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ALIMENTO PARA NIÑOS PREPARADO CON
   HARINAS DE MAÍZ DE CALIDAD PROTEÍNICA Y
                      GARBANZO EXTRUIDOS
  ROBERTO GUTIéRREZ DORADO, ORALIA GUADALUPE CáRDENAS VALENZUELA, CLAUDIA
        ALARCóN VALDEZ, JOSé ANTONIO GARZóN TIZNADO, JORGE MILáN CARRILLO,
                      EDUARDO ARMIENTA ALDANA y CUAUHTéMOC REYES MORENO


RESUMEN

   El presente estudio tuvo tres objetivos: 1) Determinar la mejor         enciales cubrió satisfactoriamente los requerimientos para niños
combinación de harina de maíz de calidad proteínica extruido               de 2-5 años de edad recomendados por FAO/WHO, excepto para
(HME) y harina de garbanzo extruido (HGE) para producir un                 triptófano. El alimento infantil tipo atole derivado de esta mez-
alimento para niños de alta calidad proteínica y elevada acept-            cla tuvo un contenido de proteína de 4,52%, que es 14,4% de
abilidad sensorial, 2) formular el alimento infantil tipo atole            la energía del alimento, adecuado para un alimento para niños.
a partir de la mezcla HME/HGE optimizada, y 3) evaluar las                 Cada 100g de alimento infantil aportan 6,3-12,6% y 23,8-34,8%
propiedades nutricionales de la mezcla HME/HGE optimizada                  del requerimiento diario de energía y proteína para niños y ni-
y del alimento. Se aplicó la metodología de superficie de re-              ñas de 1-8 años de edad. El alimento infantil tuvo 62,1% de di-
spuesta para determinar la combinación óptima HME/HGE. La                  gestibilidad de la proteína in vitro, C-PER de 1,93 y calificación
mejor combinación HME/HGE fue 21,2:78,8%; esta mezcla tuvo                 entre “me gusta mucho” y “me gusta extremadamente” en una
contenidos (en materia seca) de 20,07% de proteína, 5,70% de               prueba hedónica para aceptabilidad general. Este alimento
lípidos y 71,14% de carbohidratos; su perfil de aminoácidos es-            podría utilizarse como alimento soporte del crecimiento infantil.



                  a desnutrición es una de        se ha desarrollado alimentos infantiles su-    (Granito et al., 2003), papillas (Cerezal-
                  las principales causas de       plementarios que son suministrados a tra-      Mezquita et al., 2007) y galletas (INCAP,
                  morbilidad y mortalidad         vés de programas gubernamentales. Mez-         2002). En cuanto a la alimentación huma-
en niños en la mayoría de los países en de-       clas de cereales y leguminosas han sido        na, el maíz es el tercer cereal en importan-
sarrollo (Alarcón-Valdez, 2004). Para mini-       empleadas en la formulación de alimentos       cia, después del trigo y el arroz; sin em-
mizar las adversidades de la desnutrición         infantiles (Bressani, 1983), como pastas       bargo, posee un contenido proteínico relati-

PALABRAS CLAVE / Alimento Infantil / Garbanzo / Maíz de Calidad Proteínica / Nutrición /
Recibido: 09/01/2008. Modificado: 29/09/2008. Aceptado: 01/10/2008.

                                    Roberto Gutiérrez Dorado. Ingeniero Químico, Maestro en Ciencias en Ciencia y Tecnología
de Alimentos y Pasante de Doctor en Ciencias en Biotecnología, Universidad Autónoma de Sinaloa (UAS), México. Profesor Investi-
gador, UAS, México.
                                    Oralia Guadalupe Cárdenas Valenzuela. Ingeniero Químico, Maestro en Ciencias en Ciencia
y Tecnología de Alimentos y Pasante de Doctor en Ciencias en Biotecnología, UAS, México. Profesor Investigador, UAS, México.
                                    Claudia Alarcón Valdéz. Ingeniero Bioquímico, Instituto Tecnológico de los Mochis, México.
Maestro en Ciencias, UAS, México.
                                    José Antonio Garzón Tiznado. Ingeniero Agrónomo, UAS, México. Maestro en Ciencias en
Fitopatología, Colegio de Posgraduados, Chapingo, México. Doctor en Ciencias en Biotecnología de Plantas, CINVESTAV-IPN,
México. Profesor Investigador, UAS, México.
                                    Jorge Milán Carrillo. Ingeniero Químico, Maestro y Doctor en Ciencias en Biotecnología Agrí-
cola / Alimentaría, UAS, México. Profesor Investigador, UAS, México.
                                    Eduardo Armienta Aldana. Ingeniero Bioquímico, UAS, México. Maestro y Doctor en Cien-
cias en Biotecnología de Plantas, CINVESTAV-IPN, México. Profesor Investigador, UAS, México.
                                    Cuauhtémoc Reyes Moreno. Ingeniero Bioquímico, UAS, México. Maestro en Ciencias en
Ciencia y Tecnología de Alimentos, Universidad Autónoma de Querétaro, México. Doctor en Ciencias en Biotecnología de Plantas,
CINVESTAV-IPN, México. Profesor Investigador, UAS, México. Dirección: Lichis No. 1986; Colonia La Campiña; 80060 Culiacán,
Sinaloa, México. e-mail: creyes@uas.uasnet.mx




868                                                       0378-1844/08/12/868-07 $ 3.00/0              DEC 2008, VOL. 33 Nº 12
vamente bajo y una composición de ami-          lienda, horneado, cocción, secado y fer-        se enfriaron a temperatura ambiente (25ºC)
noácidos esenciales desfavorable.               mentación (Bressani et al, 1984), así como      y fueron molidos (Cyclone Sample Mill,
                   El maíz presenta deficien-   nuevas tecnologías, las cuales actualmente      UD Corp., Boulder, CO, EEUU) hasta obte-
cias en lisina y triptófano, además de un       son ampliamente usadas en la industria de       ner una harina que pasara a través de una
desbalance leucina/isoleucina, lo cual con-     alimentos, tales como el calentamiento por      malla Nº80 (0,150mm). La HME obtenida
tribuye al desarrollo de pelagra y kwas-        radio frecuencias, microondas, infrarrojos,     se envasó en recipientes herméticos y se al-
hiorkor (Gopalan y Rao, 1975). Debido a         perfusión instantánea y de alto calor, ca-      macenó a 4ºC.
la importancia nutricional del maíz, se han     lentamiento óhmico y extrusión (Felows,
hecho importantes esfuerzos para mejorar        2000; Richardson, 2001). La extrusión ge-       Preparación de harina de garbanzo
la calidad de su proteína. Mertz et al.         neralmente es un proceso llevado a cabo a       extruido (HGE)
(1964) encontraron que el gen opaco-2 de        alta temperatura y en tiempo corto, y ofre-
un tipo de maíz aumenta significativamente      ce numerosas ventajas tales como versatili-                        La HGE se preparó de
la concentración de lisina. Desafortunada-      dad, alta productividad, bajos costos de        acuerdo a Milán-Carrillo et al. (2002). Doce
mente, este gen está asociado con una re-       operación, eficiencia energética, obtención     lotes de 500g de grano entero se fragmenta-
ducción del rendimiento de grano, el au-        de productos de alto valor biológico y ele-     ron en una licuadora doméstica (Osterizer®
mento de la susceptibilidad a la pudrición      vada digestibilidad de las proteínas (Mer-      4655-813, Sunbeam, México) a baja veloci-
de la mazorca, endospermo harinoso suave        cier, 1993; Milán-Carrillo et al., 2002). El    dad hasta obtener fragmentos con tamaños
y pobres propiedades para la molienda           presente trabajo tuvo tres objetivos: 1) De-    que pasaron a través de una malla Nº10
seca. Debido a estas propiedades indesea-       terminar la mejor combinación harina de         (2mm). Debido al proceso de molienda, la
bles, este maíz con alto contenido de lisina    maíz de calidad proteínica extruido (HME)       testa se separó de los cotiledones fragmenta-
nunca fue cultivado con éxito en grandes        / harina de garbanzo extruido (HGE) para        dos y fue eliminada con una corriente de
superficies. Después de más de 20 años de       producir un alimento infantil de alta cali-     aire aplicada a los fragmentos con un abani-
esfuerzos interdisciplinarios, mejoradores      dad proteínica y elevada aceptabilidad sen-     co domestico. Los fragmentos, sin testa, fue-
de plantas y bioquímicos del Centro Inter-      sorial, 2) formular el alimento infantil tipo   ron molidos en la misma licuadora a alta ve-
nacional del Mejoramiento del Maíz y el         atole a partir de la mezcla HME/HGE op-         locidad hasta obtener harina con tamaños de
Trigo (CIMMyT), México, han desarrolla-         timizada y 3) evaluar las propiedades nu-       partícula que pasaron a través de una malla
do líneas de maíz con endospermo duro y         tricionales de la mezcla HME/HGE opti-          Nº40 (0,425mm), que se ajustó a 26,5% de
mejorados nutricionalmente, llamados maí-       mizada y del alimento elaborado.                humedad con una solución salina (0,25%
ces de calidad proteínica (MCP; NRC,                                                            NaCl y 0,75% de NaHCO3 en agua destilada,
1988). Estas líneas poseen buenas propie-       Materiales y Métodos                            p/v). Cada lote fue empacado en bolsas de
dades agronómicas y de procesamiento,                                                           polietileno y almacenado a 4ºC por 12h. An-
con un mejorado contenido de lisina y trip-                       Maíz (Zea mays L) de ca-      tes de la extrusión las muestras se acondicio-
tófano (Sproule et al., 1988; Bockholt y        lidad proteínica variedad V-537C, y garban-     naron a 25ºC durante 6h. Se utilizó el mismo
Rooney, 1992). Después de 10 años de es-        zo (Cicer arietinum L) variedad Blanco Si-      extrusor empleado para la obtención de
fuerzos interdisciplinarios, el CIMMYT y        naloa 92 fueron proporcionados por INIFAP       HME, a 151ºC y velocidad de tornillo de
el Instituto Nacional de Investigaciones Fo-    Valle de Culiacán, Sinaloa, México. Los         190rpm. Los extruidos se enfriaron a tempe-
restales, Agrícolas y Pecuarias (INIFAP),       granos fueron limpiados, guardados en reci-     ratura ambiente (25ºC) y fueron moliedos
México, han desarrollado con éxito 26 va-       pientes herméticos y almacenados a 4ºC.         (Cyclone Sample Mill) hasta obtener una ha-
riedades e híbridos de MCP, principalmen-                                                       rina que pasara a través de una malla Nº80
te para regiones tropicales y subtropicales,    Preparación de harina de maíz                   (0,150mm). La HGE obtenida se envasó en
que son similares al maíz normal en rendi-      extruido (HME)                                  recipientes herméticos y se almacenó a 4ºC.
miento y otras propiedades agronómicas, y
se está tratando de introducirlos en la pro-                       La HME se preparó de         Preparación de alimentos para niños
ducción comercial (INIFAP, 1999).               acuerdo a Reyes-Moreno et al., (2003). Tres
                   El garbanzo, por su parte,   lotes de 500g de grano entero se fragmenta-                       Se prepararon 11 diferen-
es una buena fuente de proteínas y carbohi-     ron en una licuadora doméstica (Osterizer®      tes alimentos infantiles tipo atole a partir de
dratos; además, posee importantes cantida-      4655-813, Sunbeam, México) a baja veloci-       11 mezclas HME/HGE obtenidas por la
des de vitaminas (tiamina, niacina), minera-    dad hasta obtener fragmentos con tamaños        combinación en diferentes proporciones de
les (Ca, P, Fe, Mg, K) y ácidos grasos insa-    que pasaron a través de una malla Nº10          cada harina (Tabla III). Para la obtención de
turados (oleico, linoleico). Sin embargo, las   (2mm). Los fragmentos fueron molidos en         los alimentos se preparó una suspensión
proteínas del garbanzo son deficientes en       la misma licuadora a alta velocidad hasta       combinando 25g de mezcla, 8g de sacarosa
aminoácidos azufrados (metionina y cisteí-      obtener harina con tamaños de partícula que     y 80ml de agua purificada. La suspensión
na; Chavan et al., 1987; Reyes Moreno et        pasaron a través de una malla Nº40              se calentó a 90ºC por 8min, se enfrió a
al., 2004). Al mezclarlas, las proteínas de     (0,425mm). La harina de maíz se mezcló          temperatura ambiente (25ºC) por 30min y
maíz y garbanzo se complementan unas con        con cal en una proporción de 0,24g de cal       se evaluó sensorialmente para aceptabilidad
otras para producir proteínas de mayor cali-    por 100g de harina y la mezcla se ajustó a      (A) con panelistas adultos semientrenados,
dad nutricional.                                28% de humedad con agua destilada. Cada         en una prueba hedónica para aceptabilidad
                   Varias tecnologías de pro-   lote se empacó en bolsa de polietileno y se     general.
cesamiento de alimentos tienen potencial        almacenó a 4ºC por 12h. Antes de la extru-
para incrementar la biodisponibilidad y         sión las muestras se acondicionaron a 25ºC      Evaluación sensorial
densidad nutritiva, seguridad alimentaria,      durante 6h. La extrusión se realizó en ex-
estabilidad durante almacenamiento y pala-      trusor de tornillo simple Mod 20 DN (Bra-                         Las muestras (20g) de ali-
tabilidad, y pueden ser aplicadas para la       bender Instruments, Inc, NJ, EEUU) con          mento se sirvieron en copas cuyas tapas se
preparación de alimentos infantiles. Entre      diámetro de barril de 19mm, utilizando una      marcaron con números de tres dígitos selec-
estas tecnologías se incluyen aquellas tradi-   temperatura del extrusor de 79,4ºC y veloci-    cionados al azar. Para la evaluación se se-
cionales como rostizado, germinación, mo-       dad de tornillo de 73,5rpm. Los extruidos       leccionó un panel de 30 jueces de ambos



               DEC 2008, VOL. 33 Nº 12                                                                                                     869
sexos semientrenados de los estudiantes,         punto X= (X1, X2) de la zona experimental.        (ATA) 10% y se agitaron en un agitador or-
profesores y personal (18-35 años de edad)       Se procuró que todas las variables de res-        bital 21704-10, (Cole Parmer, Vernon Hills,
de la Facultad de Ciencias Químico Biológi-      puesta tuvieran valores tan altos como fuera      IL, EUA) a 400rpm y 25ºC por 1h. El sobre-
cas de la Universidad Autónoma de Sinaloa,       posible. Una vez calculadas las tres deseabili-   nadante se aforó a 50ml con agua destilada
México. La evaluación y selección de los         dades individuales se obtuvo la deseabilidad      y se tomó una alícuota para la determinación
panelistas se basó en el interés de los parti-   global para las tres variables de respuesta       de N2. El N2 de la alícuota y el NT de la
cipantes, agudeza para la detección de sabor     aplicando la función matemática de transfor-      muestra se determinaron por microKjeldahl
y olor, y la capacidad de entender los pro-      mación D= (d1d2d3)1/3. El valor óptimo ideal      (960,52; AOAC, 1999). El contenido de PV
cedimientos del ensayo, además de que de-        es D= 1, siendo aceptables los valores entre      se calculó como (NT-NNP)×6,25.
clararon disfrutar de comer alimentos tipo       0,6 y 0,8. Para la realización de estas deter-
atole. Los evaluadores fueron ubicados en        minaciones se utilizó el paquete Design Ex-       Lisina disponible (LD)
compartimentos individuales con temperatu-       pert (2002).
ra (25ºC) y humedad relativa (50-60%) con-                                                                            La lisisna disponible se
troladas. Las muestras fueron evaluadas          Composición proximal                              determinó de acuerdo al procedimiento de
para aceptabilidad (A) con una escala hedó-                                                        Hurrel et al. (1979). Se utilizó colorante Na-
nica de 6 puntos (0: me disgusta mucho; 5:                        Se emplearon los méto-           ranja 12, el cual a pH ácido se liga a los re-
me gusta extremadamente; Larmond, 1977).         dos de AOAC (1999): secado a 105ºC por            siduos de lisina de las proteínas formando
La evaluación sensorial se repitió tres veces    24h para humedad (925,098), incineración          un cromógeno. Se colocaron muestras de
en diferentes días.                              a 550ºC para cenizas (923,03); desgrasado         0,5g en matraces Erlenmeyer de vidrio. En
                                                 con éter de petróleo en un equipo Soxhlet         la primera etapa (lectura A) en un matraz
Diseño para la preparación de mezclas            para lípidos (920,39C), y microKjeldahl           con la muestra se añadió 40ml de una solu-
de HME/HGE                                       (960,52) para proteínas (N×6,25). El con-         ción de 1,3626g de colorante Naranja 12 por
                                                 tenido de carbohidratos se determinó por          litro de solución reguladora de fosfatos (20g
                  Se seleccionó un diseño        diferencia.                                       ácido oxálico + 3,4g de fosfato monobásico
Lattice Simplex para mezclas (metodología                                                          de potasio + 60ml ácido acético, pH 1,25).
de superficie de respuesta). Las proporcio-      Diferencia total de color (ΔE)                    En la segunda etapa, correspondiente a la
nes de los componentes(X1= HME y X2 =                                                              propionilación (lectura B), 0,2ml de anhídri-
HGE) se expresaron como fracciones de la                         El color superficial de           do propiónico y 2ml de solución reguladora
mezcla, siendo siempre 100% la suma              las muestras se midió por triplicado uti-         de fostafos se añadieron a otro matraz con
(X1+X2) de las proporciones de los compo-        lizando un colorímetro CR-210 (Minolta,           muestra. Ambos matraces se agitaron a
nentes. El diseño experimental generó 11         Japón). Las variables L, a, y b de las            400rpm y 25ºC por 1h. Se tomaron alícuo-
tratamientos. Las mezclas de cada trata-         muestras (m) se registraron y compara-            tas (15ml) de cada matraz y se centrifugaron
miento se evaluaron para proteína verdade-       ron con los de un estándar (s) de color           (5000g, 25ºC, 15min); cada sobrenadante se
ra (PV) y lisina disponible (LD). A partir       blanco de valores L s =97,63, a s = 0,78,         diluyó con agua destilada (1:100). Se midie-
de cada mezcla se preparó un alimento in-        bs =-0,25. La ΔE se calculó con la ecua-          ron las absorbancias a 475nm con un espec-
fantil, y cada uno de ellos se evaluó senso-     ción ΔE= ((Ls-Lm) 2 +(as-a m) 2 +(bs-bm) 2)1/2    trofotómetro UV-Visible 21D-1146 (Spectro-
rialmente para aceptabilidad (A). Se consi-                                                        nic, Milton Roy, EEUU). Se construyó una
deró como variables de respuesta a PV, LD        Actividad e índice de absorción de agua           curva estándar de lisina y la cantidad en la
y A. El modelo experimental se representa                                                          muestra se obtuvo restando la lectura B de
como                                                  Se determinó la actividad de agua (aw)       la lectura A.
donde Yk: variables de respuesta; β1, β2 y       en muestras de harina de 5g acondicionadas
                                                              a 25ºC, utilizando un medidor        Digestibilidad proteínica in vitro (DP)
                                                              Aqua Lab CX-2 (Decagon De-
                                                              vices, Pullman, WA, EEUU)                               Se aplicó la metodología
                                                              calibrado con solución saturada      de Hsu et al. (1977). Se seleccionó un siste-
                                                              de KCl de aw= 0,849 a 25ºC           ma multienzimático (Sigma Chemical, St.
                                                              (Milán et al., 2000). Para el ín-    Luis, MO, EEUU) constituido por 8mg de
β12: parámetros estimados para cada térmi-       dice de absorción de agua (IAA) Se utilizó        tripsina pancreática porcia tipo IX (Sigma
no lineal y la interacción, respectivamente.     la metodología de Anderson et al. (1969).         T-0303) con 15600U/mg; 15,5mg de quimo-
Se aplicó análisis de regresión múltiple y se    Una alícuota de 2,5g de cada muestra se           tripsina pancreática bovina tipo II (Sigma
obtuvo un modelo de predicción para cada         suspendió en 30ml de agua destilada en un         C-4129) con 83,9 U/mg; y 6,5mg de pepti-
variable de respuesta (Design Expert,            tubo de centrífuga de 60ml puesto previa-         dasa intestinal porcina grado III (Sigma
2002).                                           mente a peso constante. La suspensión se          P-7500) con 102 U/g; todo en 5ml de agua
                                                 homogeneizó con una varilla de vidrio, por        destilada. Mientras se agitaba en un baño a
Combinación óptima de HME/HGE                    1min a 25ºC y se centrifugó (3000g, 25ºC,         37ºC, una cantidad específica de cada mues-
                                                 10min). El IAA se calculó a partir del peso       tra se utilizó para preparar 50ml de una
                   Se aplicó la metodología      del precipitado y se expresó como g gel /g        suspensión acuosa de proteína (6,25mg/ml)
de superficie de respuesta como técnica para     sólidos (MS).                                     y se ajustó el pH de la suspensión a 8,0. A
determinar la combinación óptima de HME/                                                           cada suspensión proteínica, mantenida a
HGE para producir un alimento para niños.        Proteína verdadera (PV)                           37ºC y en agitación constante, se le añadió
El objetivo de la optimización fue encontrar                                                       5ml de solución multienzimática y se regis-
un valor común óptimo para las tres varia-                         Ésta se calculó a partir de     tró el pH a los 10min. La DP se calculó
bles de respuesta. Se aplicó el método de de-    la diferencia entre N2 total (NT) y N2 no         como DP= 210,46-18,10X, donde X es el
seabilidad (De la Vara y Domínguez, 2002).       proteínico (NNP). Para la determinación de        pH registrado 10min después de añadir el
Los tres modelos (uno para cada variable de      NNP, ~0,5g de muestra se mezclaron con            sistema multienzimático a la solución proteí-
respuesta) pueden ser evaluados en cualquier     20ml de una solución de ácido tricloroacético     nica (Hsu et al., 1977).



870                                                                                                      DEC 2008, VOL. 33 Nº 12
Análisis de aminoácidos                                       TABLA I                                         mayor (p<0,05) de proteínas y ceni-
                                                COMPOSICIÓN QUÍMICA Y PROPIEDADES                             zas, y un contenido menor (p<0,05)
                    Se colocó 5-10mg            FISICOQUÍMICAS DE HARINAS DE MAÍZ                             de carbohidratos y lípidos que la
de cada muestra en ampolletas de                      DE CALIDAD PROTEÍNICA Y                                 HME (Tabla I). Khan et al (1995) re-
2ml que contenían un estándar inter-                   GARBANZO EXTRUIDOS1                                    portaron en cuatro variedades diferen-
no (norleucina) y 0,4ml HCl 6N. Las                      Propiedad                 HME            HGE         tes de garbanzo contenidos (% en
ampolletas fueron cerradas a vacío y                                                                          MS) de 23,1-26,79% de proteínas; 3,6-
colocadas en estufa a 110ºC por 24h. Composición química (% MS)                                               5,2% de lípidos; 2,8-3,6% de cenizas
Se tomó un alícuota de 20µl del hi-          Proteínas                            10,75 b        22,28 a      y 45,5-56,7% de carbohidratos. El in-
drolizado, se secó y se sometió a de-        Lípidos                               5,84 a         5,48 b      tervalo de actividad de agua (0,50-
rivatización. Las muestras para deter-       Carbohidratos                        81,40 a        69,12 b      0,51) de las harinas extruidas corres-
minación de cisteína se trataron pri-        Cenizas                               2,01 b         3,13 a      pondió a valores donde la actividad
mero con ácido perfórmico a tempe- Fisicoquímicas                                                             enzimática, crecimiento de microorga-
ratura ambiente por 18h (Hirs, 1967).        Actividad acuosa                      0,51 a         0,50 a      nismos y reacciones químicas ocurren
El contenido de triptofano se deter- Color                                                                    muy lentamente (Labuza, 1980), lo
minó por separado. Las muestras se           Valor Hunter L                       87,89 b        88,92 a      cual favorece al producto en una vida
hidrolizaron en tubos de polipropile-        Diferencia total de color            12,95 b        23,41 a      de anaquel larga. La HGE tuvo mayor
no con KOH 4,2M, que contenía 1%             IAA                                   2,82 b         3,29 a      (p<0,05) ΔE que la HME (23,41 vs
(w/v) de tiodiglicol, a 110ºC por 18h. 1 Las medias fueron comparadas por renglones usando la prueba 12,95). En este trabajo ΔE representa
Después de la hidrólisis, el KOH se de rangos múltiples de Duncan. Medias con la misma letra no son la diferencia total de color en referen-
neutralizó con ácido perclórico 4,2M. significativamente diferentes a p≤0,05.                                 cia a un estándar de color blanco. Va-
Se colectó el sobrenadante, se ajustó HME: harina dede absorción de agua (g gel/g de garbanzo extrui- lores mayores de ΔE significan hari-
                                         do, IAA: índice
                                                             maíz extruido, HGE: harina
                                                                                        sólidos, MS)
a pH 3 con ácido acético diluido y                                                                            nas más oscuras. Por lo tanto, HGE
se tomó una alícuota de 50µl para su                                                                          fue más oscura que HME, lo cual
derivatización. El equipo fue calibra                                  TABLA II                              también fue observado visualmente.
do con una mezcla de aminoácidos              PROPIEDADES NUTRICIONALES DE HARINAS HGE también tuvo mayor (p<0,05)
(Pierce Estándar H) suplementada                    DE MAÍZ DE CALIDAD PROTEÍNICA Y                          IAA que HME (3,29 vs 2,82). Los
con triptofano.                                             GARBANZO EXTRUIDOS1                              mayores valores de ΔE e IAA de
                    El análisis de ami-         Propiedad         HME          HGE        Requerimientos HGE no son debidos a los procesos de
noácidos se realizó en equipo Pico-Tag                                                    niños 2-5 años elaboración de las harinas extruidas,
(Waters, Milford, MA, EUA) según la                                                         (FAO/WHO)        sino se deben a que la harina de gar-
metodología propuesta por Cohen y                                                                            banzo crudo, a partir de la cual se ela-
                                           Nutricionales
Strydom (1988). El triptofano se anali-       AAE                                                            boró HGE, presentó mayores valores
zó utilizando las condiciones descritas        His                3,51 a       2,60 b            1,9         de ΔE e IAA (19 y 2,15g gel por g
por Hariharan et al (1993). Como pro-          Ile                2,63 b       2,92 a            2,8         muestra seca, respectivamente) que la
teína control se utilizó caseína.              Leu                9,12 a       7,15 b            6,6         harina de maíz crudo (9,2 y 1,25g gel
                                               Lys                4,12 b       6,58 a            5,8         por g muestra seca) a partir de la cuál
                                               Met+Cys            5,03 a       2,08 b            2,5
Relación de eficiencia proteínica              Phe+Tyr            7,33 b       8,14 a            6,3         se elaboró HME. Durante la elabora-
calculada (C-PER)                              Trp                0,89 b       1,2 a             1,1         ción de HGE se presentaron menores
                                               Thr                3,5 b        3,9 a             3,4         incrementos de ΔE e IAA (23,2 y
                    Las C-PER fueron           Val                5,07 a       3,52 b            3,5         53%, respectivamente) que durante la
                                             AAE limitante         Lys        Met+Cys
calculadas según el procedimiento                                                                            elaboración de HME (40,8 y 125,6%).
                                           Digestibilidad
sugerido por Satterlee et al. (1982) y proteínica                                                            El incremento de ΔE durante la elabo-
reportado como método 982.30 por in vitro                       80,9 b        82,6 a                         ración de HGE y HME sugiere reac-
la AOAC (1999). Para el cálculo se C-PER                          1,57 b       1,89 a                        ciones de oscurecimiento no enzimáti-
requiere conocer la digestibilidad                                                                           co durante el proceso de extrusión, en
proteínica in vitro y el contenido de
                                           1
                                             Las medias fueron comparadas por renglones usando la prueba el cual se emplean altas temperaturas
                                           de rangos múltiples de Duncan. Medias con la misma letra no
aminoácidos esenciales de la muestra son significativamente diferentes a p≤0,05.                             y contenidos de humedad intermedios.
analizada. Se empleó caseína como          HME: harina de maíz extruido, HGE: harina de garbanzo ex- Estas condiciones de procesamiento
proteína de referencia. El C-PER se        truido, AAE: aminoácido esencial (g/100 g de proteína), C-PER: favorecen las reacciones de Maillard
determinó utilizando la ecuación de relación de eficiencia proteínica calculada.                             de grupos amino con azucares reduc-
regresión                                                                                                    tores, lo cual conduce a la formación
                                                   rianza (ANOVA) de una sola vía y prueba de compuestos de color (Bjorck et al., 1983).
  C-PER= -2,1074 +2,8525(Z) -0,4030(Z2)            de rango múltiple de Duncan (p≤0,5).               Por otro lado, la desnaturalización de proteí-
                                                                                                      nas, la gelatinización del almidón e hincha-
donde Z se calculó en base al perfil de ami- Resultados y Discusión                                   miento de la fibra cruda que ocurren durante
noácidos y a la digestibilidad proteínica in                                                          la extrusión podrían ser responsables del in-
vitro de la muestra y de la proteína de refe- Propiedades de las harinas extruidas                    cremento de IAA de productos extruidos
rencia, así como en relación a los valores                                                            (Gujska y Khan, 1990).
estándares de FAO/WHO (1991) para ami-                                 Los contenidos de proteí-
noácidos esenciales.                               nas, lípidos y carbohidratos de la harina de Aminoácidos esenciales (AAE) en
                                                   maíz extruida (HME) que se presentan en la las harinas extruidas
Análisis estadístico                               Tabla I coinciden con los reportados por Be-
                                                   llo-Pérez et al. (2002) para harinas de maíz            El contenido de AAE y la calificación
                    Los resultados obtenidos nixtamalizado. Por su parte, la harina de gar- química de las proteínas de HME y HGE
fueron analizados utilizando análisis de va- banzo extruido (HGE) presentó un contenido se presentan en la Tabla II, que incluye ade-



                DEC 2008, VOL. 33 Nº 12                                                                                                          871
TABLA III
       DISEÑO EXPERIMENTAL UTILIZADO PARA OBTENER
      DIFERENTES COMBINACIONES DE HME/HGE PARA LA
    PRODUCCIÓN DE ALIMENTOS INFANTILES, Y RESULTADOS
      EXPERIMENTALES DE LAS VARIABLES DE RESPUESTA1
    Ensayo2         Componentes de                  Variables de respuesta
                      la mezcla3
               HME(X1)          HGE(X2)          PV(Y1)     LD(Y2)      A(Y3)
       1       100 (1,0)          0 (0)           8,21        3,5        2,2
       2        50 (0,5)         50 (0,5)        13,81        4,8        3,1
       3         0 (0)          100 (1,0)        18,17        6,1        3,7
       4        75 (0,75)        25 (0,25)       10,22        4,2        2,5
       5        25 (0,25)        75 (0,75)       17,29        5,4        3,5
       6        50 (0,5)         50 (0,5)        13,76        4,8        2,7
       7       100 (1,0)          0 (0)           8,06        3,5        2,0
       8         0 (0)          100 (1,0)        17,79        6,1        3,4
       9        50 (0,5)         50 (0,5)        13,59        4,8        2,8
      10       100 (1,0)          0 (0)           8,32        3,5        2,2
      11         0 (0)          100 (1,0)        18,14        6,1        3,5        Figura 1. Deseabilidad para la mejor combinación de harina de
                                                                                    MCP extruido (HME) y harina de garbanzo extruido (HGE) para
1
  El diseño fue de lattice simplex con dos componentes; 11 ensayos. 2 No corres-
                                                                                    la elaboración de un alimento infantil
ponde al orden de procesamiento. 3 Los números entre paréntesis son valores codi-
ficados. HME: harina de maíz de calidad proteínica extruido, HGE: harina de gar-
banzo extruido, PV: proteína verdadera (%, DM), LD: lisina disponible (g/100 g de                  HME complementa las deficiencias en azu-
proteína), A: aceptabilidad.                                                                       frados (Met+Cys) de HGE (Tablas II y IV).
                                                                                                                      El contenido de AAE de
más los requerimientos de AAE para niños           jes HME-HGE (X1X2; p≤0,01) para YA=             la mezcla optimizada fue mayor que los re-
de 2-5 años de edad recomendados por               0,14X1 +3,55X2 -0,28X1X2. El modelo de          querimientos para niños de 2-5 años (FAO/
FAO/WHO (1991). Los contenidos de los              predicción explicó el 95% de la variación to-   WHO, 1991), excepto para Trp. La califica-
AAE His, Leu y Phe+Tyr en ambas hari-              tal (p≤0,0001) en los valores de aceptabili-    ción química de AAE varió de 91,81 (Trp) a
nas, los azufrados Met+Cys y Val en HME,           dad de las mezclas HME/HGE.                     153,40 (Met+Cys), y la calificación química
y de Lys, Trp y Thr en HGE, fueron mayo-           Optimización. El objetivo del proceso de op-    más baja correspondió para Trp (91,81; Tabla
res a las recomendaciones de FAO/WHO               timización fue encontrar la mejor combina-      IV). La mezcla optimizada tuvo una digesti-
(1991). Otros AAE, como Thr en HME e               ción HME/HGE para obtener valores ópti-         bilidad proteínica in vitro y un C-PER de
Ile y Val en HGE, se encontraron a niveles         mos de las tres variables de respuesta (PV,     84,5% y 1,85, respectivamente (Tabla IV).
comparables al patrón de referencia, mien-         LD, A). Para la predicción de los valores       Serna-Saldívar et al. (1999) llevaron a cabo
tras que Lys, Trp e Ile en HME, y los azu-         óptimos, los modelos de predicción              estudios sobre el valor nutricional de mezclas
frados (Met+Cys) en HGE fueron identifica-         completos se consideraron en la función
dos como AAE limitantes.                                                                                    TABLA IV
                                                   de deseabilidad (De la Vara y Domín- COMPOSICIÓN QUÍMICA Y PROPIEDADES
                                                   guez, 2002). Los valores óptimos para         NUTRICIONALES DE LA MEZCLA
Modelos de predicción para                         las variables de respuesta se obtuvieron
las variables de respuesta                                                                             HME/HMN OPTIMIZADA
                                                   a una deseabilidad global de 0,878
                                                   como resultado de la combinación de         Propiedad         Mezcla Requerimientos
Proteína verdadera (PV). El contenido de           21,2g HME +78,8g HGE por 100g de                            HME/HGE para niños
PV de las mezclas HME/HGE varió de 8,06                                                                        optimizada1   2-5 años
                                                   mezcla (Figura 1). Esta combinación se                                  (FAO/WHO)
a 18,17% (Tabla III). El análisis de regresión     denominó mezcla optimizada y se utili- Composición química
mostró que PV dependió significativamente          zó como ingrediente básico para la pre- (%, MS)
de los porcentajes de HME (X1; p≤0,0001) y         paración de un alimento infantil.         Proteínas            20,07
HGE (X2; p≤0,0001) y de la interacción                                                       Lípidos                      5,70
HME-HGE (X1X2; p≤0,0001), para YTP=                                                          Carbohidratos               71,14
                                                   Propiedades de la mezcla optimizada
8,20X1 +18,04X2 -2,64X1X2. Este modelo de                                                    Cenizas                      3,09
predicción explicó el 99,8% de la variación                                                  Nutricionales
                                                                       Los contenidos de     AAE
total (p≤0,0001) en el contenido de PV de
                                                   proteínas, lípidos y carbohidratos de la    His                      2,75           1,9
las mezclas HME/HGE.                                                                           Ile                      3,31           2,8
                                                   mezcla HME/HGE optimizada se presen-
                                                   tan en la Tabla IV. Esta mezcla cubrió      Leu                      7,61           6,6
Lisina disponible (LD). Los contenidos de                                                      Lys                      6,26           5,8
                                                   satisfactoriamente las recomendaciones de   Met+Cys                  3,84           2,5
LD de las mezclas HME/HGE fueron afec-
                                                   FAO/WHO para ingredientes básicos a         Phe+Tyr                  8,71           6,3
tados por los porcentajes de HME (X1;
                                                   utilizar en la preparación de alimentos     Trp                      1,01           1,1
p≤0,0001) y de HGE (X2; p≤0,0001) y por                                                        Thr                      3,70           3,4
                                                   para niños, es decir 16,1g de proteína,
la interacción HME-HGE (X1X2; p≤0,001)                                                         Val                      3,80           3,5
                                                   6,0g de grasa y 375kcal por 100g de in-   Calificación AAE          91,81
para YAL = 3,49X1 +6,09X2 -0,02X1X2. El
                                                   grediente (Mitzner et al., 1984).         AAE limitante               Trp
modelo de predicción explicó el 99,9% de la
                                                                       Cuando se mezclan     Digestibilidad proteínica
variación total (p≤0,0001) en el contenido de
                                                   HME y HGE sus proteínas se comple-        in vitro (%)              84,5
LD de las mezclas HME/HGE.
                                                   mentan entre sí para producir una mejor   C-PER                      1,85
Aceptabilidad. Este parámetro dependió sig-        calidad, cubriéndose las deficiencias en 1
                                                                                              21,2g HME +78,8g HGE/100 g mezcla.
nificativamente de los porcentajes de HME          aminoácidos limitantes de manera recí- HME: harina de maíz extruido, HGE: harina de garbanzo
(X1; p≤0,0001) y HGE (X2; p≤0,0001) en las         proca. La HGE complementa las defi- extruido, AAE: aminoácidos esenciales (g/100g proteína),
mezclas y de la interacción de los porcenta-       ciencias en Lys y Trp de HME, y la C-PER: relación de eficiencia proteínica calculada.



872                                                                                                      DEC 2008, VOL. 33 Nº 12
TABLA V                                   el cual se encuentra dentro del intervalo reco-    Fomento y Apoyo a Proyectos de Investiga-
      COMPOSICIÓN QUÍMICA                             mendado, es superior al de los atoles elabora-     ción 2007 y por el Consejo Estatal de Cien-
  Y PROPIEDADES NUTRICIONALES                         dos a base de harina de maíz. Por otro lado,       cia y Tecnología de Sinaloa, en su Convoca-
  Y SENSORIALES DEL ALIMENTO                          la cantidad de energía recomendada a consu-        toria para Apoyo a Proyectos de Investiga-
            INFANTIL                                  mir por niños y niñas físicamente activos con      ción 2006.
     Propiedad                            Alimento    edades de 1-3 años es 1000-1400kcal/día,
                                           infantil   para niñas de 4-8 años es 1400-1800kcal/día                         REFERENCIAS
                                                      y para niños de 4-8 años es 1600-2000kcal/
Composición química (g/100g)                                                                             Alarcón-Valdez C (2004) Elaboración de alimentos
 Proteínas                                    4,52
                                                      día. Así mismo, un nivel seguro de ingestión
                                                      de proteínas para niños y niñas es de 13 y              de alto valor nutricional a partir de maíz (Zea
 Lípidos                                      1,28                                                            mays L) de calidad proteínica y garbanzo. Tesis.
 Carbohidratos                               24,00    19g/día para las edades de 1-3 y de 4-8 años,           Universidad Autónoma de Sinaloa. México. pp.
 Cenizas                                      0,69    respectivamente (USDA, 2005). Una porción               11-19.
Energía (kcal)                                126     (100g) del alimento infantil aporta el 9,0-        Anderson RA, Conway HR, Pfeifer VF, Griffin
Nutricionales                                         12,6%, 7,0-9,0% y 6,3-7,9% de los requeri-              ELJr (1969) Gelatinization of corn grits by roll
                                                      mientos diarios de energía para niños y niñas           and extrusion cooking. Cereal Sci. Today 14:
 Digestibilidad proteínica in vitro (%)      92,1                                                             4-7, 11-12.
 C-PER                                        1,93    de 1-3 años, niñas de 4-8 años y niños de 4-8      AOAC (1999) Official Methods of Analysis. 16th edn.
Sensorial                                             años, respectivamente; así como aporta el               Association of Analyst Chemists. Gaithersburg,
 Aceptabilidad                                 4,31   34,8% y el 23,8% del requerimiento diario de            MD, USA. Cap. 4, pp. 25; cap. 12, pp. 7; cap.
C-PER: Relación de eficiencia proteínica calculada.   proteína para niños de 1-3 y 4-8 años de                32, pp. 1-2; cap. 45, pp. 59-60.
                                                      edad, respectivamente. Además, el alimento         Bello-Pérez LA, Osorio-Díaz P, Agama-Acevedo E,
                                                      tuvo valores de digestibilidad proteínica in vi-        Núñez-Santiago C, Paredes-López O (2002)
                                                                                                              Chemical, physicochemical and rheological pro-
de cereales-leguminosas, evaluando digestibi-         tro y C-PER de 62,1% y 1,93, respectivamen-             perties of masas and nixtamalized corn fluors.
lidad proteínica in vitro, perfil de aminoáci-        te. Los panelistas (adultos semientrenados) en          Agrociencia 36: 319-328.
dos, C-PER, y PER y reportaron digestibili-           una prueba hedónica para aceptabilidad gene-       Björck I, Noguchi A, Asp NG, Cheftel JC, Dahlqvist
dades in vitro y C-PER´s de 83,21-84,7% y             ral, evaluaron al alimento infantil como sen-           A (1983) Protein nutritional value of a biscuit
1,22-1,35 para pan de trigo fortificado con           sorialmente aceptable, ya que le otorgaron              processed by extrusion cooking: Effects on avai-
                                                                                                              lable lysine. J. Agric. Food Chem. 31: 488-492.
soya desgrasada y harina de sésamo, respec-           calificación de 4,31 en una escala hedónica
                                                                                                         Bockholt AJ, Rooney LW (1992) QPM hybrids for
tivamente. Estos investigadores concluyeron           de 6 puntos (0-5). Esto significa que la acep-          the United States. En Mertz ET (Ed,) Quality
que los PER obtenidos utilizando la digesti-          tabilidad se encuentra entre me gusta mucho             Protein Maize. American Association of Cereal
bilidad in vitro y aminoácidos subestimaron           y me gusta extremadamente.                              Chemists St Paul, MN, EEUU. pp. 111-121.
los valores obtenidos en ratas, sin embargo                                                              Bressani R (1983) Guidelines for the development of
las diferencias absolutas entre los dos trata-        Conclusiones                                            processed and packed weaning foods. Food
                                                                                                              Nutr. Bull. 5: 1-20.
mientos fueron similares, indicando que la                                                               Bressani R, Harper JM, Whickstrom B (1984) Pro-
técnica de C-PER predijo la misma diferen-                               La combinación óptima de             cessed and packaged weaning foods: develop-
cia observada en el bioensayo en ratas. Se            harina de maíz de calidad proteínica extruido           ment, manufacture and marketing. En Mitzner
recomienda utilizar técnicas in vitro como            (HME) y harina de garbanzo extruido (HGE)               N, Scrimshaw N, Morgan R (Eds.) Improving
indicador rápido y preciso de la digestibilidad       para producir un alimento infantil tipo atole           the Nutritional Status of Children During
                                                                                                              Weaning Period. MIT. Cambridge, MA,
in vitro y PERs en alimentos.                         de alto valor nutricional fue HME/HGE=                  EEUU. pp. 51-64.
                                                      21,2/78,8%. Cada 100g de esta mezcla con-          Cerezal-Mezquita P, Carrasco-Verdejo A, Pinto-Ta-
Composición y propiedades nutritivas                  tiene 20,07g de proteína, 5,70g de lípidos,             pia K, Romero-Palacios N, Arcos-Zavala R
del atole preparado con la mezcla                     71,14g de carbohidratos y 3,09g de cenizas.             (2007) Suplemento alimenticio de alto conteni-
optimizada                                            Además, cubre satisfactoriamente los requeri-           do proteico para niños de 2-5 años. Desarrollo
                                                                                                              de la formulación y aceptabilidad. Interciencia
                                                      mientos de aminoácidos esenciales (EAA)                 32: 857-864.
                   En la Tabla V se presenta          para niños de 2-5 años recomendados por la         Chavan JK, Salunkhe DK (1987) Biochemistry and
la composición química y las propiedades              FAO/WHO, excepto para Trp, con califica-                technology of chickpea (Cicer arietinum L)
nutricionales del alimento infantil preparado         ción química de 91,81. El alimento preparado            seeds. Crit. Rev. Food Sci. Nutr. 25: 107-158.
con la mezcla optimizada (21,2g HME                   con esta mezcla tuvo un contenido de proteí-       Cohen SA, Strydam DJ (1988) Amino acid analysis
+78,8g HGE en 100g de mezcla). El alimen-             na de 4,52% que representa el 14,4% de la               using prhenylisothiocynate derivatives. Anal.
                                                                                                              Biochem. 174: 1-16.
to infantil tuvo un contenido de 4,52g de             energía del alimento, lo cual es adecuado
                                                                                                         De la Vara SR, Domínguez DJ (2002) Métodos de
proteínas, 1,28g de lípidos, 24g de carbohi-          para un alimento para niños. Cada 100g del              superficie de respuesta; un estudio comparativo.
dratos, 0,69g de cenizas y 126kcal por 100g.          alimento aportan 6,3-12,6% y 23,8-34,8% del             Rev. Matem. Teoría y Aplic. 1: 47-65.
El contenido de proteínas, lípidos y carbohi-         requerimiento diario de energía y proteína         Design Expert (2002) Expert Design. FAOSTAT.
dratos representa el 14,4; 9,2 y 76,4% del            para niños y niñas entre 1 y 8 años de edad.            Food and Agriculture Organization of the Uni-
contenido energético del alimento infantil.           El alimento tuvo 62,1% de digestibilidad de             ted Nations. Roma, Italia. http//apps.fao.org/
                   Una dieta bien balanceada          la proteína in vitro, C-PER de 1,93 y califi-      FAO/WHO (1991) Protein Quality Evaluation. FAO
                                                                                                              Food and Nutrition Paper 51. Food and Agricul-
para niños debe disponer 9-15% de la energía          cación entre me gusta mucho y me gusta ex-              ture Organization of the United Nations, Roma,
a partir de proteínas, 35-45% de las grasas y         tremadamente en una prueba hedónica para                Italia. 66 pp.
45-55% de carbohidratos (Cerezal-Mezquita             aceptabilidad general. Este alimento podría        Felows PJ (2000) Food Processing Technology:
et al., 2007). Con base en ello, el alimento          utilizarse como alimento soporte del creci-             Principles and Practice. 2a ed. Woodhead. Cam-
infantil tipo atole elaborado a partir de la          miento infantil.                                        bridge, RU.
mezcla optimizada de HGE y HME, presentó                                                                 Gopalan C, Rao KSJ (1975) Pellagra and amino acid
                                                                                                              imbalance. Vitam. Horm. 33: 505-528.
un contenido de carbohidratos superior y un                       AGRADECIMIENTOS
                                                                                                         Granito M, Torres A, Guerra M (2003) Desarrollo y
contenido de lípidos inferior a la recomenda-                                                                 evaluación de una pasta a base de trigo, maíz,
ción, lo cual es característico de este tipo de                        Esta investigación fue fi-             yuca y frijol. Interciencia 28: 372-379.
alimentos (atoles), con la diferencia que el          nanciada por la Universidad Autónoma de            Gujska E, Khan K (1990) Effect of temperature on
contenido de proteínas del alimento infantil,         Sinaloa, México, a través del Programa de               properties of extrudates from high starch frac-



                  DEC 2008, VOL. 33 Nº 12                                                                                                                 873
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                                                            chnol. 33: 117-123.                                     collaborative study. J. Assoc. Off. Anal. Chem.
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                                                            zation of extrusion process to transform harde-
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                                                            ned chickpeas (Cicer arietinum L) into a useful
    mejorada. Instituto de Nutrición de Centro Amé-                                                                 nal evaluation of table bread fortified with defat-
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WEANING FOOD FROM QUALITY PROTEIN MAIZE AND CHICKPEA EXTRUDED FLOURS
Roberto Gutiérrez Dorado, Oralia Guadalupe Cárdenas Valenzuela, Claudia Alarcón Valdez, José Antonio Garzón Tiznado,
Jorge Milán Carrillo, Eduardo Armienta Aldana and Cuauhtémoc Reyes Moreno
SUMMARY

   The present study had three objectives: 1) To determine the best                 children 2-5 years old recommended by FAO/WHO, except for trypto-
combination of quality extruded protein maize flour (EMF) and ex-                   phan. The atole-type weaning food prepared with the optimized mix-
truded chickpea flour (ECF) for producing a weaning food of high                    ture had a protein content of 4.52%, which accounts for 14.4% of
quality protein and high sensory acceptability, 2) to make a kind of                the supplied energy, suitable for a weaning food. Each 100g of the
infant food (atole) with an optimal EMF/ECF blend, and 3) to evalu-                 weaning food supply, respectively, 6.3-12.6% and 23.8-34.8% of the
ate the nutritional properties of the optimized EMF/ECF mixture and                 daily energy and protein requirements for children 1-8 years old. The
the weaning food. Response surface methodology was applied to                       weaning food had a 62.1% protein digestibility in vitro, a C-PER of
determine the optimal EMF/ECF combination. The best EMF/ECF                         1.93, and was evaluated between “very liked” and “extremely liked”
combination was 21.2:78.8%. This mixture contained (in dry matter)                  in a hedonic test for overall acceptability. This food could be used to
20.07% protein, 5.70% lipids and 71.14% carbohydrates; its essential                support the growth of infants.
amino acids (EAA) profile satisfactorily covered the requirements for

ALIMENTO PARA CRIANÇAS PREPARADO COM FARINHAS DE MILHO DE QUALIDADE PROTEÍNICA E
GRÃOS-DE–BICO EXTRUSADO
Roberto Gutiérrez Dorado, Oralia Guadalupe Cárdenas Valenzuela, Claudia Alarcón Valdez, José Antonio Garzón Tiznado,
Jorge Milán Carrillo, Eduardo Armienta Aldana e Cuauhtémoc Reyes Moreno
RESUMO
   O presente estudo teve três objetivos: 1) Determinar a melhor                    senciais cobriu satisfatoriamente os requerimentos para crianças
combinação de farinha de milho de qualidade proteínica extru-                       de 2-5 anos de idade recomendados por FAO/WHO, exceto para
sado (HME) e farinha de grão-de-bico extrusado (HGE) para                           triptófano. O alimento infantil tipo mingau derivado desta mis-
produzir um alimento para crianças de alta qualidade proteí-                        tura teve um conteúdo de proteína de 4,52%, que é 14,4% da
nica e elevada aceitabilidade sensorial, 2) formular o alimento                     energia do alimento, adequado para um alimento para crianças.
infantil tipo mingau a partir da mistura HME/HGE otimizada,                         Cada 100g de alimento infantil aportam 6,3-12,6% e 23,8-34,8%
e 3) avaliar as propriedades nutricionais da mistura HME/HGE                        do requerimento diário de energia e proteína para meninos e
otimizada e do alimento. Aplicou-se a metodologia de superfície                     meninas 1-8 anos de idade. O alimento infantil teve 62,1% de
de resposta para determinar a combinação ótima HME/HGE. A                           digestibilidade da proteína in vitro, C-PER de 1,93 e qualificação
melhor combinação HME/HGE 21,2:78,8%; esta mistura teve                             entre “gosto muito” e “gosto demasiado” em uma prova hedôni-
conteúdos (em matéria seca) de 20,07% de proteína, 5,70% de                         ca para aceitabilidade general. Este alimento poderia utilizar-se
lipídios e 71,14% de carboidratos; seu perfil de aminoácidos es-                    como alimento suporte do crescimento infantil.



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Alimento para niños preparado con harinas de maíz de calidad proteínica y garbanzo extruidos

  • 1. ALIMENTO PARA NIÑOS PREPARADO CON HARINAS DE MAÍZ DE CALIDAD PROTEÍNICA Y GARBANZO EXTRUIDOS ROBERTO GUTIéRREZ DORADO, ORALIA GUADALUPE CáRDENAS VALENZUELA, CLAUDIA ALARCóN VALDEZ, JOSé ANTONIO GARZóN TIZNADO, JORGE MILáN CARRILLO, EDUARDO ARMIENTA ALDANA y CUAUHTéMOC REYES MORENO RESUMEN El presente estudio tuvo tres objetivos: 1) Determinar la mejor enciales cubrió satisfactoriamente los requerimientos para niños combinación de harina de maíz de calidad proteínica extruido de 2-5 años de edad recomendados por FAO/WHO, excepto para (HME) y harina de garbanzo extruido (HGE) para producir un triptófano. El alimento infantil tipo atole derivado de esta mez- alimento para niños de alta calidad proteínica y elevada acept- cla tuvo un contenido de proteína de 4,52%, que es 14,4% de abilidad sensorial, 2) formular el alimento infantil tipo atole la energía del alimento, adecuado para un alimento para niños. a partir de la mezcla HME/HGE optimizada, y 3) evaluar las Cada 100g de alimento infantil aportan 6,3-12,6% y 23,8-34,8% propiedades nutricionales de la mezcla HME/HGE optimizada del requerimiento diario de energía y proteína para niños y ni- y del alimento. Se aplicó la metodología de superficie de re- ñas de 1-8 años de edad. El alimento infantil tuvo 62,1% de di- spuesta para determinar la combinación óptima HME/HGE. La gestibilidad de la proteína in vitro, C-PER de 1,93 y calificación mejor combinación HME/HGE fue 21,2:78,8%; esta mezcla tuvo entre “me gusta mucho” y “me gusta extremadamente” en una contenidos (en materia seca) de 20,07% de proteína, 5,70% de prueba hedónica para aceptabilidad general. Este alimento lípidos y 71,14% de carbohidratos; su perfil de aminoácidos es- podría utilizarse como alimento soporte del crecimiento infantil. a desnutrición es una de se ha desarrollado alimentos infantiles su- (Granito et al., 2003), papillas (Cerezal- las principales causas de plementarios que son suministrados a tra- Mezquita et al., 2007) y galletas (INCAP, morbilidad y mortalidad vés de programas gubernamentales. Mez- 2002). En cuanto a la alimentación huma- en niños en la mayoría de los países en de- clas de cereales y leguminosas han sido na, el maíz es el tercer cereal en importan- sarrollo (Alarcón-Valdez, 2004). Para mini- empleadas en la formulación de alimentos cia, después del trigo y el arroz; sin em- mizar las adversidades de la desnutrición infantiles (Bressani, 1983), como pastas bargo, posee un contenido proteínico relati- PALABRAS CLAVE / Alimento Infantil / Garbanzo / Maíz de Calidad Proteínica / Nutrición / Recibido: 09/01/2008. Modificado: 29/09/2008. Aceptado: 01/10/2008. Roberto Gutiérrez Dorado. Ingeniero Químico, Maestro en Ciencias en Ciencia y Tecnología de Alimentos y Pasante de Doctor en Ciencias en Biotecnología, Universidad Autónoma de Sinaloa (UAS), México. Profesor Investi- gador, UAS, México. Oralia Guadalupe Cárdenas Valenzuela. Ingeniero Químico, Maestro en Ciencias en Ciencia y Tecnología de Alimentos y Pasante de Doctor en Ciencias en Biotecnología, UAS, México. Profesor Investigador, UAS, México. Claudia Alarcón Valdéz. Ingeniero Bioquímico, Instituto Tecnológico de los Mochis, México. Maestro en Ciencias, UAS, México. José Antonio Garzón Tiznado. Ingeniero Agrónomo, UAS, México. Maestro en Ciencias en Fitopatología, Colegio de Posgraduados, Chapingo, México. Doctor en Ciencias en Biotecnología de Plantas, CINVESTAV-IPN, México. Profesor Investigador, UAS, México. Jorge Milán Carrillo. Ingeniero Químico, Maestro y Doctor en Ciencias en Biotecnología Agrí- cola / Alimentaría, UAS, México. Profesor Investigador, UAS, México. Eduardo Armienta Aldana. Ingeniero Bioquímico, UAS, México. Maestro y Doctor en Cien- cias en Biotecnología de Plantas, CINVESTAV-IPN, México. Profesor Investigador, UAS, México. Cuauhtémoc Reyes Moreno. Ingeniero Bioquímico, UAS, México. Maestro en Ciencias en Ciencia y Tecnología de Alimentos, Universidad Autónoma de Querétaro, México. Doctor en Ciencias en Biotecnología de Plantas, CINVESTAV-IPN, México. Profesor Investigador, UAS, México. Dirección: Lichis No. 1986; Colonia La Campiña; 80060 Culiacán, Sinaloa, México. e-mail: creyes@uas.uasnet.mx 868 0378-1844/08/12/868-07 $ 3.00/0 DEC 2008, VOL. 33 Nº 12
  • 2. vamente bajo y una composición de ami- lienda, horneado, cocción, secado y fer- se enfriaron a temperatura ambiente (25ºC) noácidos esenciales desfavorable. mentación (Bressani et al, 1984), así como y fueron molidos (Cyclone Sample Mill, El maíz presenta deficien- nuevas tecnologías, las cuales actualmente UD Corp., Boulder, CO, EEUU) hasta obte- cias en lisina y triptófano, además de un son ampliamente usadas en la industria de ner una harina que pasara a través de una desbalance leucina/isoleucina, lo cual con- alimentos, tales como el calentamiento por malla Nº80 (0,150mm). La HME obtenida tribuye al desarrollo de pelagra y kwas- radio frecuencias, microondas, infrarrojos, se envasó en recipientes herméticos y se al- hiorkor (Gopalan y Rao, 1975). Debido a perfusión instantánea y de alto calor, ca- macenó a 4ºC. la importancia nutricional del maíz, se han lentamiento óhmico y extrusión (Felows, hecho importantes esfuerzos para mejorar 2000; Richardson, 2001). La extrusión ge- Preparación de harina de garbanzo la calidad de su proteína. Mertz et al. neralmente es un proceso llevado a cabo a extruido (HGE) (1964) encontraron que el gen opaco-2 de alta temperatura y en tiempo corto, y ofre- un tipo de maíz aumenta significativamente ce numerosas ventajas tales como versatili- La HGE se preparó de la concentración de lisina. Desafortunada- dad, alta productividad, bajos costos de acuerdo a Milán-Carrillo et al. (2002). Doce mente, este gen está asociado con una re- operación, eficiencia energética, obtención lotes de 500g de grano entero se fragmenta- ducción del rendimiento de grano, el au- de productos de alto valor biológico y ele- ron en una licuadora doméstica (Osterizer® mento de la susceptibilidad a la pudrición vada digestibilidad de las proteínas (Mer- 4655-813, Sunbeam, México) a baja veloci- de la mazorca, endospermo harinoso suave cier, 1993; Milán-Carrillo et al., 2002). El dad hasta obtener fragmentos con tamaños y pobres propiedades para la molienda presente trabajo tuvo tres objetivos: 1) De- que pasaron a través de una malla Nº10 seca. Debido a estas propiedades indesea- terminar la mejor combinación harina de (2mm). Debido al proceso de molienda, la bles, este maíz con alto contenido de lisina maíz de calidad proteínica extruido (HME) testa se separó de los cotiledones fragmenta- nunca fue cultivado con éxito en grandes / harina de garbanzo extruido (HGE) para dos y fue eliminada con una corriente de superficies. Después de más de 20 años de producir un alimento infantil de alta cali- aire aplicada a los fragmentos con un abani- esfuerzos interdisciplinarios, mejoradores dad proteínica y elevada aceptabilidad sen- co domestico. Los fragmentos, sin testa, fue- de plantas y bioquímicos del Centro Inter- sorial, 2) formular el alimento infantil tipo ron molidos en la misma licuadora a alta ve- nacional del Mejoramiento del Maíz y el atole a partir de la mezcla HME/HGE op- locidad hasta obtener harina con tamaños de Trigo (CIMMyT), México, han desarrolla- timizada y 3) evaluar las propiedades nu- partícula que pasaron a través de una malla do líneas de maíz con endospermo duro y tricionales de la mezcla HME/HGE opti- Nº40 (0,425mm), que se ajustó a 26,5% de mejorados nutricionalmente, llamados maí- mizada y del alimento elaborado. humedad con una solución salina (0,25% ces de calidad proteínica (MCP; NRC, NaCl y 0,75% de NaHCO3 en agua destilada, 1988). Estas líneas poseen buenas propie- Materiales y Métodos p/v). Cada lote fue empacado en bolsas de dades agronómicas y de procesamiento, polietileno y almacenado a 4ºC por 12h. An- con un mejorado contenido de lisina y trip- Maíz (Zea mays L) de ca- tes de la extrusión las muestras se acondicio- tófano (Sproule et al., 1988; Bockholt y lidad proteínica variedad V-537C, y garban- naron a 25ºC durante 6h. Se utilizó el mismo Rooney, 1992). Después de 10 años de es- zo (Cicer arietinum L) variedad Blanco Si- extrusor empleado para la obtención de fuerzos interdisciplinarios, el CIMMYT y naloa 92 fueron proporcionados por INIFAP HME, a 151ºC y velocidad de tornillo de el Instituto Nacional de Investigaciones Fo- Valle de Culiacán, Sinaloa, México. Los 190rpm. Los extruidos se enfriaron a tempe- restales, Agrícolas y Pecuarias (INIFAP), granos fueron limpiados, guardados en reci- ratura ambiente (25ºC) y fueron moliedos México, han desarrollado con éxito 26 va- pientes herméticos y almacenados a 4ºC. (Cyclone Sample Mill) hasta obtener una ha- riedades e híbridos de MCP, principalmen- rina que pasara a través de una malla Nº80 te para regiones tropicales y subtropicales, Preparación de harina de maíz (0,150mm). La HGE obtenida se envasó en que son similares al maíz normal en rendi- extruido (HME) recipientes herméticos y se almacenó a 4ºC. miento y otras propiedades agronómicas, y se está tratando de introducirlos en la pro- La HME se preparó de Preparación de alimentos para niños ducción comercial (INIFAP, 1999). acuerdo a Reyes-Moreno et al., (2003). Tres El garbanzo, por su parte, lotes de 500g de grano entero se fragmenta- Se prepararon 11 diferen- es una buena fuente de proteínas y carbohi- ron en una licuadora doméstica (Osterizer® tes alimentos infantiles tipo atole a partir de dratos; además, posee importantes cantida- 4655-813, Sunbeam, México) a baja veloci- 11 mezclas HME/HGE obtenidas por la des de vitaminas (tiamina, niacina), minera- dad hasta obtener fragmentos con tamaños combinación en diferentes proporciones de les (Ca, P, Fe, Mg, K) y ácidos grasos insa- que pasaron a través de una malla Nº10 cada harina (Tabla III). Para la obtención de turados (oleico, linoleico). Sin embargo, las (2mm). Los fragmentos fueron molidos en los alimentos se preparó una suspensión proteínas del garbanzo son deficientes en la misma licuadora a alta velocidad hasta combinando 25g de mezcla, 8g de sacarosa aminoácidos azufrados (metionina y cisteí- obtener harina con tamaños de partícula que y 80ml de agua purificada. La suspensión na; Chavan et al., 1987; Reyes Moreno et pasaron a través de una malla Nº40 se calentó a 90ºC por 8min, se enfrió a al., 2004). Al mezclarlas, las proteínas de (0,425mm). La harina de maíz se mezcló temperatura ambiente (25ºC) por 30min y maíz y garbanzo se complementan unas con con cal en una proporción de 0,24g de cal se evaluó sensorialmente para aceptabilidad otras para producir proteínas de mayor cali- por 100g de harina y la mezcla se ajustó a (A) con panelistas adultos semientrenados, dad nutricional. 28% de humedad con agua destilada. Cada en una prueba hedónica para aceptabilidad Varias tecnologías de pro- lote se empacó en bolsa de polietileno y se general. cesamiento de alimentos tienen potencial almacenó a 4ºC por 12h. Antes de la extru- para incrementar la biodisponibilidad y sión las muestras se acondicionaron a 25ºC Evaluación sensorial densidad nutritiva, seguridad alimentaria, durante 6h. La extrusión se realizó en ex- estabilidad durante almacenamiento y pala- trusor de tornillo simple Mod 20 DN (Bra- Las muestras (20g) de ali- tabilidad, y pueden ser aplicadas para la bender Instruments, Inc, NJ, EEUU) con mento se sirvieron en copas cuyas tapas se preparación de alimentos infantiles. Entre diámetro de barril de 19mm, utilizando una marcaron con números de tres dígitos selec- estas tecnologías se incluyen aquellas tradi- temperatura del extrusor de 79,4ºC y veloci- cionados al azar. Para la evaluación se se- cionales como rostizado, germinación, mo- dad de tornillo de 73,5rpm. Los extruidos leccionó un panel de 30 jueces de ambos DEC 2008, VOL. 33 Nº 12 869
  • 3. sexos semientrenados de los estudiantes, punto X= (X1, X2) de la zona experimental. (ATA) 10% y se agitaron en un agitador or- profesores y personal (18-35 años de edad) Se procuró que todas las variables de res- bital 21704-10, (Cole Parmer, Vernon Hills, de la Facultad de Ciencias Químico Biológi- puesta tuvieran valores tan altos como fuera IL, EUA) a 400rpm y 25ºC por 1h. El sobre- cas de la Universidad Autónoma de Sinaloa, posible. Una vez calculadas las tres deseabili- nadante se aforó a 50ml con agua destilada México. La evaluación y selección de los dades individuales se obtuvo la deseabilidad y se tomó una alícuota para la determinación panelistas se basó en el interés de los parti- global para las tres variables de respuesta de N2. El N2 de la alícuota y el NT de la cipantes, agudeza para la detección de sabor aplicando la función matemática de transfor- muestra se determinaron por microKjeldahl y olor, y la capacidad de entender los pro- mación D= (d1d2d3)1/3. El valor óptimo ideal (960,52; AOAC, 1999). El contenido de PV cedimientos del ensayo, además de que de- es D= 1, siendo aceptables los valores entre se calculó como (NT-NNP)×6,25. clararon disfrutar de comer alimentos tipo 0,6 y 0,8. Para la realización de estas deter- atole. Los evaluadores fueron ubicados en minaciones se utilizó el paquete Design Ex- Lisina disponible (LD) compartimentos individuales con temperatu- pert (2002). ra (25ºC) y humedad relativa (50-60%) con- La lisisna disponible se troladas. Las muestras fueron evaluadas Composición proximal determinó de acuerdo al procedimiento de para aceptabilidad (A) con una escala hedó- Hurrel et al. (1979). Se utilizó colorante Na- nica de 6 puntos (0: me disgusta mucho; 5: Se emplearon los méto- ranja 12, el cual a pH ácido se liga a los re- me gusta extremadamente; Larmond, 1977). dos de AOAC (1999): secado a 105ºC por siduos de lisina de las proteínas formando La evaluación sensorial se repitió tres veces 24h para humedad (925,098), incineración un cromógeno. Se colocaron muestras de en diferentes días. a 550ºC para cenizas (923,03); desgrasado 0,5g en matraces Erlenmeyer de vidrio. En con éter de petróleo en un equipo Soxhlet la primera etapa (lectura A) en un matraz Diseño para la preparación de mezclas para lípidos (920,39C), y microKjeldahl con la muestra se añadió 40ml de una solu- de HME/HGE (960,52) para proteínas (N×6,25). El con- ción de 1,3626g de colorante Naranja 12 por tenido de carbohidratos se determinó por litro de solución reguladora de fosfatos (20g Se seleccionó un diseño diferencia. ácido oxálico + 3,4g de fosfato monobásico Lattice Simplex para mezclas (metodología de potasio + 60ml ácido acético, pH 1,25). de superficie de respuesta). Las proporcio- Diferencia total de color (ΔE) En la segunda etapa, correspondiente a la nes de los componentes(X1= HME y X2 = propionilación (lectura B), 0,2ml de anhídri- HGE) se expresaron como fracciones de la El color superficial de do propiónico y 2ml de solución reguladora mezcla, siendo siempre 100% la suma las muestras se midió por triplicado uti- de fostafos se añadieron a otro matraz con (X1+X2) de las proporciones de los compo- lizando un colorímetro CR-210 (Minolta, muestra. Ambos matraces se agitaron a nentes. El diseño experimental generó 11 Japón). Las variables L, a, y b de las 400rpm y 25ºC por 1h. Se tomaron alícuo- tratamientos. Las mezclas de cada trata- muestras (m) se registraron y compara- tas (15ml) de cada matraz y se centrifugaron miento se evaluaron para proteína verdade- ron con los de un estándar (s) de color (5000g, 25ºC, 15min); cada sobrenadante se ra (PV) y lisina disponible (LD). A partir blanco de valores L s =97,63, a s = 0,78, diluyó con agua destilada (1:100). Se midie- de cada mezcla se preparó un alimento in- bs =-0,25. La ΔE se calculó con la ecua- ron las absorbancias a 475nm con un espec- fantil, y cada uno de ellos se evaluó senso- ción ΔE= ((Ls-Lm) 2 +(as-a m) 2 +(bs-bm) 2)1/2 trofotómetro UV-Visible 21D-1146 (Spectro- rialmente para aceptabilidad (A). Se consi- nic, Milton Roy, EEUU). Se construyó una deró como variables de respuesta a PV, LD Actividad e índice de absorción de agua curva estándar de lisina y la cantidad en la y A. El modelo experimental se representa muestra se obtuvo restando la lectura B de como Se determinó la actividad de agua (aw) la lectura A. donde Yk: variables de respuesta; β1, β2 y en muestras de harina de 5g acondicionadas a 25ºC, utilizando un medidor Digestibilidad proteínica in vitro (DP) Aqua Lab CX-2 (Decagon De- vices, Pullman, WA, EEUU) Se aplicó la metodología calibrado con solución saturada de Hsu et al. (1977). Se seleccionó un siste- de KCl de aw= 0,849 a 25ºC ma multienzimático (Sigma Chemical, St. (Milán et al., 2000). Para el ín- Luis, MO, EEUU) constituido por 8mg de β12: parámetros estimados para cada térmi- dice de absorción de agua (IAA) Se utilizó tripsina pancreática porcia tipo IX (Sigma no lineal y la interacción, respectivamente. la metodología de Anderson et al. (1969). T-0303) con 15600U/mg; 15,5mg de quimo- Se aplicó análisis de regresión múltiple y se Una alícuota de 2,5g de cada muestra se tripsina pancreática bovina tipo II (Sigma obtuvo un modelo de predicción para cada suspendió en 30ml de agua destilada en un C-4129) con 83,9 U/mg; y 6,5mg de pepti- variable de respuesta (Design Expert, tubo de centrífuga de 60ml puesto previa- dasa intestinal porcina grado III (Sigma 2002). mente a peso constante. La suspensión se P-7500) con 102 U/g; todo en 5ml de agua homogeneizó con una varilla de vidrio, por destilada. Mientras se agitaba en un baño a Combinación óptima de HME/HGE 1min a 25ºC y se centrifugó (3000g, 25ºC, 37ºC, una cantidad específica de cada mues- 10min). El IAA se calculó a partir del peso tra se utilizó para preparar 50ml de una Se aplicó la metodología del precipitado y se expresó como g gel /g suspensión acuosa de proteína (6,25mg/ml) de superficie de respuesta como técnica para sólidos (MS). y se ajustó el pH de la suspensión a 8,0. A determinar la combinación óptima de HME/ cada suspensión proteínica, mantenida a HGE para producir un alimento para niños. Proteína verdadera (PV) 37ºC y en agitación constante, se le añadió El objetivo de la optimización fue encontrar 5ml de solución multienzimática y se regis- un valor común óptimo para las tres varia- Ésta se calculó a partir de tró el pH a los 10min. La DP se calculó bles de respuesta. Se aplicó el método de de- la diferencia entre N2 total (NT) y N2 no como DP= 210,46-18,10X, donde X es el seabilidad (De la Vara y Domínguez, 2002). proteínico (NNP). Para la determinación de pH registrado 10min después de añadir el Los tres modelos (uno para cada variable de NNP, ~0,5g de muestra se mezclaron con sistema multienzimático a la solución proteí- respuesta) pueden ser evaluados en cualquier 20ml de una solución de ácido tricloroacético nica (Hsu et al., 1977). 870 DEC 2008, VOL. 33 Nº 12
  • 4. Análisis de aminoácidos TABLA I mayor (p<0,05) de proteínas y ceni- COMPOSICIÓN QUÍMICA Y PROPIEDADES zas, y un contenido menor (p<0,05) Se colocó 5-10mg FISICOQUÍMICAS DE HARINAS DE MAÍZ de carbohidratos y lípidos que la de cada muestra en ampolletas de DE CALIDAD PROTEÍNICA Y HME (Tabla I). Khan et al (1995) re- 2ml que contenían un estándar inter- GARBANZO EXTRUIDOS1 portaron en cuatro variedades diferen- no (norleucina) y 0,4ml HCl 6N. Las Propiedad HME HGE tes de garbanzo contenidos (% en ampolletas fueron cerradas a vacío y MS) de 23,1-26,79% de proteínas; 3,6- colocadas en estufa a 110ºC por 24h. Composición química (% MS) 5,2% de lípidos; 2,8-3,6% de cenizas Se tomó un alícuota de 20µl del hi- Proteínas 10,75 b 22,28 a y 45,5-56,7% de carbohidratos. El in- drolizado, se secó y se sometió a de- Lípidos 5,84 a 5,48 b tervalo de actividad de agua (0,50- rivatización. Las muestras para deter- Carbohidratos 81,40 a 69,12 b 0,51) de las harinas extruidas corres- minación de cisteína se trataron pri- Cenizas 2,01 b 3,13 a pondió a valores donde la actividad mero con ácido perfórmico a tempe- Fisicoquímicas enzimática, crecimiento de microorga- ratura ambiente por 18h (Hirs, 1967). Actividad acuosa 0,51 a 0,50 a nismos y reacciones químicas ocurren El contenido de triptofano se deter- Color muy lentamente (Labuza, 1980), lo minó por separado. Las muestras se Valor Hunter L 87,89 b 88,92 a cual favorece al producto en una vida hidrolizaron en tubos de polipropile- Diferencia total de color 12,95 b 23,41 a de anaquel larga. La HGE tuvo mayor no con KOH 4,2M, que contenía 1% IAA 2,82 b 3,29 a (p<0,05) ΔE que la HME (23,41 vs (w/v) de tiodiglicol, a 110ºC por 18h. 1 Las medias fueron comparadas por renglones usando la prueba 12,95). En este trabajo ΔE representa Después de la hidrólisis, el KOH se de rangos múltiples de Duncan. Medias con la misma letra no son la diferencia total de color en referen- neutralizó con ácido perclórico 4,2M. significativamente diferentes a p≤0,05. cia a un estándar de color blanco. Va- Se colectó el sobrenadante, se ajustó HME: harina dede absorción de agua (g gel/g de garbanzo extrui- lores mayores de ΔE significan hari- do, IAA: índice maíz extruido, HGE: harina sólidos, MS) a pH 3 con ácido acético diluido y nas más oscuras. Por lo tanto, HGE se tomó una alícuota de 50µl para su fue más oscura que HME, lo cual derivatización. El equipo fue calibra TABLA II también fue observado visualmente. do con una mezcla de aminoácidos PROPIEDADES NUTRICIONALES DE HARINAS HGE también tuvo mayor (p<0,05) (Pierce Estándar H) suplementada DE MAÍZ DE CALIDAD PROTEÍNICA Y IAA que HME (3,29 vs 2,82). Los con triptofano. GARBANZO EXTRUIDOS1 mayores valores de ΔE e IAA de El análisis de ami- Propiedad HME HGE Requerimientos HGE no son debidos a los procesos de noácidos se realizó en equipo Pico-Tag niños 2-5 años elaboración de las harinas extruidas, (Waters, Milford, MA, EUA) según la (FAO/WHO) sino se deben a que la harina de gar- metodología propuesta por Cohen y banzo crudo, a partir de la cual se ela- Nutricionales Strydom (1988). El triptofano se anali- AAE boró HGE, presentó mayores valores zó utilizando las condiciones descritas His 3,51 a 2,60 b 1,9 de ΔE e IAA (19 y 2,15g gel por g por Hariharan et al (1993). Como pro- Ile 2,63 b 2,92 a 2,8 muestra seca, respectivamente) que la teína control se utilizó caseína. Leu 9,12 a 7,15 b 6,6 harina de maíz crudo (9,2 y 1,25g gel Lys 4,12 b 6,58 a 5,8 por g muestra seca) a partir de la cuál Met+Cys 5,03 a 2,08 b 2,5 Relación de eficiencia proteínica Phe+Tyr 7,33 b 8,14 a 6,3 se elaboró HME. Durante la elabora- calculada (C-PER) Trp 0,89 b 1,2 a 1,1 ción de HGE se presentaron menores Thr 3,5 b 3,9 a 3,4 incrementos de ΔE e IAA (23,2 y Las C-PER fueron Val 5,07 a 3,52 b 3,5 53%, respectivamente) que durante la AAE limitante Lys Met+Cys calculadas según el procedimiento elaboración de HME (40,8 y 125,6%). Digestibilidad sugerido por Satterlee et al. (1982) y proteínica El incremento de ΔE durante la elabo- reportado como método 982.30 por in vitro 80,9 b 82,6 a ración de HGE y HME sugiere reac- la AOAC (1999). Para el cálculo se C-PER 1,57 b 1,89 a ciones de oscurecimiento no enzimáti- requiere conocer la digestibilidad co durante el proceso de extrusión, en proteínica in vitro y el contenido de 1 Las medias fueron comparadas por renglones usando la prueba el cual se emplean altas temperaturas de rangos múltiples de Duncan. Medias con la misma letra no aminoácidos esenciales de la muestra son significativamente diferentes a p≤0,05. y contenidos de humedad intermedios. analizada. Se empleó caseína como HME: harina de maíz extruido, HGE: harina de garbanzo ex- Estas condiciones de procesamiento proteína de referencia. El C-PER se truido, AAE: aminoácido esencial (g/100 g de proteína), C-PER: favorecen las reacciones de Maillard determinó utilizando la ecuación de relación de eficiencia proteínica calculada. de grupos amino con azucares reduc- regresión tores, lo cual conduce a la formación rianza (ANOVA) de una sola vía y prueba de compuestos de color (Bjorck et al., 1983). C-PER= -2,1074 +2,8525(Z) -0,4030(Z2) de rango múltiple de Duncan (p≤0,5). Por otro lado, la desnaturalización de proteí- nas, la gelatinización del almidón e hincha- donde Z se calculó en base al perfil de ami- Resultados y Discusión miento de la fibra cruda que ocurren durante noácidos y a la digestibilidad proteínica in la extrusión podrían ser responsables del in- vitro de la muestra y de la proteína de refe- Propiedades de las harinas extruidas cremento de IAA de productos extruidos rencia, así como en relación a los valores (Gujska y Khan, 1990). estándares de FAO/WHO (1991) para ami- Los contenidos de proteí- noácidos esenciales. nas, lípidos y carbohidratos de la harina de Aminoácidos esenciales (AAE) en maíz extruida (HME) que se presentan en la las harinas extruidas Análisis estadístico Tabla I coinciden con los reportados por Be- llo-Pérez et al. (2002) para harinas de maíz El contenido de AAE y la calificación Los resultados obtenidos nixtamalizado. Por su parte, la harina de gar- química de las proteínas de HME y HGE fueron analizados utilizando análisis de va- banzo extruido (HGE) presentó un contenido se presentan en la Tabla II, que incluye ade- DEC 2008, VOL. 33 Nº 12 871
  • 5. TABLA III DISEÑO EXPERIMENTAL UTILIZADO PARA OBTENER DIFERENTES COMBINACIONES DE HME/HGE PARA LA PRODUCCIÓN DE ALIMENTOS INFANTILES, Y RESULTADOS EXPERIMENTALES DE LAS VARIABLES DE RESPUESTA1 Ensayo2 Componentes de Variables de respuesta la mezcla3 HME(X1) HGE(X2) PV(Y1) LD(Y2) A(Y3) 1 100 (1,0) 0 (0) 8,21 3,5 2,2 2 50 (0,5) 50 (0,5) 13,81 4,8 3,1 3 0 (0) 100 (1,0) 18,17 6,1 3,7 4 75 (0,75) 25 (0,25) 10,22 4,2 2,5 5 25 (0,25) 75 (0,75) 17,29 5,4 3,5 6 50 (0,5) 50 (0,5) 13,76 4,8 2,7 7 100 (1,0) 0 (0) 8,06 3,5 2,0 8 0 (0) 100 (1,0) 17,79 6,1 3,4 9 50 (0,5) 50 (0,5) 13,59 4,8 2,8 10 100 (1,0) 0 (0) 8,32 3,5 2,2 11 0 (0) 100 (1,0) 18,14 6,1 3,5 Figura 1. Deseabilidad para la mejor combinación de harina de MCP extruido (HME) y harina de garbanzo extruido (HGE) para 1 El diseño fue de lattice simplex con dos componentes; 11 ensayos. 2 No corres- la elaboración de un alimento infantil ponde al orden de procesamiento. 3 Los números entre paréntesis son valores codi- ficados. HME: harina de maíz de calidad proteínica extruido, HGE: harina de gar- banzo extruido, PV: proteína verdadera (%, DM), LD: lisina disponible (g/100 g de HME complementa las deficiencias en azu- proteína), A: aceptabilidad. frados (Met+Cys) de HGE (Tablas II y IV). El contenido de AAE de más los requerimientos de AAE para niños jes HME-HGE (X1X2; p≤0,01) para YA= la mezcla optimizada fue mayor que los re- de 2-5 años de edad recomendados por 0,14X1 +3,55X2 -0,28X1X2. El modelo de querimientos para niños de 2-5 años (FAO/ FAO/WHO (1991). Los contenidos de los predicción explicó el 95% de la variación to- WHO, 1991), excepto para Trp. La califica- AAE His, Leu y Phe+Tyr en ambas hari- tal (p≤0,0001) en los valores de aceptabili- ción química de AAE varió de 91,81 (Trp) a nas, los azufrados Met+Cys y Val en HME, dad de las mezclas HME/HGE. 153,40 (Met+Cys), y la calificación química y de Lys, Trp y Thr en HGE, fueron mayo- Optimización. El objetivo del proceso de op- más baja correspondió para Trp (91,81; Tabla res a las recomendaciones de FAO/WHO timización fue encontrar la mejor combina- IV). La mezcla optimizada tuvo una digesti- (1991). Otros AAE, como Thr en HME e ción HME/HGE para obtener valores ópti- bilidad proteínica in vitro y un C-PER de Ile y Val en HGE, se encontraron a niveles mos de las tres variables de respuesta (PV, 84,5% y 1,85, respectivamente (Tabla IV). comparables al patrón de referencia, mien- LD, A). Para la predicción de los valores Serna-Saldívar et al. (1999) llevaron a cabo tras que Lys, Trp e Ile en HME, y los azu- óptimos, los modelos de predicción estudios sobre el valor nutricional de mezclas frados (Met+Cys) en HGE fueron identifica- completos se consideraron en la función dos como AAE limitantes. TABLA IV de deseabilidad (De la Vara y Domín- COMPOSICIÓN QUÍMICA Y PROPIEDADES guez, 2002). Los valores óptimos para NUTRICIONALES DE LA MEZCLA Modelos de predicción para las variables de respuesta se obtuvieron las variables de respuesta HME/HMN OPTIMIZADA a una deseabilidad global de 0,878 como resultado de la combinación de Propiedad Mezcla Requerimientos Proteína verdadera (PV). El contenido de 21,2g HME +78,8g HGE por 100g de HME/HGE para niños PV de las mezclas HME/HGE varió de 8,06 optimizada1 2-5 años mezcla (Figura 1). Esta combinación se (FAO/WHO) a 18,17% (Tabla III). El análisis de regresión denominó mezcla optimizada y se utili- Composición química mostró que PV dependió significativamente zó como ingrediente básico para la pre- (%, MS) de los porcentajes de HME (X1; p≤0,0001) y paración de un alimento infantil. Proteínas 20,07 HGE (X2; p≤0,0001) y de la interacción Lípidos 5,70 HME-HGE (X1X2; p≤0,0001), para YTP= Carbohidratos 71,14 Propiedades de la mezcla optimizada 8,20X1 +18,04X2 -2,64X1X2. Este modelo de Cenizas 3,09 predicción explicó el 99,8% de la variación Nutricionales Los contenidos de AAE total (p≤0,0001) en el contenido de PV de proteínas, lípidos y carbohidratos de la His 2,75 1,9 las mezclas HME/HGE. Ile 3,31 2,8 mezcla HME/HGE optimizada se presen- tan en la Tabla IV. Esta mezcla cubrió Leu 7,61 6,6 Lisina disponible (LD). Los contenidos de Lys 6,26 5,8 satisfactoriamente las recomendaciones de Met+Cys 3,84 2,5 LD de las mezclas HME/HGE fueron afec- FAO/WHO para ingredientes básicos a Phe+Tyr 8,71 6,3 tados por los porcentajes de HME (X1; utilizar en la preparación de alimentos Trp 1,01 1,1 p≤0,0001) y de HGE (X2; p≤0,0001) y por Thr 3,70 3,4 para niños, es decir 16,1g de proteína, la interacción HME-HGE (X1X2; p≤0,001) Val 3,80 3,5 6,0g de grasa y 375kcal por 100g de in- Calificación AAE 91,81 para YAL = 3,49X1 +6,09X2 -0,02X1X2. El grediente (Mitzner et al., 1984). AAE limitante Trp modelo de predicción explicó el 99,9% de la Cuando se mezclan Digestibilidad proteínica variación total (p≤0,0001) en el contenido de HME y HGE sus proteínas se comple- in vitro (%) 84,5 LD de las mezclas HME/HGE. mentan entre sí para producir una mejor C-PER 1,85 Aceptabilidad. Este parámetro dependió sig- calidad, cubriéndose las deficiencias en 1 21,2g HME +78,8g HGE/100 g mezcla. nificativamente de los porcentajes de HME aminoácidos limitantes de manera recí- HME: harina de maíz extruido, HGE: harina de garbanzo (X1; p≤0,0001) y HGE (X2; p≤0,0001) en las proca. La HGE complementa las defi- extruido, AAE: aminoácidos esenciales (g/100g proteína), mezclas y de la interacción de los porcenta- ciencias en Lys y Trp de HME, y la C-PER: relación de eficiencia proteínica calculada. 872 DEC 2008, VOL. 33 Nº 12
  • 6. TABLA V el cual se encuentra dentro del intervalo reco- Fomento y Apoyo a Proyectos de Investiga- COMPOSICIÓN QUÍMICA mendado, es superior al de los atoles elabora- ción 2007 y por el Consejo Estatal de Cien- Y PROPIEDADES NUTRICIONALES dos a base de harina de maíz. Por otro lado, cia y Tecnología de Sinaloa, en su Convoca- Y SENSORIALES DEL ALIMENTO la cantidad de energía recomendada a consu- toria para Apoyo a Proyectos de Investiga- INFANTIL mir por niños y niñas físicamente activos con ción 2006. Propiedad Alimento edades de 1-3 años es 1000-1400kcal/día, infantil para niñas de 4-8 años es 1400-1800kcal/día REFERENCIAS y para niños de 4-8 años es 1600-2000kcal/ Composición química (g/100g) Alarcón-Valdez C (2004) Elaboración de alimentos Proteínas 4,52 día. Así mismo, un nivel seguro de ingestión de proteínas para niños y niñas es de 13 y de alto valor nutricional a partir de maíz (Zea Lípidos 1,28 mays L) de calidad proteínica y garbanzo. Tesis. Carbohidratos 24,00 19g/día para las edades de 1-3 y de 4-8 años, Universidad Autónoma de Sinaloa. México. pp. Cenizas 0,69 respectivamente (USDA, 2005). Una porción 11-19. Energía (kcal) 126 (100g) del alimento infantil aporta el 9,0- Anderson RA, Conway HR, Pfeifer VF, Griffin Nutricionales 12,6%, 7,0-9,0% y 6,3-7,9% de los requeri- ELJr (1969) Gelatinization of corn grits by roll mientos diarios de energía para niños y niñas and extrusion cooking. Cereal Sci. Today 14: Digestibilidad proteínica in vitro (%) 92,1 4-7, 11-12. C-PER 1,93 de 1-3 años, niñas de 4-8 años y niños de 4-8 AOAC (1999) Official Methods of Analysis. 16th edn. Sensorial años, respectivamente; así como aporta el Association of Analyst Chemists. Gaithersburg, Aceptabilidad 4,31 34,8% y el 23,8% del requerimiento diario de MD, USA. Cap. 4, pp. 25; cap. 12, pp. 7; cap. C-PER: Relación de eficiencia proteínica calculada. proteína para niños de 1-3 y 4-8 años de 32, pp. 1-2; cap. 45, pp. 59-60. edad, respectivamente. Además, el alimento Bello-Pérez LA, Osorio-Díaz P, Agama-Acevedo E, tuvo valores de digestibilidad proteínica in vi- Núñez-Santiago C, Paredes-López O (2002) Chemical, physicochemical and rheological pro- de cereales-leguminosas, evaluando digestibi- tro y C-PER de 62,1% y 1,93, respectivamen- perties of masas and nixtamalized corn fluors. lidad proteínica in vitro, perfil de aminoáci- te. Los panelistas (adultos semientrenados) en Agrociencia 36: 319-328. dos, C-PER, y PER y reportaron digestibili- una prueba hedónica para aceptabilidad gene- Björck I, Noguchi A, Asp NG, Cheftel JC, Dahlqvist dades in vitro y C-PER´s de 83,21-84,7% y ral, evaluaron al alimento infantil como sen- A (1983) Protein nutritional value of a biscuit 1,22-1,35 para pan de trigo fortificado con sorialmente aceptable, ya que le otorgaron processed by extrusion cooking: Effects on avai- lable lysine. J. Agric. Food Chem. 31: 488-492. soya desgrasada y harina de sésamo, respec- calificación de 4,31 en una escala hedónica Bockholt AJ, Rooney LW (1992) QPM hybrids for tivamente. Estos investigadores concluyeron de 6 puntos (0-5). Esto significa que la acep- the United States. En Mertz ET (Ed,) Quality que los PER obtenidos utilizando la digesti- tabilidad se encuentra entre me gusta mucho Protein Maize. American Association of Cereal bilidad in vitro y aminoácidos subestimaron y me gusta extremadamente. Chemists St Paul, MN, EEUU. pp. 111-121. los valores obtenidos en ratas, sin embargo Bressani R (1983) Guidelines for the development of las diferencias absolutas entre los dos trata- Conclusiones processed and packed weaning foods. Food Nutr. Bull. 5: 1-20. mientos fueron similares, indicando que la Bressani R, Harper JM, Whickstrom B (1984) Pro- técnica de C-PER predijo la misma diferen- La combinación óptima de cessed and packaged weaning foods: develop- cia observada en el bioensayo en ratas. Se harina de maíz de calidad proteínica extruido ment, manufacture and marketing. En Mitzner recomienda utilizar técnicas in vitro como (HME) y harina de garbanzo extruido (HGE) N, Scrimshaw N, Morgan R (Eds.) Improving indicador rápido y preciso de la digestibilidad para producir un alimento infantil tipo atole the Nutritional Status of Children During Weaning Period. MIT. Cambridge, MA, in vitro y PERs en alimentos. de alto valor nutricional fue HME/HGE= EEUU. pp. 51-64. 21,2/78,8%. Cada 100g de esta mezcla con- Cerezal-Mezquita P, Carrasco-Verdejo A, Pinto-Ta- Composición y propiedades nutritivas tiene 20,07g de proteína, 5,70g de lípidos, pia K, Romero-Palacios N, Arcos-Zavala R del atole preparado con la mezcla 71,14g de carbohidratos y 3,09g de cenizas. (2007) Suplemento alimenticio de alto conteni- optimizada Además, cubre satisfactoriamente los requeri- do proteico para niños de 2-5 años. Desarrollo de la formulación y aceptabilidad. Interciencia mientos de aminoácidos esenciales (EAA) 32: 857-864. En la Tabla V se presenta para niños de 2-5 años recomendados por la Chavan JK, Salunkhe DK (1987) Biochemistry and la composición química y las propiedades FAO/WHO, excepto para Trp, con califica- technology of chickpea (Cicer arietinum L) nutricionales del alimento infantil preparado ción química de 91,81. El alimento preparado seeds. Crit. Rev. Food Sci. Nutr. 25: 107-158. con la mezcla optimizada (21,2g HME con esta mezcla tuvo un contenido de proteí- Cohen SA, Strydam DJ (1988) Amino acid analysis +78,8g HGE en 100g de mezcla). El alimen- na de 4,52% que representa el 14,4% de la using prhenylisothiocynate derivatives. Anal. Biochem. 174: 1-16. to infantil tuvo un contenido de 4,52g de energía del alimento, lo cual es adecuado De la Vara SR, Domínguez DJ (2002) Métodos de proteínas, 1,28g de lípidos, 24g de carbohi- para un alimento para niños. Cada 100g del superficie de respuesta; un estudio comparativo. dratos, 0,69g de cenizas y 126kcal por 100g. alimento aportan 6,3-12,6% y 23,8-34,8% del Rev. Matem. Teoría y Aplic. 1: 47-65. El contenido de proteínas, lípidos y carbohi- requerimiento diario de energía y proteína Design Expert (2002) Expert Design. FAOSTAT. dratos representa el 14,4; 9,2 y 76,4% del para niños y niñas entre 1 y 8 años de edad. Food and Agriculture Organization of the Uni- contenido energético del alimento infantil. El alimento tuvo 62,1% de digestibilidad de ted Nations. Roma, Italia. http//apps.fao.org/ Una dieta bien balanceada la proteína in vitro, C-PER de 1,93 y califi- FAO/WHO (1991) Protein Quality Evaluation. FAO Food and Nutrition Paper 51. Food and Agricul- para niños debe disponer 9-15% de la energía cación entre me gusta mucho y me gusta ex- ture Organization of the United Nations, Roma, a partir de proteínas, 35-45% de las grasas y tremadamente en una prueba hedónica para Italia. 66 pp. 45-55% de carbohidratos (Cerezal-Mezquita aceptabilidad general. Este alimento podría Felows PJ (2000) Food Processing Technology: et al., 2007). Con base en ello, el alimento utilizarse como alimento soporte del creci- Principles and Practice. 2a ed. Woodhead. Cam- infantil tipo atole elaborado a partir de la miento infantil. bridge, RU. mezcla optimizada de HGE y HME, presentó Gopalan C, Rao KSJ (1975) Pellagra and amino acid imbalance. Vitam. Horm. 33: 505-528. un contenido de carbohidratos superior y un AGRADECIMIENTOS Granito M, Torres A, Guerra M (2003) Desarrollo y contenido de lípidos inferior a la recomenda- evaluación de una pasta a base de trigo, maíz, ción, lo cual es característico de este tipo de Esta investigación fue fi- yuca y frijol. Interciencia 28: 372-379. alimentos (atoles), con la diferencia que el nanciada por la Universidad Autónoma de Gujska E, Khan K (1990) Effect of temperature on contenido de proteínas del alimento infantil, Sinaloa, México, a través del Programa de properties of extrudates from high starch frac- DEC 2008, VOL. 33 Nº 12 873
  • 7. tions of navy, pinto and chickpea beans. J. Food Larmond E (1977) Laboratory Methods for Sensory Reyes-Moreno C, Cuevas-Rodríguez EO, Milán-Ca- Sci. 55: 466-469. Evaluation of Foods. Publication N° 1637. De- rrillo J, Cárdenas-Valenzuela O, Barrón-Hoyos J Hariharan M, Sundar N, Vannoord T (1993) partment of Agriculture, Ottawa, Canada. 74 pp. (2004) Solid state fermentation process for pro- Systematic appoach to the development of Mercier C (1993) Nutritional appraisal of extruded duction of chickpea (Cicer arietinum L.) tempeh plasma amino acid analises by high-perfor- foods. Int. J. Food Sci. Nutr. 44: 545-553. flour. Physicochemical and nutritional characte- mance liquid chomatography with ultraviolet Mertz ET, Bates LS, Nelson OE (1964) Mutant gene ristics of the product. J. Sci. Food Agric. 84: detection with precolum derivatization using that changes protein composition and increases 271–278. phenylisothiocynate. J. Chromatogr. 621: lysine content of maize endosperm. 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Each 100g of the infant food (atole) with an optimal EMF/ECF blend, and 3) to evalu- weaning food supply, respectively, 6.3-12.6% and 23.8-34.8% of the ate the nutritional properties of the optimized EMF/ECF mixture and daily energy and protein requirements for children 1-8 years old. The the weaning food. Response surface methodology was applied to weaning food had a 62.1% protein digestibility in vitro, a C-PER of determine the optimal EMF/ECF combination. The best EMF/ECF 1.93, and was evaluated between “very liked” and “extremely liked” combination was 21.2:78.8%. This mixture contained (in dry matter) in a hedonic test for overall acceptability. This food could be used to 20.07% protein, 5.70% lipids and 71.14% carbohydrates; its essential support the growth of infants. amino acids (EAA) profile satisfactorily covered the requirements for ALIMENTO PARA CRIANÇAS PREPARADO COM FARINHAS DE MILHO DE QUALIDADE PROTEÍNICA E GRÃOS-DE–BICO EXTRUSADO Roberto Gutiérrez Dorado, Oralia Guadalupe Cárdenas Valenzuela, Claudia Alarcón Valdez, José Antonio Garzón Tiznado, Jorge Milán Carrillo, Eduardo Armienta Aldana e Cuauhtémoc Reyes Moreno RESUMO O presente estudo teve três objetivos: 1) Determinar a melhor senciais cobriu satisfatoriamente os requerimentos para crianças combinação de farinha de milho de qualidade proteínica extru- de 2-5 anos de idade recomendados por FAO/WHO, exceto para sado (HME) e farinha de grão-de-bico extrusado (HGE) para triptófano. O alimento infantil tipo mingau derivado desta mis- produzir um alimento para crianças de alta qualidade proteí- tura teve um conteúdo de proteína de 4,52%, que é 14,4% da nica e elevada aceitabilidade sensorial, 2) formular o alimento energia do alimento, adequado para um alimento para crianças. infantil tipo mingau a partir da mistura HME/HGE otimizada, Cada 100g de alimento infantil aportam 6,3-12,6% e 23,8-34,8% e 3) avaliar as propriedades nutricionais da mistura HME/HGE do requerimento diário de energia e proteína para meninos e otimizada e do alimento. Aplicou-se a metodologia de superfície meninas 1-8 anos de idade. O alimento infantil teve 62,1% de de resposta para determinar a combinação ótima HME/HGE. A digestibilidade da proteína in vitro, C-PER de 1,93 e qualificação melhor combinação HME/HGE 21,2:78,8%; esta mistura teve entre “gosto muito” e “gosto demasiado” em uma prova hedôni- conteúdos (em matéria seca) de 20,07% de proteína, 5,70% de ca para aceitabilidade general. Este alimento poderia utilizar-se lipídios e 71,14% de carboidratos; seu perfil de aminoácidos es- como alimento suporte do crescimento infantil. 874 DEC 2008, VOL. 33 Nº 12