¿Qué es la prueba MIO? Análisis de la prueba MIO y cómo debe realizarse.

1. MIO ((MOVILIDAD,
INDOL Y ORNITINA)
SCARLETT BAEZ IBARRA

2.  El medio MIO se utiliza
para la identificación de
Endobacterias. Este
medio como su nombre
lo indica sirve para
observar la movilidad, la
producción de indol y
descarboxilación de la
ornitina.

3. MIO (Movilidad, Indol y Ornitina)
Indicador de pH: púrpura de
bromocresol
 Ácido: color amarillo (pH = 5.2)
 Alcalino: color púrpura (pH = 6.8)
 Medio no inoculado: color púrpura
intenso brillante (pH = 6.0)

4. MIO (Movilidad, Indol y Ornitina)
 Medio de cultivo altamente nutritivo
por la presencia de extracto de
levadura, peptona y tripteína.
1. Descaborxilación de ornitina
2. Producción de indol
3. Movilidad

5. DESCABOXILACIÓN DE ORNITINA
Mide la capacidad enzimática de un
organismo para descarboxilar un
aminoácido (ornitina) para formar
una amina, con la consiguiente
alcalinidad.
El aminoácido L-ornitina es
descarboxilado por la enzima ornitina
descarboxilasa para dar la diamina
putrescina y CO2 producidos en
condiciones anaeróbicas. L-ornitina Putrecina + CO2
ornitina descarboxilasa

6. DESCABOXILACIÓN DE ORNITINA
Positivo: color púrpura del medio
Negativo: Color amarillo en el fondo del tubo
que puede ser púrpura al final.

7. PRODUCCIÓN DE INDOL
La prueba de indol se basa
en la formación de un
complejo de color rojo
cuando el indol reacciona
con el grupo aldehído de p-
dimetilaminobenzaldehido
(sustancia activa del reactivo
de Kovacs).
La formación de indol se
produce solamente en
aquellos organismos capaces
de fermentar los hidratos de
carbono.

8. El triptófano es un
aminoácido que
puede ser oxidado por
ciertas bacterias para
formar 3 metabolitos
principales:
• Indol
• Escatol
• Indolacético
PRODUCCIÓN DE INDOL
El principal
intermediario
en la
degradación
del triptófano
es el ácido
indolpírúvico.
La
degradación
del triptófano
libera indol,
ácido
pirúvico,
amoniaco y
energía.

9. PRODUCCIÓN DE INDOL
Condiciones
Reactivo de Kovacs
 Adicionar 5 gotas y agitar suavemente
el tubo
Conservación
 Los reactivos deberán guardarse en el
refrigerador (4° C)
Resultados
 Positivo: Anillo rojo en la superficie del
medio.
 Negativa: No se produce color
 Negativa: Color naranja en la superficie
del medio.
*La reacción positiva después de 24
horas indica una prueba completa.
*Si el cultivo de 24 horas es negativo
deberá incubarse otras 24 horas y repetirse la
prueba.

10. MOVILIDAD
Positiva. Los organismos
móviles migran de la
línea de siembra y se
difunden en el medio
provocando turbiedad.
Negativa. Crecimiento
bacteriano acentuado
siguiendo la línea de
siembra.
Determina si un organismo es
móvil o inmóvil. Las bacterias
tienen movilidad por medio de
sus flagelos.
alga verde
Chlamydomonas
bacteria del cólera
Vibrio cholerae

11. MOVILIDAD
Condiciones
Consistencia del medio
 Semisólido en forma vertical
Inoculación
 Por picadura, en forma vertical
Condiciones de incubación
 Tiempo: 24 - 48 horas
 Temperatura: 35 -37° C

12. EJEMPLO DE PREPARACIÓN DE MEDIO MIO

13. EJEMPLO DE PREPARACIÓN DE MEDIO MIO

14. Reporte de Resultados

15. La movilidad se detectará
por la presencia de turbidez
alrededor del punto de
inoculación.
El indol se formará si la bacteria
tiene la capacidad de producir
la enzima triptofanasa que
desdoblará el a.a. triptófano en
indol, ácido pirúvico y amonio.
El indol es incoloro pero
al reaccionar con el
reactivo de Kovacs (p-
dimetil-
aminobenzaldehido)
que se adiciona
después de que creció
la bacteria, dará un
color rojo violeta.
La descarboxilación de la
ornitina como el medio tiene
púrpura de bromocresol y
una pequeña cantidad de
glucosa:
Cuando ésta se fermenta
se produce un color
amarillo en el fondo
(ornitina descarboxilasa
negativa)
Al descarboxilarse la ornitina
se produce putresina la cual
es alcalina y sobrepasa la
acidez dada por la
fermentación de las glucosa
resultando en un color morado
en el fondo.
PARA RESUMIR