1. iagnóstico microbiológico indirecto y i
nmunidad humoral
Alba Miriam Poche Ceballos
Estudiante Inmunodiagnóstico Veterinario, LCV UDCA

2. iagnóstico microbiológico indirecto y i
nmunidad humoral
INMUNIDAD HUMORAL
Cuando hablamos de la inmunidad
humoral nos referimos a la
respuesta de un individuo frente a a
la presencia de un agente causante
de infección. Debido a que la
inmunidad humoral esta mediada
por los anticuerpos. Aquellos
anticuerpos que son producidos
como mecanismo de defensa. Y que
estos son producidos por los
linfocitos T o células de la
inmunidad celular. Aunque también
se dice que pueden ser anticuerpos
con memoria inmunológica.
Teniendo en cuenta que para la
inmunidad humeral también forman
parte las inmunoglobulinas A, B y
M, que estas son producidas por
células plasmáticas del retículo
endotelial ósea los linfocitos B
maduros.
Imagen tomada del artículo métodos
fisicoquímicos en biotecnología. Universidad
nacional Autónoma de México.
Adicional a ello también se debe tener en cuenta que también existe un
sistema de complemento encargado de la activación de los linfocitos B. para
que después sean activados los mecanismos de anticuerpos. Estos
anticuerpos se dividen en diferentes tipos según su estructura y función: una
de las especificaciones más claras son los de clase IgG que predominan en la
circulación y que además persisten durante muchos años después de la
exposición. Mientras que los de clase IgM son los primeros anticuerpos
específicos en aparecer como respuesta a la infección pero no se mantiene con
picos elevados y que después de un tiempo pueden desaparecer. Cuando
hablamos de la IgAes la encargada de la inmunidad en las superficies
mucosas, mientras que la IgE es importante en las enfermedades alérgicas y
parasitarias. Estos anticuerpos pueden actuar directamente, impidiendo la
función de un microorganismo invasor, neutralizando las toxinas y enzimas
secretadas o facilitando la eliminación del antígeno por las células fagocitarias.
Alba Miriam Poche Ceballos
Estudiante Inmunodiagnóstico Veterinario, LCV UDCA

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nmunidad humoral
Tipo de técnica de evaluación inmunidad humoral
Serología:dentro de esta podemos ubicar métodos como:
inmunofluorescencia, aglutinación o enzimoinmunoanálisis, más inhibición de
la hemólisis o fijación del complemento, con el objetivo de detectar el nivel
de anticuerpos presentes en el suero, especialmente las IgM o IgG que
actúan contra antígenos de superficie, teniendo en cuenta que es un
marcador indirecto y que adicionalmente a ello se puede dividir en dos
grupos según su objetivo:
- El primer grupo tiene como objetivo determinar la presencia de
anticuerpos protectores. Por tal razón es valorado como un método
cualitativo.
- El segundo grupo tiene como objetivo mider los cambios cuantitativos
en los títulos de anticuerpos durante la infección. Para ello se deben
manejar muestras pareadas, una durante la fase aguda y otra en la
fase de convalecencia.
Inmunofluorescencia: Es una de las técnica que se utiliza para la
identificación rápida de un antígeno, exponiéndolo a anticuerpos conocidos
marcados con fluoresceína y observando la característica reacción de la
precipitación antígeno-anticuerpo.
Existen 2 tipos que podemos clasificar en:
Directa; cuando el anticuerpo se acopla con fluoresceína y se expone al
antígeno y esa unión permite ver estructura o microorganismos.
Indirecta; El método indirecto es utilizado con un anticuerpo sin marcar
llamado diana, que se une a un antígeno específico, adicionalmente a esa
reacción se le añaden varios anticuerpos policlonales marcados con fluorescina
que tienen afinidad por el anticuerpo diana.
Imagen tomada del artículo métodos fisicoquímicos en biotecnología.
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Aglutinación:técnica que funciona como resultado de su interacción con
anticuerpos específicos denominados aglutininas. Que puede detectar
proteínas o polisacáridos antigénicos. Este método puede realizarse
directamente sobre muestras clínicas.
Imagen tomada del artículo métodos fisicoquímicos en biotecnología.
EIA (Enzimoinmunoanálisis):Este método consiste en la asociación de un
anticuerpo con una enzima, donde esta asociación produce una reacción que
convierte un sustrato incoloro en un producto final coloreado, lo que
confirma que se ha producido la unión y por tanto aumenta la sensibilidad del
análisis. Es utilizado para detectar toxinas bacterianas, proteínas y
polisacáridos antigénicos de microorganismos.
Imagen tomada del artículo métodos fisicoquímicos en biotecnología.
Radioinmunoensayo RIE: Esta es una técnica radiológica que se utiliza
para determinar las concentraciones de un antígeno, un anticuerpo o algún
tipo de proteína en el suero.
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Imagen tomada del artículo métodos fisicoquímicos en biotecnología.
ELISA: Este es un análisis de inmunoabsorción ligada a enzimas que busca
detectar antígenos o anticuerpos específicos utilizando inmunoreactivos.
Inmunoblot o westernblot: Técnica que se utiliza para aislar proteínas
mezcladas en una muestra. Donde lo primero que se hace es separar las
proteínas unas de otras mediante una electroforesis en gel, este debe
manejarse con el criterio de peso molecular. Después de este primer paso,
pasan a una membrana absorbente en donde se exponen a un anticuerpo
asociado a una enzima o a fluoresceína que se une a una proteína en especial
y permite confirmar la presencia de la proteína en cuestión mediante la
amplificación de la detección.
Imagen tomada del artículo métodos fisicoquímicos en biotecnología.
Modalidades:están caracterizadas por presentarse de forma directa o
indirecta. Donde la gran mayoría reacciona de forma indirecta; y lo hace a
través de la medición de la reacción antígeno - anticuerpo debido a que esta
Alba Miriam Poche Ceballos
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6. iagnóstico microbiológico indirecto y i
nmunidad humoral
es la forma de evaluar cómo está funcionando el mecanismo de
inmunidad o defensa.
Mientras que la modalidad directa: está basada en la identificación de la
estructura del microorganismo como tal.
Principios en que se basan:en la creación de anticuerpos de memoria con el
fin de que; en el momento de que se presente el microorganismo causante de
la enfermedad o infección. El sistema inmunológico reaccione de forma
completa buscando inhibir el crecimiento y proliferación del microorganismo,
ya que activa el mecanismo de defensa detectando los anticuerpos e
inmediatamente activa la inmunidad humoral para que ayude a combatir la
infección.
Aplicaciones:pueden ser empleadas para la determinación de antígeno-
anticuerpo en enfermedades como DVB, IBR, BRUCELLA ect. Que permiten la
valoración y adicionalmente a ello el diagnóstico e interpretación de títulos
presentes de la inmunidad humoral.
Lectura e interpretaciones diagnósticas:las lecturas e interpretaciones van
de acuerdo a los títulos expresados por cada técnica donde especifica de que
valor o porcentaje pasa a ser un animal o individuo positivo o negativo ya que
lo que mide son los títulos presentes.
Referencias bibliográficas
Bloisi, R.M. 1988.Principles of Immunology and Inmunodiagnostic. Ed.
Lea/Tebiger.
Bullock, G.R., Petrusz, P. 1989.Techniques in immuno-citochemistry.Vol. 4,
Academic Press.
Calderón P. Rocío V. Junio 2007. Instituto de biotecnología, universidad
nacional autónoma de México, Cuernavaca, Morelos.
Carvalho Gomes, P.A., 2000, Surface plasmon resonance as a tool in the
functional analysis of an immunodominant site in foot-and-mouth disease
virus, Tesis de doctorado, Universitat de Barcelona
Vélez H. et al. Enfermedades Infecciosas. Corporación para investigaciones
Biológicas. Medellín, 1991.
Alba Miriam Poche Ceballos
Estudiante Inmunodiagnóstico Veterinario, LCV UDCA