1. LA DIVERSIDAD DE BACTERIAS
AISLADAS DE LOS RESERVORIOS
DE AGUA DULCE DE LA
ANTÁRTIDA QUE POSEEN LA
CAPACIDAD DE PRODUCIR
POLIHIDROXIALCANOATOS
ESTUDIANTE:
ALINA JANICE VELASQUE GUTIERREZ
DOCENTE:
SOTO GONZALES, HEBERT HERNAN
CURSO:
BIOTECNOLOGÍA
AUTORES: lawomir Ciesielski , Dorota Górniak , Justyna Możejko , Aleksander Świątecki , Jakub Grzesiak ,y Marek Zdanowski
ANTÁRTIDA
2. LA DIVERSIDAD DE BACTERIAS AISLADAS DE
LOS RESERVORIOS DE AGUA DULCE DE LA
ANTÁRTIDA QUE POSEEN LA CAPACIDAD DE
PRODUCIR POLIHIDROXIALCANOATOS
MATERIALES Y MÉTODOS
INTRODUCCIÓN
Los extremófilos que habitan las zonas
polares son una fuente de enzimas
novedosas, que tienen un gran potencial
económico en muchos procesos
industriales, incluidas las aplicaciones
agrícolas, químicas y farmacéuticas
MÉTODOS
Se ha demostrado que las células
bacterianas con un contenido más alto de
PHA pueden sobrevivir más tiempo que
aquellas con un contenido más bajo de
PHA, porque pueden utilizar su material de
reserva por más tiempo y de manera más
eficiente
El objetivo principal de este
estudio fue determinar si las
bacterias que habitan en los
reservorios de agua dulce en las
áreas de primer plano de los
glaciares tienen el potencial de
sintetizar PHA.
Se recolectaron muestras de agua y esteras de cinco depósitos de agua dulce
poco profundos y un arroyo. Se ubicaron en el promontorio del glaciar Ecology
cerca de la estación antártica polaca “Arctowski. Los reservorios seleccionados
fueron diferentes en edad, ubicación y parámetros ambientales.
1° Muestras de Agua Dulce
MATERIALES
2° Frascos Estériles
3° Placas Petri
4° Agua Esteril
5° Agar
6° Kit comercial Genomic Min
7° Bomba jardinora (5L)
1RO. OBTENCIÓN DE
SITIOS DE RECOLECCIÓN
2DO. PROCEDIMIENTOS
DE BIOLOGÍA MOLECULAR
4TO. ESTADÍSTICAS
8° Programa ClustalW
9° Windows v. Canoco 4.5
Para obtener ADN, las células se rasparon de la superficie de las inclinaciones y
se lavaron en agua estéril. La extracción de ADN se realizó utilizando el kit
comercial Genomic Mini.
Se realizó un análisis de correspondencia canónica (CCA) utilizando un paquete
estadístico para Windows v. Canoco 4.5 [ 29 ]. La presencia de bacterias que
poseen una forma específica de genes de la PHA sintasa se analizó en relación
con el entorno ambiental "todos los demás datos".
Las secuencias de genes que codifican el ARNr 16S y las PHA sintasas se
compararon con las de la base de datos GenBank utilizando el programa NCBI
blast. Las secuencias se alinearon utilizando el programa ClustalW.
3RO. ANÁLISIS
FILOGENÉTICO
3. RESULTADOS
Un total de 50 aislamientos bacterianos de cinco estanques y una
corriente se caracterizaron mediante la secuenciación de un
fragmento de 1000 pb de largo del gen 16S rRNA . Se analizaron
filogenéticamente veinte secuencias de ADN únicas junto con sus
parientes más cercanos derivados de GenBank.
Las cepas aisladas se analizaron filogenéticamente mediante secuenciación del gen de ARNr 16S y se
clasificaron como miembros de las clases de bacterias alfa , beta o gammaproteobacterias . La reacción
en cadena de la polimerasa se utilizó para detectar genes de PHA sintasa. Los productores potenciales de
polihidroxialcanoatos (PHA) pertenecientes principalmente a Pseudomonas sp. Y Janthinobacterium sp. se
aislaron de los cinco sitios de muestreo, lo que sugiere que la síntesis de PHA es una característica
bacteriana común en los sitios pioneros. Todas las PseudomonasLas cepas tenían el potencial genético
para sintetizar PHA de cadena media, mientras que algunas cepas de Janthinobacterium aisladas podrían
producir PHA de cadena corta o PHA de cadena media.
Los análisis filogenéticos de los genes phaC y phaC1 , especialmente en Janthinobacterium sp., Sugieren que estos
genes podrían haber sido adquiridos por transferencia genética horizontal. Los resultados obtenidos nos permiten
especular que la posesión de estos genes que permiten la síntesis de PHA puede mejorar la aptitud y supervivencia de
las bacterias en condiciones adversas. Además, los resultados presentados muestran que los microorganismos que
habitan en ambientes extremos deben ser considerados como productores potenciales de PHA
DISCUSIÓN Y
CONCLUSIONES
En los estanques que se estudiaron, más de la mitad de las cepas aisladas poseían genes responsables de la síntesis
de PHA. Entre ellos se encontraban principalmente microbios pertenecientes al género Pseudomonas (seis cepas) y al
género Janthinobacterium (cuatro cepas). El elevado número de aislamientos que poseen genes responsables de la
síntesis de PHAs sugiere que las bacterias antárticas evolucionaron, u obtuvieron de otra manera, esta capacidad
metabólica para soportar las condiciones extremas típicas de las regiones polares.