1. Extracción y
purificación de
ADN
Hazzly Guerrero
Gabriela Berrio
Alanis Mosquera
Andrea Marenco
Alberth Martínez
Guido malo
Emanuel Martínez

2. Se definen como grandes polímeros estructurados
por la repetición de nucleótidos unidos por medio de
enlaces fosfodiéster. Existen dos tipos que son el
ADN y el ARN. La diferencia entre estos dos tipos de
ácidos nucleicos es que el ADN es desoxirribosa
(adenina, guanina, citosina, timina) y el ARN es
ribosa (adenina, guanina, citosina y uracilo)
Generalidades de los ácidos nucleicos
(muyeducatuvo/Ácidos Nucleicos Qué son,
Funciones y Estructura - ADN y ARN, 2022)

3. Extracción del ADN
El primer aislamiento de ácido
desoxirribonucleico (ADN) estuvo hecho en
1869 por Friedrich Miescher. La extracción
consiste en la separación y purificación del
ADN con el fin de poder estudiarlo, analizarlo
o manipularlo basándose en las características
fisicoquímicas de la molécula.
ADN, biologiamolecular, extraccion, tecnicas

4. Aspecto histórico de la extracción del
ADN
Aislado por primera vez***
1869JohanFriedrichMiescher.
En 1889RichardAltmann,

5. 1937WilliamAstbury
1953MauriceWilkins
1953 franciscricky jameswatson

6. Colecta de la muestra y recomendaciones para
los tipos de muestras
plantas animales sangre
Colectay transporte • En los casos de tejido
foliar
• Se recomienda tejido
joven.
• Una vez recolectado
debe congelarse
inmediatamente en
nitrógeno líquido.
• Por otro lado, si es
tejido de cultivo in
vitro, no es necesario
congelar la muestra.
• Cortar el tejido en
trozos pequeños.
• Es necesario utilizar un
buffer especializado
que inactive nucleasas
para poder transportar
la muestra.
• Utilizar agujas de
calibre apropiados.
• Homogeneizar
correctamente la
muestra.
• Evitar la
contaminación de la
muestra.
• Evitar movimientos
bruscos durante el
transporte.

7. Almacenamiento • Almacenar el tejido en
congelación fija a –
80°.
• Se recomienda no
tener una única
muestra.
Según el método de colecta
las muestras deben
almacenarse en etanos a 4°
C o si fue congelado, en
nitrógeno líquido a – 80°.
Las muestras se pueden
mantener por unos
cuantos días a 4°C luego
de su colecta.

8. *Homogenización del tejido*
homogenización mecánica
Nitrógeno liquido
Pistilos
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9. Homogenización química
• Esta se caracteriza por ser rápida y
completa. Es esencial para asegurar la
obtención de ADN y evitar su
degradación.
• Se recomienda realizar en bacterias, o
muestras pequeñas de tejidos frescos o
sangre.
• Esta homogeneización se da mediante
agentes químicos ya que la muestra
debe mantenerse en una solución a
altas temperaturas en presencia de
detergentes, proteasas

10. Lisis celular
El proceso de lisis depende
principalmente del tipo de célula que
se considere. Para las células vegetales
y bacterianas, por ejemplo, este
comienza con la desintegración de la
pared celular.
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11. *PROTOCOLO TRADICIONAL**
Separación de proteínas y lípidos
El ADN se encuentra mezclado entre grupos
fosfatos, cantidades de proteínas y lípidos, en
este proceso se busca aislar el material genético,
esto se logra hacer gracias a las propiedades
hidrofílicas soluble en agua de los grupos
fosfatos.

12. Precipitación del ADN:
La precipitación del ADN es un
proceso en el cual a través de
etanol se busca colocar el ADN
en una solución acuosa, hacerlo
insoluble, para que se precipite, o
bien se destaque en una forma
de “nebulosa”.
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material/application-notes
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13. • Ya eliminado el etanol de la muestra, se prosigue a hidratar el
ADN.
• Esta hidratación se puede realizar con agua, con un pH de 7 y
en las soluciones amortiguadoras se recomienda utilizar Tris-
HCL (pH 8,5) como tampón biológico y EDTA o acido
etilendiaminotetraacético pH (8,0) para almacenar el
material. Esto es lo que se conoce como el buffer TE que
solubiliza al ADN mientras lo protege de la degradación.
• Se recomienda evitar el pipeteo y la agitación agresiva.
• Además, para evitar la fragmentación consiste en incubar a 55
°C el ADN, 1 a 2 horas con agitación suave.
Redisolución del ADN: