. En las superficies no se detectaron microorganismos. Finalmente, en las manos de un manipulador se identificaron bacterias mesófilas y algunas colonias en placa MacConkey.
Este protocolo describe las fases de micropropagación de árboles de chopo a través de cultivo de tejidos y transformación genética mediante Agrobacterium. La Fase I incluye la preparación del medio de cultivo y el cultivo de brotes. La Fase II describe la PCR, ligación y transformación bacteriana. La Fase III implica la transformación vegetal. Posteriormente se llevan a cabo las fases de inoculación y fenotipado de patógenos.
Este documento presenta una guía de prácticas de bioquímica y nutrición para estudiantes de medicina. Incluye contenidos sobre bioquímica como interconversión de unidades, espectrofotometría, enzimas y digestión, y nutrición como valoración nutricional y evaluación de la masa corporal. También presenta el reglamento del laboratorio e instrucciones de seguridad para las prácticas.
Este documento describe el material de laboratorio y medidas de seguridad necesarias para la práctica de microbiología. Detalla elementos clave como matraces Erlenmeyer, probetas, cajas de Petri, asas de cultivo, pipetas bacteriológicas y más. Explica que se deben seguir estrictamente las técnicas estándar, usar equipo de seguridad como guantes y bata, y aplicar medidas como limpiar el área de trabajo y desechar residuos de forma segura. El objetivo es reconocer el material y conocer procedimientos que redu
Este documento presenta las normas generales y los procedimientos para realizar prácticas de microbiología de manera segura y estéril. En la Práctica 1, se describen los tipos de medios de cultivo, su preparación y esterilización, así como técnicas para manipular microorganismos como la esterilización de asas y la siembra en placas. El documento también incluye instrucciones detalladas para la Práctica 1 sobre la preparación de material estéril, una curva de crecimiento bacteriano y el aislamiento
Este documento presenta las normas generales y prácticas de microbiología para el laboratorio. Detalla los procedimientos para trabajar de manera estéril, incluyendo la esterilización de equipos como asas y pipetas, y la preparación y manipulación de medios de cultivo de manera estéril. También describe los diferentes tipos de medios de cultivo y su uso, así como los pasos para la Práctica 1 sobre trabajo en condiciones estériles y manipulación de microorganismos.
El documento presenta los resultados de un informe sobre medios de cultivo utilizados para cultivar Escherichia coli. Se describen dos métodos de siembra: uno en un caldo nutritivo líquido y otro en agar MacConkey sólido. Tras la incubación, se observó el crecimiento de bacilos Gram negativos característicos de E. coli en el agar.
1) El documento presenta las normas y prácticas de microbiología para el laboratorio de segundo curso de la Licenciatura de Farmacia de la Universidad Miguel Hernández. 2) Se describen los procedimientos para trabajar de forma estéril y manipular microorganismos, incluyendo la esterilización de materiales y el uso de campanas de flujo laminar. 3) También se explican conceptos como los diferentes tipos de medios de cultivo, su preparación y esterilización.
Este informe describe los equipos de biología molecular utilizados en el laboratorio de Biotecnología de la Universidad Nacional de Moquegua. Se describen nueve equipos principales, incluyendo agitadores térmicos, minicentrífugas, espectrofotómetros, termocicladores y centrifugadoras. Cada equipo se describe detallando sus funciones, características y especificaciones técnicas, así como sus aplicaciones en investigaciones biomoleculares. El objetivo del informe es proporcionar una visión general de los equipos disponibles para for
Este informe describe los equipos de biología molecular utilizados en el laboratorio de Biotecnología de la Universidad Nacional de Moquegua. Se describen nueve equipos principales, incluyendo agitadores térmicos, minicentrífugas, espectrofotómetros, termocicladores y centrifugadoras. Cada equipo se describe detallando sus funciones, características y especificaciones técnicas, así como sus aplicaciones en investigaciones biomoleculares. El objetivo del informe es proporcionar una visión general de los equipos disponibles para for
En esta práctica, los estudiantes observan halos de inhibición usando diferentes desinfectantes como jabón de cocina, Pinol, cloro y Fabuloso en muestras tomadas de trapos de cocina, manos sin lavar, baño y lavabo. No se observan halos de inhibición con Pinol y Fabuloso, lo que indica que no son efectivos para inhibir el crecimiento bacteriano. Los estudiantes también realizan tinción de Gram y morfología colonial para identificar las bacterias presentes.
INFORME DE LABORATORIO 1 - BIOTECNOLOGIA.pdfCinthiaSamanda
El documento describe los equipos de tecnología molecular disponibles en el laboratorio de la Universidad Nacional de Moquegua. Estos incluyen centrifugadoras, termocicladores, espectrofotómetros, concentradores al vacío y otros equipos necesarios para investigaciones a nivel molecular como la amplificación de ADN y electroforesis. El documento explica las características y usos de cada equipo para apoyar las investigaciones de los estudiantes.
Reporte 2 Técnicas básicas para el cultivo de microorganismos: siembra y estu...1231712
Por medio de esta práctica aprendimos a utilizar los distintos medios de cultivo y sus diferentes nutrimentos y funciones ya que en algunos crecen determinadas bacterias impidiendo el crecimiento y desarrollo de otras, también utilizamos la incubadora para acelerar el crecimiento de bacterias deseadas las cuales las obtuvimos de heces fecales.
Se llevaron a cabo anotaciones en cuadernos y bitácoras que fueron de la mano con la práctica conforme avanzábamos en ella.
Por ultimo logramos cumplir el objetivo que fue detectar la morfología de colonias y bacterias al igual que aprender técnicas y métodos básicos para la preparación de medios de cultivo en los cuales se desarrollaron nuestras bacterias.
El análisis de cianobacterias se ha vuelto una parte crucial en la gestión de recursos hídricos y en la preservación de la salud ambiental. Las cianobacterias, también conocidas como algas verde-azuladas, son organismos fotosintéticos unicelulares que pueden proliferar en cuerpos de agua dulce, salada y en ambientes terrestres.
InvestigacióN Y Recuento De Staphilococcus Aureus2lidia Olmos Vera
Este documento describe los pasos de un procedimiento para investigar y contar Staphylococcus aureus. Se requieren placas de agar, hisopos, tubos de ensayo con agua de peptona, asa en L y mechero Bunsen. Se toma una muestra nasal con hisopo y se siembra en placas de agar. Las placas se incuban a 37°C durante 30 horas y se cuentan las colonias, algunas con halo y otras sin halo. Si se observan halos a las 48 horas, se realiza una prueba de coagulasa para confirmar la presencia de S
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puntos geográficos y facilitando el flujo de bienes y personas.
INFORME Nº2 ISLAMIENTO DE MICROOGANISMOS EN DIFERENTES AMBIENTES.pdf
1. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA
ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERIA AMBIENTAL
“AÑO DEL FORTALECIMIENTO DE LA SOBERANÍA NACIONAL”
TEMA: AISLAMIENTO DE MICROOGANISMOS EN DIFERENTES AMBIENTES
DOCENTE: Blgo. HERBERT HERNAN SOTO GONZALES
CURSO: BIOTECNOLOGIA
ESTUDIANTES:
QUISPE DURAND SAHURY JELLITZA
HANCCO LAROTA DIEGO WALDIR
PANTA AURIS FABRICCIO PIERO
SANCHEZ JAVIER ANGELA MATIHEL
2. TABLA DE CONTENIDO
1.INTRODUCCION..............................................................................................................................3
2.OBJETIVOS.......................................................................................................................................3
2.1. Objetivo General.........................................................................................................................3
2.2. Objetivos Específicos ..................................................................................................................3
3.MARCO TEORICO...........................................................................................................................3
3.1Antecedentes .................................................................................................................................3
3.2Bases Teóricas...............................................................................................................................4
4.METODOLOGIA...............................................................................................................................5
4.1. MATERIALES ...........................................................................................................................5
4.2. UBICACIÓN...............................................................................................................................8
4.3. PREPARACION DE CULTIVO................................................................................................9
4.4. AISLAMIENTO .......................................................................................................................10
4.5. CULTIVO .................................................................................................................................10
4.6. CONTEO DE COLONIAS.......................................................................................................13
4.7. VISUALIZACION DE LO MICROORGANISMOS..............................................................14
5.RESULTADOS Y DISCUSIÓN.......................................................................................................14
6.CONCLUSIONES............................................................................................................................21
7.ANEXOS...........................................................................................................................................22
8.BIBLIOGRAFIA..............................................................................................................................23
3. 1.INTRODUCCION
La liberación de contaminantes en el medio ambiente, tanto como el petróleo y sus
derivados, son las causas principales de contaminación global. (Aguilar, 2013).
Ante los impactos contaminantes, se contemplaban medidas convencionales, tales
como la incineración, la detoxificación, técnicas de remediación. (Alcarraz, 2014). Las
desventajas de usar las técnicas mencionadas, es que su ejecución suele ser costosa y
de por si pueden perturbar el medio ambiente. Se plantean nuevas alternativas para dar
solución a los problemas ambientales provocados por contaminantes fósiles, la
biorremediación, una tecnología emergente que aprovecha la capacidad metabólica de
los microorganismos. (Lorenzo, 2016).
Para poder darle uso a los microorganismos, se realiza una forma de cultivo, para poder
manejarlas de la manera que convenga. En este informe se presentará la base para la
utilización de los microorganismos, comenzando desde la recolección de muestras,
pasando al laboratorio para comenzar con el cultivo de los microorganismos, hasta el
aislamiento de estas.
2.OBJETIVOS
2.1. Objetivo General
Aislar y cultivar microorganismos.
2.2. Objetivos Específicos
Preparación de cultivos adecuados para el desarrollo de microorganismos.
Contabilización de colonias microbianas.
Desarrollo de técnicas adecuadas para el aislamiento y cultivo.
3.MARCO TEORICO
3.1Antecedentes
A nivel internacional, Álvarez María del Mar & Blando Lily, en el artículo
científico “Aislamiento de Microorganismos en diferentes ambientes”
explicaron los procedimientos iniciales en la obtención de microrganismos en
base al aislamiento. Dicho aislamiento se realizó en ambientes distintos. Con
4. la finalidad de conocer los microorganismos a los que estamos expuestos
diariamente.
A nivel nacional, Alcarraz Mario & Vasquez George, en el artículo científico
“Aislamiento de microorganismos halófilos con potencial biotecnológico y
análisis de parámetros fisicoquímicos en suelos costero” Basándose en el
aislamiento de los microrganismos un ambiente árido y altamente salino
ubicadas en las zonas costeras de la capital del país. Esto fue realizado con el
objetivo de identificar qué tipo de microorganismos están presentes, tras ser
evaluados enzimáticamente, se dio a conocer sus capacitadas en el tratamiento
de contaminantes, siendo importante en la bioprospección microbiana.
3.2Bases Teóricas
i. Aislamiento
Es la separación de un determinado microorganismo del resto de
microorganismos que le acompañan. El método más frecuente es la
siembra por estría sobre un medio de cultivo solido adecuado dispuesto
en una placa Petri.
ii. Microorganismos
Organismo que solo puede verse bajo microscopio, entre ellas incluyen
las bacterias, los protozoos, las algas y los hongos.
iii. Disoluciones seriadas
Consiste en inocular una serie de tubos de ensayos, en el que se coloca
900µL de agua destilada y luego 100µL la solución de la muestra, se
inocula el primer tubo, se agita el mismo se retira 100µL que se inocula
en el segundo tubo y así sucesivamente utilizando diferentes puntas de
la micropipeta.
6. Vaso de precipitado Agua destilada
Marcador indeleble Pabilo
Incubadora
Autoclave vertical
7. Cabina de flujo laminar Papel film
Cinta de papel Bolsas ziploc
Espátula Probeta
Contador de colonias de
bacterias
Microscopio óptico
8. 4.2. UBICACIÓN
Para el presente trabajo se tomaron muestras de dos puntos diferentes, el primero fue en los
Humedales de Ite que se encuentra ubicado en el distrito de Ite, provincia de Jorge Basadre, en el
departamento de Tacna y el segundo punto fue en el Rio Osmore que se encuentra ubicado en el
distrito de Ilo, provincia de Ilo, en el departamento de Moquegua.
Las coordenadas UTM del punto uno es: 19K 802193 S y 286144 E, las coordenadas del segundo
punto son: 19K 8050068.49 S y 251603.63 E.
Figura 1: Punto 1-Humedales de Ite
Figura 2: Punto 2-Rio Osmore
9. 4.3. PREPARACION DE CULTIVO
Primero se llevo a cabo la preparación de medios de cultivo (Agar nutritivo), para lo cual se realizó
un pequeño calculo para saber la cantidad necesaria, según las indicaciones que venían en el frasco
del Agar nutritivo 65gramos para 1000 ml. de agua, en nuestro caso serian solo 500 ml de agua
por lo que se realizo una regla de tres simples y nos dio el resultado de 32.5 gramos. Luego pasamos
a pesar el Agar nutritivo en la balanza analítica, luego se colocaba un vaso de precipitado en un
agitador magnético y se le coloca 400 ml. de agua, mas los 32,5 gramos de Agar nutritivo a 400
rpm, una vez que no haya grumos se coloca la solución en una probeta hasta llegar a los 500 ml.
se le agrega agua destilada, finalmente se coloca la solución en un frasco y se tapa.
Figura 3: Pesando el Agar nutritivo
Se realizó el autoclavado de todos los instrumentos de laboratorio que se utilizaran en la práctica.
Para lo cual primero se debe envolver todos los materiales en papel craft y asegurar con cinta de
papel y en algunos casos ajustar con el pabilo, luego se colocan los instrumentos en el canastillo
de acero, se coloca agua desionizada en la caldera del autoclave hasta la línea demarcada,
colocamos el canastillo dentro para poder ajustar la tapa del autoclave girando las llaves para que
quede correctamente cerrado, encendemos el equipo, se debe esperar alrededor de 30 minutos para
llegar a los 121C que es la condición para esterilización, cuando la temperatura llegue a 121C se
debe esperar solo 15 minutos, al termino de este tiempo sonara una alarma se debe girar la perilla
y dejar enfriar el autoclave para poder retirar el material.
10. Figura 4: Materiales en el equipo de autoclave
4.4. AISLAMIENTO
Primero se pesó 2 g de sedimentos de los humedales de Ite y con una espátula se diluyó en el caldo
nutriente esterilizado, este procedimiento de dilución se hizo en la campana de flujo ya que este es
un lugar libre de contaminación, luego se agito para homogenizar y se dejó reposar todo un día en
la incubadora.
Figura 5 : 1gr. de muestra de Ite y caldo nutriente
4.5. CULTIVO
El medio de cultivo se distribuyó en 15 placas Petri de la siguiente manera.
11. Primero se retiró de la autoclave los medios de cultivo donde se sometieron a 105ºC por durante
15 minutos para poder derretir y fueron pasados a baño maría para bajar su temperatura.
Figura 6 : Baño maría de los agares
Para la distribución del medio de cultivo (caldo) en las placas petri debidamente rotuladas, se
encendió el mechero perteneciente a la cabina de flujo con el fin de que toda la zona esté aséptica
y únicamente nos salgan microorganismos que nosotros deseamos, luego se introdujo a la cabina
de flujo las placas Petri y el medio de cultivo .
Figura 7 : Cabina de flujo laminar y distribución del caldo nutriente a las placas petri
12. Posterior a esto recién se distribuyó cantidades similares y caldo nutriente a las placas siempre
cerca del mechero, y estas fueron llevadas a la incubadora en bolsas ziploc para mantenerlas
aisladas.
Figura 8 : Placas petri
Luego se utilizaron 8 tubos de vidrio en una gradilla y las placas con medio de cultivo preparadas
en el paso anterior , para el cultivo se tomo 100 μL de la muestra de sedimento mas el caldo
nutriente (inoculo) y 1000 μLde agua destilada el cual se coloco de la siguiente manera:
Al primer tubo se coloco 100 μL de la muestra de sedimento mas el caldo nutriente
(inoculo) y 1000 μL de agua destilada con micropipetas de 100 y 1000 μL y se agito
.
Al segundo tubo se le coloco 100 μL del tubo anterior y 1000 μL de agua destilada
y así sucesivamente con el resto de tubos .
Figura 9 : colocación de agua destilada en los tubos
13. Cabe resaltar que todo este procedimiento se realizó también en la cámara de flujo laminar y la
técnica empleada fue la técnica de diluciones seriadas. Finalmente se tomó 100 μL de cada tubo y
se lo coloco a cada placa Petri con micropipeta de 100 μL que tenga debidamente limpia su punta
y se esparció con un esparcidor sobre la superficie de la placa.
Figura 9: Esparcimiento en las placas petri
Se dejo encubando en condiciones adecuadas durante aproximadamente 3 días.
Cabe resaltar que las placas deben estar rotuladas de la siguiente manera:
4.6. CONTEO DE COLONIAS
Luego de que las placas petri estuvieran en la incubadora se originaron colonias visibles las cuales
fueron contabilizadas con un contador de colonias , contando siempre solo las colonias que no se
encuentren juntas entre ellas .
Figura 10: Placa petri con colonias de microorganismos
14. Luego estas fueron pasadas a placas petri con medios de cultivo ,muy cuidadosamente con un
montadiente se pasa las colonias haciendo una pequeña raya por cada colonia para posteriormente
visualizarlas, se debe utilizar un palito diferente para cada colonia así también todo este
procedimiento se realiza en la cabina de flujo laminar .
Figura 11 : Placa petri con colonias de microorganismos separadas
4.7. VISUALIZACION DE LO MICROORGANISMOS
Para esta parte se colocó una muestra de cada colonia con un montadiente con un portaobjeto y se
colocó cristal violeta (100 ul) para la visualización de microorganismos, finalmente se utilizó el
microscopio
Figura 12: Cristal violeta para observación de microorganismos y microorganimos observados
5.RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Las placas Petri fueron inoculadas el día cinco de mayo y metidas a la estufa. Paso tres días para
obtener los resultados siendo que en todas las inoculaciones de las muestras se encontró colonias
15. de bacterias en una mayor proporción las cuatro primeras inoculaciones -1, -2, -3, -4 (figura). En
las demás inoculaciones se encontró colonias más separadas lo que nos permitió aislarlas (figura).
Figura 13: muestra -1 descartada
Figura 14: muestra -2 descartada
Figura 15: muestra -3 descartada
En la inoculación -5 se encuentra varias colonias aparentemente iguales sin embargo se pueden
encontrar algunas que son transparentes. Se encontraron 56 colonias.
16. Figura 16: muestra -5
En la inoculación -6 empieza a disminuir el número de colonias a 30, se identifica cada vez
colonias más grandes con forma parecida a un huevo frito y colonias agrupadas de un color oscuro.
Figura 17: muestra -5
La inoculación -7 sucede un cambio bastante notable la disminución de colonias es mayor siendo
11 y se aprecia mejores colonias mucho más grandes.
Figura 18: muestra -5
17. La inoculación -8 la disminución de colonias se reduce hasta 8 y teniendo la colonia más grande.
Figura 19: muestra -5
Luego de terminar de contar las colonias se procedió al aislamiento de las bacterias en un medio
cultivo (agar nutriente). Inicialmente se tenia las bacterias en delgadas líneas (figura) para luego
meterlas a la estufa y esperar dos dias a que crezcan. Una vez sacado de la estufa se observó
claramente el crecimiento de las bacterias uno en especial se expandió bastante y se formó
pequeñas colonias arredro de las líneas.
Figura 20: aislamiento de bacterias
18. Figura 21: resultado del aislamiento de bacterias
Al termino de observar su crecimiento se uso un microscopio para observar con mejor detalle las
bacterias con un objetivo de x10, x20, x30 y x40.
En el aumento x10 no se distingue muy bien las bacterias apenas se notan como puntos, se observa
hongos y burbujas de aire
Figura 21: Observación de bacterias con aumento x10
19. En el aumento x20 se distingue un pequeño cambio, pero aún no se observa claramente las
bacterias.
Figura 22: Observación de bacterias con aumento x20
Con el aumento x30 ya se observabas las bacterias teniendo como características ser más alargadas
y otras en forma de circulo
20. Figura 23: Observación de bacterias con aumento x30
Con el aumento x40 se tenía una calidad de imagen muy bueno, pudiendo identificar características
de algunas bacterias.
Figura 24: Observación de bacterias con aumento x40
21. Estos resultados concuerdan con Alvarez y Baldon que indican Si bien, en la Fig 1 y 2 se observan
únicamente colonias bacterianas, se comprueba que estos microorganismos son los más
encontrados en el suelo; además se observan colonias de diferentes colores y morfología
Se confirma también que existen otros métodos del conteo de bacterias como lo hicieron Ramírez
S en Recuento en cámara de Neubauer Saccharomyces cerevisiae. Los resultados del número de
células por este método fueron de 100 cells/mm3 que al ser convertidas a la unidad utilizada para
el patrón de McFarland fue de 1,0*105 cells/mL
6.CONCLUSIONES
Los microrganismos son una alternativa para la biorremediación, evitando impactos
negativos por el uso de técnicas de remediación que incluyan químicos.
El cultivo de microrganismo nos ayuda a reproducirlas para poder conservarlas o utilizarlas
en biorremediación o estudios que nos permitan conocer sus ventajas.
22. El éxito del aislamiento de microorganismos, va a depender de la separación sobre el medio
de cultivo, depende de la superficie sobre la que se ha distribuido la muestra. Es muy
importante realizar el mayor número de estrías posible ya que las primeras estarán cargadas
mientras que en las últimas las colonias estarán separadas.
Si bien se encontraron colonias en las muestras inoculadas aun no podemos identificarlas
correctamente y preservar bacterias puntuales. Es de suma importancia porque al tener
identificado podremos usarlas correctamente para diversos usos o como en nuestro caso
producción de bioelectricidad.
7.ANEXOS
Figura 1: Envolviendo los
materiales con papel craft
Figura 2: Distribución del
medio de cultivo
Figura 3: Muestras
inoculadas
Figura 4: Recolectando
muestras
23. 8.BIBLIOGRAFIA
Revelo, D. M., Hurtado, N. H., & Ruiz, J. O. (2013). Celdas de combustible
microbianas (CCMs): Un reto para la remoción de materia orgánica y la generación
de energía eléctrica. Informacion Tecnologica, 24(6).
https://doi.org/10.4067/S0718-07642013000600004
Buritaca H., H. M., Mejía, M., & Álvarez, M. D. M. (2017). Aislamiento de
Microorganismos en diferentes ambientes (Suelo, Agua y Aire). Mente Joven, 6.
https://doi.org/10.18041/2323-0312/mente_joven.0.2017.3666
Tenorio, C., Reyna, R., & Narciso, T. (2019). Identificación Fitoquímica Y
Aislamiento De Microorganismos Endófitos De Agave Americana. FLEPS 2019 -
IEEE International Conference on Flexible and Printable Sensors and Systems,
Proceedings, 6(1).