Proyecto fc inmunologia

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Catedra de Inmunología - Facultad Ciencias de la Salud. Universidad Técnica de Manabí.
Catedra de Inmunología, Escuela de XXXXXXXXXXX, Facultad Ciencias de la Salud. Universidad Técnica de Manabí.
Alergia, tos recurrente, covid-19, dolor articular, asma, artritis,artrosis, dr. Jorge cañarte alcivar, defensas, inmunólogo,
TECNICAS DE DIAGNOSTICO EN INMUNOLOGIA
María Cedeño Velez1
, José Delgado Muentes1
, Andrea Medranda Cevallos1
, Helen Morales Garcia1
,
Marcela Rodríguez Palacios1
, Jorge Cañarte Alcívar2-3
1Estudiante de la Escuela de Laboratorio Clínico. Facultad Ciencias de la Salud. Universidad Técnica de Manabí, Portoviejo
– Manabí – Ecuador
2Docente Investigador. Facultad Ciencias de la Salud. Universidad Técnica de Manabí. Portoviejo – Manabí – Ecuador
3Medico especialista en Inmunología Clínica, StemMedic, Manta – Manabí – Ecuador.
Resumen. - En los últimos años, los avances
tecnológicos han permitido el desarrollo de
técnicas para el diagnóstico de múltiples
enfermedades, estas técnicas se fundamentan en
la afinidad antígeno-anticuerpo. El antígeno es una
sustancia que, al introducirse en el organismo,
induce una respuesta inmunitaria, provocando la
formación de anticuerpos. Un anticuerpo es una
gammaglobulina elaborada por las células
plasmáticas en respuesta a un antígeno. Estas
técnicas inmunológicas han sido de gran ayuda
para las enfermedades autoinmune. La
sensibilidad y especificidad en la detección de los
anticuerpos específicos también ha aumentado,
dado que las nuevas técnicas permiten un
diagnostico con mayor certeza. La técnica de la
inmunofluorescencia indirecta es la más utilizada
debido a su fácil manejo y estandarización. En el
método ELISA la modalidad más frecuente para la
determinación de antígenos es el ELISA
"sándwich" directo. Para los antígenos puros o
totales se utiliza la prueba de
Contrainmunoelectroforesis, técnica que permite
una rápida detección de anticuerpos o antígenos
microbianos solubles encontrados en fluidos
corporales y tejidos. Las técnicas de aglutinación
se basan en la reacción antígeno-anticuerpo, son
la base de la mayor parte de las técnicas
inmunológicas. La inmunocromatografía es una
de las técnicas inmunológicas cuya principal
ventaja es la rapidez para el diagnóstico de
enfermedades. El objetivo de esta revisión fue
explorar y analizar información específica sobre
técnicas de diagnóstico en inmunología,
destacando las principales pruebas y
procedimientos, para lo cual se ha realizado una
búsqueda sistemática de libros y artículos para
fortalecer el carácter científico de la investigación.
Palabras claves. – Técnicas,
inmunocromatografía, inmunofluorescencia,
contrainmunoelectroforesis, antígeno.
Introducción.- Investigar enfermedades
que modifican principalmente el sistema
inmunológico es un desafío importante para los
médicos, ya que generalmente requiere pruebas
complementarias específicas y costosas.
En este sentido, es factible dividir las
enfermedades inmunológicas en cuatro
categorías: inmunodeficiencia, enfermedades
autoinmunes, enfermedades alérgicas y
enfermedades tumorales, por lo que es factible

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orientar la investigación de laboratorio desde
métodos clínicos adecuados (Carla Bastías O.,
2015) (Carla Bastías O., 2015).
Actualmente, el soporte de laboratorio para el
diagnóstico de enfermedades autoinmunes
incluye un gran número de tecnologías que
permiten la identificación y confirmación de
antígenos específicos que han sido identificados.
Además, en las últimas décadas, este tipo de
tecnologías han evolucionado significativamente
con el desarrollo de pruebas con mayor
especificidad y sensibilidad. Las técnicas más
utilizadas son: inmunofluorescencia indirecta (IFI),
ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas
(ELISA), ensayo multiplex y
electroinmunotransferencia (EIT). Cada uno de
ellos es diferente, pero conservan la base general
para reconocer la unión antígeno-anticuerpo, por
lo que presentamos las características más
importantes de estas pruebas. (Diego F.
Hernández Ramírez, 2010)
Técnicas de diagnóstico en inmunología.
Las técnicas de detección de antígeno son técnicas
inmunológicas que se fundamentan en la afinidad
antígeno-anticuerpo. Definiríamos el antígeno
como aquella molécula estructural o metabólica
de origen microbiano que es reconocida como
extraía por el organismo humano y que es capaz
de desencadenar una respuesta inmunitaria.
Por otro lado, un anticuerpo es una
gammaglobulina sintetizada por las células
plasmáticas en respuesta a la estimulación
ejercida por un antígeno, con el que reacciona de
forma específica, gracias a la correspondencia
entre sus estructuras. (1)
Durante los últimos años el avance tecnológico ha
permitido desarrollar técnicas que ayudan al
diagnóstico de múltiples enfermedades. En el caso
de las enfermedades autoinmunes, las técnicas
inmunológicas son de gran ayuda ya que permiten
la detección de varios auto anticuerpos
simultáneamente a partir de volúmenes de
muestra pequeños.
Aunado al desarrollo de las nuevas técnicas, la
sensibilidad y especificidad en la detección de las
especificidades de los anticuerpos también han
ido en aumento, de tal manera que el clínico
puede contar con pruebas que le permiten hacer
los diagnósticos tempranos con mayor certeza y
hacer también el seguimiento del curso de la
enfermedad en función de la variación de los
anticuerpos presentes en las muestras de los
pacientes.
Cabe destacar que las nuevas técnicas de
laboratorio que se utilizan para el apoyo en el
diagnóstico de las enfermedades autoinmunes ya
no son exclusivas de laboratorios de investigación,
sino que, por su control de calidad, facilidad de
estandarización y reproducibilidad pueden usarse
en laboratorios clínicos medianos y pequeños.
Inmunofluorescencia indirecta
La inmunofluorescencia indirecta (IFI) es una de
las técnicas más utilizadas en los estudios de
autoinmunidad debido a su fácil manejo y
estandarización. Sin embargo, la lectura e
interpretación requieren de amplia experiencia.

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La técnica se basa en el reconocimiento de los
anticuerpos que reconocen estructuras
antigénicas celulares nativas. La interacción se
evidencia por medio de un anticuerpo
antiinmunoglobulina humana, producido en
conejo, cabra o cobayo, dirigido contra las
fracciones constantes (Fc) de las
inmunoglobulinas IgG, IgA y/o IgM. (2)
En la inmunofluorescencia indirecta el anticuerpo
empleado no está marcado con ninguna sustancia,
revelándose la presencia del antígeno al emplear
un segundo anticuerpo marcado con un
fluorocromo frente al anticuerpo primario. (3)
La interacción se evidencia por medio de un
anticuerpo antiinmunoglobulina humana,
producido en
conejo, cabra o
cobayo,
dirigido contra
las fracciones
constantes (Fc)
de las
inmunoglobulinas IgG, IgA y/o IgM.
Determinación de antígenos por ELISA
La modalidad más frecuente del método ELISA
para la determinación de antígenos es el modelo
ELISA "sándwich" directo. En este modelo, el Ac
específico para la Ag de interés se encuentra
adsorbido en un soporte sólido sobre el cual se
añadirá la muestra biológica. En el caso de que en
dicha muestra se encuentre la Ag, quedará
capturado en la placa y será puesto en evidencia
tras la adición de otro Ac específico conjugado con
la enzima. Por último, se añade el sustrato
incoloro que, por acción de la enzima, dará un
producto coloreado que producirá un color
observable a simple vista y cuantificable mediante
un espectrofotómetro. (4)
Se han desarrollado varios paquetes diagnósticos
basados en este tipo de método para la
identificación de patógenos y toxinas tales como
Salmonella spp., Escherichia coli, enterotoxinas
estafilocóccicas, entre otros.
El método para la determinación de la avidez del
enlace de IgG específica es un ensayo indirecto
que consiste en un enzimoinmunoanálisis. El
antígeno se emplea para recubrir los pocillos (fase
sólida). La presencia de enlaces fuertes entre
anticuerpos IgG y antígeno (es decir la avidez de la
IgG) en una determinada muestra positiva para
IgG se detecta comparando la señal de una
muestra de referencia (es decir no tratada) con la
señal de la misma muestra tratada con urea, que
disocia los enlaces débiles entre IgG y el antígeno.
(5)
Contrainmunoelectroforesis
La prueba de Contrainmunoelectroforesis (CIEF)
es una técnica de inmunoprecipitación que utiliza

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antígenos puros o totales, y permite la rápida
detección de anticuerpos o antígenos microbianos
solubles en una variedad de fluidos corporales y
tejidos. (6)
En un par de pocillos practicados en un gel de
agarosa se enfrentan la muestra en la cual
deseamos estudiar la presencia de antígeno y el
antisuero homólogo. Al aplicar un campo eléctrico
a través del gel, el antígeno migra hacia el pocillo
del antisuero y las inmunoglobulinas hacia el del
antígeno, bien como consecuencia de la carga
eléctrica o bien arrastradas en sentido contrario
por el flujo osmótico que se establece en el
interior del agar.
Técnicas de aglutinación
Las reacciones de aglutinación y de precipitación
son la base de la mayor parte de las técnicas
inmunológicas. Su principio se basa en la reacción
antígeno-anticuerpo.
Las técnicas de aglutinación son sólo
semicuantitativas y algo más difíciles. La
aglutinación de los antígenos nativos insolubles o
de las partículas recubiertas por el antígeno puede
evaluarse a simple vista con o sin la ayuda del
microscopio. Entre las ventajas de las reacciones
de aglutinación están su alto grado de sensibilidad
y la enorme variedad de substancias identificables
a través del uso de partículas que están
recubiertas por antígeno o por anticuerpo. (7)
Inmunocromatografía
Es una técnica inmunológica que permite
visualizar la reacción antígeno-anticuerpo por la
acumulación del oro coloidal del conjugado en
zonas específicas del papel de nitrocelulosa donde
se fijan previamente anticuerpos de captura. (8)
En la actualidad, esta técnica se viene utilizando
para el diagnóstico rápido de varias
enfermedades, a través de la detección de
antígenos en diversos líquidos biológicos, tales
como en infecciones por Estreptococos b-
hemolítico, Chlamydia, virus de la hepatitis,
malaria, etc.

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Conclusiones. - Se puede acotar que las
técnicas de diagnóstico en el área de la
inmunología son de suma importancia hoy por
hoy, dichas técnicas han evolucionado, son menos
invasivas y nos facilitan la determinación de las
enfermedades autoinmunes para que se pueda
emitir un tratamiento. Como se habló
anteriormente existen múltiples técnicas, sin
embargo todas tienen el mismo fundamento que
radica en el reconocimiento de la unión antígeno-
anticuerpo, además de que actualmente poseen
una mayor especificidad y sensibilidad o en otras
palabras nos brindan más precisión en sus
resultados.
Por su fácil manejo, una de las técnicas más
utilizadas es la inmunofluorescencia indirecta y
esta tiene muchos campos de aplicación como por
ejemplo su uso en el área de microbiología al
momento de diagnosticar algunos tipos de
bacterias con sus cultivos que en estado positivo
emiten fluorescencia color verde manzana. La
inmunofluorescencia directa se basa en el
reconocimiento de anticuerpos que reconocen
estructuras antigénicas nativas, esta interacción
se da por medio de un anticuerpo anti
inmunoglobulina humana que se dirige en contra
de las fracciones constantes de las
inmunoglobulinas IgA, IgG o IgM.
La inmunología tiene una aplicación bastante
amplia, es una ciencia que se basa en las
reacciones del organismo frente a agentes
externos que pueden ser causantes de patologías,
pienso que otra de las áreas más importantes
donde la usamos es en la inmunocromatografía
para la determinación de pruebas en las que
necesitamos un resultado rápido y una técnica
poco invasiva, un claro ejemplo son las pruebas
rápidas para coronavirus.

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Bibliografía. -
1. Carla Bastías O., F. S. (2015).
LABORATORIO DE INMUNOLOGÍA EN
LA PRÁCTICA
2. Carles A, Bartalome R, Dominguez J,
Lurdes M, Rabella N. SEIMC. [Online].;
2005. Acceso 23 de Agosto de 2021.
Disponible en:
https://seimc.org/contenidos/docume
ntoscientificos/procedimientosmicrob
iologia/seimc-
procedimientomicrobiologia19.pdf.
3. Diego H, Caviedes J.
ReumatologiaClinica. [Online].; 2010.
Acceso 21 de Agosto de 2021.
Disponible en:
https://www.reumatologiaclinica.org/
es-tecnicas-inmunologicas-que-
apoyan-el-articulo-
S1699258X09002411.
4. Cercenado E, Cantón R. Seimc.org.
[Online].; 2005. Acceso 21 de Agosto
de 2021. Disponible en:
https://seimc.org/contenidos/docume
ntoscientificos/procedimientosmicrob
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procedimientomicrobiologia19.pdf.
5. Hernández Ramírez, D. F., & Cabiedes,
J. (2010). Técnicas inmunológicas que
apoyan el diagnóstico de las
enfermedades autoinmunes.
Reumatología Clínica, 6(3), 173–177.
doi:10.1016/j.reuma.2009.10.003
6. Gosling J. Immunoassays: A Practical
Approach. Oxford: Oxford University.
[Online].; 2000. Acceso 21 de Agosto
de 2021. Disponible en:
http://scielo.sld.cu/pdf/hie/v51n1/hie
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7. Becerra L, Campos C. SCIELO. [Online].;
Disponible en: Dialnet-
TestDeAvidezEnElDiagnosticoDePrimo
infeccionDeEnfer-6236151.pdf.
8. Acuña D, Cornejo W. SCIELO. [Online].;
Disponible en:
http://www.scielo.org.pe/scielo.php?
pid=S1025-
55832020000300294&script=sci_artt
ext.
9. Aguilar V. MEDIAGRAPHICS. [Online].;
Disponible en:
https://www.medigraphic.com/pdfs/g
aceta/gm-2004/gms043p.pdf.
10. Escalante H, Huamanchay O, Davelois
K. SCIELO. [Online].; 2001. Acceso 23
de Agosto de 2021. Disponible en:
http://www.scielo.org.pe/scielo.php?s
cript=sci_arttext&pid=S1726-
46342001000200002.

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