1. PRACTICA DE LABORATORIO
“EXTRACCION DEL ADN HUMANO APARTIR DE LA SALIVA, MEDIANTE EL
USO DE REACTIVOS CASEROS”
AUTOR:
MICHELL PAOLA BUELVAS CASTILLO
DOCENTE:
VANESA SANTOS HERNANDEZ
INSTITUCION EDUCATIVA LOS GARZONES
“INSTEGAR”
MONTERÍA-CÓRDOBA
2021
2. OBJETIVO.
Aislar el ADN de la saliva mediante el uso de reactivos caseros.
MATERIALES:
2 vasos
Alcohol frio
Lavaplatos liquido
Sal
Agua
cuchara
MARCO TEORICO.
La secreción salival del hombre varía entre 1 y 1,5 litros diarios. Tiene una función
lubricante y facilitadora de la masticación y la deglución; asimismo posee una
función enzimática desdoblando los glúcidos (amilasa). Durante la noche casi deja
de segregarse. La saliva en sí, no es un fluido que contenga componente celular y
por ello carece por sí misma de ADN; pero se encuentra en un medio lleno de células
epiteliales (epitelio bucal). Estas células se desprenden continuamente y llegan a
formar parte de la saliva; El ADN se encuentra en el interior del núcleo de todas las
células, disperso y muy replegado, unido a proteínas para formar la cromatina. Por
lo tanto, podremos extraerlo a partir de prácticamente cualquier material de origen
biológico, en primer lugar tienen que romperse la pared celular y la membrana
plasmática para poder acceder al núcleo de la célula. Después debe romperse igual
la membrana nuclear para dejar libre el ADN. Por último hay que proteger el ADN
de enzimas que puedan disminuirlo y para aislarlo hay que hacer que se precipite
en alcohol. El ADN es soluble en agua, pero cuando se encuentra en alcohol se
desenrolla y precipita en la interface entre el alcohol y el agua. Además de
permitirnos ver el ADN, el alcohol separa el ADN de otros componentes celulares,
los cuales son dejados en la solución acuosa. La sal evita la unión de las proteínas
al ADN.
3. METODOLOGIA:
Mezclamos medio vaso de agua con una cucharadita de sal, luego se revolvió hasta
que la sal se disolvió por completo. Introduje en mi boca un poco de agua salada y
la removí durante un minuto evitando formar burbujas, luego escupí el agua de
vuelta en un vaso vacío.
Al vaso que contiene el agua salada con saliva (muestra) le añadí una gota del
detergente líquido para platos, luego lo revolví despacio para no hacer burbujas y
deje reposar 5 minutos.
Ya pasados los 5 minutos, le agregue 3 cucharadas de alcohol helado en el vaso
con la muestra, de forma que resbale por las paredes del vaso para que forme una
capa sobre el agua salada. Y espere unos 3 minutos. A continuación algunas
evidencias de la practica.
MATERIALES ADICION DE SAL EN EL
AGUA
AGUA + SAL
AGUA SALADA + LA SALIVA
AL AGUA SALADA + LA SALIVA SE LE
ADICIONO UNA GOTA DE JABON.
4. EN LAS SIGUIENTES IMÁGENES SE PUEDEN OBSERVAR LAS CADENAS DE
MOLECULAS DE ADN QUE SE FORMARON.
5. RESULTADOS.
Durante el enjuague el agua ha recogido las células que se desprenden de las
encías, las paredes de la boca, la lengua, etc. Después, al añadir el agua con sal y
el jabón, se ha provocado un choque osmótico a las células; el jabón ha
desestabilizado las membranas y todo el contenido celular está vertido en el vaso.
El detergente utilizado en el experimento tiene como función, destruir las
membranas celulares del tejido vivo que estamos utilizando; el detergente disuelve
las grasas, siendo el componente principal de la membrana plasmática y nuclear de
las células; al romperse las membranas celulares se permite la salida del ADN al
exterior.
La sal en disolución actúa disminuyendo la solubilidad de las proteínas, lo que hace
que precipiten y se separen más fácilmente del ADN para poder obtenerlo con una
mayor pureza.
El alcohol separa el ADN de otros componentes celulares, los cuales quedan en la
solución acuosa.
CONCLUSION.
En este laboratorio pudimos analizar y concluir que al agregar la sal en esta
disolución esta actúa disminuyendo la solubilidad de las proteínas, haciendo que
precipite y se separe más fácilmente del ADN.
Con el detergente utilizado en el experimento pudimos considerar que el detergente
disuelve las grasas o lípidos, que es el componente principal de la membrana
plasmática y nuclear de las células. El ADN es una molécula muy larga y tiende
agruparse. De ahí la facilidad para retirarla. Para aislar el ADN hay que hacer que
precipite en alcohol. El ADN es soluble en agua, pero cuando se encuentra en
alcohol se precipita en la interface entre el alcohol y el agua. Además de permitirnos
6. ver el ADN, el alcohol separa el ADN de otros componentes celulares, los cuales
son dejados en la solución acuosa.
CUESTIONARIO
1 ¿Crees que se puede aislar ADN de cualquier tejido humano?
Cualquier tejido del cuerpo que no se haya degradado es una fuente potencial de
ADN. El hueso es una de las mejores fuentes de ADN a partir de restos humanos
descompuestos. Incluso cuando la carne se ha descompuesto, a menudo se puede
obtener ADN del hueso desmineralizado.
2. ¿Para que se utilizan cada uno de los reactivos (sal, detergente, alcohol) en la
extracción de ADN?
El cloruro de sodio ayuda a separar algunas de las proteínas que están
unidas al ADN. También mantiene las proteínas disueltas en la capa acuosa
de forma a impedir que estas precipiten también con el alcohol, junto con el
ADN.
El alcohol disminuye la constante dieléctrica de la solución acuosa. El etanol
frio provoca que el ADN se separe del agua y precipite. Cuando el ADN se
separa de la solución acuosa, tiende agruparse, lo que hace que sea visible.
Las largas cadenas del ADN se enrollaran alrededor de la varilla al revolver
la interfase entre las dos capas.
El lavaplatos ayuda a disolver la membrana celular que es una bicapa
lipídica.
3. ¿Qué utilidad tiene actualmente aislar ADN de una especie o individuo?
Los análisis del ADN son de gran utilidad, ya que nos ayudan junto con las
características macro- y microscópicas, a diferenciarlas. De todo el genoma se ha
probado que algunas regiones brindan buena información para diferenciar especies.
Los procedimientos que se siguen para realizar estos análisis consisten en la
extracción del ADN a partir de algún tejido en estudio, su amplificación por medio
de la técnica de PCR (siglas por el inglés Polymerase Chain Reaction), la
secuenciación de esas regiones amplificadas, y por último la comparación de las
secuencias de ADN obtenidas.
7. 4. ¿Crees que el ADN que obtuviste es puro? Justifica
Si es puro, debido a que la saliva arrastra las células del epitelio que recubre las
paredes internas de la boca y que se están desprendiendo constantemente. Durante
el enjuague el agua ha recogido las células que se desprenden de las encías, las
paredes de la boca, la lengua, etc.
5. ¿Con qué fines puede modificarse el ADN de una especie?
Se puede editar el ADN de toda clase de seres vivos, con fines diversos: para tratar
enfermedades, crear alimentos transgénicos, mejorar características humanas no
patológicas, entre otras finalidades.
BIBLIOGRAFIA.
Feduchi-Blasco-Romero-Yañez. (2003). Bioquimica "Conceptos esenciales".
Inglaterra : Panamericana.
José Teijon Rivera- Amando Garrido . (2009). Bioquimica Metabolica. Austria
: Tebar.