1. Laboratorio de Biología Celular
EXTRACCIÓN DE ADN

2. HISTORIA
• 1869 Friedrich Miescher: Nucleína
• 1919 Phoebus Levene: Nucleótido
• 1930 Levene y Albrecth Kossel: ADN
• 1937 William Astbury: estructura ADN
• 1928 Federick Griffith: Principio transformante
• 1944 Oswald Avery, Colin McLeod y Maclyn Mc
Carty : Aislaron el factor transformante.
• 1952 Alfred Hershey y Martha Chase: Fago T2
• 1940 Chargaff: Equimolaridad
• 1953 Watson y Crick: Modelo de doble hélice

3. Nucleótido

5. ADN
JAMES WATSON Y FRANCIS CRICK

6. Extracción de ADN y ARN
Muestras
 Sangre periférica
 Fluidos corporales
 Tejidos
 Tejidos incluidos en parafina

7. Extracción de ADN y ARN
Lisis
Inhibición de nucleasas
Desnaturalización de proteínas
Precipitación de ADN

8. Lisis
 Mecánica (trituración, lisis hipotónica)
 Tratamiento químico (detergentes)
 Digestión enzimática (Proteinasa K)
 Garantizar la integridad del ADN o RNA

9. Add DNase
Add RNase
+ DNase (protein)
+ RNase (protein)
Inhibición de nucleasas

10. Etapas

11. Variantes
Diferentes Metodologías
• Disolventes orgánicos (Sambrook J. and Russell
DV. Purification of Nucleic Acids by Extraction
with Phenol:Chloroform.

12. Columnas con material adsorbente: se suelen utilizar para
cualquier tipo de ácidos nucleicos
KITS COMERCIALES

15. EXTRACCIÓN DE ADN
VEGETAL

16. PROCEDIMIENTO
• Macerar suavemente fruta (banano y tomate) con agua
destilada por 1 min.
• Agregar una pequeña cantida de sal.
• Agregar shampoo, macerar suavemente sin generar
espumas.
• Filtrar la mezcla con papel filtro hasta obtener líquido
claro.
• Agregar a un tubo de ensayo la solución obtenida.
• Adicionar la solución obtenida a otro tubo de ensayo que
contenga Alcohol 96% frío.
• Observar la formación de un precipitado Blanco.

17. RESULTADO

18. CUESTIONARIO
• ¿Cuál es la función del shampoo y la sal en la
extracción del ADN?
• ¿Cuál es la función del alcohol frio?

19. GRACIAS….