Glaeser, E. - El triunfo de las ciudades [2011].pdf
Gram
1. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO
FACULTAD DE CIENCIAS BIOLOGICAS
CIRCULO DE ESTUDIANTES DE MICROBIOLOGIA
Aislamiento e identificación de
Bacterias Gram (+)
CURSO: TECNICAS EN MICROBIOLOGIA
1
15. Colocar una
gota de H2O2
en la lamina
porta objeto
Tomar una
asada de la
muestra
Hacer una
suspensión
Cultivo de
Staphylococcus
(+) = Aparición de burbujas
(-) = No hay cambios
(+) = Aparición de burbujas
(-) = No hay cambios
15
17. El peróxido de hidrógeno se produce cuando la bacteria utiliza el azúcar
por vía oxidativa. Al ser éste un compuesto muy oxidante las bacterias la
eliminan mediante la producción de la enzima catalasa (H2O2 -> H2O +
½ O2).
El peróxido de hidrógeno se produce cuando la bacteria utiliza el azúcar
por vía oxidativa. Al ser éste un compuesto muy oxidante las bacterias la
eliminan mediante la producción de la enzima catalasa (H2O2 -> H2O +
½ O2).
CATALASA Esta enzima descompone el peróxido de
hidrógeno en oxígeno y agua.
Esta enzima descompone el peróxido de
hidrógeno en oxígeno y agua.
QuímicamenteQuímicamente
es una hemoproteína de estructura similar a la
de la hemoglobina, excepto por que los 4
átomos de hierro que posee la molécula están es
estado oxidado (Fe+++
) en lugar de reducido (Fe+
+
).
es una hemoproteína de estructura similar a la
de la hemoglobina, excepto por que los 4
átomos de hierro que posee la molécula están es
estado oxidado (Fe+++
) en lugar de reducido (Fe+
+
).
De esta manera las bacterias se protegen
del efecto tóxico del H2O2, presente en los
fagocitos como principal bactericida
De esta manera las bacterias se protegen
del efecto tóxico del H2O2, presente en los
fagocitos como principal bactericida
17
18. El peróxido de hidrógeno ;s i se deja acumular, éste puede ser
letal para las células bacterianas.
El peróxido de hidrógeno ;s i se deja acumular, éste puede ser
letal para las células bacterianas.
CATALASA
protege a los microorganismos del H2O2 tóxico
que re acumula durante el metabolismo
bacteriano y es liberado después de la
fagocitosis.
protege a los microorganismos del H2O2 tóxico
que re acumula durante el metabolismo
bacteriano y es liberado después de la
fagocitosis.
Transforma el peróxido de hidrogeno en agua y
oxígeno de acuerdo a la siguiente reacción:
Transforma el peróxido de hidrogeno en agua y
oxígeno de acuerdo a la siguiente reacción:
H2O2 ----------------> H2O + O2 (burbujas de gas)H2O2 ----------------> H2O + O2 (burbujas de gas)
18
19. Punción cardíaca
4.5 mL
0.5 mL
de
citrato
de
Sodio
3.8%
Sangre
+
citrato
de
Sodio
3.8%
Separación del
plasma
19
20. Incubar a
37 ºCCultivo puro
de S. aureus
Controlar la
aparición de
“coagulo ” a partir
de los 5 min hasta
las 24 hrs
Controlar la
aparición de
“coagulo ” a partir
de los 5 min hasta
las 24 hrs
plasma citratado
de conejo
20
24. Staphylococcu
s aureus
c
c
c
c
c
COAGULOS
DE FIBRINA
•Causa agregación del
fibrinógeno sobre S. aureus.
•Aglutinación rápida de las
células.
FIBRINOGENO
PRESENTE EN EL
PLASMA
FIBRINOGENO
PRESENTE EN EL
PLASMA
COAGUL
ASA EN
LA
SUPERFI
CIE DE
LA PRED
CELULAR
COAGUL
ASA EN
LA
SUPERFI
CIE DE
LA PRED
CELULAR
ACTUA DE
MANERA
DIRECTA
MODIFICAMODIFICA
26. Pesar 120 g de
Agar base
Disolver en 110
mL de agua
destilada
Agar Base
26
27. Licuar el
Agar base
(45 ºC)
Agregar inmediatamente
del 6 – 7 % de sangre al
medio
…..
….. Verter en
placas petri
…..
Asegurar que las
placas queden
secas antes de la
siembra
27
28. Produce una zona clara,
incolora, alrededor de la
colonia del microorganismo
por destrucción completa
de la hemoglobina.
no se produce
actividad hemolítica
o decoloración por la
colonia del
microorganismo.
Es la parcial destrucción de
los glóbulos rojos cerca de
la colonia, ejerce su acción
a nivel de la hemoglobina,
la que puede transformarse
en biliverdina o bilirrubina
de color amarillo verdoso.
28
30. β - Hemolisisβ - Hemolisis
Es una esfingomielinasa que
actua en el complejo
esfingolmielina lipocarbohidrato.
Requiere de iones magnesio y la
especificidad de sustrato esta
restringida a esfingomielina y
lisofosfatidilcolina
Es una esfingomielinasa que
actua en el complejo
esfingolmielina lipocarbohidrato.
Requiere de iones magnesio y la
especificidad de sustrato esta
restringida a esfingomielina y
lisofosfatidilcolina
La sensibilidad variable de los
eritrocitos de diferentes especies
de animales se deba a diferencias
en el contenido de esfingomielina
de la membrana
La sensibilidad variable de los
eritrocitos de diferentes especies
de animales se deba a diferencias
en el contenido de esfingomielina
de la membrana
30
31. Posteriormente la enzima
biliverdina reductasa, que
también requiere NADPH, reduce
la biliverdina a bilirrubina.
Diariamente se producen unos 300
mg de este compuesto de intenso
color amarillo que tiene como
único destino su excreción.
Posteriormente la enzima
biliverdina reductasa, que
también requiere NADPH, reduce
la biliverdina a bilirrubina.
Diariamente se producen unos 300
mg de este compuesto de intenso
color amarillo que tiene como
único destino su excreción.
El núcleo tetrapirrólico del grupo
hemo sufre la acción de la hemo
oxigenasa, un sistema enzimático
que produce ruptura entre los
anillos A y B de la protoporfirina,
liberando el hierro y dando lugar a
un tetrapirrol lineal, la biliverdina.
El sistema requiere NADPH y O2.
El núcleo tetrapirrólico del grupo
hemo sufre la acción de la hemo
oxigenasa, un sistema enzimático
que produce ruptura entre los
anillos A y B de la protoporfirina,
liberando el hierro y dando lugar a
un tetrapirrol lineal, la biliverdina.
El sistema requiere NADPH y O2.α
hemolisis
β
hemolisis
Halo
Transparent
e
Halo amarillo
verdoso
31
