El documento describe diferentes sistemas de expresión de proteínas recombinantes, destacando la glándula mamaria como una alternativa apropiada. Explica que la selección del sistema depende de los eventos postraduccionales necesarios y que los vectores adenovirales podrían usarse para producir proteínas en la leche mediante transducción de la glándula mamaria.

2.  Conocer los hospederos que permiten la
expresión de proteínas recombinantes y sus
mecanismos de acción.
 Analizar las ventajas y desventajas de los
sistemas de expresión con especial énfasis
en la glándula mamaria como biofábrica.

3.  La glándula mamaria
se identifica como una
alternativa apropiada
para la producción de
proteínas
recombinantes con
modificaciones
postraduccionales
propias de eucariontes
superiores.

4.  El éxito del ensayo
consiste en encontrar
el vector adecuado
para transferir los
genes de interés a las
células epiteliales
mamarias y que la
transducción ocurra
de manera masiva y
eficiente.

5.  Transferencia in situ
 Endocitosis mediada por receptor
 Uso de pistolas de genes
 Vectores adenovirales

6.  Los vectores
adenovirales podrían
ser un punto de partida
para el desarrollo de
sistemas de producción
de proteínas
recombinantes en la
leche de mamíferos
genéticamente
modificados, mediante
la transducción
transiente de la
glándula mamaria con
vectores adenovirales.

7.  La selección de un organismo u otro para la
expresión de proteínas de interés
biofarmacéuticos está relacionada con los
eventos postraduccionales específicos,
necesarios para que ocurran los
plegamientos correctos que garanticen la
actividad biológica de la molécula.

8.  La especie mas estudiado genética
y fisiológicamente Escherichia
coli.
Las ventajas de este
microorganismos son:
 La rápida generación de biomasa.
 La fácil manipulación genética.
 Que no requiere de medios de
cultivo.
 La alta eficiencia en la
incorporación del el material
genético foráneo.

9.  No expresan muchas de las modificaciones
postraduccionales.
 No se forman puentes disulfuro entre las
cisteínas.
 No enlazan oligosacáridos a las proteínas.

10.  Se logro modificar genéticamente las rutas
enzimáticas de glicosilación de la Pichia
pastoris, como una alternativa novedosa
para la producción de proteínas
recombinantes en microorganismos
eucariontes inferiores, la cual permita la
obtención de la proteína de interés con un
patrón de glicosilación específico y una
elevada homogeneidad.

11.  Las plantas se
consideran uno de
los sistemas de
producción mas
seguros, ya que
carecen de secuencias
de ADN oncógenas

12. Ventajas:
 Bajo costo y capacidad de producción a
gran escala, así como a la simplicidad de la
cosecha y el almacenaje.
Desventajas:
 Tiene la limitación de no generar perfiles
de oligosacáridos de tipo complejo,
limitando su utilización como agentes
terapéuticos en los seres humanos.

13. La transferencia del
material genético para la
generación de animales
transgénicos se realiza
en etapas iniciales del
desarrollo embrionario.
Lo anterior favorece el
paso de la nueva
información a la línea
germinal del individuo
genéticamente
modificado.

14.  Principales aplicaciones Limitaciones de la
de los animales expresión de proteínas
transgénicos:
en la sangre:
 Obtención de modelos
animales  Separación de la
 Producción de proteínas proteína recombinante
recombinantes de su homóloga en el
hospedero.
Las proteínas
recombinantes
producidas en animales  La deficiente
transgénicos se estabilidad de las
expresan en las células proteínas secretadas al
de un tejido específico y suero sanguíneo.
se secretan en un fluido
corporal determinado.

15. En la leche de algunos
mamíferos, principalmente
rumiantes se pueden llegar a
producir de 200 g hasta 1 kg de
proteína por día.
Ejemplos de proteínas
recombinantes producidas en
la glándula mamaria:
 Hormona del crecimiento
humana (hGH)
 Factor de crecimiento neural
 Proteína C humana
Antitrombina humana (Ath)
Lactoferrina humana.

16. La expresión de
proteínas
recombinantes en
la glándula
mamaria depende
de :
 Casete de
expresión utilizado
Método para la
transferencia del
material genético.

17.  Los promotores más utilizados son aquellos que en
condiciones naturales regulan la expresión de las
proteínas de la leche.

20.  Microinyección de ADN:
Consiste en la microinyección del ADN
foráneo en el pronúcleo de embriones
unicelulares y la inserción al azar del
materia genético en el embrión
microinyectado.
Hasta la actualidad este método se ha
utilizado como la técnica universal de
transferencia horizontal de material
genético.

22.  Técnica de Transferencia nuclear de células
somáticas (TNCS)
En la actualidad representa un procedimiento
alternativo para crear animales transgénicos.
Ventajas:
• Permite la introducción directa de transgenes a
ovocitos anucleados
• Permite la selección de los embriones
transformados por los métodos convencionales
de biología molecular
• Posibilita la selección del sexo en la línea de
fundadores

23. Desventajas:
 La metodología es
compleja y demanda
equipamiento
 Los reactivos son muy
caros
 En vacas los fetos
generados por TNCS, se
pierden entre el día 35 y el
60 de gestación
 Complicaciones en el
embarazo, debido al
síndrome de feto gigante;
también se observan
anomalías pulmonares y
deficiencias metabólicas,
tanto en fetos como en
crías nacidas.

24. Consiste en transferir el ADN directamente a las
células que constituyen el epitelio mamario de
una hembra adulta.
Ventajas:
• Es aplicable a casi todas las especies de
mamíferos independientemente de su fondo
genético.
• Permite la inserción de múltiples casetes de
expresión
• Reduce considerablemente el tiempo entre la
aplicación del método de modificación y la
obtención del producto de interés.