El documento describe un procedimiento para identificar las etapas de la mitosis en células de cebolla y obtener un cariotipo de células sanguíneas. Explica las fases del ciclo celular y la mitosis, así como los pasos para teñir y observar las células de cebolla bajo el microscopio y para cultivar, tratar con colchicina y analizar los cromosomas en las células sanguíneas para generar un cariotipo.
1. Ciclo celular y mitosis
Objetivos:
Identificar las diferentes fases del ciclo celular
Identificar las etapas del ciclo celular bajo el microscopio
Estudiar la mitosis y el ciclo celular en las células meristematicas de la raíz de
Allium Cepa (cebolla)
Reconocer e identificar la citogénesis en las células sanguíneas y conocer la
función de los medios de cultivo.
Metodología
La clase se realizó de manera virtual en donde la profesora nos explicó los conceptos de
ciclo celular y mitosis y nos explicó el procedimiento para la identificación de las etapas de
la mitosis en las células meristematicas de la cebolla, y a causa de la situación sanitaria
se procede a realizar este informe utilizando las herramientas digitales establecidas por el
docente.
Se identificaran las fases de la mitosis de la cebolla a través del sitio web
mmegias.webs.uvigo.es
Observación de la mitosis en células vegetales (células de la cebolla)
Reactivos
Cebolla
Recipiente
Portaobjetos
3. ácido acético
Procedimiento
1. Colocamos la cebolla en un frasco y agregamos agua hasta cubrir la porción
radicular del vegetal, y la dejamos durante tres o cuatro días para que sus
aumenten sus raíces
4. 2. Se cortan pequeños fragmentos de la raíz y se coloca en un porta objetos
3. Luego se le agrega HCL N5
4. Posteriormente se tiñe con aceto-orceina ( se deja actuar por 20 minutos)
5. Por último se le añade una gota de ácido acético al 45%.
5. Resultados
Foto de cómo se ven los cromosomas en el microscopio y como se ven cuado se
pasa a un software
6. Fases de la mitosis en la cebolla:
1 PROFASE
2 METAFASE
8. Reactivos para la citogénesis de células sanguíneas:
Obtención de un cariotipo
Procedimiento para la citogénesis
1. Se extraen 10 a 20 ml de sangre
2. Se vierten unas gotas de sangre en un frasco que contiene un medio de cultivo en
donde se añade fitohemaglutinina para estimular la mitosis y se incuba a 37°
durante 2 a 3 días.
3. Se añade Colcemid al cultico durante 1 o 2 horas para detener la mitosis en la
metafase.
4. Se pasan las muestras a un tubo y se centrifugan
9. 5. Luego se pasan a otro tubo que contiene un fijador.
6. Se dejan caer las células goteando sobre un portaobjetos
7. Se procede a la visualización en un microscopio
10. 8. Se pasan las imágenes a un software y de recortan los cromosomas y se ordenan
para obtener el cariotipo.
Medios de cultivo
PRMI- fue desarrollado originalmente para cultivar células leucémicas humanas en
suspensión y monocapa
11. SFB- es un importante suplemento del medio de cultivo celular que favorece el
crecimiento y adhesión celular.
PHA- Es una proteína que presenta una potente actividad mitogénica que también es
capaz de aglutinar distintos tipos de células, tales como eritrocitos y leucocitos.
ANTIBIOTICOS- se usan de forma rutinaria en cultivos celulares para prevenir posibles
contaminaciones
COLCHICINA- se usa para prevenir los ataques de gota (dolor repentino e intenso en una
o más articulaciones, causado por niveles anormalmente altos de una sustancia llamada
ácido úrico en la sangre) en adultos.
12. Marco teórico:
Concepto de ciclo celular y mitosis (fases de la mitosis)
Mitosis: es la división celular que produce dos células hijas genéticamente entre si. es el
mecanismo por el cual se reparten los cromosomas para formar los dos núcleos de las
células hijas.
Etapas de la mitosis:
Profase
Metafase
Anafase
Telofase
Citogénesis (concepto)
La citogenética es una herramienta de gran importancia que
permite realizar el diagnóstico cromosómico de pacientes con
indicación clínica de cromosomopatía, lo cual les va a permitir
asesorar a las familias respecto de dicha enfermedad, su
pronóstico y riesgo de recurrencia.
Cariotipo: la colección de cromosomas de un individuo, en las células animales
(mamíferos) se presenta 23 pares de cromosomas a excepción de las células
reproductoras
METODOLOGIA
METODOLOGÍA
MARCO TEÓRICO
Análisis de resultados
¿Cómo se observan los cromosomas?
En la interfase. Durante este tiempo crece, duplica sus cromosomas y se prepara para
una división celular.
Profase. Se condensan los cromosomas y los centrosomas se desplazan a los lados
opuestos del núcleo
13. Metafase. Los cromosomas se ubican claramente sobre la placa ecuatorial.
Anafase. Cromosomas migran claramente hacia los polos extremos de las células
Telofase. Cromosomas muy excéntricos, en los polos.
Citocinesis: Separación del citoplasma y resultado en dos células hijas.
Para realizar el conteo de los cromosomas, se extraen imágenes del microscopio y en un
software se organizan y se analizan.
Medios de cultivo de la citogénesis en células sanguíneas
Medios de cultivo
PRMI- fue desarrollado originalmente para cultivar células leucémicas humanas en
suspensión y monocapa
SFB- es un importante suplemento del medio de cultivo celular que favorece el
crecimiento y adhesión celular.
PHA- Es una proteína que presenta una potente actividad mitogénica que también es
capaz de aglutinar distintos tipos de células, tales como eritrocitos y leucocitos.
14. ANTIBIOTICOS- se usan de forma rutinaria en cultivos celulares para prevenir posibles
contaminaciones
COLCHICINA- se usa para prevenir los ataques de gota (dolor repentino e intenso en una
o más articulaciones, causado por niveles anormalmente altos de una sustancia llamada
ácido úrico en la sangre) en adultos.
Conclusión
Finalmente podemos decir según lo visto que el ciclo celular y la mitosis son un proceso
importante para el desarrollo y mantenimiento de la vida. En la práctica pudimos identificar
todas las fases de la mitosis en la vista microscópica, además se comprendió el concepto
de citogenética que nos ayuda a realizar un diagnóstico cromosómico en los pacientes
con diferentes patologías y donde vimos la importancia de los medios de cultivos que
consta de una solución que permiten el crecimiento de células, virus, bacterias o incluso
plantas pequeñas.
Bibliografía:
Megías M, Molist P, Pombal MA. (2019). Atlas de histología vegetal y animal. La célula: :
http://mmegias.webs.uvigo.es/5-celulas/1-introduccion.php
CULTIVO DE SANGRE PERIFÉRICA Y EXTENDIDO CROMOSÓMICO. (2008, 27
noviembre). [Vídeo]. YouTube. https://www.youtube.com/watch?v=RR0_iuoOZTA
Prueba de cariotipo. (2020, 3 diciembre). Medlineplus.
https://medlineplus.gov/spanish/pruebas-de-laboratorio/prueba-de-cariotipo/
15. González, R. M. (2021, 5 septiembre). El Cariotipo: ¿Qué es y para qué sirve? - El Blog
de. Genotipia. https://genotipia.com/cariotipo/
Tigres, T. D. T. (2020). Cariotipo. IB BIOTECH.
https://www.ibbiotech.com/es/info/cariotipo/