Extraccion Y Resultados Del Estudio Del Veneno De Distintas Especies De Tarantulas

1. ARACNARIO DEL IBt UNAM
“BEATRIZ BLANCO DE LOPEZ SILANES”
Extracción y resultados del estudio del veneno de
distintas especies de tarántulas

4. PRIMER OBJETIVO
es la divulgación
Con pláticas sencillas y didácticas se enseña a los visitantes,
niños y adolescentes en su mayoría, la biología básica de este
grupo de animales, la estrategia para estudiar sus venenos y se
hace énfasis en el papel ecológico fundamental que juegan
estas especies en el ambiente en el que viven

8. No DE
TIPO DE PLATICA FECHA LUGAR PERSONAS
Plática y Exposición de arácnidos y reptiles 23 de Enero del 2004 Colegio Porter Cuernavaca, Morelos, 25
Plática y Exposición de arácnidos y reptiles 29 de Enero del 2004 Konecalli Cuernavaca, Morelos, 15
Platica de arácnidos 12 de Febrero del 2004 Montessori Nautilus Cuernavaca, Morelos, 30
Taller de quot;Animales ponzoñososquot; 26 de Marzo del 2004 Hellen Keller Cuernavaca, Morelos, 200
Arácnidos 27 de Abril del 2004 Framboyán Cuernavaca, Morelos, 100
Alacranes y Bichos peligrosos en Morelos 24 de Abril del 2004 Instituto de Biotecnología UNAM Cuernavaca, Morelos, 150
Arácnidos 29 de Abril del 2004 Esc. Sec. Jesus Conde Rodriguez Tepoztlán, Mor. 300
Arácnidos 7 de Mayo de l 2004 Colegio Framboyán Cuernavaca, Morelos, 80
Arácnidos 27 de Mayo del 2004 Escuela Secundaria Técnica No. 28 Jiutepec Mor. 150
Arácnidos 18 de Junio del 2004 Departamento de Telesecundarias, Totolapán Mor. 40
Plática y Exposición de arácnidos y reptiles 25 de Junio del 2004 Telesecundaria Niños Heroes Col.Yecapixteca, Yecapixtla Mor. 50
Plática y Exposición de arácnidos y reptiles 8 de Julio del 2004 Colegio Waldorf de Morelos, Cuernavaca Morelos 60
Arácnidos 31 de Agosto del 2004 Esc. Prim. Part. Inc. quot;Ocachicualliquot; Cuernavaca Morelos 50
Plática y Exposición de arácnidos 27 de Octubre del 2004 11a Semana Nacional de Ciencia y Tecnología. SEP-CONACYT 100
Plática y Exposición de arácnidos 29 de Octubre del 2004 11a Semana Nacional de Ciencia y Tecnología. SEP-CONACYT 60
Exposición de arácnidos y reptiles 17-19 Marzo del 2005 Reunión Internacional de Expertos en Envenenamiento por Animales Ponzoñosos 230
Plática y Exposición de arácnidos 20 de Abril del 2005 The Churchil School, DF. México 20
Plática y Exposición de arácnidos 25 de Mayo del 2005 Tlalpán II del Sistema de Bachillerato del GDF 15
Plática y Exposición de arácnidos 2 de Junio del 2005 Colegio Porter, Cuernavaca Morelos 17
Plática y Exposición de arácnidos 7 y 8 de Junio 2005 Instituto Suizo Americano, Cuernavaca Morelos 37
Plática y Exposición de arácnidos 8 de Julio 2005 Colegio London School 15
Plática y Exposición de arácnidos 23 de Septiembre 2005 UAEH Biotecnología 6to semestre 6
Exposición de arácnidos y reptiles 24-28 de Octubre 2005 12a Semana Nacional de Ciencia y Tecnología. SEP-CONACYT 200
Exposición de arácnidos y reptiles 25 de Noviembre 2005 Centro de atención en Desarrollo Infantil (CEADE), Cuernavaca Morelos 15
Exposición de arácnidos y reptiles 6 de Diciembre del 2005 Ciencias Ambientales UAG, Cuernavaca Morelos 20

9. Plática y Exposición de arácnidos y serpientes 25 de Enero del 2006 Montesori de Tepoztlán, Cuernavaca Morelos 8
Plática y Exposición de arácnidos y serpientes 9 Marzo del 2006 Universidad de las Americas Puebla, Puebla 18
Plática y Exposición de arácnidos y serpientes 15 de Marzo 2006 Instituto Highland, Cuernavaca Morelos 200
Plática y Exposición de arácnidos y serpientes 24 de Marzo 2006 Colegio de Educación Integral, D.F., Cuernavaca Morelos 80
Plática y Exposición de arácnidos y serpientes 26 de Marzo 2006 International G.S. of Mexico, Cuernavaca, Morelos 50
Plática y Exposición de arácnidos y serpientes 1 de Abril 20006 Expociencia y Tecnología, Emiliano Zapata,, Morelos 60
Plática y Exposición de arácnidos y serpientes 7 de Abril 2006 Escuela Juan Kepler Jiutepec, Morelos 20
Plática y Exposición de arácnidos y serpientes 30 de Junio 2006 Instituto Nuevo Siglo, Cuernavaca Morelos 12
Plática y Exposición de arácnidos y serpientes 18 de Septiembre 2006 Colegio Hellen Keller, Cuernavaca Morelos 100
Plática y Exposición de arácnidos y serpientes 23-27 de Octubre del 2006 13a Semana Nacional de Ciencia y Tecnología. SEP-CONACYT 150
Plática y Exposición de arácnidos y serpientes 30 de Octubre del 2006 Colegio Suizo Alemán, Cuernavaca Morelos 10
TOTAL= 2,693 PERSONAS
No de pláticas 2004-2006= 36
Personas importantes
Dr. Juan Ramón de la Fuente 9 Marzo del 2005
Rick West 14Marzo del 2005
Dra. Anita Hoffmann 27 Abril del 2006

12. SEGUNDO OBJETIVO
Producción de veneno para su estudio bioquímico, inmunológico y fisiológico

13. EXTRACCION DE VENENO

15. 1.- Líquido transparente, se vuelve de Brachypelma vagans
Propiedades del veneno turbio con el almacenamiento
2.- pH = 5.5 a 5.7
3.- Componentes sólidos = 16 %; (agua) = 84 %
4.- Tóxico: insectos, ratones y reptiles
5.- Se obtienen de 6 a 10 µl / tarántula
6.- No presenta proteasas ni fosfolipasa

16. Filtración en gel de una columna de Sephadex G-50 (1.6 x162 cm)
Se aplicarón 30.6 mg del veneno de B. vagans, se utilizó 20 mM acetato deamonio
pH 4.7. El Flujo fué de 40 ml/min. Las fracciones estan indicadas con barras
horizontales.
3
A260nm
Absorbance or mMHO
2.5 A280nm
mMHO B.D.RNAse NaCl
2
VENENO
1.5
1
VI
I III IV V
II
0.5
0
0 50 100 150 200 250 300 350 400
mL
SDS-PAGE de cada una de las fracciones obtenidas de la filtración en gel..
M son los marcadores de peso molecular; las fracciones están indicadas con números
romanos; VC es el veneno completo de Brachypelma vagans.
M I II III IV V VI VC
116
97.2
66.4
55.6
42.7
36.5
26.6
20.0
14.3

17. Brachypelma vagans
Reino Animalia
Phylum Arthropoda
Subphylum Chelicerata
Clase Arachnida
Orden Araneae
Suborden Opisthothelae
Infraorden Megalomorphae
Familia Theraphosidae
Subfamilia Theraphosinae
Género Brachypelma
Especie B. vagans

18. “Factor de dispersión” (Duran Reynals, 1931)
HIALURONIDASA (Meyer, 1940)
Hidrólisis de ácido hialurónico
Rompe enlaces glucosídicos ß- 1-4
Endo-N-acetil-D-hexosaminidasa (EC. No 3.2.1.35)
D IS A C A R ID O R E P E T ID O
C H 2O H
C H 2O H
-
COO
3
-
COO NHCOCH
1 3
1
4
3 1
NHCOCH 3
1 N - a c e til g l u c o s a m i n a
Á c id o D -g lu c u ró n ic o

19. células epiteliales
fibras de
lámina basal
colágeno
macrófago capilar
fibras elásticas
fibroblasto
glucosaminoglucanos,
células cebadas
proteoglicanos y
glicoproteínas
50 µm

20. SDS-PAGE de actividad de hialuronidasa del
veneno completo de Brachypelma vagans.
Cantidades decrecientes de veneno (µg/pozo).
Gel al 10 % en condiciones no reductoras
0.062
0.031
0.016
0.125
0.25
0.5
1
2
M
175
83
47.5
32.5
25
16.5
6.5

21. Plamido s/digerir
Xho1-HindIII
s
Eco Rl
2 3 ,1 3 0
9 ,4 1 6
6 ,5 5 7
4 ,3 6 1
2 ,3 2 2
2 ,0 2 7
564
Modelo de Plegamiento de la Hialuronidasa de B. vagans (basado en 3D de
Hialuronidasa de A. Mellifera;Structure, Vol. 8, 1025–1035, 2000)

22. Las hialuronidasas han sido empleadas terapéuticamente por muchos años
•Incrementan la permeabilidad de la membrana de los tejidos
Ortopedia
Oftalmología
Medicina interna
Oncología
Dermatología
Ginecología

23. Grammostola rosea

24. ABSORBANCIA 230 nm
Norm.
1400
1600
1800
1200
1000
200
400
600
800
0
0
10
20
30
MW 3697
YCQKWMWTCDSKRKCCEDMVCQLWC
TIEMPO (min)
MW 3997
ECGKFMWKCKNSNDCCKDLVCSS
40
GCLEFWWKCNDDKCC MW 4096
50
min

25. Membrana celular
Glucolípido
• Proteínas de membrana que tienen permeabilidad selectiva
por ciertos iones.
• Son multiméricas con varios dominios trans-membranales
• Estan compuestos por:
– Poro
– Compuerta
– Filtro de selectividad

26. CLASIFICACIÓN DE LOS CANALES.
De potasio.
Dependientes de voltaje
Dependientes de calcio
De rectificación interna
Operados por ligando
Sensibles al ATP
De sodio
Dependientes de voltaje
Epiteliales (ENaC)
Catiónicos inespecíficos
Operados por ligando
De rectificación interna (canales h y f)
De calcio
Dependientes de voltaje (L, T, N, P, Q y R)
Operados por ligando (receptores para el ATP)
Sensibles al estiramiento
De cloruro
Dependientes de voltaje (ClC-1)
Operados por ligandos (receptores para GABA ó glicina)
Controlado por AMPc (CFTR)

27. CANAL DE POTASIO HERG
(Human Eter-a-go go-Related Gen)

28. REPRESENTACION ESQUEMATICA DE UN POTENCIAL DE ACCION CARDIACO

29. Mutación del gen HERG (LQT2) en el cromosoma 7q35-36
ARRITMIAS
Son alteraciones del ritmo o de la
conducción del impulso cardíaco.

30. Síndrome de QT Largo (SQTL) es ocasionado por una disfunción
de los canales iónicos presentes a nivel de la membrana celular
“torsade de pointes” (torcedura de las puntas)
Taquicardia ventricular

31. TERCER OBJETIVO
Es proporcionar material biológico, respaldado con datos
de colecta, a los estudiosos de la taxonomía, la biología
y la distribución de los arácnidos.

32. AGRADECIMIENTOS
Dr. George Vanderbilt Odell
Dr. Alejandro Alagón Cano
Dra. Rosana Sánchez lópez
M. En C. Alejandro Olvera Rodríguez
Instituto Bioclón y Laboratorio Silanes