2. Del griego πρό, pro = antes de y κάρυον, karion = núcleo.
Unicelulares: Célula con ADN libre en el citoplasma, no hay
núcleo celular diferenciado.
Reino Mónera: Bacterias y Cianobacterias
PROCARIOTAS
8. IDENTIFICACIÓN DE BACTERIAS
•Tinción Gram: En 1884 el bacteriólogo Christian
Gram publicó:
Gram +
Gram –
Complejidad y química de su pared celular
Peptidoglicano.
• Bacterias Gram – (menor cantidad de peptidoglicano)
• Bacterias Gram + (mayor cantidad de peptidoglicano).
12. Medios de cultivo
Medio de cultivo artificial que reúne una serie de condiciones
como son: temperatura, grado de humedad y presión de
oxígeno adecuadas, así como un grado correcto de acidez o
alcalinidad.
Debe contener los nutrientes y factores de crecimiento
necesarios y debe estar exento de todo microorganismo
contaminante.
15. Según sus requerimientos de oxígeno los microorganismos pueden ser:
Aerobios estrictos: requieren oxígeno para crecer. Ej. Mycobacterium
tuberculosis.
Anaerobios facultativos: pueden crecer en presencia o en ausencia de oxígeno.
Ej. Levaduras, enterobacterias.
Anaerobios estrictos: crecen en ausencia de oxígeno. En presencia de oxígeno su
crecimiento cesa, algunos mueren rápidamente. Ej. Especies del género
Clostridium.
Anaerobios aerotolerantes: crecen en ausencia de oxígeno, pero la presencia de
oxígeno no perjudica su crecimiento. Ej.: Especies del género Lactobacillus.
Microaerofílicos: requieren pequeñas concentraciones de oxígeno para crecer.
Ej.: Especies del género Spirillum.
17. o Teñir con cristal violeta 1 MINUTO
o Lugol
o Alcohol 96% o Alcohol Acetona
o Safranina.
o Dejar secar.
o Observar al microscopio.
o Nota: en cada paso lavar con agua.
Tinción de Gram
18. Productos que
se utilizan
Reacción y coloración de las bacterias
GRAM + GRAM -
1) Cristal violeta Células color violeta Células color violeta
2) Lugol solución
iodada
Se forma el complejo CV-I. Las células
continúan teñidas de color violeta.
Se forma el complejo CV-I. Las células
continúan teñidas de color violeta.
3) Alcohol Se deshidratan las paredes celulares.
Se contraen los poros. Disminuye la
permeabilidad. El complejo CV-I no
sale de las células que continúan
teñidas de color violeta.
Eliminación por extracción de grasas de
las paredes celulares. Aumenta la
porosidad. El complejo CV-I se separa
de la célula.
4) Safranina Células no decoloradas; quedan teñidas de
color violeta.
Células decoloradas; se tiñen de color
rosado.
Diferencia Tinción de Gram
21. La tinción de Ziehl-Neelsen es una tinción diferencial que permite distinguir un grupo especial de bacterias cuya
pared presenta resistencia a la decoloración por una mezcla de ácido y alcohol: las BAAR o bacterias ácido-alcohol
resistentes.
Entre las BAAR se encuentran las micobacterias, agentes etiológicos de enfermedades como la tuberculosis y la
lepra.Estas bacterias se tiñen muy mal con la tinción de Gram, por lo que su visualización es solo posible con esta
técnica.
fue descrita por primera vez por dos médicos alemanes:
franz ziehl, un bacteriólogo, y Friedrich Neelsen, un patólogo
Tincion Ziehl-Neelsen
22. Micobacterias
● El género Mycobacterium está integrado por bacilos largos de 3 a 5μm de longitud o curvos en forma de
maza, inmóviles, no esporulados, con abundantes gránulos citoplasmáticos, que poseen una resistencia
mayor a la tinción por los colorantes comunes, pero una vez teñidos son resistentes a la decoloración con
una mezcla de alcohol ácido.
23. Tuberculosis
La tuberculosis (TB) es una enfermedad causada por Mycobacterium tuberculosis, una bacteria que casi siempre
afecta a los pulmones. Se trata de una afección curable y que se puede prevenir. La infección se transmite de
persona a persona a través del aire. Cuando un enfermo de TB pulmonar tose, estornuda o escupe, expulsa bacilos
tuberculosos al aire. Basta con que una persona inhale unos pocos bacilos para quedar infectada
24. LEPRA
La lepra es una enfermedad infecciosa crónica causada por Mycobacterium leprae, un bacilo acidorresistente con
forma de curva. Afecta principalmente a la piel, los nervios periféricos, la mucosa de las vías respiratorias altas y
los ojos. La lepra es una enfermedad curable. Si se trata en las primeras fases, se puede evitar la discapacidad.
25. Fundamento
El fundamento de esta técnica de tinción se basa en las propiedades de la pared celular de estos microorganismos. La
pared está formada por un tipo de ácidos grasos llamados ácidos micólicos; estos se caracterizan por presentar
cadenas muy largas.
26. Técnica
Los reactivos necesarios para su realización son los siguientes:
0,5 fucsina básica
50 cc agua destilada
etanol absoluto 70%
28,5 g cristales de fenol derretidos hematoxilina
alcohol ácido 3%
Azul de etileno 0,3%
28. Etapa 1
PREPARACIÓN DEL EXTENDIDO:
Tomar una cantidad homogénea de esputo y extenderla de un extremo a otro del portaobjetos para lograr una
mezcla homogénea
37. Interpretación de resultados
células color
Bacilos y microorganismos Alcohol
Ácido-Resistentes.
rojo brillante
Gérmenes, otros organismos y
material de soporte.
diferentes tonalidades de azules
38. Para el informe:
● Investigar:
● Tinción de endospora (Shaeffer-Fulton)
● Tinción de bacterias encapsuladas
El tamaño de las bacterias varía dependiendo de las
especies entre menos de 1 μm y 250 μm; siendo lo más
habitual entre 1 y 10 μm. Son microorganismos unicelulares muy primitivos.
Metanógenas son anaerobios y obtienen energía mediante la producción de gas natural, como el metano.
Halófilas: Viven en ambientes extremadamente salinos. Halococcus y Halobacterium.
Termófilas son microorganismos que viven y se desarrollan en condiciones de temperaturas extremas 8o°C y pH extremos
CLASIFICACIÓNArqueobacteria y Eubacterias
Carencia de mitocondrias (la membrana citoplasmática ejerce la función que desempeñarían ésta).
Realizan división celular por fisión binaria
por bipartición o fisión binaria: cada célula se parte en dos.
NUTRICION:
- Autótrofas: Fotosintéticas o quimiosintéticas
- Heterotrofas: Absorben nutrientes del ambiente
Estructuralmente está formado por cadenas glucosídicas en que se repite una unidad elemental de N-acetil-glucosamina unida por un enlace glicosídico β1→4 a ácido N-acetil-murámico. Las unidades elementales están entre sí mediante enlaces glicosídicos β1→4.
Procedimiento:
Preparar laminilla con una gota de agua o solucion salina
Cepa Bacteriana
Esparcir por la laminilla
Secar en mechero