Nutrición y Valoración Nutricional en Pediatria.pptx
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Mycobacterium Y Espiroquetas Teoria 4
Microbiologia y Parasitologia (Universidad Privada Antenor Orrego)
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2. Mycobacterium
•Son bacilos rectos y curvos.
•Están agrupados en amas.
•Son inmóviles.
•No poseen esporas.
•Todos son aerobios.
•Su pared es rica en lípidos: Ácido micotico
(hidrófoba). Esta característica lipídica de su pared
le permite tener resistencia con ciertos
desinfectantes.
•Colorean bien con Ziehl Neelsen: (fucsina fenicada
+calor) y resisten a la decoloración con ácidos. Se
encuentran los bacilos teñidos con fucsina
fenicada.
•Son bacilos alcohol ácido resistente.
ESPECIES
§PATÓGENAS PARA EL HOMBRE
- Mycobacterium tuberculosis
- Mycobacterium leprae
§PATÓGENAS PARA LOS ANIMALES Y AVECES
EL HOMBRE:
- Mycobacterium vovis
- Mycobacterium avium. Solo se ve en pacientes
con VIH, en estadíos avanzados de la
infección
- Mycobacterium simiae
§AMBIENTALES OPORTUNISTAS ATIPICOS:
Según la clasificación de Runyon se dividen en 4
grupos:
•Fotocromogenos: Producen pigmentos a la luz.
- Kansassi, Simiae, Marinum
•Escotocromogenos: Producen pigmentos sin
necesidad de luz.
- Scrofulaceum, gordonae.
•No cromógenos:
- Avium, ulcerans, xenopi, terrae.
•Desarrollo rápido: Poseen un crecimiento antes de
los 7 días.
- Ortuitum, phlei, smegamatis.
*Tenemos más de 350 micobacterias
M.
tubercu.
M.
bovis
M.
avium
M.
atípico
CATALASA
22°C
++ ++ ++ ++
70°C -- -- ++ ++
ÁCIDO
NICOTÍNICO
++ -- -- --
NItrato
reductasa
++ -- -- --
Antibióticos S S R R
Animal sensible Cobayo -- pollo --
- Todas las especies de mycobacterias poseen
catalasa a 22°C
- La catalasa a 26°C
- El mycobacterium tuberculosis es el único que
producen ácido nicotínico y nitrato reductasa, por
lo tanto estas características le permiten una
diferenciación bioquímica de las demás bacterias.
- En el mycobacterium bovis y el M. atípicos se evalúa
la sensibilidad con el conejo.
MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS
¿Qué nos ocasiona?
- Nos genera la tuberculosis, la cual es una
enfermedad muy antigua. hay hallazgos
patológicos en los huesos de la edad piedra
- Villain(1965) y Laenec (1882) describen la clínica
de la enfermedad
- Robert Koch (1882) descubre y cultiva el bacilo
- Calmette y Guerin (1921): Se descubrió la vacuna
del BCG. La vacuna de la BCG se le inyecta a los
recien nacidos y protege de las infecciones por
tuberculosis severa como la Tuberculosis meníngea
y tuberculosis miliar.
- Wakman (1946) planteó el tratamiento con
estreptomicina. Es un medicamento de primera linea.
ESTRUCTURA DEL MYCOBACTERIUM
Forma:
•Son bacilos rectos o curvados, con las medidas de
0.2 a 0.6 x 1 a 10 micrometros
•No posee flagelo
•No posee cápsula ni esporas.
Estructura:
•Pared rodeada de lípidos (dentro de los lípidos de
la pared está el Ácido micólico) y proteínas (Ácido
glutámico y diaminopimélico). Estas proteínas son
inmunogénicos, a partir de estas proteínas se va a
formar el derivado proteico purificado(PPD). El PPD
permite saber si hay presencia de la bacteria, pero
no se desarrolla la enfermedad, a esta etapa se le
conoce como la etapa de infección o presencia
de estado latente.
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3. •Posee fosfolípidos que inducen a la necrosis.
CARACTERÍSTICAS
- Es una bacteria aerobia estricta
- Produce ácido nicotínico
- Produce nitrato reductasa
- Produce la enzima catalasa solo en temperaturas
ambiente (22°C)
- Es de crecimineto lento. Se multiplica de cada 15
a 18 horas
RESISTENTE
- Desecación: 10 en áreas contaminadas 6 meses en
esputo protegido del sol.
- Inactivo por años en los tejidos.
- A los agentes químicos: Desinfectantes, ácidos y
bases fuertes (Hidrófobo). Es resistente a los
desinfectantes debido a la característica
hidrofóbica de su pared.
SENSIBILIDAD
- Al alcohol.
- A los rayos UV: Por dos horas al sol o por 24 horas
en la sombra.
- A temperaturas elevadas: Muere en la
pasteurización (62°C)
CULTIVO DE MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS
PRUEBA GOLD ESTÁNDAR:
- La prueba Gold estándar es la mejor prueba que
se tiene para el diagnóstico de Tuberculosis.
- Requiere de medios muy nutritivos (aminoácidos,
glicerol y lípidos)
CULTIVOS EN MEDIO SÓLIDO:
- Lowenstein y Jensen contiene Huevos, papa y
glicerina, se desarrolla a 2,3 a 4 semanas a 37°C:
Se forman colonias rugosas y cremosas
- Ogawa contiene huevos y Ácido glutámico
(conocido como “Ajinomoto”). Se desarrolla en 7
días, aunque es relativo debido a que el
crecimiento se puede ver a partir del día 10
CULTIVO EN MEDIO LÍQUIDO:
- Middlebrook: sales inorgánicas y aminoácidos.
Desarrolla en siete días. En los medio líquidos es
desarrollo es más rápido.
PATOGENIA
- Patógeno para el ser humano (reservorio)
- Casi todos sus constituyentes son antigénicos.
- No produce endo ni exotoxinas.
- La gotitas que contienen a la bacteria van a
ingresar a los alveolos pulmonares, dentro del tejido
de los alveolos hay macrofagos que se van a
encargar de eliminar a el Mycobacterium
tuberculosis, pero lo que hace la hábil bacteria es
utilizarlo para desarrollarse.
- Tiene capacidad para multiplicarse dentro de los
macrófagos (impide unión del fagosoma con el
lisosoma)
- Una vez que las bacterias se han introducido en los
macrofagos, estos se sensibilizan. Los macrófagos
sensibilizados secretan citocinas: interleucina(IL 10
o IL 12) y factor de necrosis tumoral alfa, las que
incrementan la inflamación.
- El factor cordón (micolato de trehalosa el cual es
un Glucolípido) forma agregados de bacterias
como cordones. Virulencia. Inhiben migración de
leucocitos.
- El factor cordón positivo es propio del M.
tuberculosis.
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4. - Produce sulfatides (sulfoglicolípidos) que
promueven la supervivencia intracelular
- Los Linfocitos T estimulados, liberan interferón
gamma (IGRA) que contribuye a la necrosis tisular,
además nos permite determinar si existe infección
latente. La infección latente es cuando posee la
bacteria dentro del organismo pero no se
desarrolla la enfermedad. Es recomendable que
este tipo de pacientes también se le de
tratamiento.
- Las proteínas de la pared del bacilo juegan un
papel importante en el estado de hipersensibilidad
retardada e Inmunidad celular. Apartir de estas
proteínas se deriva el BPD.
INICIO:
Los BK son fagocitados por macrófagos
a. Si son destruido hay SALUD
b. Si se multiplican se produce la INFECCIÓN
(factor Cord, Öxido nítrico, Fagossomas/lisosomas)
RESPUESTA CELULAR: Se produce por los
macrofagos sensibilizados
a. pro-inflamatorios: IFγ, FNTα, IL12, destruyen los
bacilos produce la Infección latente (SALUD)
b. anti inflamatorios: FNTβ, IL 10, defecto de
receptores, escasos mediadores pro-Inflamat.
No se controla multiplicación bacteriana:
ENFERMEDAD
INFECCIÓN TUBERCULOSA
PRIMARIA: Transmisión aérea se presenta en un 97%.
En este tipo de infección muchas veces el virus se
instala en el pulmón pero no pase nada más.
SECUNDARIA O REINFECCIÓN:
- Endógena: a partir de focos inactivos. Es cuando
tenemos la bacteria dentro de nuestro organismo y
de un momento se active y produzca la infección.
- Exógena: por contagio. En éste caso los
macrófagos son más activos y la hipersensibilidad
induce al tejido a la caseificación, formando
lesiones focales.
- La más frecuente es la T. secundaria. Se diferencia
de la primaria por la ubicación en donde lesiona.
Este se ubica en la zona posterosuperior del
pulmón. Se puede encontrar las lesiones como
cavernas.
- La infección primaria se ubica mayormente en el
lóbulo medio y lóbulo inferior del pulmón. Este tipo
de infección también se ve en pacientes con un
cuadro de inmunosupresión.
DIAGNÓSTICO DE INFECCIÓN POR
MYCOBACTERIUM
1. EXAMEN MICROSCÓPICO: Frotis coloreado
con Ziehl-Neelsen
Frotis coloreado con auramina fluorescente. Se lee a
20X. Este tipo de tincion abarca marca más campo.
2. CULTIVO: Aislamiento primario. Sirve para el
diagnóstico de la bacteria. El más usado es el
cultivo por Gold standard.
•Recolección de muestra (esputo primero de la
mañana, orina de 24 horas, secreciones )
•Concentrar y Homogenizar la muestra
(centrifugación)
•Descontaminación de gérmenes de desarrollo
rápido usando NaOH, fosfato o acetilcisteina(solo
se usa cuando es una muestra muy purulenta).
•Siembra por inundación.
•Desarrollo en 15 a 30 días.
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5. •Uso de medios de cultivo con C radioactivo, pero
no se usa mucho actualmente; sino que se utiliza
medio de cultivo líquidos con un caldo nutritivo
llamada Middlebrook. Este tipo de caldo favorece
el crecimiento de la bacteria en menor tiempo(7 a
10 días).
•Prueba MODS: Observación microscópica del
cultivo. Esta prueba consta de un placa con 6
pocillos en cada fila, y posee 6 columna en donde
cada columna consiste en un paciente. En los
pocillos A y B deben haber crecimiento si no hay
crecimiento en los dos se puede decir que es
negativa. Tiene que haber crecimiento en los dos
para considerarlo una prueba positiva. Luego de
confirmar que es positivo se procede a ver los
pocillos que contienen a los antibioticos
(isonionacida y rifampicina), en donde lo normal es
no observar crecimiento en estos pocillos. si se
observa crecimiento en estos pocillos seria clave
de que la bacteria está haciendo resistencia. Si la
bacteria tiene resistencia a Rifampicina es muy
probable que también sea resistente a
isonionacida.
Si la bacteria es resistente ambas bacterias se le
denomina multidrogoresistente.
*DATO: En medios de cultivo sólidos para ver la
positivada es a partir del dia 14 y para decir que es
un cultivo negativo es luego de los 2 meses; en medio
de cultivo líquidos la positividad puede ir desde el dia
7 o dia 10 y para decir que es un cultivo negativo es
a partir del día 42
3. Técnicas moleculares de PCR de moléculas:
El aparato posee la prueba de detección de
M. tuberculosis resistente a rifampicina. Para
hacer la detección de la resistencia de
rifampicina es la identificación de la mutación
del gen rpob1. La prueba molecular tiene el fin
de encontrar la secuencia IS1081 Y IS6110,
debido a que es la secuencia de M.
tuberculosis.
4. GENOTYPE: Son ensayos de sonda en línea. La
muestra es a partir de los cultivo en donde se
llevan a un laboratorio el cual trabajara con la
cepa, quien se le va a extraer el ADN, una vez
extraído el ADN se lo lleva a un termociclador
para hacer el proceso de detección.
Posteriormete si se quiere saber si se llego a
amplificar o no se pone el producto del
termociclador en unas tiras de nitrocelulosa.
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6. 5. INMUNOLÓGICO: Reacción de Mantoux
(tuberculina) PPD
•Antigua: extracto de cultivo hervido de
Mycobacterium tbc
•Actual PPD, derivado proteico del purificado
Se inyecta 1 dosis = 5 Unidades = 0.0001 mg de
proteína, contenidos en 0.1 ml
luego de la inyecciones se investiga infección.
- Prueba de interferón gamma, se trabaja con
técnicas de ELISA o SPOT debido a que se extrae
de la sangre, esta prueba nos van a dar valores
cuantitativos que nos permiten saber si tiene o no
la infección latente.
TEST DE TUBERCULINA: MÉTODO DE MANTOUX
Se inserta la jeringa de tuberculina y se forma la papula
que luego de 48 a 72 horas se hace la lectura,
deacuerdo de la interpretación se va a determinar
que grupo es. Por ejemplo si es un PPD >= 10 es
positivo, pero si no son personal de salud sera un
PPD>= 15 para que sean diagnosticados como
positivo; en los paciente con inmunosuprimido debe
tener una PPD> 5 para ser positivo.
PREVENCIÓN DE INFECCIÓN DE
MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS
VACUNA BCG:
- Cultivo de Mycobacterium bovis atenuado
- Nos protege de la T. miliar y T. Meningea
RESISTENCIA A LOS ANTIBIÓTICOS
•ISONIONACIDA
Gen kat G codifica catalasa que activa el
antibiótico.
Gen inh A codifica reductasa para síntesis de pared
•RIFAMPICINA
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7. Gen rpo B codifica fracción de
polimerasa:..transcripción
•ETAMBUTOL
Gen rmb B codifica transferasa para sintesis de pared
•ESTREPTOMICINA
Gen rrs y rps L relacionando con ribosoma 30 S para
sintesis de proteínas
•PIRAZINAMIDA
Gen pns A codifica pirazinamidasa para activar el
antibiotico.
*Todos estos medicamentos son drogas de primera
linea.
Mycobacterium leprae
•Es una enfermedad muy antigua, bíblica y de
distribución mundial
•Hensen descubre el bacilo en el año 1873 por eso
también se le conoce como Bacilo de Hensen,
•1960 se hace la inoculación experimental de la
almohadilla plantar del armadillo y ratón LEPRA
EN PERÚ
•Leprosería en San Pablo, en el río Amazonas,
hacia la frontera con Brasil
•Se dice que aun hay casos de lepra en Ucayali
MORFOLOGÍA
-Bacilos rectos o curveados de 1 a 8 mμ
-Están agrupados en masas.
-Son intracelulares.
-Son bacilos ácido alcohol resistentes.
CULTIVO
- No cultivable en medios inertes ni celulares.
- Se desconocen propiedades fisiológicas y las
evaluaciones terapéuticas son in vivo.
- Solo se puede diagnosticar por medio de
antecedentes epidemiológico.
PATOGENIA
a. El hombre es el huésped natural.
b. Es endémico en el armadillo
c. La enfermedad es prevalente en zonas
tropicales: factores étnicos, socio económicos
(hacinamiento) y genéticos.
d. Tiene poca Infectividad (se estiman cinco años
de contacto)
e. Transmisión: contacto de una persona a otra,
disemina por inhalación aerosoles infecciosos o
contacto cutáneo con secreciones respiratorias
o contacto de heridas.
f. La presentación clínica está en relación a la
respuesta inmune.
El M. Lepra posee dos presentaciones:
LEPRA TUBERCULOIDE
- Respuesta de hipersensibilidad 3+
- Forma benigna: manchas violáceas en el
tronco. Lesiones neurológicas periféricas que
ocasionan anestesia.
- Histología: granulomas con células gigantes
epitelioides y linfocitos. Escasos bacilos
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8. LEPRA LEPROMATOSA
-Sin respuesta celular (anergia)
-Forma maligna y muy contagiosa, pápulas
infiltradas en cara y orejas.
-Cambios tróficos en extremidades (telescopaje)
-Histología: Presencia de histiocitos y pocos
linfocitos y hay numerosos bacilos dentro de los
macrófagos.
-Posee alta cantidad de bacilos.
Diagnóstico
a. Frotis y coloración Z-N de mucosa de tabique
nasal.
b. Frotis y coloración Z-N de incisión raspada de
piel o pápula infiltrada.
c. Biopsia de piel y/o nervio periférico
Prevención:
- Inmunizar con BCG
- Tratamiento
- Dapsona + Rifampicina
- Clofacimina
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9. Espiroquetas
•Bacterias en forma de espiral, que pueden tener
hasta 250 mu de largo.
•Móviles por fibrillas axiales endocelulares,
movimientos: rotación, flexión y helicoidal.
•Gram negativas pero tiñen débilmente, se observan
en campo oscuro. Coloreadas con Vagó o
Wright(Se usa en los hemogramas)
•Se multiplican por fisión binaria transversal.
•Tres géneros: Leptospira, Borrelia y Treponema
LEPTOSPIRA
Habitad:
- Distribución mundial
- Animales domésticos y salvajes de zonas templadas
y tropicales
- En aguas estancadas (pantanos).En la zona de la
selva se puede contagiar más de leptospira.
Forma:
- Muy finas (lepto) 6 a 20 mµ de largo y 0.1µ de
ancho
- Dos flagelos periplásmicos a todo lo largo
- Un extremo doblado (gancho)
- Es móvil por rotación
Fisiologia:
- Es un bacteria aerobia estricta
- Se cultiva en medio con acidos grasos de cadena
larga y suero de conejo
- Se desarrolla lento de 26 a 30 °C (1 a 4 meses)
- La prueba que más se usa es la prueba de
anticuerpos.
ESPECIES
- Interrogans: Es patógena
- Biflexa: Es saprofita
Ambas poseen numerosos serogrupos.
PATOGENIA
“Enfermedad de Weil” (ictero hemorragica)
- Los animales enfermos (roedores y perros) eliminan
leptospiras por la orina. Esta orina se deposita en
las alcantarillas. Las persona que ande por ahí y
posee una herida en el pie puede infectarse con
esta bacteria.
- El hombre se contagia por heridas en la piel o
mucosas. Se disemina por sangre a todos los
órganos.
- Bacteremia, “vasculitis sistémica”, fiebre, disfunción
hepática (ictericia), hemorragia y meningitis.
- Se puede confundir con otras fiebres virales como
Fiebre amarilla, chikungunya, dengue, por lo tanto
hay que hacer la detección de estas infecciones.
Diagnóstico:
- Directo: microscopía en campo oscuro o
fluorescencia directa de orina
- Cultivo de sangre, LCR (se coloca en los 7-10
días) y la orina se pide (después de primera
semana): desarrollo lento (hasta 4 meses)
- Inoculación en conejo
- Anticuerpos aglutinantes.Es el que más se utiliza
- Técnicas moleculares: PCR
Tratamiento:
- Penicilina (tratamiento)/ Doxiciclina (Profilaxis)
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10. Borrelia
- Enfermedad transmitida por garrapatas y piojos.
- La última epidemia de fiebre recurrente se presentó
en la segunda guerra mundial.
- Distribución mundial.
- Especies: B. Recurrentis y B. burgdorferi. Son las dos
especies más patogenas.
BORRELIA RECURRENTIS
Forma:
- Espirales irregulares con 8 a 30 mu de largo
- Fibrillas axiales: 15 a 20.
- Móvil por flexión y rotación.
- Se colorea con wright.
Fisiología:
- Microaerófilos
- Sensible a la desecación y radiaciones UV
- Cultiva en medios con suero de conejo y sangre,
poseen un desarrollo lento.
PATOGENIA - LA FIEBRE RECURRENTE
FIEBRE RECURRENTE ENDÉMICA: Es producida por
distintas clases de borrelia.
•Vector: garrapata blanda
•Reservorios: roedores, pequeños mamíferos y
garrapata blanda.
•La Borrelia invade y se elimina por saliva y excretas.
Infecta a los roedores y humanos.
•Hay varias especies de borrelia.
FIEBRE RECURRENTE EPIDÉMICA: Esta es producida
por la Borrelia Recurrentis.
•Vector: el piojo del cuerpo
•Reservorio: el hombre
•El piojo del cuerpo, transmite de hombre a hombre
•En el piojo sólo invade la hemolinfa.
•No se transmite por picadura ni excretas.
•Sólo se transmite al aplastar el piojo.
Clínica:
- Similar en ambas: Períodos febriles de 3 días
(bacteriemia) con mialgias, petequias,
hepatoesplenomegalia.
- Períodos sin fiebre de 5 a 10 días.
Diagnóstico:
- Frotis sanguíneo en periodos febriles y búsqueda
de espiroquetas. (fluorescencia directa)
- Indirecto: Detección de anticuerpos por ELISA
(reacciones cruzadas con Lues). Si posee sífilis
puede dar falsos positivos con Borrelia Recurrentis.
El diagnostico indirecto es el más usado
Tratamiento:
- Tetraciclina, cloranfenicol, penicilina
BORRELIA BURGDORFERI
- Esta borrelia se encuentra distribuida en América
del Norte, Europa y Asia.
- Desde el año 1977 se reconoce como causa de
la “enfermedad de Lyme”
- Espiroquetas muy largas (30mu)
ERITEMA MIGRATORIO: Lesiones eritematosas
causado por la B. Burgdorferi.
PATOGENIA
Transmitida por una garrapata dura (ixode),
I. Local: se produce eritema en la zona de picadura.
II. Diseminación hematógena: semanas después
aparecen eritemas en otras áreas: muslos, espalda
(eritema migratorio)
III. Tardías: meses después localización migratoria y
afecta las articulaciones y el sistema nervioso.
Diagnóstico:
- Serología: Elisa, Western Blot (mas especifica)
Tratamiento:
- Amoxicilina, Doxiciclina
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