2. Ejemplos de enzimas:
Catalasa
Se encuentra en casi todas las
células aerobias, en los
peroxisomas.
Actúa rompiendo el peróxido de
hidrógeno que se produce en las
células en agua y oxígeno :
2 H2O2
catalasa
2 H2O + O2
3. Materiales y utilidad
Patata. En ella están presentes las
enzimas de catalasa cuya actividad
queremos observar. Se escogió la patata
por ser muy manipulable y accesible.
Bisturí o cuchillo.
Pinzas.
Tubos de ensayo.
Gradillas para tubos.
Mechero. Para calentar las muestras y ver
el efecto del aumento de temperatura.
4. NaOH. Para observar el efecto del pH
demasiado básico.
Vinagre. Para observar el efecto del pH
demasiado ácido
Hielo. Para enfriar ciertas muestras y
desnaturalizar la catalasa, esta vez por frío.
Agua oxigenada comercial (peróxido de
hidrógeno al 3%). Es el sustrato, que
reaccionará con la enzima si ésta no está
desnaturalizada, y que no reaccionará en
caso de que sí lo esté. La evidencia de la
reacción es que al realizarse se libera
espuma o burbujas por el desprendimiento
de O2.
5. Desarrollo de la práctica
Cada grupo dispone de 5 tubos señalados de la
A a la E.
A los tubos A se les añade un cubito de patata y
2ml de H2O2.
A los tubos B se les añade un cubito de patata y
2ml de vinagre. Hay que esperar al menos 5
minutos para que el vinagre surta efecto.
A los tubos C se les añade un cubito de patata y
2 ml de la disolución de NaOH. Hay que
esperar 5 minutos para que el NaOH surta
efecto
6. A los tubos D se les añade un cubito de
patata y 2ml de H2O. Hay que hervir
durante 5 minutos.
A los tubos E se les añade un cubito de
patata y 2ml de H2O. Hay que introducir
los dos tubos en recipiente con agua y
hielo durante 10 minutos.
Por último se añaden 2ml de H2O2 a todos
los tubos que aún no lo tenían (todos
menos el A )
Desarrollo de la práctica
7. Observación de resultados
TUBO TRATAMIENTO
RESULTADO
OBSERVADO
EXPLICACIÓN
A Patata + 2ml H2O2 Salen burbujas.
B No salen burbujas.
C No salen burbujas.
D No salen burbujas.
E
Apenas salen
burbujas.
En los tubos E no deberían haber salido burbujas; la desnaturalización debería haber sido más
radical, pero quizá el tiempo al que se sometieron las muestras al frío no fue suficiente. Pudo
haberse dado la renaturalización de la catalasa. Sería mejor añadir el H2O2 lo antes posible
después de quitar los muestras F y F’ del hielo, para que no haya tiempo de renaturalización.
8. Interpretación
Tubo A: la catalasa contenida en la patata reacciona con el H2O2
dando agua y oxígeno que al ser un gas, tiende a salir y al hacerlo,
burbujea.
Tubo B: El vinagre añadido desnaturaliza la catalasa (a un pH
ácido las proteínas se desnaturalizan) y cuando añadimos el H2O2
no se produce reacción.
Tubo C: El NaOH ha desnaturalizado la catalasa (un pH alcalino
también la desnaturaliza) y tampoco hay reacción con el H2O2.
Tubo D: No hay reacción con el H2O2 porque el calor a
desnaturalizado la enzima.
Tubo E: Hubo una pequeña reacción que no debió darse. Tal vez
la inmersión en medio frío debió durar más o, quizás, se tardó un
poco en añadir el H2O2 después de sacar la muestra del agua
helada y la enzima tuvo tiempo de renaturalizarse.
