Derivatización con bsa

1. Derivatización con BSA
Análisis Cromatográfico y de Masas

2. Derivatizante: BSA
Nombre químico: N,O-Bis
(Trimetilsilil) Acetamida.
Reacción de derivatización:
Sililación (un hidrógeno activo
se sustituye por un grupo
alquilsililo).
Aplicaciónes: Ataca los grupos hidróxilos, amidas, amidas, principalmente
en compuestos polares como ácidos, alcoholes, ácidos carboxílicos y enoles.
Es utilizado generalmente para preparación de muestra en Cromatografía de
Gases.

3. ¿Qué es la derivatización?
Es el proceso en el cual consiste en modificar
químicamente un compuesto para producir un
derivado con nuevas propiedades que faciliten o
permitan su análisis cromatográfico.

4. Tenemos un ejemplo…
En Cromatografía de gases es necesario derivatizar
algunos compuestos, principalmente los que tienen
grupos funcionales polares con el fin de mejorar su
volatilidad, su estabilidad térmica y en algunos casos
la sensibilidad en la detección.

5. ¿Qué es BSA?
También llamado N,O-Bis
(Trimetilsilil) Acetamida, es uno
de los compuestos más usados
para los procesos de
derivatización (reacción de
sililación).
Su reactividad permite sililar
diversos compuestos con grupos
funcionales como hidróxilos,
amidas, aminas, principalmente
en compuestos polares como
ácidos, alcoholes, ácidos
carboxílicos y enoles. Estructura del BSA

6. Características
1. Forman productos
altamente estables con la
mayoría de los grupos
funcionales orgánicos que
reaccionan.
2. Las reacciones ocurren
rápidamente.
3. El BSA y sus derivados son
más volátiles que otros
muchos reactivos sililantes.
4. Causa menos interferencia
en los procesos
cromatográficos.
5. El grupo más vulnerable a
la sililación son los –OH.
6. Cuenta con buenas
propiedades disolventes y
por lo general pueden
funcionar como un reactivo
de sililación eficiente, sin la
necesidad de usar
disolventes adicionales.
7. Pueden usar otros
solventes para mejorar su
eficiencia, p. ej. DMF.
(Dimetilfumarato).

7. Preparación de BSA para derivatizar
Consideraciones
 El BSA es extremadamente sensible a la humedad y
debe ser manejado en condiciones secas.
 Antes de la derivatización, se debe preparar un
blanco de cada reactivo (todos los componentes,
disolventes, etc., excepto de la muestra),

8. 1. Pesar 1-10 mg de muestra en un recipiente de
reacción de 5 ml. Si es apropiado, disolver la muestra
en un disolvente. Si la muestra está en solución
acuosa, se evapora a sequedad, para utilizar de
forma pura o para añadirle un disolvente.

9. 2. Agregue exceso de reactivo de sililación.
• El BSA se puede utilizar en la fuerza completa o con un
disolvente (p. ej. compuestos apolares).
• En la mayoría de aplicaciones, es aconsejable utilizar un
exceso del reactivo de sililación, al menos una
proporción 2: 1 molar de BSA a muestra. No todas las
muestras se derivatizan mediante Solo BSA.
• El BSA puede ser mezclado con otros catalizadores para
favorecer la sililación (ácido trifluoroacético, hidrógeno
cloruro, acetato de potasio, piperidina, O-
metilhidroxilamina hidrocloruro, piridina).

10. 3. Para determinar si la derivación es completa, se
pueden analizar alícuotas de la muestra en un equipo
computacional en intervalos de tiempo establecidos
hasta que ya no se observa aumento de pico (s)
producto.

11.  Los tiempos de derivatización varían ampliamente,
dependiendo de la especificidad que tenga
compuesto (s) que se derivatiza.
• Muchos compuestos son completamente
derivatizados tan pronto como se disuelven en el
reactivo, otros tienen reacciones más lentas.
• Los compuestos con pobre solubilidad pueden
requerir calentamiento. Algunos compuestos
requerirán calentamiento a 70 ° C durante 20-30
minutos.

12. Casos donde se
alenta la sililación
 Baja o nula solubilidad
de la muestra con el
BSA.
 La posición de los
grupos funcionales se
encuentran
estéricamente
impedidos.
 La muestra cuenta con
una estructura
Como acelerar la
reacción.
Adición de un catalizador,
incremente tiempo,
concentración de BSA y
temperatura, según sea el
caso.

13. MECANISMO

14. La sililación es el procedimiento de derivatización más
ampliamente utilizado para el análisis de CG.
En esta reacción, un hidrógeno activo se sustituye por
un grupo alquilsililo.
El BSA y los derivados del sililo se forman por el
desplazamiento del protón activo en compuestos que
tengan los grupos -OH, -COOH,=NH,-NH2, -SH.

15. Reacción general para la sililación

16. La reacción se considera como un ataque
nucleófilo sobre el átomo de silicio del donante
sililo, produciendo un estado de transición
bimolecular.
El grupo que ataca el compuesto de sililo deja al
grupo x con baja basicidad. Mientras, la
capacidad de estabilizar
una carga negativa en el estado de transición se
pierde, dejando poca o ninguna tendencia para la
unión de nuevo entre sí mismo y el átomo de

17. El compuesto de sililo se debe perder fácilmente del
estado de transición durante la reacción, pero posee
una estabilidad química suficiente en combinación
con el grupo atacante para permitir el
almacenamiento a largo plazo del agente de
derivación para su uso.

18. Como la formación del estado de transición es reversible, la
derivatización sólo se procede a la finalización si la
basicidad del grupo saliente x excede del grupo al que
sustituye. la facilidad de derivatización de diversos grupos
funcionales para un agente sililante sigue este orden:
alcohol>fenol>acidoscarboxilicos>amina>amida.
Dentro de esta secuencia hacia un reactivo de sililación en
particular también se verá influenciada por impedimento
estérico, por lo tanto, la facilidad de reactividad para
alcoholes sigue este orden:
primario>secuandario>terciario, y para aminas:
primario>secundario.

19. Aplicaciones
Las muestras que son sometidas a la sililación son
compuestos volátiles no termosensibles, macro-
moléculas grandes o moléculas proteínicas pequeñas,
por ejemplo drogas, fármacos, flavonoides. Entre los
métodos que utilizan más este reactivo destacan la
cromatografía de gases y la de HPLC.

20. Integrantes
 Díaz Palacios Jessica
 Ibal Rodríguez Carlos Alexis
 6° C Turno Vespertino.