Este documento describe los principales componentes y funciones del sistema inmunológico, incluyendo células, antígenos, anticuerpos e inmunoglobulinas. Explica que el sistema inmunológico protege al cuerpo destruyendo microorganismos invasores mediante la interacción entre antígenos y anticuerpos. También resume varias técnicas inmunológicas comunes como aglutinación, inmunofluorescencia, radioinmunoensayo, ELISA y western blot que detectan y cuantifican antígenos a trav
Radioinmunoensayo, ELISA y Western BlotBryan Priego
A continuación, te proporciono información detallada sobre los tipos de ELISA, inmunoensayo y Western Blot, incluyendo los pasos a seguir, la técnica, el fundamento, los materiales, la historia y las aplicaciones. Espero que esta explicación te ayude a comprender mejor cómo se llevan a cabo estas técnicas y para qué se utilizan. Si tienes alguna duda, no dudes en preguntar, estaré encantado de ayudarte.
El ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) es una técnica de ensayo inmunológico ampliamente utilizada para detectar y cuantificar la presencia de una sustancia específica, como un antígeno o un anticuerpo, en una muestra biológica. Existen diferentes tipos de ELISA, incluyendo el competitivo, directo, indirecto y sándwich.
En el ELISA competitivo, el antígeno de interés compite con un antígeno marcado previamente conocido por su unión a un anticuerpo. La cantidad de antígeno presente en la muestra se determina midiendo la cantidad de antígeno marcado que se une al anticuerpo.
En el ELISA directo, el antígeno de interés se une directamente a una superficie sólida (como un pozo de una placa de microtitulación) y se detecta utilizando un anticuerpo marcado que se une específicamente al antígeno.
En el ELISA indirecto, se utilizan dos anticuerpos: uno primario, que se une específicamente al antígeno, y otro secundario, marcado con una enzima, que se une al anticuerpo primario. La enzima proporciona una señal detectable para cuantificar la presencia del antígeno.
En el ELISA sándwich, se utilizan dos anticuerpos: uno de captura, que se une al antígeno, y otro de detección, que se une a otra región del antígeno. El antígeno se "sándwicha" entre los dos anticuerpos, lo que permite una alta sensibilidad en la detección.
El inmunoensayo es una técnica general que utiliza anticuerpos para detectar y cuantificar antígenos o anticuerpos específicos. El ELISA es un ejemplo de inmunoensayo, pero también existen otras técnicas, como el radioinmunoensayo (RIA), que utiliza isotopos radiactivos, y los inmunoensayos enzimáticos basados en enzimas para la detección.
El Western Blot, también conocido como inmunotransferencia, es una técnica utilizada para detectar proteínas específicas en una muestra. Consiste en separar las proteínas de la muestra mediante electroforesis en gel, transferirlas a una membrana y luego incubar la membrana con anticuerpos específicos para las proteínas de interés. Los anticuerpos marcados permiten la detección de las proteínas mediante reacciones enzimáticas o quimioluminiscencia.
Twitter.com/@bryanpriegop
Tema 68 "Fundamento y descripción de las pruebas serológicas y de evaluación ...Dian Alex Gonzalez
La serología es el estudio que permite comprobar la presencia de anticuerpos en sangre. Es una prueba fundamental a la hora de realizar donaciones de sangre y transfusiones......
Radioinmunoensayo, ELISA y Western BlotBryan Priego
A continuación, te proporciono información detallada sobre los tipos de ELISA, inmunoensayo y Western Blot, incluyendo los pasos a seguir, la técnica, el fundamento, los materiales, la historia y las aplicaciones. Espero que esta explicación te ayude a comprender mejor cómo se llevan a cabo estas técnicas y para qué se utilizan. Si tienes alguna duda, no dudes en preguntar, estaré encantado de ayudarte.
El ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) es una técnica de ensayo inmunológico ampliamente utilizada para detectar y cuantificar la presencia de una sustancia específica, como un antígeno o un anticuerpo, en una muestra biológica. Existen diferentes tipos de ELISA, incluyendo el competitivo, directo, indirecto y sándwich.
En el ELISA competitivo, el antígeno de interés compite con un antígeno marcado previamente conocido por su unión a un anticuerpo. La cantidad de antígeno presente en la muestra se determina midiendo la cantidad de antígeno marcado que se une al anticuerpo.
En el ELISA directo, el antígeno de interés se une directamente a una superficie sólida (como un pozo de una placa de microtitulación) y se detecta utilizando un anticuerpo marcado que se une específicamente al antígeno.
En el ELISA indirecto, se utilizan dos anticuerpos: uno primario, que se une específicamente al antígeno, y otro secundario, marcado con una enzima, que se une al anticuerpo primario. La enzima proporciona una señal detectable para cuantificar la presencia del antígeno.
En el ELISA sándwich, se utilizan dos anticuerpos: uno de captura, que se une al antígeno, y otro de detección, que se une a otra región del antígeno. El antígeno se "sándwicha" entre los dos anticuerpos, lo que permite una alta sensibilidad en la detección.
El inmunoensayo es una técnica general que utiliza anticuerpos para detectar y cuantificar antígenos o anticuerpos específicos. El ELISA es un ejemplo de inmunoensayo, pero también existen otras técnicas, como el radioinmunoensayo (RIA), que utiliza isotopos radiactivos, y los inmunoensayos enzimáticos basados en enzimas para la detección.
El Western Blot, también conocido como inmunotransferencia, es una técnica utilizada para detectar proteínas específicas en una muestra. Consiste en separar las proteínas de la muestra mediante electroforesis en gel, transferirlas a una membrana y luego incubar la membrana con anticuerpos específicos para las proteínas de interés. Los anticuerpos marcados permiten la detección de las proteínas mediante reacciones enzimáticas o quimioluminiscencia.
Twitter.com/@bryanpriegop
Tema 68 "Fundamento y descripción de las pruebas serológicas y de evaluación ...Dian Alex Gonzalez
La serología es el estudio que permite comprobar la presencia de anticuerpos en sangre. Es una prueba fundamental a la hora de realizar donaciones de sangre y transfusiones......
Tema 6 del módulo de Procesamiento citológico y tisular del C.F.G.S. de Anatomía Patológica y Citodiagnóstico: Aplicación de técnicas inmunohistiquímicas.
Se denomina motor de corriente alterna a aquellos motores eléctricos que funcionan con alimentación eléctrica en corriente alterna. Un motor es una máquina motriz, esto es, un aparato que convierte una forma determinada de energía en energía mecánica de rotación o par.
2. SISTEMA INMUNOLOGICOSISTEMA INMUNOLOGICO
Esta compuesto por células y proteínas.
FUNCIÓN:FUNCIÓN:
La función del sistema inmunológico es mantener los microorganismos
infecciosos (agentes patógenos) como determinadas bacterias, virus,
hongos, parásitos, células tumorales fuera de nuestro cuerpo y destruir
cualquier microorganismo infeccioso que logre invadir nuestro
organismo.
Cualquier agente considerado extraño por un sistema inmunológico se
denomina ANTIGENO y los que protegen se denominan
ANTICUERPOS.
3. ANTÍGENO (Ag):es una sustancia que desencadena la formación de
anticuerpos y puede causar una respuesta inmunitaria.
ANTÍGENO (Ag):es una sustancia que desencadena la formación de
anticuerpos y puede causar una respuesta inmunitaria.
5. • Inmunoglobulinas G (IgG): Se forman en grandes cantidades y
pueden viajar del fluido sanguíneo a los tejidos. Estas
inmunoglobulinas (anticuerpos) son la única clase que cruza la
placenta y le pasa inmunidad de la madre al recién nacido.
• Inmunoglobulinas A (IgA): Se producen cerca de las
membranas mucosas y llegan hasta secreciones como las
lágrimas, bilis, saliva, mucosa, donde protegen contra
infecciones en el tracto respiratorio y los intestinos.
• Inmunoglobulinas M (IgM): Son los primeros anticuerpos que
se forman en respuesta a las infecciones y por lo tanto son
importantes para proteger durante los primeros días de una
infección.
• Inmunoglobulinas E (IgE): Se encargan de reacciones alérgicas.
Principales clases de anticuerpos o
gammaglobulinas:
6. TECNICAS INMUNOLOGICASTECNICAS INMUNOLOGICAS
Los antígenos presentes en los tejidos y líquidos biológicos
se pueden detectar y cuantificar mediante muchas técnicas
inmunológicas basadas en la extraordinaria especificidad
de las reacciones antígeno-anticuerpo.
Existen diversos métodos basados en procedimientos
distintos para visualizar la unión Ag-Ac . Así tenemos:
1. Técnicas de aglutinación. Cuando el antígenos e
encuentra unido o formando parte de células, bacterias o
partículas, la reacción Ag-Ac se puede detectar y cuantificar
por el aglutinado celular o bacteriano formado.
7. AGLUTINACION
Son útiles para la detección de antígenos y
anticuerpos. Su fundamento es inducir una agrupación
microscópicamente visible de partículas, causada por
interacciones antígeno anticuerpo que forman
puentes entre ellas. Existen varios tipos de
aglutinación en donde se destacan:
AGLUTINACION ACTIVA-: anticuerpos dirigidos
contra componentes de las partículas (eritrocitos,
bacterias). - Un ejemplo de este caso es la
determinación de grupos sanguíneos.
AGLUTINACION PASIVA: los anticuerpos se dirigen
contra moléculas que se han adherido
intencionalmente a una partícula que actúa como
medio de soporte pasivo (látex). Una variante es la
aglutinación pasiva reversa, en donde lo que se
detecta es el antígeno y las partículas están
recubiertas por el anticuerpo.
8. 2. Técnicas de fluorescencia y citometría de flujo. Para la realización
de estas técnicas el anticuerpo se marca con un fluorocromo detectándose la
formación del complejo Ag-Ac por la fluorescencia emitida.
CITOMETRIA DE FLUJO
•Es una técnica de análisis celular que implica medir las características de
dispersión de luz y fluorescencia que poseen las células conforme se las hace
pasar a través de un rayo de luz. Para su análisis por citometría de flujo, las
células deben encontrarse individualmente en suspensión en un fluido.
9. INMUNOFLUORESCENCIA
Es una técnica utilizada para visualizar la distribución de una proteína o antígeno
específico en células o secciones de tejidos utilizando la especificidad de los
anticuerpos por su antígeno para dirigir marcadores fluorescentes a las
biomoléculas dianas de forma específica.
INMUNOFLUORESCENCIA DIRECTA:
El marcaje directo en el que el anticuerpo primario está marcado con marcador
fluorescente.
INMUNOFLUORESCENTE INDIRECTA:
El marcaje indirecto en el que un anticuerpo secundario marcado con un
fluorcromo se utiliza ara reconocer un anticuerpo primario.
NOTA: Las muestras marcadas inmunofluorescencia se examinan bajo un
microscopio de fluorescencia o un microscopio confocal.
10.
11. 3. Técnicas de radioinmunoensayo. En estas técnicas al anticuerpo se une un
isótopo radiactivo siendo posible la cuantificación del complejo Ag-Ac a través de la
radiactividad emitida.
RADIO INMUNOENSAYO
•El Radioinmunoensayo (o abreviado RIA del inglés Radioimmunoassay) es un método
radioinmunométrico que se basa en la formación específica de los complejos Antígeno-
Anticuerpo (Ag-Ac) lo que le dota de una gran especificidad unido a la sensibilidad de los
métodos radiológicos. La técnica ha sido prácticamente reemplazada por el método ELISA el
cual mide la unión Ag-Ac mediante colorimetrías en lugar de radiometrías
12. 4. Cromatografía de afinidad. La especificidad de la unión
Ag-Ac puede utilizarse para obtener Acs y Ags puros.
PRUEBA ELISA
Es una técnica de inmunoensayo
en la cual un antígeno
inmovilizado se detecta
mediante un anticuerpo
enlazado a un enzima capaz de
generar un producto detectable
como cambio de color o algún
otro tipo.
La interacción antígeno-
anticuerpo en el laboratorio
puede ser utilizada para
determinar si un paciente tiene
una infección o una enfermedad
autoinmune.
13. NEFELOMETRIA
La nefelometría es un
procedimiento analítico que se basa
en la dispersión de la radiación que
atraviesan las partículas de materia.
Cuando la luz atraviesa un medio
transparente en el que existe una
suspensión de partículas sólidas, se
dispersa en todas direcciones y
como consecuencia se observa
turbia. La dispersión no supone la
pérdida neta de potencia radiante,
solo es afectada la dirección de la
propagación, porque la intensidad
de la radiación es la misma en
cualquier ángulo..
14. 5. Inmunoprecipitación e inmunoblotting. Permite
detectar la presencia y cantidad de antígenos y anticuerpos
específicos.
INMUNOBLOT
•El Inmunoblot o Western blot es una técnica mediante la cual se
separan proteínas por electroforesis en gel de poliacrilamida y
después se transfieren electroforéticamente a un papel de
nitrocelulosa o una membrana similar, donde son detectadas con
anticuerpos que reconocen los antígenos que hay en ellas.