Este documento describe un experimento para determinar la actividad enzimática de la ureasa. La ureasa es una enzima que cataliza la hidrólisis de la urea en amoníaco y dióxido de carbono. El procedimiento incluye incubar una muestra con ureasa y medir los productos formados por dos métodos: reacción de neutralización y método colorimétrico con reactivo de Nessler. Los resultados cuantificarán la velocidad de la reacción catalizada por la ureasa.

1. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO
FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS
DEPARTAMENTO ACADÉMICO DE QUÍMICA
BIOLÓGICA Y FISIOLOGÍA ANIMAL
CÁTEDRA DE BIOQUÍMICAAMBIENTAL
P2. - Determinación de la actividad enzimática de
la ureasa.

2. + 2H20
UREASA
pH 7,2 / 37oC
grupo de las hidrolasas
Sustrato
Producto
2NH40H + CO2
INTRODUCCIÓN

4. + Nessler
2NH40H
Presencia de la
actividad de la
ureasa
Producto
INTRODUCCIÓN

5. MATERIALES
Demostrar la actividad
enzimática,
determinando para ello
la actividad de ureasa.
OBJETIVO

6. A. Sistema de incubación
PROCEDIMIENTO
Rotular

7. B.1.
Cuantificación
de producto
formado.
Reacción de
Neutralización
2 mL
2 mL
2 gotas
2 gotas
Sistema
anterior
Rojo de
metilo
HCl 0.05N
HCl 0.05N
PROCEDIMIENTO
Rojo de
metilo
2B
1B

8. B.2. Reacción de
Nessler
PROCEDIMIENTO
Agua Nessler
destilada
Sist.
Incubación

10. 1. Determinación del producto formado por reacción de neutralización:
2. Determinación del producto formado por método colorimétrico (reactivo de Nessler)
RESULTADOS
TUBO V HCl gastado Velocidad (µmol urea
desdoblados/min)
1
2