5. GONZÁLEZ CABEZA 5
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IOLOGÍA / GONZÁLEZ CABEZA / MICROBIOLOGÍA / GONZÁLEZ C
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CABEZA / MICROBIOLOGÍA / GONZÁLEZ CABEZA / MICROBIOLO
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CULTIVO
* La mayoría crece en
medio sólido, como
colonias discoides de 1
a 2 mm de diámetro.
* Las cepas que producen
material capsular con
frecuencia dan lugar a
colonias mucoides.
* El peptostreptococo es
anaerobio obligado.
6. GONZÁLEZ CABEZA 6
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CARACTERISTICAS DE CRECIMIENTO
• La energía se obtiene principalmente de los azucares.
• Crecimiento de estreptococos es escaso sobre medio sólido o en caldo a
menos que sea enriquecido con sangre o líquidos tisulares.
• El crecimiento y la hemólisis se favorecen por incubación en 10% de CO2.
VARIACION
• Variantes de la misma cepa de estreptococo pueden mostrar colonias de
forma diferente (particularmente notable entre las cepas del grupo A, que
dan lugar a colonias mate o brillosas).
• Las colonias mate consisten en microorganismos que producen mucha
proteína M. Estos microorganismos tienden a ser virulentos y relativamente
no susceptibles a la fagocitosis por los leucocitos humanos.
• Las colonias brillantes tienden a producir poca proteína M y con frecuencia
no son virulentas.
7. GONZÁLEZ CABEZA 7
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CLASIFICACIÓN DEL GÉNERO
Streptococcus
• Tradicionalmente la clasificación de los Streptococcus se ha
basado en la reacción hemolítica de la cepa y en el grupo
serológico.
• Este último está determinado por el tipo de polisacarido C,
presente en la pared celular del microorganismo,
denominado antígeno de Lancefield.
• Estos antígenos permiten la clasificación de los
Streptococcus β-hemolíticos en grupo A, B, C, D, F, G y otros
grupos aislados con menor frecuencia. Los microorganismos
que pertenecen al grupo A tienen el mismo tipo de
carbohidrato C, aquellos en el grupo B comparten el mismo
carbohidrato C y así sucesivamente.
8. GONZÁLEZ CABEZA 8
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• Algunos de los grupos tienen una sola especie, como por ejemplo el
grupo A incluye sólo la especie Streptococcus pyogenes y por lo
tanto, el término Streptococcus grupo A y S. pyogenes se refiere al
mismo microorganismo.
• Lo mismo ocurre con el grupo B el cual contiene sólo la especie S.
agalactiae. Los otros grupos serológicos incluyen un número variable
de especies.
• Se ha descubierto que especies de Streptococcus que no producen
hemólisis pueden también poseer polisacarido C y que además
cepas β hemolíticas de diferentes especies de estreptococos pueden
compartir el mismo grupo antigénico.
• Los Streptococcus han experimentado varios cambios taxonómicos
en las dos últimas décadas, y es así por ejemplo que los
Enterococcus que habían sido considerados Streptococcus del grupo
D, son ahora considerados un género aparte, y los Streptococus del
grupo C y G aislados de humanos están clasificados en una misma
subespecie, S dysgalactiae subsp. equisimilis.
9. GONZÁLEZ CABEZA 9
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Nombre
Sustancia
específica
de grupo
Hemólisis Hábitat
Criterios
importantes de
laboratorio
Enfermedades
comunes e
importantes
Streptococcus
pyogenes
A β Faringe,
piel
Prueba PYR
positiva3, inhibido
por bacitacina
Faringitis, Impétigo,
fiebre reumática,
glomerulonefritis.
Streptococcus
agalactiae
B β Aparato
genital
femenino
Hidrólisis de
hipurato, CAMP
positiva4.
Septicemia y
meningitis neonatal.
Enterococcus
faecalis (y otros
enterococos)
D α,
no
hemólisis
Colon Crecimiento en
presencia de bilis,
hidroliza esculina,
crecimiento en
8.5% de NaCl,
descompone el
almidón.
Endocarditis,
comúnmente aislado
de la sangre en el
cáncer de colon.
10. GONZÁLEZ CABEZA 10
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Nombre
Sustancia
específica de
grupo
Hemólisis Hábitat
Criterios
importantes de
laboratorio
Enfermedades
comunes e
importantes
F(A,C,G) y
no
tipificables
β Faringe,
colon,
aparato
genital
femenino
Colonias pequeñas
(diminutas)
variantes de
especies
hemolíticos. Los del
grupo A son
resistentes a
bacitracina y PYR
negativos.
Infecciones
piógenas, incluso
absceso cerebral
Habitualmen
te no
tipificado o
intipificable
α,
no
hemólisis
Faringe,
colon,
aparato
genital
femenino
Patrón de
fermentación de
carbohidratos.
No bien definido
Streptococcus
anginosus (S.
Intermedius, S.
Constellatus,
grupo S. millen)
11. GONZÁLEZ CABEZA 11
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Nombre
Sustancia
específica de
grupo
Hemólisis Hábitat
Criterios
importantes de
laboratorio
Enfermedades
comunes e
importantes
Streptococcus
viridans (muchas
especies )
Habitualmen
te no
tipificado o
intipificable
α,
no
hemólisis
Boca,
faringe,
colon,
aparato
genital
femenino
Resistente a
optoquina
Colonias no solubles
en bilis
Patrón de
fermentación de
carbohidratos.
Caries dental (S.
mutans)
endocarditis,
abscesos (con
muchas otras
especies de bacterias
)
Streptococcus
pneumoniae.
Ninguno α Faringe Susceptible a
optoquina
Colonias solubles en
bilis, reacción
quellung positivas.
Neumonía,
meningitis,
endocarditis.
Peptostreptococcu
s (muchas
especies)
Ninguno α,
no
hemólisis
Boca,
colon,
aparato
genital
femenino
Anaerobios
obligados
Absceso (con otras
múltiples especies de
bacterias)
14. GONZÁLEZ CABEZA 14
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STREPTOCOCCUS GRUPO A
(Streptococcus pyogenes)
• Son cocos
esféricos de 0.5 a 1
um que forma
cadenas cortas en
las muestras
clínicas y cadenas
más largas cuando
crecen en medios
líquidos.
15. GONZÁLEZ CABEZA 15
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• Crecimiento resulta óptimo en agar enriquecido con sangre,
pero se inhibe si el medio contiene una concentración alta de
glucosa. Tras 24 horas de incubación, se observan colonias
blancas de 1 a 2 mm con una zona grande de B-hemólisis.
16. GONZÁLEZ CABEZA 16
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Critical point dried whole group A
streptococci (Streptococcus
pyogenes) viewed directly by
transmission electron microscopy
(TEM 6,500X). Chains of
streptococci are clearly evident. To
remove cell surface proteins, cells
were treated with trypsin prior to
preparation and mounting. Strain:
D471; M-type 6. Electron
micrograph of Streptococcus
pyogenes by Maria Fazio and
Vincent A. Fischetti, Ph.D. with
permission. The Laboratory of
Bacterial Pathogenesis and
Immunology, Rockefeller University.
17. GONZÁLEZ CABEZA 17
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Dividing streptococci (12,000X).
Electron micrograph of
Streptococcus pyogenes by Maria
Fazio and Vincent A. Fischetti,
Ph.D. with permission. The
Laboratory of Bacterial
Pathogenesis and Immunology,
Rockefeller University
18. GONZÁLEZ CABEZA 18
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Electron micrograph of an ultra-thin section of a chain
of group A streptococci (20,000X). The cell surface
fibrils, consisting primarily of M protein, are clearly
evident. The bacterial cell wall, to which the fibrils are
attached, is also clearly seen as the light staining
region between the fibrils and the dark staining cell
interior. Incipient cell division is also indicated by the
nascent septum formation (seen as an indentation of
the cell wall) near the cell equator. The streptococcal
cell diameter is equal to approximately one micron.
Electron micrograph of Streptococcus pyogenes by
Maria Fazio and Vincent A. Fischetti, Ph.D. with
permission. The Laboratory of Bacterial Pathogenesis
and Immunology, Rockefeller University
19. GONZÁLEZ CABEZA 19
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Negative staining of group A
streptococci viewed by TEM 28,000X.
The "halo" around the chain of cells
(approximately equal in thickness to the
cell diameter) is the remnants of the
capsule that may be found surrounding
the exterior of certain strains of group A
streptococci. The septa between pairs of
dividing cells may also be seen. Electron
micrograph of Streptococcus pyogenes
by Maria Fazio and Vincent A. Fischetti,
Ph.D. with permission. The Laboratory of
Bacterial Pathogenesis and
Immunology, Rockefeller University
20. GONZÁLEZ CABEZA 20
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High magnification electron micrograph of an ultra-thin section of a group A
streptococcus sibling pair (70,000 X). At this magnification, especially in the cell on
the left, the cell wall and cell surface fibrils, consisting primarily of M protein, are
well defined. Interdigitaion of these fibrils between neighboring cells of different
chains is also in plain view. Strain: C126/21/1; M-type 43. Electron micrograph of
Streptococcus pyogenes by Maria Fazio and Vincent A. Fischetti, Ph.D. with
permission. The Laboratory of Bacterial Pathogenesis and Immunology, Rockefeller
University.
21. GONZÁLEZ CABEZA 21
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FACTORES DE VIRULENCIA
DE LOS ESTREPTOCOCOS GRUPO A
FACTOR DE VIRULENCIA ACCIÓN
Cápsula No inmunogénica; antifagocítica
Proteína M Antifagocítica; anticomplementaria
Proteína F Media adherencia a células epiteliales.
Ácido lipoteicoico Posiblemente media adherencia a células epiteliales.
Exotoxinas (toxinas
eritrogénicas).
Median pirogenicidad, aumento de la hipersensibilidad
tardía y la susceptibilidad a la endotoxina,
citotoxicidad, mitogenicidad inespecífica para
linfocitos T, inmunodeperesión de la función de los
linfocitos T y producción de exantema
escarlatiniforme.
22. GONZÁLEZ CABEZA 22
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FACTOR DE
VIRULENCIA
ACCIÓN
Estreptolisina S Lisa leucocitos, o plaquetas y
hematíes; estimula liberación de
enzimas lisosómicas; no
inmunogénica.
Estreptolisina O Lisa leucocitos, plaquetas y hematíes;
estimula la liberación de enzimas
lisosómicas; inmunogénica.
Estreptocinasas Lisan coágulos sanguíneos; facilitan
diseminación de las bacterias de los
tejidos.
DNasa Despolimeriza el ADN libre en el
material purulento.
23. GONZÁLEZ CABEZA 23
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Streptococcus β - hemolíticos
• Las cepas de Streptococcus con antígenos de los grupos A,
C o G son subdivididas de acuerdo al tamaño de la colonia.
Las cepas que forman una colonia grande y que presentan el
antigeno A, C o G son consideradas Streptococcus
piogénicos "clásicos".
• Las cepas β hemolíticas que también tienen los antígenos A,
C o G pero que forman una colonia pequeña son
consideradas cepas del grupo anginosus (previamente
denominados S. milleri).
• Sin embargo, como veremos más adelante, a este grupo
anginosus también pertenecen cepas de Streptococcus que
no son beta hemolíticas.
24. GONZÁLEZ CABEZA 24
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INFECTIOUS DISEASES
Streptococcus pyogenes – Gram stain
Gram-positive
cocci in chains.
Strep until proven
otherwise. All
Strep pyogenes is
still susceptible to
penicillinso routine
susceptibility
testing is not done.
29. GONZÁLEZ CABEZA 29
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Streptococcus NO β-hemolíticos
• Cuando se aísla una cepa de Streptococcus que presenta
hemólisis alfa, es importante diferenciar las cepas de
Streptococcus pneumoniae de los otros Streptococcus del
grupo viridans.
• Si la cepa no presenta hemólisis y es aislada de sitios
estériles, y debido a su asociación con cáncer
gastrointestinal, se deben hacer pruebas que permitan la
identificación de Streptococcus bovis.
• El aislamiento de S. bovis de un hemocultivo puede ser la
primera indicación de que el paciente tiene un tumor oculto.
34. GONZÁLEZ CABEZA 34
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SÍNDROMES CLÍNICOS
• Enfermedad Estreptocócica Supurada:
Faringitis:
La faringitis estreptocócica es la causa bacteriana más común
de irritación de la garganta y es causada por el Streptococcus
del grupo A, en ocasiones se debe a los grupo C y G. Esta
enfermedad afecta sobre todo a niños entre 5 y 15 años de
edad, pero también son susceptibles los lactantes y los
adultos. El patógeno se disemina por contacto persona-
persona a través de gotitas respiratorias.
35. GONZÁLEZ CABEZA 35
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ESCARLATINA
• La escarlatina es una
complicación de la faringitis
estreptocócica, pues se
distingue por la aparición
de una erupción cutánea a
menudo luego de la
infección faríngea. Es una
infección de tipo bacteriano
producida por el
Estreptococo del Grupo A.
36. GONZÁLEZ CABEZA 36
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SÍNDROME DE SHOCK TÓXICO
ESTREPTOCÓCICO
• Es similar al shock tóxico consiste un un cuadro grave con
toxicidad sistémica, shock séptico, eritema macular y fallo
multiorgánico.
• Los estreptococos Grupo A son los responsables del
síndrome y se ha relacionado el síndrome de shock tóxico
estreptococico con cepas del serotipo M 1 y 3 o M18 y
algunos exhiben cápsulas prominentes de ácido hialurónico
(cepas mucoides).
37. GONZÁLEZ CABEZA 37
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ERISIPELA
• La erisipela es una celulitis superficial aguda de la piel con afectación linfática
prominente y suele aparecer después de una infección respiratoria o cutánea
por Streptococcus grupo A.
• Se inician con una pequeña herida en la piel, esta lesión que tiene un aspecto
eritematoso indurado, que adopta la morfología de la piel de naranja,
extendiéndose por la periferia con un margen ligeramente sobreelevado en el
cual pueden observarse ocasionalmente vesículas.
38. GONZÁLEZ CABEZA 38
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PIODERMA
• Es un término con el cual se
describe cualquier infección
superficial de la piel
ocasionada por bacterias.
• La enfermedad clínica está
precedida por colonización
inicial de la piel con
estreptococos grupo A,
mediante contacto directo, o
por transferencia a través de
un vector artrópodo.
39. GONZÁLEZ CABEZA 39
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ENFERMEDAD ESTREPTOCÓCICA NO
SUPURADA
FIEBRE RUMÁTICA
• Es un padecimiento inflamatorio que aparece en sujetos
susceptibles a tener una respuesta autoinmune cuando se
ponen en contacto con el estreptococo β-hemolítico del grupo
A.
• Se caracteriza por alteraciones inflamatorias en el corazón,
las articulaciones, los vasos sanguíneos y los tejidos
subcutáneos y se asocia con infecciones respiratorias altas.
• El diagnóstico es muy probable si existen datos de infección
previa por estreptococos del grupo A.
40. GONZÁLEZ CABEZA 40
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GLOMERULONEFRITIS AGUDA
• Es otra complicación no supurada de la enfermedad
estreptocócica.
• Se asocia con cepas nefritogénicas de estreptococos grupo A.
• Diagnóstico clínico se basa en cuadro clínico y los datos de
infección reciente por estreptococo grupo A.
• Es un problema renal que involucra la inflamación de los
glomérulos después de que se ha presentado una infección por
ciertas cepas de la bacteria estreptococo hemolítico del Grupo A.
• Es el resultado de una infección, no en los riñones, sino en un
lugar apartado como la piel o la faringe. Como consecuencia de
la retención de inmunocomplejos en los glomérulos de los
riñones, los glomérulos se inflaman causando filtración y
excreción renal insuficiente.
48. GONZÁLEZ CABEZA 48
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DETECCIÓN DE ANTÍGENOS
• Pruebas inmunológicas que evalúan la reacción con el hidrato de carbono
específico de grupo.
• Extracción de Ag mediante tratamiento de la muestra clínica.
• Aglutinación de las partículas de Látex o el revelado da un indicador positivo en el
método EIA.
CULTIVO
• Recoger muestra de la parte posterior de la orofaringe.
• Saliva colonizada por bacterias que inhiben el crecimiento de Streptococcus
Grupo A.
• En infecciones cutáneas se toma muestra del material purulento y la base de la
lesión.
• Añadir antimicrobiano a las placas de agar sangre.
50. GONZÁLEZ CABEZA 50
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IDENTIFICACIÓN
• Se clasifica por su susceptibilidad a la
Bacitracina.
• Prueba directa identifica alrededor del 50% de
los cultivos positivos.
51. GONZÁLEZ CABEZA 51
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DETECCIÓN DE ANTICUERPOS
• Medición de anticuerpos contra la
estreptolisina O , prueba ASO.
• Estos anticuerpos aparecen a las 3 o 4
semanas.
• No se observan títulos altos de ASO en los
pacientes con piodermia estreptocócica.
52. GONZÁLEZ CABEZA 52
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TRATAMIENTO, PREVENCIÓN Y
CONTROL
• Los estreptococos grupo A son muy sensibles
a la penicilina.
• Es posible la persistencia de estreptococos
grupo A en la orofaringe (estado portador)
después de un ciclo completo de terapia.
• No se ha descrito resistencia a los antibióticos
en tales casos; así pues, se puede iniciar otro
ciclo de tratamiento.
53. GONZÁLEZ CABEZA 53
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• Los pacientes con historia de fiebre reumática
requieren profilaxis antibiótica prolongada para
prevenir las recidivas.
• Además, la lesión de las válvulas cardíacas
predispone a endocarditis.
• Es necesaria la profilaxis antibiótica antes de
procedimientos que puedan producir bacteriemia
transitoria (ej., extracciones dentales).
• El tratamiento antibiótico específico no altera el
curso de la glomerulonefritis aguda y no está
indicado para profilaxis de esa enfermedad, puesto
que no se observan recidivas.
63. GONZÁLEZ CABEZA 63
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FISIOLOGÍA Y ESTRUCTURA
• El neumococo es un coco Gram
positivo encapsulado.
• Las células miden 0,5 a 1,2 µm de
diámetro, tiene forma oval o lanceolada
y se disponen en parejas o cadenas
cortas.
• La morfología de las colonias varía. Las
cepas encapsuladas forman en general
colonias grandes (1 a 3 mm sobre agar
sangre; más pequeñas en agar
chocolate o agar sangre calentado),
redondas, mucoides y no pigmentadas.
64. GONZÁLEZ CABEZA 64
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• Las cepas no encapsuladas
son más pequeñas y
aparecen planas.
• Todas las colonias
experimentan autólisis al
envejecer (la porción central
de la colonia se disuelve, lo
que produce un aspecto
umbilicado).
• Las colonias son α-
hemolíticas en agar sangre
cuando se incuban bajo
condiciones aerobias, y
pueden ser β-hemolíticas en
los cultivos anaerobios.
65. GONZÁLEZ CABEZA 65
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• El organismo tiene necesidades nutricionales delicadas y sólo es
capaz de crecer en medios enriquecidos (p. ej., agar tripticasa de
soja o agar de infusión de cerebro-corazón) y suplementados
con productos hematológicos.
• S. pneumoniae fermenta varios de hidratos de carbono, y el
producto metabólico principal es el ácido láctico.
• Esta especie crece poco en medios con concentraciones altas
de glucosa, debido a que el ácido láctico alcanza con rapidez
niveles tóxicos.
• Como todos, los estreptococos, S. pneumoniae carece de
catalasa.
• A menos que se proporcione una fuente exógena de catalasa el
cúmulo de peróxido de hidrógeno inhibirá su crecimiento.
• La capa de peptidoglicano de la pared celular de los
neumococos es típica de los cocos Gram positivos.
66. GONZÁLEZ CABEZA 66
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• El ácido teicoico expuesto (conocido también como sustancia C)
es específico de especie y no está relacionado con los hidratos
de carbono específicos de grupo en los estreptococos β-
hemolíticos.
• La sustancia C precipita una fracción globulínica sérica (proteína
C reactiva (PCR]) en presencia de calcio.
• La PCR se encuentra a concentraciones bajas en sujetos sanos
y aumenta en pacientes con enfermedades inflamatorias agudas.
• El ácido lipoteicoico de la membrana puede dar reacción cruzada
con los antígenos de superficie de Forssman en las células de
mamífero.
67. GONZÁLEZ CABEZA 67
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CULTIVO
• La muestra se debe inocular en un medio nutriente
enriquecido y suplementado con sangre.
• La recuperaciòn de S. pneumoniae en el cultivo de los
esputos de pacientes con neumonìa es muchas veces difìcil,
ya que se ve superado en poco tiempo por las bacterias
orales contaminantes.
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DEFINICION
• Es un método para diferenciar el S.
pneumoniae de los H.influenza y de los
estreptocos saprofitos de la flora orofaríngea
por la hinchazón capsular del germen al poner
la muestra en contacto con anticuerpos
específicos
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PROCEDIMIENTO
• Se mezcla una gota de Antisuero para el Neumococo,
una gota de la muestra en un portaobjeto y una gota
de azul de metileno al 3%.
• Si se desea se prepara un control negativo (una gota
de la muestra con azul de metileno al 3% y sin
Antisuero) en el mismo portaobjeto.
• Se colocan cubreobjetos sobre cada preparado y
después de 10 minutos a temperatura ambiente, se
examinan.
• Presentan una aparente "tumefacción" que se debe a
la formación de un complejo Ag-Ac en la superficie
del microorganismo, lo que causa un cambio en el
índice de refracción de la cápsula y una "tumefacción"
aparente.
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SÍNDROMES CLÍNICOS: NEUMONÍA
• Fiebre (presente en el 80% de los pacientes, con frecuencia en los
ancianos está ausente, suele desaparecer en las primeras 72
horas si el tratamiento es eficaz)
• Tos seca o productiva. Suele desaparecer dentro de los ocho
primeros días si el tratamiento es eficaz.
• Escalofríos (presentes hasta en un 40-50% de los pacientes)
• Dolor torácico de tipo pleurítico (30% de los pacientes)
• Taquipnea, definida como frecuencia respiratoria mayor 30/
minuto, presente en un 45-70% de los pacientes, es el signo más
sensible en ancianos.
• Confusión mental (presente en el 44´5% de pacientes ancianos).
• En la auscultación pulmonar podemos encontrar: crepitantes
(suelen normalizarse dentro de las tres primeras semanas de
tratamiento) y soplo tubárico. Una auscultación pulmonar normal
no la descarta