Este documento describe una práctica de microbiología sobre medios de cultivo. Explica que un medio de cultivo contiene nutrientes y factores para el desarrollo microbiano. Detalla los pasos para preparar tres medios de cultivo usando agar y muestras de uñas, y sembrarlos usando la técnica de estría. Las cajas Petri se incuban a 37°C y se observan los resultados después de 72 horas.

1. LICENCIATURA EN ENFERMERIA
PRACTICA DE MICROBIOLOGIA
PRACTICA NO. 2
MEDIO DE CULTIVO
OBJETIVO:
Conocerá los diferentes medios de cultivos y técnicas de sembrado.
INTRODUCCION
Un medio de cultivo es un conjunto de nutrientes, factores de crecimiento y otros componentes que
crean las condiciones necesarias para el desarrollo de los microorganismos. La diversidad metabólica
de los microorganismos es enorme; por ello la variedad de medios de cultivo es grande, no existiendo
un medio de cultivo universal adecuado para todos ellos. Un medio de cultivo debe contener una forma
asimilable: Nitrógeno y Proteínas, Lípidos e Hidratos de Carbono, distintas Sales Minerales, factores
de crecimiento (Vitaminas), agua, extractos de carne o levaduras. Deben ser estériles, poseer
propiedades buffer, y una viscosidad óptima.
PREPARACION DE MEDIOS DE CULTIVO
Los principios generales que rigen la preparación de un medio tanto en forma natural como utilizando
medios sintéticos deshidratados, son en general:
1. Asegurar cantidades adecuadas de substancias estimulantes del desarrollo, pensando con
exactitud los distintos ingredientes.
2. Adaptar la reacción final del medio de cultivo a un pH óptimo.
3. Emplear la menor filtración posible.
4. Emplear el mínimo de calor en la esterilización.
Los medios de Cultivo se clasifican de acuerdo al:
Estado físico: líquidos, semisólidos y sólidos.

2. Según su composición: simples, enriquecidos.
Al uso al que se destinen.
MÉTODOS BASICOS DE INOCULACION
1. Siembra por picadura o siembra profunda:
Se utilizan tubos que contengan un medio solido o semisólido, o un medio solido inclinado.
Se introduce el asa recta cargada, casi hasta el fondo, utilizando una trayectoria recta y
teniendo cuidado de que el trayecto de salida sea el mismo.
Un medio de cultivo inclinado puede inocularse por picadura y estría que en la superficie,
en este caso se efectúa primero la picadura.
2. Siembra por estrías o siembra superficial:
El estriado sobre las superficies de placa de agar o en medios inclinados es usado
especialmente para aislar cultivos puros a partir de especímenes que contienen flora mixta
las características de homogeneidad de las colonias aisladas permiten la diferenciación de
las cepas.
La siembra por estrías consiste en extender el material por cultivar en líneas paralelas o
estrías cubriendo ampliamente la superficie de forma que las bacterias al ir avanzando se
distribuyan y finalmente puedan depositarse células aisladas.
La siembra por estrías en medios inclinados se inicia en el fondo del tubo, al principio de la
superficie inclinada.
MATERIAL
- Bolsa Roja
- 3 vasos de precipitados de 250 ml.
- Soporte Universal
- Mechero
- Rejilla de Asbesto
- 3 Agitadores de Vidrio
- 3 Cajas de Petri
- 1 Abate lenguas
- 3 Asa de Siembra
- Agua Destilada
- 3 diferentes fórmulas de medio de cultivo
- Fruta en descomposición
- Portaobjetos
- Guantes
- Cubre bocas
- Palillos de Madera

3. DESARROLLO DE LA PRÁCTICA
Empleando diferentes medios de cultivo, realizar la preparación de cada medio en 1.1 g. de polvo agar
en 50 ml. de agua destilada en un vaso de precipitado. Mezclar bien con agitación frecuente y hervir
durante 1 min. Distribuir en cajas de Petri, todo este procedimiento debe hacerse junto al fuego.
Flamear la tapa de la caja de Petri y dejar en la mesa reposar para que el agar solidifique
adecuadamente (en caso de realizar en cajas de vidrio). Si se realiza en cajas de plástico dejar
reposar sin flamear, hasta que solidifique. Una vez solidificada tome el asa de siembra y ponerla en el
fuego al rojo vivo.
Para realizar la siembra tomar una muestra de la parte interna del contorno de las uñas, con el palillo y
depositarlo en el portaobjetos, posteriormente con el asa tomar la muestra y llevar a cabo la siembra
en la técnica de estría, colocar la tapa de la caja Petri, sellarla e introducir la caja a la estufa a una
temperatura de 37°. Observar resultados 72 horas después.
EVALUACION
- Realización de los medios de cultivos.
- Observación de resultados.
- Presentación de reporte.
BIBLIOGRAFIA
- Gerhardt, p,.
Methods for general and molecular bacteriology.
American society for microbiology, Washington, 1993.
- Murray P. R., Kobayashi. g. s., Rosenthal, K.s,.
Microbiologia Medica.
2ed. Harcourt brace, 1997.