Este documento describe varias pruebas para identificar carbohidratos, incluyendo las pruebas de Bencidina, Anilina, Tollens, Fehling y Benedict. Explica que la prueba de Bencidina es positiva para pentosas mientras que las pruebas de Anilina y Fehling son negativas para la mayoría de carbohidratos probados. También provee resultados para cada carbohidrato probado en las pruebas de Tollens, Fehling y Benedict.

1. PRACTICA 3. Identificación de
carbohidratos
CETIS 62
Integrantes:
Gutiérrez Prieto Natali
López Villafaña Michel Vanessa
Macías Moreno Ana Isabel
Zavala Laguna Andrea
Zavala Quiroz Guadalupe Roberto
Especialidad: Laboratorio clínico
Profesora: Marta Gabriela Acevez morales
Grado y Grupo: 6 “E”

2. Objetivo:
Realizar diferentes experimentos donde se identifiquen las características de los
carbohidratos.
Carbohidratos
Los carbohidratos son uno de los principales nutrientes en nuestra alimentación.
Estos ayudan a proporcionar energía al cuerpo. Se pueden encontrar tres
principales tipos de carbohidratos en los alimentos: azúcares, almidones y fibra.
Los carbohidratos son unas biomoléculas que también toman los nombres de
hidratos de carbono, glúcidos, azúcares o sacáridos; aunque los dos primeros
nombres, los más comunes y empleados, no son del todo precisos, ya que no se
tratan estrictamente de átomos de carbono hidratados, pero los intentos por sustituir
estos términos por otros más precisos no han tenido éxito. Estas moléculas están
formadas por tres elementos fundamentales: el carbono, el hidrógeno y el oxígeno,
este último en una proporción algo más baja. Esto se cumple gracias a una enzima,
la amilasa, que ayuda a descomponer esta molécula en glucosa o azúcar en sangre,
que hace posible que el cuerpo utilice la energía para realizar sus funciones.
Funciones
El cuerpo necesita las tres formas de carbohidratos para funcionar correctamente.
El cuerpo descompone los azúcares y los almidones en glucosa (azúcar en la
sangre) para utilizarlos como energía.
La fibra es la parte del alimento que el cuerpo no descompone. La fibra ayuda a
hacerlo sentir lleno y puede ayudarle a mantener un peso saludable.
Existen dos tipos de fibra. La fibra insoluble agrega volumen a las heces para que
pueda tener deposiciones regulares. La fibra soluble ayuda a reducir los niveles de
colesterol y puede ayudar a mejorar el control del azúcar en la sangre.
Tipos de carbohidratos
Existen cuatro tipos, en función de su estructura química: los monosacáridos, los
disacáridos, los oligosacáridos y los polisacáridos.
Monosacáridos
Son los más simples, ya que están formados por una sola molécula. Esto los
convierte en la principal fuente de combustible para el organismo y hace posible que

3. sean usados como una fuente de energía y también en biosíntesis o anabolismo, el
conjunto de procesos del metabolismo destinados a formar los componentes
celulares. También hay algunos tipos de monosacáridos, como la ribosa o
la desoxirribosa, que forman parte del material genético del ADN. Cuando estos
monosacáridos no son necesarios en ninguna de las funciones que les son propias,
se convierten en otra forma diferente como por ejemplo los polisacáridos.
Disacáridos
Son otro tipo de hidratos de carbono que, como indica su nombre, están formados
por dos moléculas de monosacáridos. Estas pueden hidrolizarse y dar lugar a dos
monosacáridos libres. Entre los disacáridos más comunes están la sacarosa (el más
abundante, que constituye la principal forma de transporte de los glúcidos en las
plantas y organismos vegetales), la lactosa o azúcar de la leche, la maltosa (que
proviene de la hidrólisis del almidón) y la celobiosa (obtenida de la hidrólisis de la
celulosa).
Oligosacáridos
La estructura de estos carbohidratos es variable y pueden estar formados por entre
tres y nueve moléculas de monosacáridos, unidas por enlaces y que se liberan
cuando se lleva a cabo un proceso de hidrólisis, al igual que ocurre con los
disacáridos. En muchos casos, los oligosacáridos pueden aparecer unidos a
proteínas, dando lugar a lo que se conoce como glucoproteínas.
Polisacáridos
Son cadenas de más de diez monosacáridos cuya función en el organismo se
relaciona normalmente con labores de estructura o de almacenamiento. Ejemplos
de polisacáridos comunes son el almidón, la amilosa, el glucógeno, la celulosa y
la quitina.

4. DETERMINACION DE CARBOHIDRATOS
Reaccion de la Bencidina
La bencidina es una sustancia que cristaliza con una molécula de agua si se hace
la cristalización por debajo de 60°C, y anhidrasis porque el sulfato de bencidina es
insoluble. Prueba específica para pentosas. Una pentosa está formada por 5 átomos
de carbono, por lo que tanto como se habla de una aldopentosa se hace referencia
a un monosacárido que contiene 5 átomos de carbono y puede contener también el
grupo cetosa, por el cual toma el nombre de cetohexosa.
Característico para identificación de pentosas.
Trabaja de forma similar que en la prueba de Tollens, pero en este caso, el ácido
es acético y el compuesto con el que se condensa el furfural es una bencidina.
Materiales

5. Reactivo de Bencidina

6. Carbohidratos al 1 %
Procedimiento
1. En un tubo de ensayo colocar 0.5ml del reactivo de bencidina.
2. Añadir 1 ó 2 gotas de solución de carbohidrato.
3. Calentar en agua hirviendo durante varios minutos, inmediatamente después
enfriar con agua.
4. Si se forma un color rosa o rojo la prueba es positiva.
Esta prueba parece muy satisfactoria para pentosas, las hexosas comunes no
interfieren en esta prueba.
Resultados
Carbohidratos (azucares) Resultados
Galactosa Positivo
Xilosa Positivo
Glucosa Anhidra Negativo
Maltosa Negativo
Fructosa Negativo
Sacarosa Negativo
Dextrosa Negativo
Miel Negativo
L - Arabinose Positivo

7. PRUEBA DE ANILINA
La anilina es un compuesto orgánico, liquido ligeramente amarillo de olor
característico.
No se evapora fácilmente a temperatura ambiente.
La anilina es levemente soluble en agua y se disuelve fácilmente en la mayoría de
los solventes orgánicos.
La prueba de anilina consiste en determinar la temperatura mínima (punto de
anilina) a la cual se enturbia una solución de anilina e hidrocarburo a partes iguales.
Cuanta más alta es esta temperatura, menor es el poder de disolución de
hidrocarburo en examen.
Materiales

8. Acido acetilico glacial
Anilina
Carbohidratos al 1%
Procedimiento

9. 1. Colocar 1 ml de carbohidrato.
2. Añadir 2 ml de ácido acético glacial y 3 gotas de anilina.
3. Calentar a hervir durante 1 minuto la coloración roja es positiva
Esta prueba la dan positiva las pentosas, puede servir para diferenciar las pentosas
de ácidos urónicos.
Resultados
Carbohidratos (azucares) Resultados
Galactosa Negativo
Xilosa Negativo
Glucosa Anhidra Negativo
Maltosa Negativo
Fructosa Negativo
Sacarosa Negativo
Dextrosa Negativo
Miel Negativo
L - Arabinose Negativo
AZÚCARES REDUCTORES
(Tollens, Fehling, Benedict)
OXIDACIÓN
Aunque la oxidación de los aldehídos, y en algunos casos las cetonas pueden
emplearse como un método de preparación de ácidos carboxílicos, las reacciones
que se describen son principalmente como pruebas cualitativas que permiten
diferenciar los aldehídos y determinar acetonas de otras clases de compuestos
orgánicos.

10. La oxidación de los aldehídos a ácidos carboxílicos se efectúa muy fácilmente en
una solución alcalina. Estos reactivos alcalinos son agentes oxidantes moderados,
oxidan los aldehídos al mismo tiempo que ellos se reducen.
El reactivo Tollens se prepara por la adición de hidróxido de amonio en una solución
de nitrato de plata hasta que el precipitado de óxido de plata formado inicialmente
se disuelve nuevamente es conveniente considerar a este reactivo como óxido de
palta en lugar de
Ag + 2OH -H2O Ag2O +4NH3 2Ag (NH3)2OH
Una solución que contiene el ión plata amonicéo, y a menudo así es considerado
en sus reacciones como aldehído.
H O
CH3-C-C=O + Ag2O CH3-C-OH + 2Ag
La reacción conocida, la “prueba del espejo de plata” (Tollens), comprende en
realidad al aldehído, una pequeña concentración de ión plata y los iones oxidrilo.
La solución de Fehling consiste en dos partes:
a) Una solución de sulfato cúprico.
b) Una solución de hidroxilo de sodio y tartrato de sodio y potasio (sal de
Rochelli).
Cuando se mezclan cantidades iguales de estas soluciones, se forma un complejo
soluble de tartrato cúprico de color azul obscuro, el cual proporciona una pequeña
concentración de iones cúprico. Los aldehídos reducen la solución de Fehling y
forman un precipitado rojo de óxido cuproso
OH OH
CH3-C=O + 2Cu + 5OH CH3-C=O + Cu2 + 3H2O
La solución de Benedict es semejante a la de Fehling con la modificación de que se
utiliza citrato de sodio en lugar del tartrato de sodio y potasio. Tiene como ventaja
sobre la solución de Fehling de que no es necesario dividirla en dos reactivos
separados.

11. Las 3 soluciones mencionadas nos sirven para distinguir los aldehídos de las
acetonas sencillas, porque las últimas no reaccionan. Pueden además indicarse que
la reducción de las soluciones permite diferenciar un aldehído de un alcohol. Aunque
los alcoholes pueden oxidarse por agentes oxidantes fuertes no son atacados por
estos reactivos moderados.
El benzaldehído puede oxidarse hasta ácido benzoico con el reactivo de Tollens,
pero no es atacado por las soluciones de Fehling o de Benedict.
Los aldehídos reducen con dificultad las soluciones neutras o ácidas de las sales
de plata o de cobre. Solo en soluciones alcalinas se observa la fuerte acción
reductora de los aldehídos, aunque no se conoce con certeza el papel que en ella
juega el ión oxidrilo.
PRUEBA DE TOLLENS
La prueba de Tollens es un procedimiento de laboratorio para distinguir un aldehído
de una cetona: se mezcla un agente oxidante suave con un aldehído o una cetona
desconocida; si el compuesto se oxida, es un aldehído, si no ocurre reacción, es
una cetona. El complejo de plata amoniacal [Ag(NH3)2]+ en solución básica es el
agente oxidante utilizado en la prueba de Tollens. Si hay un aldehído presente, éste
se oxida a la sal del ácido RCOO-. Al mismo tiempo, se produce plata metálica
Ag(s) por la reducción del complejo de plata amoniacal.
La plata metálica producida en esta reacción recubre la parte interna del recipiente
y forma un espejo de plata.
MATERIAL REACTIVOS
Tubos de ensayo Reactivo de Tollens

12. Carbohidratos en polvo
Pipeta de 1 ml
Baño María
TÉCNICA
1. Colocar en un tubo de ensayo 1 ml de carbohidrato.

13. 2. Añadir 1 ml de reactivo de Tollens.
3. Agitar perfectamente.
Calentar a baño maría durante 5 minutos máximo. Observar la forma de espejo que
se forma en los positivos.
Resultados
Carbohidratos (azucares) Resultados
Galactosa Positivo
Xilosa Positivo
Glucosa Anhidra Positivo
Maltosa Positivo
Fructosa Positivo
Sacarosa Positivo
Dextrosa Positivo
Miel Positivo
L - Arabinose Positivo
PRUEBA DE FEHLING
Identifica azucares reductores de no reductores.
Los carbohidratos reductores se oxidan a sales de ácidos aldonicos cuando el Cu
2+ del reactivo de Fehling se reduce a Cu 1+.
Se fundamenta en el poder reductor del grupo carbonilo de un aldehído. Este se
oxida a un ácido carboxílico y reduce la sal de cobre en medio alcalino a oxido de
cobre, que forma un precipitado de color rojo.
Esta reacción se produce en medio alcalino fuerte, por lo que algunos compuestos
no reductores como la fructosa (que contiene un grupo cetona) puede enolizarse a
la forma aldehído dando lugar a un falso positivo.
Materiales

15. Procedimiento
1. Colocar en un tubo de ensayo 1 ml de carbohidratos.
2. Añadir 1 ml de Fehling “A” y 1 ml de Fehling “B”.
3. Mezclar bien y ponerlo a baño maría o en la flama del mechero durante cierto
tiempo.
4. Sí mira a marrón o rojo la prueba es positiva.
Esta prueba es una reacción de oxido-reducción, los alcoholes del azúcar se oxidan
a aldehídos y ácidos, el cobre se reduce de cúprico a cuproso por eso cambia de
color la solución y se forma el precipitado.
Resultados
Carbohidratos (azucares) Resultados
Galactosa Positivo
Xilosa Positivo
Glucosa Anhidra Negativo
Maltosa Positivo
Fructosa Positivo
Sacarosa Positivo
Dextrosa Positivo
Miel Negativo
L - Arabinose Negativo

16. PRUEBA DE BENEDIC
En esta prueba el agente oxidante es una solución básica de Cu+2(ac); se adicionan
iones citrato para evitar la precipitacióndel Cu+2 en la solución básica. El ion Cu+2 da
a la solución de Benedict su color azul característico. Cuando el Cu+2oxida un
aldehído, gana un electrón y se reduce a Cu+, el cual se precipita como óxido de
cobre (I), Cu2O, de color rojo ladrillo. Debido a su color rojo ladrillo el óxido de cobre
(I) es fácilmente detectable.
En el pasado la prueba de Benedict se utilizó rutinariamente en los laboratorios
médicos para detectar la presencia de azúcar en la orina. Un ensayo positivo indica
que los riñones han excretado el exceso de azúcar. Una elevada concentración de
azúcar en la orina posiblemente podría indicar que el paciente es diabético o que
tiene alguna otra enfermedad metabólica. Actualmente se utilizan tabletas, barras y
papeles que contienen el reactivo apropiado para realizar la prueba de azúcar en la
orina debido a que son más convenientes y rápidos que los métodos antiguos.
Normalmente después que se disuelve la tableta o el papel, cambia de color, se
compara entonces con colores patrones para determinar la concentración de azúcar
en la orina.
MATERIAL REACTIVOS

17. 9 tubos de ensayo Reactivo de Benedict
Carbohidratos de 1%
6 pipetas de 5 ml
1 gradilla

18. 1 baño maría
Ligas

19. TÉCNICA
1. Colocar en varios tubos de ensayo 1 ml de solución de Benedict
2. Añadir 3 gotas de cada solución de carbohidratos en cada tubo.
3. Agitar y colocar los tubos al mismo tiempo en agua hirviendo durante 3
minutos.
4. Enfriar la solución y hacer comparaciones.
5. Obsérvese el precipitado formado. Un cambio de color NO indica reacción
positiva, solo el precipitado.
Resultados
Carbohidratos (azucares) Resultados
Galactosa Negativo
Xilosa Negativo
Glucosa Anhidra Negativo
Maltosa Negativo
Fructosa Positivo
Sacarosa Positivo
Dextrosa Positivo
Miel Positivo

20. L - Arabinose Negativo
PRUEBA DE TRINITROFENOL
Trinitrofenol que también recibe el nombre de ácido pícrico, este de indicador es
incoloro en pH´s ácidos y amarillo en básicos.
Este indicador se obtiene por nitración directa de fenol en ácido nítrico concentrado.
El trinitrofenol tiende a formar sales de picrato que son peligrosas e inestables.
Además los grupos nitro (fuertemente electronegativos) estabilizan al base
conjugada, haciendo que el H del grupo OH se disociecon facilidad, dando entonces
una disolución acida del mismo, de ahí su nombre de “acido”.
Materiales

21. Resultados
Carbohidratos (azucares) Resultados
Galactosa Negativo
Xilosa Positivo
Glucosa Anhidra Negativo
Maltosa Negativo

22. Fructosa Positivo
Sacarosa Positivo
Dextrosa Positivo
Miel Positivo
L - Arabinose Positivo
Conclusiones
BENCIDINA
En conclusión nos pareció una práctica muy interesante pues ya que nos dimos
cuenta de que la reacción de la bencidina es utilizada para la identificación de
pentosas, se trata de un indicador analítico para determinación de oxidantes. Pues
ya que en presencia de un oxidante se oxida por perdida de dos protones y dos
electrones a lo que se llama su forma “meroquinoidea” que tiene color azul.
No hubo problema alguno al realizar la práctica.

23. El equipo trabajo de manera ordenada y equitativamente, al final se obtuvieron los
resultados deseados.
ANILINA
En esta prueba los carbohidratos eran en polvos o como los vemos nosotros, y al
darnos positivo se formaba una capa plata, como una especie de espejo platinado,
en todas nuestras muestras se formó ese espejo, solo en la sacarosa no porque no
había muestra para realizar la prueba
AZUCARES REDUCTORES
En esta prueba los carbohidratos eran en polvos o como los vemos nosotros, y al
darnos positivo se formaba una capa plata, como una especie de espejo platinado,
en todas nuestras muestras se formó ese espejo, solo en la sacarosa no porque no
había muestra para realizar la prueba
Esta prueba nos sirvió para distinguir un aldehído de una cetona, y creo que se logró
el objetivo de la prueba, se cuidó cada paso del procedimiento, y se tuvieron
resultados satisfactorios
FEHLING
En conclusión de esta práctica nos pareció muy importante pues ya que nos dimos
cuenta de que la reacción de Fehling es utilizada para la determinación de azucares
reductores, este se oxida a un ácido carboxílico y reduce la sal de cobre o en medio
alcalino a oxido de cobre pasando a un color rojo.
Un aspecto importante de esta reacción es que la forma de aldehído puede
detectarse fácilmente aunque exista en muy pequeña cantidad. Si un azúcar reduce
el licor de Fehling a oxido de cobre rojo, se dice que es un azúcar reductor.
El equipo trabajo de manera responsable y ordenada siguiendo al pie de la letra las
indicaciones.
Al final se logró el objetivo que se había planteado obteniendo resultados
satisfactorios.
BENEDIC
En conclusión de esta práctica nos pareció muy importante pues ya que nos dimos
cuenta de que la reacción de Fehling es utilizada para la determinación de azucares
reductores, este se oxida a un ácido carboxílico y reduce la sal de cobre o en medio
alcalino a oxido de cobre pasando a un color rojo.
Un aspecto importante de esta reacción es que la forma de aldehído puede
detectarse fácilmente aunque exista en muy pequeña cantidad. Si un azúcar reduce
el licor de Fehling a oxido de cobre rojo, se dice que es un azúcar reductor.

24. El equipo trabajo de manera responsable y ordenada siguiendo al pie de la letra las
indicaciones.
Al final se logró el objetivo que se había planteado obteniendo resultados
satisfactorios.
PRUEBA DE TRINITROFENOL
Al terminar la práctica realizada llegamos a la conclusión de que el equipo trabajo
de manera responsable y ordenada, logramos obtener resultados satisfactorios.
Nos dimos cuenta que el ácido pícrico es uno de los productos químicos más
peligrosos en uso.
El ácido pícrico es toxico por todas las rutas de exposición, también es irritante a la
piel, y puede producir productos tóxicos cuando se descompone.
Es un reactivo con una amplia variedad de productos químicos y sumamente
susceptibles a la formación de sales “picratos”.
CUESTIONARIO
1. Escribe las fórmulas de los carbohidratos utilizados en la práctica.
Galactosa: C6H12O6
Xilosa: C5H10O5
Glucosa anhidra: C6H12O6
Maltosa: C12H22O11
Fructosa: C6H12O6
Sacarosa: C12H22O11
Dextrosa: C6H12O6
Miel: C12H22O11
L. arabinose: C5H10O5

25. 2. ¿Qué es un azúcar reductor?
Son aquellos azúcares que poseen su grupo carbonilo (grupo funcional) intacto, y
que a través del mismo pueden reaccionar como reductores con otras moléculas.
Es un tipo de carbohidrato o azúcar natural que contiene un grupo aldehído o cetona
libre.
3. ¿Qué usos tiene el reactivo de Fehling?
Su utilización como reactivo es para la determinación de azúcares reductores es
decir demostrar la presencia de glucosa o sus derivados como la sacarosa o la
fructosa.
4. Explica porque el yodo da coloración azul marino, con el almidón.
Porque el yodo entra a la estructura helicoidal del almidón, y al unirse dentro de
estas cadenas provoca un efecto de color de los enlaces en el rango del espectro
de la luz, se dice que el yodo se oxida al reaccionar con el almidón por eso cambia
de color.
5. ¿Qué importancia farmacológica, tiene el identificar los carbohidratos?
Los Carbohidratos son importantes porque ayudan a obtener energía al menor
precio para el cuerpo, obtienes más moléculas de CO2 y H2O sin necesidad de
invertir tanta energía ATP´s. Los carbohidratos tienen como principal función el
suministrarle energía a nuestro cuerpo, especialmente al cerebro y al sistema
nervioso, por esto es que los carbohidratos son tan importantes en la dieta diaria de
una persona sana.