1. POTENCIAL BIOLÓGICO DE Trichoderma spp. PARA EL
COMBATE DE ENFERMEDADES DEL CACAHUATE EN
MÉXICO
Centro de Agroecología
05/10/2022
Romero-Arenas Omar, Martínez-Salgado Saira Jazmin, Andrade
Hoyos Petra, Parraguirre Lezama Conrado y Rivera-Tapia Antonio
Emal: biol.ora@hotmail.com
IX Congreso Latinoamericano de Agroecología
Costa Rica 2022
2. Importancia del cacahuate
Tercer cultivo oleaginoso producido a nivel
mundial.
Constituye la principal fuente de proteínas
(20- 30%) y lípidos en la dieta de áreas rurales.
52,602.81 ha de área sembrada para el año
2021 con 81,413 toneladas.
Figura 1. Producción nacional de cacahuate en México.
(SIAP, 2018; FAO, 2020). 2
I. INTRODUCCIÓN
3. 3
Tizón de la hoja
• Alternaria spp.
• Drechslera sp.
• Phoma sp. Mancha foliar
Cercospora arachidicola
Pudrición de vainas
Aspergillus flavus, Penicillium
expansum, Fusarium sp.
Damping off
• Fusarium spp.
• Rhizoctonia solani
Podredumbre
carbonosa
Macrophomina
phaseolina
Marchitamiento
Verticillium
Fusarium sp.
dhaliae,
Enfermedades en cacahuate causadas por hongos
Roya
Puccinia arachidis
• Pestalotiopsis
sp.
• Sclerotium sp.
Mancha de la hoja
4. 4
Colonizar agresivamente los sustratos, por su alta velocidad de
crecimiento
Abundante esporulación
Amplia gama de sustratos sobre los que puede crecer
Diversidad de enzimas
Algunas especies del género forman sideróforos (hidroxamatos)
(Correa, 1997; Singh et al., 2011; Vinale et al., 2013).
Hongos cosmopolitas con capacidad antagónica frente a hongos
fitopatógenos del suelo, y promoción del crecimiento de las plantas.
Están biológicamente adaptados para:
EL POTENCIAL BIOLÓGICO DEL GÉNERO Trichoderma spp.
5. Identificación de patógenos de la raíz de Arachis hypogaea L.
9
Objetivos específicos
1. Aislar e identificar a Macrophomina phaseolina de raíz de Arachis hypogaea L., por
medio de taxonomía clásica y biología molecular.
CAPÍTULO I.
6. 10
Muestreo de material vegetal en campo
Figura 1. (A) plantas con signos de enfermedad, (B) acercamiento de planta con síntoma de marchitez y follaje muerto, (C) planta
con daños en la corona.
A b c
B C
MATERIALES Y MÉTODOS
7. Aislamiento de hongos
Figura 2. (A) tejido vegetal con
síntomas de enfermedad, (B)
desinfestación de raíces y tallo, (C)
siembra de tejido en medio PDA, (D)
crecimiento del hongo después de 2
días de incubación.
11
d
b
c
(Agrios, 2005;Arias y Piñedo, 2008)
A
B
C
D
8. 18
Características morfológicas
Abundante micelio aéreo en la placa de
cultivo con esclerocios incrustados dentro de
las hifas o absorbidos en el agar (Figura 6A).
Presenta crecimiento rápido cubriendo la
superficie en 4 días a 28°C.
Características microscópicas
Las hifas son septadas, inicialmente hialinas y
se tornan de color miel o negro. Los
microesclerocios son de color negro y su
tamaño varía (50-150 μm), se forman a partir
del agregación de hifas con 50 a 200 células
individuales acoplado por un pigmento de
melanina (Figura 6B).
Género Macrophomina
A B
Figura 3. (A) colonia de cepa NH en medio PDA de 7 días. (B)
microesclerotia germinada observada a 100x.
(Short y Wyllie, 1978; Pandey et al., 2019).
9. 14
Pruebas de
patogenicidad
Figura 4. (A) desinfestación de
semillas de cacahuate en NaClO al
1%, (B) sulfato de cobre al 1%,
(C,D) germinación y desarrollo de
plantulas (E,F) inoculación de las
cepas a ensayar.
a
b
c
d
e
f
A
B
C
D
E
F
10. 21
Macrophomina phaseolina
a b
Figura 5. Necrosis en cuello de raíz de cacahuate causada por M. phaseolina, (A) daño externo, (B) corte
trasversal muestra daño interno, (C) planta sana (testigo).
(Pal et al., 2014).
c
A B C
PRUEBAS DE PATOGENICIDAD
12. 24
1. Evaluar la capacidad antagónica in vitro de 5 cepas Trichoderma spp., frente a
M. phaseolina, patógeno de cacahuate.
2. Evaluar la estimulación de las cinco cepas de Trichoderma en el crecimiento de plantas de
A. hypogaea L.
Capítulo II.
Evaluación del control biológico de Trichoderma spp., in vitro y en campo
Objetivos específicos
13. 25
• Medir cada 24h/ 10 días.
•Triplicado
•28°C
Técnica de cultivos
duales Porcentaje de inhibición
del crecimiento radial
(PICR)
Clasificación de la
capacidad antagónica
Clase I
• Sobrecrecimiento de Trichoderma sp., que colonizó
toda la superficie del medio y redujo la colonia del
patógeno
Clase II
• Sobrecrecimiento de Trichoderma sp., que colonizó al
menos 2/3 de la superficie del medio
Clase III
• Trichoderma sp., y patógeno colonizaron la mitad del
medio (más que 1/3 y menor que 2/3). Uno no se
sobrepuso al otro
Clase IV
• Hongo patógeno colonizó al menos 2/3 de la
superficie del medio y resistió la invasión por
Trichoderma sp.
ClaseV
• Sobrecrecimiento del hongo patógeno que colonizó
toda la superficie del medio
EVALUACIÓN DE LA CAPACIDAD ANTAGÓNICA DE TRICHODERMASPP.,IN VITRO
Antagonista
Fitopatógeno
𝑃𝐼𝐶𝑅= 𝑅1−𝑅2
𝑥 100,
𝑅1
Figura 6. Representación de cultivo dual.
MATERIALES Y MÉTODOS
R1: diámetro del testigo
R2: diámetro del organismo ensayado
14. 27
Figura 7. (A) planta de cacahuate de 30 días, (B, C) inoculación de las cepas por tratamiento en campo.
A B C
Inoculación manual
60 mL para cada
tratamiento
15. 28
Figura 8. Cosecha de cacahuates después de 3 meses del establecimiento de los tratamientos, ( A) arranque
de plantas, (B) sacudido y apilado (10 por tratamiento), (C) amarrado y etiquetado.
A B C
16. 29
Figura 9. (A) Registro de peso de plantas por tratamiento, (B) despegue manual de cacahuates por planta, (C) registro
de peso cacahuates.
A B C
17. 30
Figura 10. PICR de Trichoderma spp., frente a M. phaseolina.
EVALUACIÓN DE LA CAPACIDAD ANTAGÓNICA DE Trichoderma spp., IN VITRO
Figura 1 1 . Confrontación entre M. phaseolina ( A) T. asperellum (T-AS1),
B) T. harzianum (T-Ah), (C) T. koningiopsis (T-K11), (D) T. hamatum (T-A12),
(E) T. harzianum (T-H3).
RESULTADOS
(Khaledi y Taheri , 2017).
A B
C D E
Khaledi y Taheri (2017) reporan T. harzianum con 58.7% PICR, mientras
que la especie T. viride un valor de 20.2% frente a M. phaseolina.
18. Figura 12. Rendimiento
potencial (ton/ha) de
cacahuate para cada
tratamiento en la
comunidad de
Buenavista de Benito
Juárez, Puebla-México.
*Letras diferentes
significa diferencia
significativa entre
tratamientos de acuerdo
con Tukey-Kramer para
p ≤0.05.
20. Conclusiones
Se logró identificar a M. phaseolina (ID: MT645246) asociada a la pudrición carbónica,
proveniente de la pudrición del tallo y raíz del cultivo del maní “variedad Virginia Champs”, ubicada
en las comunidades campesinas Buenavista de Benito Juárez, perteneciente al municipio de Chietla.
en Puebla, México.
Las cepas T. koningiopsis (T-K11) presentó el mayor porcentaje de inhibición del crecimiento radial
de PICR sobre M. phaseolina (71,11 %) en condiciones in vitro.
En condiciones de campo, T. koningiopsis (T-K11) fue más eficaz para reducir la incidencia de la
enfermedad en un 76%, además obtuvo la mayor producción (1.6013±0.01 ton/ha) superando al
tratamiento químico (Cercobin®) la cual obtuvo la segunda mayor producción.
