1. AISLAMIENTO DE BACTERIAS
PRODUCTORAS DE
POLIHIDROXIALCANOATOS
MEDIANTE UNA COMBINACIOÓN DE
ENFOQUES FENETÍPICOS Y
GENOTÍPICOS
DOCENTE: HEBERT SOTO GONZALES
ALUMNO: AYRTON SOTO PAREDES
UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA
2021-PERÚ
AUTORES: S.‐S. Si, Y.‐C. Chuang, C.‐H. Chen,
2. AISLAMIENTO DE BACTERIAS PRODUCTORAS DE
POLIHIDROXIALCANOATOS MEDIANTE UNA COMBINACIOÓN DE
ENFOQUES FENETÍPICOS Y GENOTÍPICOS
INTRODUCCIÓN
Los polihidroxialcanoatos (PHA) son un grupo de poliésteres sintetizados por
bacterias, arqueas y algunos hongos. Estos poliésteres son biodegradables y
biocompatibles. Cuando el sustrato de carbono es superior a otros nutrientes como
nitrógeno, azufre, fósforo u oxígeno , muchos microorganismos pueden acumular
PHA como energía intracelular y almacenamiento de carbono. inclusiones.
MATERIALES Y
MÉTODOS
Desarrollar un enfoque eciente
utilizando una combinación de
métodos fenotípicos y
genotípicos para el aislamiento
de bacterias ambientales que
producen polihidroxialcanoatos
de longitud media de cadena
(mcl-PHA).
OBJETIVOS
Se utilizaron Pseudomonas oleovorans BCRC10951 (ATCC8062),
Pseudomonas nitroreducens BCRC11041 (ATCC33634) y Pseudomonas
putida KT2442 como control positivo para las cepas productoras de PHA.
Bacterias y cultivo
de
microorganismos
Se recolectaron suelos de diferentes sitios, incluidos un campo agrícola,
sitios de drenaje de desechos industriales, campo contaminado con
petróleo, áreas de aguas termales, etc. Las bacterias aisladas de estos
ambientes se examinaron para la producción de PHA.
Aislamiento del
medio ambiente de
microorganismos
productores de
PHA
3. Las células bacterianas se recolectaron y lavaron dos veces con
1 ml de solución salina tamponada con fosfato estéril.
Extracción de ADN para determinación
de secuencia, amplicación de cistrón de
ARNr 16S por PCR y secuenciación de
ARNr 16S
Amplicación del gen
pha C por PCR
El ADN bacteriano se extrajo de los sedimentos celulares como
se describió anteriormente.
Clonación y determinación
de la secuencia del gen pha
C
Se purificaron amplicones de PCR del tamaño esperado (800 pb)
a partir de gel de agarosa de bajo punto de fusión ( 0,7 %)
Aislamiento y
caracterización de PHAs
Se estudiaron las producciones de polímeros de cepas seleccionadas utilizando
condiciones de crecimiento de cultivo por lotes en dos etapas.
RESULTADOS
La incorporación de la identificación fenotípica en la estrategia de aislamiento
demostró ser un enfoque útil en nuestro aislamiento de cepas potenciales que se
utilizarán para la producción industrial de PHA
Una de las principales preocupaciones en la comercialización de PHA son los
altos costos de producción de PHA producido biológicamente en comparación con
los de la producción de materiales plásticos de base petroquímica.
DISCUSIÓN
