Las enterobacterias

LAS ENTEROBACTERIAS
Las
Enterobacterias
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LAS ENTEROBACTERIAS
1. Introducción
Es ésta una de las familias de mayor importancia médica dentro de los bacilos Gram negativos
no exigentes. Comparten algunas características tales como poseer en su pared externa un
lipopolisacárido (LPS), que les otorga características patogénicas particulares, tóxicas, la llamada
endotoxina de las bacterias Gram negativas.
La bacteriología actual, es un ente cainbiante, lo que ayer se llamaba de una forma, hoy recibe
otro nombre. Esta dinámica responde a un mejor entendimiento de las especies bacterianas y a un
auge en la manera de identificar las especies, sub especies y biogrupos.
Los bacteriólogos cuentan con nuevas y mejores armas en la identificación clara de las especies
bacterianas más importantes en la práctica hospitalaria y privada. Sin duda alguna, esto se ve
reflejado de manera muy especial, en las infecciones intrahospitalarias, donde las posibilidades de
identificación de un organismo determinado se han incrementado de forma importante, tal es el
caso de la técnica de electroforesis en campos pulsados.
En otro orden de cosas muchas enterobacterias son ubicuas, encontrándose muy difundidas entre
los animales y la naturaleza, pudiendo causar enfermedad en el hombre y los animales como es el
caso de Salmonella; otras aunque bien adaptadas al medio ambiente son patógenas humanos
exclusivos por ejemplo Vibrio cholerae y por último otras se encuentran bien adaptados a su
huésped, como por ejemplo, Shigella. Merecerá sin duda un párrafo especial Escherichia coli en
el marco del Síndrome Urémico Hemolítico que más tarde describiremos.
Algunos de estos bacilos Gram negativos poseen atributos de virulencia bien definidos,
comportándose como patógenos primarios, Yersinia pestis, Salmonella typhi, responsables de la
Peste y la Fiebre Tifoidea respectivamente. Otros tales como Acinetobacter y Pseudomonas
producen infecciones oportunistas.
Las Enterobacterias con frecuencia residen en el colon del hombre sin causar enfermedad.
También colonizan normalmente otros nichos ambientales con los que pueden entrar en contacto
los pacientes hospitalizados.
Debido a su ubicuidad dentro y fuera del cuerpo a menudo causan infecciones oportunistas en
pacientes debilitados. Como grupo las enterobacterias son las responsables de una tercera parte
de los aislamientos en las bacteriemias, de dos tercios de los aislados en gastroenteritis, y de tres
cuartas partes de los aislamientos en infecciones del tracto urinario. Uno de estos organismos,
Escherichia coli, es también la causa más frecuente de infección urinaria y de gastroenteritis
bacteriana en individuos sanos
Estos organismos pertenecen a la familia Enterobacteriaceae que consta de varios géneros
expuestos en las siguientes tablas:

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LAS ENTEROBACTERIAS
Clasificación por géneros de las Enterobacterias
Escherichia
Shigella
Klebsiella
Enterobacter
Hafnia
Serratia
Proteus
Morganella
Providencia
Salmonella
Yersinia
Edwardsiella
Citrobacter
Erwinia
Clasificación de Bacterioides no considerados
como Enterobacterias clásicas
Pseudomona
Kluyvera
Cedecea
Moellerella
Rahnella

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Algunos de éstos como Shigella, Salmonella o Yersinia, tienen una serie de peculiaridades
clínicas por lo que serán discutidos en otra sección. Desde el punto de vista microbiológico las
enterobacterias se caracterizan porque no forman esporas, son capaces de crecer tanto en
aerobiosis como en anaerobiosis (es decir, son anaerobios facultativos), fermentan la glucosa, no
producen oxidasa, y tienen una movilidad variable (dependiendo de la presencia o no de flagelos).
Las enterobacterias poseen una membrana interna (citoplasmática), una cubierta de
peptidoglicano que la rodea, y una compleja membrana externa (pared celular) que comprende la
cápsula y que contiene lipopolisacáridos y porinas (canales para la penetración de antibióticos y
nutrientes).
ENTEROBACTERIA PATOGENATIPO
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Es de destacar que algunos de ellos como Escherichia coli forman parte de la flora normal del
tubo digestivo y permanecen en él sin causar enfermedad siempre y cuando no se modifiquen las
condiciones de su hábitat. Aquí, en éste trabajo bibliográfico, se hará énfasis en aquellos géneros
y especies que se encuentran más frecuentemente relacionados con la patología humana y animal,
en el marco de las ETA (Enfermedades transmitidas por los alimentos).
Se utilizan como un indicador de calidad microbiológica para alimentos que hayan recibido
tratamientos determinados para hacerlos inocuos. Su presencia en un número significativo,
indicará un fallo y consecuentemente un riesgo para el consumidor.
Esta singular familia comprende un número muy variado de géneros y especies bacterianos cuyo
hábitat natural es el tubo digestivo del hombre y los animales. No todos los bacilos Gram
negativos que tienen este hábitat forman parte de la familia Enterobacteriaceae.
Se los encuentra también en el suelo, agua, frutas, vegetales y otras plantas. La familia está
definida por un conjunto de características fenotípicas (bioquímicas, fisiológicas e
inmunológicas) a las que se han agregado posteriormente otros elementos establecidos por
técnicas de hibridización de ácidos nucleicos que miden distancias evolutivas y han definido
mejor la interrelación de todos los microorganismos integrantes de la familia.
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Son bacilos Gram negativos rectos, con un diámetro de 0.3 a 1.5 micras. Si son móviles,
presentan flagelos perítricos. No forman esporos. Desarrollan en presencia o en ausencia de
oxígeno (aerobios-anaerobios facultativos). Desarrollan rápidamente en medios simples, no
siendo exigentes desde el punto de vista nutricional.
Algunos desarrollan en glucosa o lactosa como única fuente de carbono, mientras otros requieren
el agregado de vitaminas y/o minerales en el medio de cultivo. Son quimioorganótrofos, poseen
metabolismo fermentativo y respiratorio. Son catalasa positivos y oxidasa negativos; reducen los
nitratos a nitritos. En los medios de cultivo forman colonias lisas, convexas y circulares de bordes
definidos. Algunas especies desarrollan colonias más mucoides que otras (por ejemplo
Klebsiella).
Los bacilos Gram negativos que integran esta Familia pueden identificarse por medio de la
expresión fenotípica de algunos caracteres genéticos y los métodos utilizados tienen como
principio:
a.La investigación de la fermentación de azucares o alcoholes en un medio peptonado con el
agregado de un indicador de pH para detectar la producción de metabolitos ácidos.
b. La investigación de la utilización de un substrato como única fuente de C.
c. La investigación de producción de ciertas enzimas sobre substratos generadores de color.
d.La investigación de la producción de un metabolito, producto final característico de una vía
metabólica.
e. La investigación de la aptitud de desarrollar en presencia de un inhibidor.
Los microorganismos pertenecientes a la Familia Enterobacteriaceae poseen una estructura
antigénica compleja. Los antígenos O, o antígenos somáticos, son la parte más externa del LPS y
están formados por unidades polisacarídicas repetidas. Algunos contienen un único azúcar. Son
termoestables y alcoholestables detectándose por aglutinación simple.
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La naturaleza de los grupos terminales y el orden en que estos azucares están dispuestos en las
unidades repetitivas determina la especificidad de los numerosos antígenos O. Un mismo
microorganismo puede poseer varios antígenos O. Cada género está asociado a grupos
antigénicos específicos, por ejemplo la mayoría de los serotipos de Shigella comparten uno o más
antígenos O con E. coli (Shigella y E. coli pertenecen al mismo género). Por otra parte E. coli
puede tener reacciones cruzadas con especies de los géneros Klebsiella y Salmonella. En E. coli
algunos antígenos somáticos están asociados con fenotipos virulentos específicos, por ejemplo E.
coli O:111 y O:119 son frecuentemente agentes etiológicos de diarrea aguda en los niños
pequeños.
Los antígenos K son externos a los antígenos O. Algunos constituyen una verdadera cápsula
visible al microscopio como sucede con Klebsiella, mientras que en E. coli por ejemplo su
estructura no es visible al microscopio óptico y se los denomina antígenos de envoltura por
comportarse como si envolvieran la bacteria volviendo inaglutinable el antígeno O de la pared.
Son de naturaleza polisacarídica. Otros antígenos de envoltura pero de naturaleza proteica se
presentan como fimbrias.
Los antígenos H, flagelares, son de naturaleza proteica. Esta proteína que constituye los flagelos
es llamada flagelina. Este antígeno es termolábil y destruido por el alcohol. El contenido de
aminoácidos y el orden en que estos se encuentran en las flagelinas determina la especificidad de
los diversos antígenos.
Como ya fue mencionado los flagelos bacterianos están compuestos de un solo tipo de proteína.
En Salmonella existe variación de fase. Como resultado de ello, la proteína flagelar puede ser de
dos tipos por medio de un mecanismo de regulación genética (inversión sitio específico), que
involucra:
a. Dos genes que codifican las dos proteínas, pero solo uno se expresa en cada momento;
b. Un gen represor de uno de estos genes y
c. La inversión de un segmento de DNA que modifica la dirección de la transcripción.
Se ha asociado a cepas de Enterobacteriaceae con: abscesos, neumonías, meningitis, septicemia,
infecciones de heridas, infecciones urinarias e intestinales. Son el componente mayor de la flora
normal intestinal, pero son relativamente poco frecuentes en otros sitios del organismo. Algunas
especies son importantes como causa de infecciones nosocomiales.
Por otra parte salvo Shigella que raramente causa infecciones fuera del tracto gastrointestinal
muchas especies de Enterobacteriaceae causan frecuentemente infecciones extraintestinales.
Escherichia coli junto a otras especies de incidencia excepcional, forma el género Escherichia.
Constituye la especie dominante de la flora aerobia del tubo digestivo, más de 10 serotipos
coexisten normalmente en el mismo individuo.
Son estas mismas bacterias integrantes de la flora normal las que pueden causar en diversas
circunstancias infecciones urinarias, septicemias, meningitis etc.

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El poseer determinadas características antigénicas, como el antígeno de envoltura K1, muy
parecido por su composición en ácido siálico al antígeno capsular de Neisseria meningitidis del
grupo B, daría a este germen potencialidades invasivas. 80% de E. coli aisladas de meningitis del
recién nacido poseen este antígeno K1.
Por otra parte el poseer plásmidos que portan genes que codifican para la producción de
diferentes adhesinas, enzimas o enterotoxinas otorga a E. coli características patogénicas
particulares y la capacidad en una u otra circunstancia dependiendo de la o las proteínas
producidas de dar infecciones urinarias o gastrointestinales.
Desde el punto de vista antigénico en E. coli se han descrito más de 150 serotipos O. Poseen
antígenos de envoltura polisacarídicos K, que como es habitual en el mundo bacteriano permiten
a la bacteria resistir más fácilmente la fagocitosis que las bacterias no capsuladas. Asimismo se
describen más de 56 antígenos H. De lo dicho se desprende que una tipificación antigénica
completa es resorte de laboratorios especializados y no forma parte del trabajo corriente de los
laboratorios.
Pueden ser móviles; las que lo son será por flagelación peritríca. Pueden presentar fimbrias,
pudiendo adherirse así a las mucosas; éstas pueden ser sexuales (intercambian información
genética). Puede producir una toxina, la Bacteriocina, que es liberada al medio externo e inhibe el
crecimiento de bacterias de otras especies.
Son activas fermentadoras de la glucosa, aunque también lo pueden ser de otros azúcares, como la
lactosa; esta familia las clasificaremos según su capacidad de fermentar la lacosa ó no:
a. Coliformes: capaces de fermentarla.
b. No coliformes: no la fermentan.
Existen infinidad de medios de cultivo y pruebas bioquímicas para su identificación y
clasificación; ejemplo: Agar McConkey, Agar de hierro Kigler, Catalasa y, Oxidasa, entre otros
(la prueba de la oxidasa es importante a nivel taxonómico, ya que mide la presencia del citocromo
c en la cadena de transporte de electrones). Además de las pruebas vistas en prácticas, existe una
batería de pruebas, llamada: Batería IMViC, usada para la clasificación de enterobacterias. Los
pasos de la batería son los siguientes:
I: Prueba del Indol; aquí se determina si una bacteria es capaz de transformar el triptófano en
indol, y para que lo pueda realizar, tiene que tener el complejo enzimático Triptofanasa. La
E.Coli posee esta enzima.
M: Prueba del Rojo de Metilo; es para ver si realiza la fermentación ácido-mixta; en ésta se pasa
de glucosa—pirúvico—ácidos (láctico, succínico, etanol, fórmico, acético). La relación ácidos:
neutros es de 4:1. Debido a la existencia de la enzima Hidrogenoliasa fórmica, el fórmico pasa a
CO2 e H2, teniendo que la relación de CO2:H2 es de 1:1.

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V: Determina si la bacteria lleva a cabo la fermentación Butanodiólica ó Butilendiólica. La V
procede del investigador: Voges – Proskauer. El producto mayoritario de esta fermentación es el
2,3-Butanodiol (neutro); como productos minoritarios también están el etanol y algún ácido.
La relación ácidos: neutros es de 1:6, y la relación de CO2:H2 es de 5:1, ya que en el paso de
pirúvico a 2,3-butanodiol se produce CO2. La fermentación ácido-mixta y la butanodiólica son
incompatibles. Existen 4 tipos de fermentaciones, típicas de enterobacterias:
a. Acido-mixta: Con producción de gas y Sin producción de gas.
b. Butanodiólica: Con producción de gas y Sin producción de gas.
iC: Prueba del Citrato. Esta prueba posee importancia taxonómica, ya que muestra si la bacteria
es capaz de utilizar el citrato como fuente principal de C. Para que la enterobacteria pueda usar el
citrato, tiene que poseer en su membrana una permeasa que permita la entrada del citrato. Para
realizarla, sembramos la bacteria en un medio que tenga sólo como fuente de C el citrato.
En algunas situaciones una persona puede infectarse con alguna de estas bacterias
enteropatógenas y no sufrir ninguna enfermedad, es decir en este caso se trata de una infección
asintomática, en la cual el patógeno se multiplica a nivel intestinal y es excretado junto con las
deposiciones, pero el sujeto no tiene síntomas. Este fenómeno es importante desde el punto de
vista epidemiológico porque la excreción asintomática pasa inadvertida y este sujeto disemina el
patógeno al ambiente y eventualmente lo puede transmitir ya sea a través de manos contaminadas
o contaminación de alimentos, a otros sujetos susceptibles que pueden presentar enfermedad.
Otra condición biológica interesante de señalar es la portación por periodos más o menos largos
de un patógeno bacteriano entérico. En este caso, después de una infección intestinal
generalmente sintomática, no se logra la erradicación del patógeno a nivel intestinal y aunque se
superan los síntomas, continua la excreción por periodos que pueden durar semanas, meses o
años. Los portadores junto con los pacientes asintomáticos explican la mantención de estos
patógenos dentro de una comunidad.
Un concepto importante de subrayar es que fuera del tracto gastrointestinal, enterobacterias
comensales del intestino pueden producir infecciones. Un buen ejemplo de ello es la
participación de E. coli como principal causa de Infección Urinaria, una patología infecciosa muy
frecuente principalmente en mujeres en la etapa activa de la vida. En este caso cepas de E. coli
del intestino, colonizan el periné, la uretra y son capaces a ascender hasta la vejiga donde se
multiplican activamente y provocan una respuesta inflamatoria. En otro tipo de pacientes como
son los niños recién nacidos y los ancianos, quienes no tienen sus mecanismos de defensa muy
eficientes, E. coli y otras eneterobacterias comensales del intestino como Klebsiella, pueden pasar
a la sangre y provocar focos de infección a distancia como meningitis.
Por último, un concepto también importante de enfatizar es el hecho que algunas especies dentro
de esta Familia tienen como hospedero exclusivo al hombre, como es el caso de Salmonella typhi
y Shigella. En cambio otras tienen un amplio reservorio animal y se transmiten en forma natural
de los animales al hombre, es decir son zoonóticas, entre ellas tenemos varios tipos de

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Salmonella, E. coli enterohemorrágico y Yersinia enterocolítica. En el caso de patógenos
zoonóticos, para un efectivo control de estas infecciones es necesario un enfoque
multidisciplinario.
El lipopolisacárido de la pared celular comprende una zona más interna denominada core, que
contiene la molécula del lípido A de la que depende la actividad biológica de la endotoxina,
responsable de la producción del shock endotóxico característico de estas bacterias. En la parte
más externa se encuentra el lipopolisacárido que constituye el antígeno O, que está constituido
por una serie de cadenas laterales repetidas de polisacáridos unidos al core. El antígeno O tiene
una gran homología entre todas las enterobacterias.
Estos antígenos O se encuentran en las cepas «lisas» y les confiere una morfología que permite
distinguirlas de las «rugosas» (términos que se refieren al aspecto de las colonias). Junto con
otros factores, la presencia de antígeno O media la resistencia bacteriana al efecto bactericida del
suero normal. Los aislados resistentes a la acción bactericida del suero son capaces de sobrevivir
más tiempo en sangre y por tanto de causar infecciones hematógenas, diseminadas y más severas.
Existen tres tipos de antígenos de superficie que sirven para serotipar e identificar a las
enterobacterias: a) el ya mencionado antígeno somático o antígeno O, b) el antígeno flagelar o
antígeno H, y c) el antígeno capsular o antígeno K.
En ciertas especies como en E. coli, la presencia de un determinado antígeno O, H y K determina
la patogenicidad de una cepa. Así, ciertos antígenos O actúan como factores de
adhesión/colonización necesarios para la producción de infección urinaria, otros actúan como
factores de colonización y como toxinas que causan gastroenteritis, y otros participan en el
desarrollo del síndrome hemolítico urémico.
Los antígenos H, que son proteínas encontradas en los flagelos de estas bacterias están también
ligados a la producción del síndrome hemolítico urémico (por ejemplo, serogrupo O157:H7) y
podrían ser responsables de la capacidad de progresión de las enterobacerias a través de las vías
urinarias. Por último, los antígenos K son polisacáridos ácidos situados en la superficie celular.
Algunos de ellos como el antígeno capsular K1 de E. coli se asocian con el desarrollo de
meningitis neonatal, bacteriemia e infección urinaria.
Otros factores de virulencia lo constituyen las fimbrias o pili, que son prolongaciones
filamentosas que permiten la adherencia de las bacterias a receptores específicos de las células
mucosas y epiteliales de las vías respiratorias, digestivas y genitourinarias. Tal unión o adherencia
es extraordinariamente selectiva. Así, las fimbrias o pili del tipo I, que son muy comunes y se
hallan en multitud de cepas de E. coli, Klebsiella spp. y Salmonella spp., se unen específicamente
a receptores que contienen manosa.
Otro factor de virulencia que contienen las enterobacterias son los plásmidos, fragmentos de ADN
extracromosómico transmisibles de bacteria a bacteria, no siempre de la misma especie, que
permiten transmitir la resistencia a antibióticos (plásmidos R) o la producción de toxinas.

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Escherichia sp
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2. Género Escherichia:
Como ya fue mencionado E.coli puede integrar la flora normal, causar diarrea, infección
urinaria, meningitis, etc. Pero una cepa que causa diarrea no causara infección urinaria ni
meningitis. La versatilidad de este microorganismo esta dado porque E.coli ha adquirido
conjuntos diferentes de genes de virulencia. Es el indicador sanitario por excelencia.
E.coli es un excelente ejemplo de que el poseer un conjunto de genes en ella es lo que hace que
una bacteria sea patógena y no la designación de género o especie.
Se ha propuesto para E. coli
agente de diarrea una
clasificación de acuerdo a sus
mecanismos de virulencia,
los llamados virotipos.
Aunque arbitraria, ésta
clasificación es muy útil.
Crecimiento de Escherichia coli en Agar Mac Conkey
Se describen 5 virotipos:
1. E. coli enterotoxigenico (ETEC)
2. E. coli enteroagregativo (EAggEC)
3. E. coli enteropatogénico (EPEC)
4. E. coli enterohemorrágico (EHEC)
5. E. coli enteroinvasor (EIEC)
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1. E. coli enterotoxigénico (ETEC): Se parece mucho a V. cholerae, adhiere a la mucosa del
intestino delgado, no la invade, elabora toxinas que causan diarrea. No hay cambios histológicos
en las células de la mucosa y muy poca inflamación. Clínicamente hay diarrea acuosa, vómitos y
se puede acompañar de fiebre. Es la llamada infección no inflamatoria del intestino delgado.
Para adherirse a las células de la mucosa ETEC produce diversos tipos de pili. Un tipo de ellos
los llamados factores antigénicos de colonización I y II (CFA/I yCFA/II) parecen contribuir
fuertemente a la colonización por estos microorganismos. Están aun en estudio los receptores
para estas adhesinas pero se piensa que son glicoproteínas. Los genes que codifican para CFA
están frecuentemente localizados en plásmidos.
La diarrea producida por cepas de ETEC es causada por la acción de dos diferentes toxinas:
toxina termolábil (LT) y toxina termoestable (ST). Hay dos LT y su estructura y mecanismo de
acción es el de la toxina colérica. Tienen diferencias en la excreción de la célula bacteriana y en
la regulación genética de su síntesis. ST es una familia de pequeñas toxinas.
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Los genes que codifican para LT y ST son portados por plásmidos. A menudo el mismo plásmido
lleva los genes de las adhesinas y toxinas.
2.E.coli enteroagregativo (EAggEC): Son agentes de diarrea persistente. Las cepas de EAggEC se
parecen a ETEC en que se unen a las células intestinales, no son invasivas y no causan
modificaciones histológicas en las células de la mucosa. Difieren de ETEC en que no adhieren en
forma uniforme sino que lo hacen en pequeños agregados.
Estas cepas poseen unas estructuras fibrilares muy delgadas que se presumen son los pili de
adherencia. Aunque es posible que estos pili promuevan la adherencia de estas bacterias entre sí,
más que la adherencia a la célula del hospedero.
Poseen una forma de adherirse en agregados, produciendo una toxina similar a ST llamada EAST
(ST enteroagregativa). Otra toxina producida por EAggEC es una toxina muy similar a una
hemolisina producida por cepas de E.coli que causan infecciones urinarias. Esta toxina no
hidroliza eritrocitos pero produce poros en las membranas celulares del hospedero.
3.E.coli enteropatógeno (EPEC): Es causal de diarrea severa y de gran trascendencia en países
subdesarrollados. EPEC exhibe un patrón de adherencia en parches, pero no forma el mismo tipo
de agregados que EAggEC. A diferencia de las anteriores la adherencia de EPEC produce
alteraciones importantes en la ultraestructura de las células del huésped. Las células a
microvellosidades donde EPEC no se encuentra y estas desaparecen en el sitio donde la bacteria
está adherida.
Este fenómeno se refiere como de unión y borramiento y es el resultado de un reordenamiento de
actina en la vecindad de la bacteria adherida. EPEC es más invasora que las anteriores y se
produce una reacción inflamatoria. Factores de virulencia. La diarrea producida por EPEC es una
enfermedad más compleja y se piensa que sucede en tres etapas. En un inicio, hay una asociación
de la célula bacteriana a la célula del hospedero llamada unión no íntima, mediada por pili. Este
pili llamado Bfp parece no ser la única adhesina de EPEC.
Posteriormente se producen señales hacia el interior de la célula asociadas con activación de
enzimas celulares y aumento de los niveles de Ca++ intracelular, probablemente debido a
fosforilización de proteínas del citoesqueleto y la activación de enzimas despolimerizantes de
actina. La bacteria se asocia entonces más próximamente con la célula del hospedero (unión
íntima) produciéndose un reagrupamiento de actina en la vecindad de la superficie celular.
Histológicamente la deformación de algunas microvellosidades y destrucción de otras se
acompaña de la formación de estructuras similares a pedestales en la célula por debajo del sitio
de adherencia de la bacteria. Estos pedestales son fibras densas de actina. La unión íntima esta
mediada por una proteína de membrana externa llamada intimina.
Seguramente otras proteínas aun no identificadas se encuentran también involucradas en este
proceso. Algunas bacterias son posteriormente internalizadas dentro de vesículas fagocíticas.
Muchos de los genes que codifican estos factores han sido localizados en plásmidos.

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4. E.coli enterohemorrágico (EHEC): Se ha reconocido recientemente a EHEC como responsable
de cuadros graves. Estas cepas causan una enfermedad que clínicamente se parece a la disentería
producida por Shigella, aunque probablemente no invade las células de la mucosa. La enfermedad
producida por EHEC puede complicarse con Síndrome Urémico Hemolítico (SUH o HUS) que
puede llevar al paciente a la muerte por falla renal aguda. E. coli O157:H7 es el serotipo
predominante en este grupo de EHEC.
Se sabe poco sobre las adhesinas, aunque se ha reconocido un fenómeno de unión y borramiento
similar a EPEC. Al igual que EPEC se produce una fuerte adhesión y reorganización de actina.
Una diferencia seria que EHEC produce toxinas parecidas a la toxina Shiga, llamadas toxinas
similares a Shiga (SLTs). Es posible que la diarrea con sangre y HUS asociado a EHEC sea
debido a la producción de SLTs, aunque no seria raro la existencia de otros factores intervinientes
y aun no estudiados.
El gen que codifica para SLT se encuentra en un fago temperado, lo que permitiría a otras cepas
productoras de diarrea adquirir SLT y dar una forma mucho más grave de enfermedad. Una
característica importante como factor de diseminación aunque no como factor de virulencia es la
posibilidad de la contaminación de carne durante la faena, que puede mezclarse en la producción
de hamburguesas, la mala cocción de estas en la preparación de comidas rápidas, que ha llevado a
la existencia de brotes en países desarrollados.
Escherichia coli se localiza
principalmente en alimentos crudos como
hamburguesas.
5. E.coli enteroinvasor (EIEC): Produce una enfermedad indistinguible de la disentería producida
por Shigella. Los pasos en la invasión y diseminación célula a célula parecen ser idénticos a los
de Shigella. A diferencia de Shigella no produce toxina de Shiga. No se han descrito casos de
HUS en relación a estas cepas, probablemente en relación con la ausencia de toxina Shiga. Al
igual que Shigella muchos de los genes involucrados residen en un gran plásmido de virulencia.
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LAS ENTEROBACTERIAS
Las infecciones del tracto urinario comienzan generalmente con la colonización de la uretra por
cepas originarias del colon previa colonización de la vagina. Una de las mayores defensas del
huésped es la acción lavadora de la orina. Las bacterias que no se pueden adherir van a ser
lavadas más rápidamente de la vejiga de lo que tardan en multiplicarse.
Por otra parte las bacterias que adhieren están más cerca de la mucosa y tienen mayores
facilidades para provocar respuesta inflamatoria. Numerosas adhesinas de E.coli uropatógeno han
sido estudiadas. Pili tipo 1 contribuyen a la colonización de la vagina y parecen intervenir muy
poco en el aparato urinario. La adhesina más importante, sobre todo en cepas que causan
infección renal es pili P.
Hay diversidad antigénica en estos pili pero todos reconocen el mismo carbohidrato como
receptor, globobiosa. Este azúcar se encuentra unido a una ceramida anclada en la membrana de
las células del huésped. Estas cepas pueden poseer otras adhesinas que no son pili. Por ejemplo
adhesinas afimbriales (AFAI, AFAIII) o la adhesina Dr que reconocen las tres al antígeno del
grupo sanguíneo Dr como receptor. En general las cepas de E.coli uropatogénico producen
múltiples adhesinas por combinación de diferentes tipos de pili o diferentes serotipos del mismo
pili.
Esto podría permitir a las bacterias adaptarse a diferentes superficies mucosas y ambientales,
brindándole un mecanismo de evasión de las defensas del hospedero. En cuanto a la respuesta
inflamatoria, hay evidencias de que LPS junto a pili P actúen sinérgicamente provocando esta
respuesta. Por otra parte algunas cepas uropatogénicas de E.coli producen una exotoxina llamada
hemolisina porque lisaba eritrocitos aunque luego se vio que lisaba otras células.
Esta hemolisina (HlyA) pertenece a una gran familia de hemolisinas llamadas RTX. Todas ellas
actúan creando poros en las membranas celulares de los eucariotas. En el ratón las cepas que
poseen HlyA y pili P colonizan la vejiga, el riñón y matan dos tercios de los ratones testados, por
otra parte cepas isogénicas que producen solo pili P, colonizan pero no causan daño renal ni
muerte.
Fotomicrografía de Escherichia coli
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Las cepas que no poseen pili y no producen hemolisina no colonizan. Al menos en el modelo
animal la hemolisina media el daño renal. Los genes que codifican para pili P están agrupados en
el cromosoma. El conjunto contiene genes para la subunidad mayor (pap A), para las proteínas
del tip (pap E, F, G), para proteínas de procesamiento y ensamblado (pap C, D, H, J, K) y
proteínas reguladoras (pap B, I). Salvo el gen I los demás forman un operón transcripto desde un
solo promotor.
Por otra parte los genes para hlyA también están agrupados y en proximidad de los genes para
pili. A las regiones que contienen los genes de virulencia se las ha llamado Blocks de genes de
virulencia.
MECANISMOS DE ACCION DE E. COLI EN EL LUMEN INTESTINAL
Originalmente descripta por Theodore Escherich en 1885 y llamada Bacterium coli commune,
hoy renombrada como Escherichia coli es uno de lo seres vivos mas estudiados. Algunas cepas
poseen diversos grados de patogenicidad, lo que llevo a profundizar los mecanismos relacionados
a ella. Otros patógenos se adhieren a la célula huésped pegándose a proteínas preexistentes pero,
en Escherichia coli enteropatogénico se encontró un mecanismo diferente, ya que manufactura e
inyecta su propio receptor en la célula huésped para adherirse a continuación. Las proteínas que
intervienen se nombran con el prefijo Esp (de Enteropatgenic Escherichia coli Secreted Proteins).
La superficie de las células epiteliales del intestino esta cubierta de microvellosidades,
extensiones de la célula que incrementan la superficie destinada a la absorción de nutrientes. En
la animación una bacteria Escherichia coli (en color púrpura) se engancha a la superficie de la
célula epitelial del intestino (en marrón) por medio de los pili (tetherlike pili). Los pili están
constituidos por hebras de largas proteínas filamentosas que pueden adherirse a las
microvellosidades de la superficie de las células intestinales.
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LAS ENTEROBACTERIAS
Una vez en contacto con la bacteria desparecen las microvellosidades de una zona de la superficie
celular, la bacteria entra en estrecho contacto con la superficie de la célula intestinal y comienza la
siguiente fase del proceso de infección.
La bacteria inyecta proteínas receptoras en célula intestinal y usa ahora un sistema especializado
de inyección a fin de enviar algunas de sus propias proteínas al interior de la célula. Este sistema
de inyección es fascinante y esta compuesto por numerosas proteínas. En este caso se esquematiza
un sistema inyector Tipo III, el cual esta especializado para bombear cosas a otras células. La
bacteria usa este sistema inyector como una jeringa e inyecta proteínas bacterianas en la célula,
forzándola a cooperar con su propia infección.
Un tubo que hace las veces de aguja (en púrpura) denominado EspA, se proyecta desde la bacteria
desde la bacteria a la superficie de la célula intestinal. Ahora dos proteínas (en verde) denominadas
EspB y EspD viajan a través del tubo para formar una abertura en la membrana de la célula
intestinal por medio de la cual proteínas bacterianas adicionales se mueven dentro de la célula
configurando un poro. Cuando este proceso se completa la bacteria inyecta una proteína (en rojo)
denominada Tir dentro de la célula.
18

LAS ENTEROBACTERIAS
Una vez dentro de la célula la proteína Tir se inserta en la membra celular y la "cabeza" de la
misma se proyecta mas allá de de superficie celular y se adhiere a a una proteína de la superficie
bacteriana denominada intimina (las "ventosas" azules). Ahora la bacteria esta adherida a la
membrana de la célula intestinal, y para la misma siguen los problemas. La proteína Tir resulta
fosforilada por mecanismos pertenecientes a la célula intestinal (esferas azules) y comienza el
siguiente paso: la formación del "pedestal".
19

LAS ENTEROBACTERIAS
La bacteria esta ahora adherida firmemente a la superficie celular por la interacción entre las
proteínas Tir e intimina. Comienza ahora la formación del pedestal, un proceso notablemente activo.
Otra proteína, perteneciente al citoesqueleto de la célula intestinal (en anaranjado) se adhiere a la
porción de la proteína bacteriana Tir que se encuentra dentro de la célula.
Una vez que ello sucede, comienzan a formarse largas hebras de actina (esferas amarillas). Los
filamentos de actina se forman directamente debajo del lugar donde la bacteria se encuentra adherida
a la célula intestinal. A medida que los mismos se alargan empujan a la membrana de la célula
intestinal hacia arriba y la bacteria queda suspendida en la cima del pedestal formado.
Cuando numerosas bacterias enteropatogénicas se han adherido comienzan los síntomas de la
infección (diarrea). Se cree que algunas de las proteínas inyectadas por Escherichia coli, como la
EspB, interfieren los mecanismos de señales de la célula huésped lo cual lleva, eventualmente, al
desarrollo de lesiones ultraestructurales y a la diarrea secretoria observada durante la infección.
20

LAS ENTEROBACTERIAS
ESCHERICHIA COLI EN EL MARCO DE LA SEGURIDAD ALIMENTARIA
Su comportamiento y su difusión, al ser un microorganismo intestinal, se asocian a Salmonella, p
lo que las medidas preventivas básicas a tomar son similares para ambos casos. Esto es, de
extremarse la higiene personal, sobre todo en el caso de ser portadores del patógeno, y evitar
consumo de alimentos crudos o poco o deficientemente cocinados.
Su detección, por otra parte, es relativamente simple por los sistemas de control rutinario de cual-
quier laboratorio. Aunque la normativa actualmente vigente no lo exija, desde distintos sectores se
ha venido insistiendo en la necesidad de aplicar estas rutinas con el fin de limitar un riesgo consi-
derado evitable. El control se plantea de forma especial para con los alimentos crudos como para la
carne y sus derivados, el pescado y sus derivados, y los vegetales.
La simple presencia de este microorganismo, o un recuento superior a 100 ufc/g o ml indicará una
contaminación fecal con el consiguiente riesgo de que existan cepas patógenas.
Aunque en general las enteritis cursan de forma característica (colitis hemorrágica afebril), la cau-
sada por la bacteria verotoxigénica da lugar a manifestaciones variables que van de formas muy
leves a formas graves con sangre (colitis hemorrágica). Se ha podido constatar que la fiebre es
relativamente frecuente en los casos de enteritis causada por la variante O157:H7, así como la
complicación con el Síndrome Hemolítico Urémico. Los mecanismos por los cuales se producen
no se conocen con precisión.
Los bóvidos se han apuntado como los
posibles reservorios de E. coli O157:H7
La infección por E. coli verotoxigénica parece ser de distribución universal, aunque irregular, pero
su prevalencia solamente se conoce con cierto detalle en los Estados Unidos, Canadá, Argentina y
Europa Occidental, ya que en el resto de países no ha sido estudiada sistemáticamente. Diversos
autores han estudiado en España la frecuencia de E. coli O157:H7 como causante de diarrea y se
ha podido demostrar que ésta es muy baja, probablemente entre el 0,1 y 1% de las diarreas estu-
diadas. Normalmente se detectan casos esporádicos aunque no son raros los brotes epidémicos y en
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22
LAS ENTEROBACTERIAS
general, no obstante, su número y extensión son limitados.
La enfermedad se transmite por vía feco – oral y el vehículo más frecuente de infección humana es
la carne de bovino, fundamentalmente las hamburguesas poco cocinadas. También se ha documen-
tado la infección vehiculada por otros alimentos como carne de pavo, salames, leche, yogur, mayo-
nesa, ensaladas, vegetales crudos y agua. Los brotes epidémicos son frecuentes en diversos países
como Estados Unidos, Reino Unido, Australia, Argentina y Japón, entre otros. La transmisión de
persona a persona también ha sido demostrada y la dosis infectante mínima se estima alrededor de
las 100 bacterias. Las distintas formas de Escherichia coli suelen ser resistentes a las temperaturas
extremas y a los ácidos débiles.
Los bóvidos parecen constituir el principal reservorio de E. coli O157:H7, encontrado con diferen-
tes prevalencias que oscilan, en animales sanos, entre el 7% y el 30% de los casos estudiados. Pa-
rece que estas cepas no son patogénicas para los animales, aunque algunos investigadores las en-
cuentran con más frecuencia en aquellos que tienen diarrea. La prevalencia de otros serotipos de E.
coli verotoxigénicos en los animales se desconoce, aunque hay informes de su aislamiento en bó-
vidos, óvidos, cabras, perros y gatos. Desde 1986, diversos grupos han efectuado estudios
prospectivos en nuestro país, que muestran una incidencia muy baja de E. coli verotoxigénica,
inferior al 0,3% de los pacientes estudiados.
Con respecto a los vegetales que se cultivan abonándolos con estiércol animal, hasta hoy se
consideraba que, después de la recolección, había que proceder al lavado de las verduras frescas,
normalmente con la incorporación al agua de desinfectantes, como el hipoclorito de sodio (lejía)
o la mezcla de peróxido de hidrógeno y ácido peracético. Sin embargo, las autoridades sanitarias
de EEUU han comprobado que los lavados prescritos se han mostrado totalmente ineficaces
contra este microorganismo.
EL SÍNDROME UREMICO HEMOLITICO EN LA REPUBLICA ARGENTINA
Últimamente ha tomado gran connotación periodística el impacto sanitario producido por la
contaminación de cierto grupo de alimentos por el agente Escherichia coli enterohemorrágica
(EHEC), uno entre tantos agentes productores de Enfermedades Transmitidas por Alimentos
(ETA), que forman parte de uno de los componentes de la Inseguridad Alimentaria que vivimos
todos aquellos que tenemos acceso físico a los alimentos (y a consumirlos). En este contexto, los
Profesionales de las Ciencias Veterinarias tenemos que cumplir con una función educativa
esencial hacia la comunidad, tratando de poner un poco de claridad a tanta confusión sobre este y
otros temas relacionados con la Salud Pública.
La FAO (Organismo de las Naciones Unidas para la Agricultura y la Alimentación) define a la
Seguridad Alimentaria como “el derecho de toda persona a tener acceso físico ilimitado a
alimentos inocuos y de calidad.” En tal sentido, en las condiciones actuales por las que atraviesa
el país, no debe extrañarnos la prevalencia elevada de un número indeterminado de
Enfermedades de Transmisión Alimentaria de las cuales carecemos, en muchos casos, de
estadísticas serias.

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LAS ENTEROBACTERIAS
Según el Sistema Nacional de Vigilancia Epidemiológica (SINAVE) del Ministerio de Salud de la
Nación, durante el último año fueron notificados 724.680 episodios de diarreas en nuestro país,
de los cuales 427.245 ocurrieron en menores de 5 años. Las más afectadas fueron las provincias
de Buenos Aires, Salta, Jujuy, Santa Fe, Chaco, Tucumán, Misiones, Formosa y San Juan.
En particular, nos referiremos al denominado Síndrome Urémico Hemolítico o Síndrome de
Gasser. Mucho se ha dicho y escrito, pero entendemos que la bibliografía científica utilizada,
perteneciente a destacados profesionales nacionales de la Salud Pública, es de excelencia y la más
adecuada para la elaboración de este informe.
Resulta interesante destacar que en las primeras observaciones, en la década del 50 y del 60,
surgen interpretaciones tanto clínicas como etiológicas y patogénicas, que luego fueron
desplazadas por otras o relegadas al olvido para cobrar nuevamente vigencia en la actualidad
enriquecidas con estudios y observaciones de los últimos años. En 1966 (Voyer y Walther, 1966),
no hacían diferenciación entre la Púrpura Trombótica Trombocitopénica (PFT) y el SUH más que
por la edad de presentación y la extensión de las lesiones. Considerábamos los términos de PTT y
SUH dentro de una vasta nomenclatura para referencia a variables sintomáticas, como veremos
más adelante.
Posteriormente se desvinculó a estas entidades, diferenciando netamente por un lado la PTT o
Síndrome de Moschcowitz Symmer de presentación especialmente en jóvenes adultos con
sintomatología predominantemente neurológica, lesiones microvasculares diseminadas, evolución
generalmente fatal y etiología desconocida y por otro el SUH o Síndrome de Gasser de
presentación principalmente en niños de corta edad, precedido generalmente por diarrea
sanguinolenta, dominando el cuadro clínico la insuficiencia renal aguda junto a anemia hemolítica
con lesiones microvasculares de selectiva localización renal y de etiología múltiple.
Por ello se postuló que SUH y PTT pueden ser gradientes sintomáticas de una misma enfermedad
(Remuzzi, 1987) referida genéricamente como Microangiopatía Trombótica (MAT, Kaplan,
1995) término acunado por Habib. Sin embargo, la similitud entre la PTT y las formas graves de
SUH con daño neurológico por lesiones extrarrenales, no significa una identidad entre ambos
cuadros (Kaplan, 1995).
En 1955 Gasser, en Suiza, describe 5 casos, 4 de los cuales eran lactantes e introduce la
denominación de Síndrome Hemolítico Uremígeno. También se han utilizado denominaciones
como Acroangiopatía Trombocítica, Trombopatía Plaquetaria Difusa y Acroangiotrombosis
Verrugosa Trombopénica (Debré y Mozziconacci, 1958).
Toda la nomenclatura estuvo así basada en las alteraciones hematológicas y las lesiones
microvasculares de trombosis. En 1962, Gianantonio presenta en la Sociedad Argentina de
Pediatría 47 observaciones del Hospital de Niños Ricardo Gutierrez de Buenos Aires, recopiladas
desde 1957, a lo que suma posteriormente nuevos casos. En los años 1963 y 1964 los uruguayos
hacen sus primeras observaciones. Garrahan, en la 1ra. Cátedra de Pediatría refiere 15 casos y en
el interior del país, López Pondal, 3 a los que deben sumarse otros dos observados también en
Tucumán por el Dr. Eduardo Martínez.

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LAS ENTEROBACTERIAS
Publicaciones de centros asistenciales de todo el país muestran el interés que ha despertado esta
enfermedad entre nosotros y el incremento continuo de su incidencia que 3 hace de la Argentina
la zona endémica más afectada del mundo. La casuística acumulada hasta la fecha es de más de
6.500 casos, lo que supera a lo observado en todo el resto del mundo. En la década del 80se
intenta también el tratamiento con factores antiagregantes plaquetarios como aspirina y
dipiridamole (O'Regan y col., 1980) y se destacan alteraciones anatomopatológicas presentes en
diversos órganos a más de las ya bien caracterizadas lesiones renales, destacándose especialmente
las lesiones cerebrales y pancreáticas (Upadhyaya y col., 1969, Preimhak y col., 1984).
En tanto en la década del 60, en la búsqueda etiológica predominaban las referencias de
asociaciones con infecciones virales, a fines de la década del 70 se comunican asociaciones con
infecciones por enterobacterias, iniciándose con las observaciones de Shigellosis en Centro
América y luego en la India. En este país Ragupathv refiere una fuerte asociación con la Shigella
disentería tipo 1.
Hoy en día se presenta así el estudio de toxinas liberadas por enterobacterias, como la línea más
promisoria para la comprensión epidemiológica de la enfermedad en su presentación endémica
tanto en los casos esporádicos como epidémicos. Hasta ahora esto se ha referido a la Shiga-like
toxina producida por cepas de E. coli y a la toxina Shiga producida por la Shigella disentería tipo
1 y ocasionalmente por la Shigella flexneri, como también lo observamos nosotros, pero parece
ser también extensivo a otras citotoxinas producidas por bacterias como Clostridium difficile,
Yersinia enterocolítica y Campilobacter.
El Síndrome Urémico Hemolítico (SUH) es la causa más frecuente de insuficiencia renal aguda
(IRA) en los niños (en la mitad de los casos necesita diálisis). Es un síndrome que incluye IRA,
trombocitopenia (disminución del número de plaquetas en la sangre) y hemólisis (destrucción de
los glóbulos rojos que lleva a una anemia) Es producido, en la mayoría de los casos, por toxinas
producidas por una bacteria: Escherichia coli O157:H7.
La toxina producida por este serogrupo de E coli se denomina “shiga toxina”, por ser similar a la
producida por Shigella. La muerte por síndrome urémico hemolítico disminuyó gracias a la
precocidad de los diagnósticos y a los nuevos métodos de control de la insuficiencia renal. Hoy, la
tasa de letalidad es del 2 por ciento. Según datos del Comité Nacional de Nefrología, el 70 por
ciento de los niños que padecen esta enfermedad se recuperan sin secuelas, sin embargo, es
necesario controlarlos regularmente porque, en algunos casos, desarrollan problemas renales o
hipertensión como consecuencia tardía del síndrome.
Escherichia coli O157:H7 y otros serotipos de E. coli productor de toxina Shiga (STEC: Shiga
Toxin E. coli). E.coli O157:H7 es un patógeno emergente asociado a enfermedades transmitidas
por alimentos. En 1982 fue reconocido por primera vez como patógeno humano responsable de
dos brotes de diarrea sanguinolenta severa que afectaron a 47 personas en EE.UU. Los brotes
fueron asociados epidemiológicamente con hamburguesas contaminadas, consumidas en
restaurantes pertenecientes a unacadena de comidas rápidas.

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LAS ENTEROBACTERIAS
A partir de entonces numerosos brotes han sido notificados en distintas partes del mundo. Hoy se
sabe que E. coli O157:H7 es el prototipo de un grupo de más de 150 serotipos de E. coli
(O26:H11; O103:H2; O111:NM; O113:H21; O145:NM; entre otros) que comparten el mismo
potencial patogénico. Los serotipos de STEC (Calderwood y col., 1996), asociados a
enfermedades severas en el hombre pertenecen a la categoría de E. coli enterohemorrágico
(EHEC: enterohemorrhagic E. coli).
Los serotipos de la VTEC (Vero Toxygenic Escherichia coli) asociados a la producción de
enfermedad en el hombre son los que corresponden a la clasificación de enterohemorrágicos
(EHEC). Esta designación alude a su capacidad de producir lesiones hemorrágicas en el intestino.
Este grupo posee una serie de cualidades que determinan su virulencia, entre las cuales cabe
mencionar:
a. Producen verocitotoxina (VT1, VT1 – VT2, VT2 y sus variantes).
b.Sintetizan una proteína llamada intimina, que es codificada por el gen llamado eaeA del
cromosoma de la bacteria. La intimina es la responsable de la unión de E. coli a las células de la
pared intestinal (enterocitos) proceso que inicia las lesiones en las vellosidades que los entericitos
poseen en aquella parte de su superficie que constituye la pared interna del intestino (estas
vellosidades se ven con claridad en la figura 1). En algunos casos de SUH se han aislado cepas de
VTEC que carecen del gen eaeA en los que la unión a los enterocitos está reemplazada por la
producción de otro accesorio de adherencia.
c.Poseen un plásmido (esto es, ADN de doble cadena que al unir sus extremos adquiere forma
circular) de gran tamaño (por eso se lo llama megaplásmido) con un peso molecular de 60
millones. Este plásmido contiene los genes necesarios para la síntesis de una enterohemolisina,
toxina que es capaz de producir la destrucción (lisis) de los glóbulos rojos (de allí hemolisina) y
un apéndice de adherencia al epitelio intestinal típico de las EHEC.
Drummond en 1989 y Kaplan en 1990 clasificaron al SUH de acuerdo a su etiología. Una
división importante es la que considera como SUH típico al que presenta antecedentes de diarrea
(D+), asociado a infección por gérmenes productores de Stx, forma endémica en nuestro país. El
SUH atípico es el que no presenta diarrea en sus pródromos (D-).
El origen del SUH post-entérico ha sido investigado en los últimos 15 años. A fines de la década
del 70, Konowalchuk y col. informaron que algunas cepas de E. coli producían ciertas exotoxinas
(a las que llamaron verotoxinas por su acción sobre las células Vero) relacionadas a la proteína de
70 kDa codificada en el DNA de Shigella dysenteriae tipo 1. El significado clínico de estas
toxinas permaneció desconocido hasta que, en 1983, Riley y col. informaron una asociación entre
la infección por E. coli serotipo O157:H7 y dos brotes de colitis hemorrágica; y Karmali y col.
demostraron infección por STEC en 11 de los 15 casos de SUH aislados. Luego, la asociación
entre SUH e infección por STEC, particularmente cepas del serotipo O157:H7, fue confirmada
por numerosos estudios realizados en diferentes países (Griffin y Tauxe, 1991) incluyendo
Argentina (Novillo y col., 1988; López y col., 1989; Rivas y col., 1996).

26
LAS ENTEROBACTERIAS
Se ha estimado que, en América y en Europa, alrededor del 90% de los niños con SUH tiene
alguna evidencia de infección por STEC siendo el serotipo O157:H7 responsable del 70% de los
casos (Lior y col., 1994; Caprioli y col., 1994; Van de Kar y col., 1994). En Argentina, la
asociación entre SUH y STEC del serotipo O157:H7 no está suficientemente clarificada. López y
col. encontraron que el serotipo O157:H7 no es común en niños argentinos con diarrea inducida
por toxina Shiga complicada o no con SUH.
En cambio, Rivas y col. detectaron en niños con SUH fundamentalmente cepas de E. coli del
O157:H7. Es importante recordar que el primer aislamiento de E. coli O157:H7 fue realizado en
nuestro país, en 1977, a partir de terneros con colibacilosis (Orskov y col.). La información sobre
STEC proviene fundamentalmente de estudios realizados con cepas del serotipo O157:H7,
fácilmente distinguible de otros serotipos de E. coli por sus peculiares propiedades bioquímicas,
ya que no fermentan sorbitol o lo hacen lentamente (Farmer y Davis, 1985) y no poseen actividad
de ßglucuronidasa (Thompson y col., 1990).
Escherichia coli forma parte de la flora habitual del intestino del hombre y de los animales. Los
animales domésticos, especialmente los rumiantes, constituyen el principal reservorio natural de
STEC. La prevalencia en vacunos oscila entre 0,1 y 16%. Ha sido aislado también de heces de
gansos, ovinos, equinos, perros, cabras y ciervos. Estudios realizados en EE.UU., Canadá e
Inglaterra (Wells y col., 1991; Chapman y col., 1993) han identificado al ganado bovino como un
reservorio importante de E. coli O157:H7, luego que los primeros brotes de colitis hemorrágica
estuvieron asociados al consumo de hamburguesas mal cocidas y leche cruda, (Griffin y Tauxe,
1991).
STEC ha sido aislado de las heces y aparentemente habita el tracto intestinal del animal portador
(Sanderson y col., 1995). El ganado lechero y particularmente los terneros y vaquillonas serían
portadores más frecuentes que el ganado adulto. También fue aislado del ganado de carne,
específicamente de terneros con diarrea, en donde STEC no sería el causante de esta patología.
En 1987, una cepa con estas características se aisló de terneros con colibacilosis en Argentina
(Ørskov y col., 1987). En estudios realizados en 720 animales sanos de seis especies diferentes,
STEC fue aislado en materia fecal de 208 animales (28,9%). La prevalencia fue mayor en tres
especies de rumiantes: ganado bovino (21,1%), ovejas (66,6%)y carneros (56,1%). Fue detectado
más esporádicamente en no rumiantes: pollos (<0,799), cerdos (7,5%), perros (4,8%) y gatos
(13,8%) (Beutin y col., 1993).
Recientes investigaciones confirman que los terneros son reservorios de la bacteria Escherichia
coli O157H:7, causante de enfermedades en humanos. El trabajo pertenece a investigadores de
las Facultades de Ciencias Veterinarias y de Bioquímica y Ciencias Biológicas UNL (Universidad
Nacional del Litoral). Concretamente, los investigadores se propusieron “aislar E. coli O157:H7
de animales bovinos, y estudiar la relación epidemiológica entre estas cepas y otras cepas
aisladas de alimentos y casos clínicos”, bajo la dirección del colega Profesor Dr. José Luis Otero.
A partir de un estudio de caracterización de E. coli O157:H7 aislados a partir de terneros, se
confirmó que es “importante el papel del ganado bovino en la epidemiología de las enfermedades
producidas por este agente patógeno en el hombre” y que “las cepas aisladas de ganado poseían
todos los factores de virulencia necesarios para producir enfermedad en humanos”.

LAS ENTEROBACTERIAS
Existen también diferencias geográficas en la incidencia del SUH y su forma de presentarse. En
particular, en la Argentina no han ocurrido brotes de magnitud semejante a los de EE.UU. y la
estadística señala más bien la aparición de numerosos
casos esporádicos.
Contrariamente a lo esperado, el síndrome urémico
hemolítico, se presenta en niños de hogares con un buen
nivel socioeconómico. Si bien se registran casos durante
todo el año, su frecuencia aumenta en la primavera,
alcanzando un máximo durante el verano, para luego
decrecer hacia el otoño. La carne picada,
insuficientemente cocida, y los lácteos y jugos sin
pasteurizar como el vehículo más frecuente de brotes de
ETA (Enfermedades Trasmitidas por Alimentos)
causados por este organismo.
La colitis hemorrágica ha sido transmitida además por
embutidos fermentados, leche cruda, yogures artesanales, sidra de manzana y mayonesa. Los
brotes que han involucrado alimentos ácidos demuestran la tolerancia de los organismos causales
a pH bajos. Estos microorganismos también han sido aislados de productos vegetales, la
contaminación de vegetales puede ser consecuencia del uso de abonos orgánicos de origen
bovino. También el agua ha sido considerada vehículo de transmisión, habiéndose informado de
brotes asociados a la ingestión de agua de bebida no clorada, o del contacto con piletas de
natación y también de un lago contaminado. También se ha identificado a la materia fecal bovina
como una fuente de contaminación para alimentos y agua.
No obstante, la dinámica de STEC, en su relación reservorio - medio ambiente, no está totalmente
dilucidada. Actualmente se ha convertido en uno de los desafíos más fuertes para la industria de la
carne. La transmisión persona a persona es también una vía importante para adquirir la infección
debido a la baja dosis infectiva (50 – 100 ufc). Ingresa al organismo por la ingesta de carne
(especialmente mal cocida), o por otros alimentos que hayan estado en contacto con la materia
fecal de la vaca, como leche no pasteurizada, verduras y frutas mal lavadas, aguas contaminadas,
etc (Fuente: Escherichia coli verotoxigénica (VTEC): su transmisión por alimentos
- Ciencia Hoy Volumen 10 Nro. 55 - Febrero / Marzo 2000).
En el esquema pueden apreciarse las vías de transmisión de E. coli verotoxigénica. Las flechas
que conectan las diversas figuras indican la dirección de la contaminación. El principal reservorio
es el ganado bovino pero otros animales como el cerdo o las mascotas (perro, gato) pueden
también actuar de reservorios. A partir de estos animales, el ser humano puede infectarse
directamente, mediante alimentos lácteos o cárneos o por la contaminación de vegetales. Los
humanos contaminados pueden contagiar a otros directamente o a través de la contaminación de
alimentos.
También la contaminación fecal de las aguas o la falta de higiene en el procesamiento industrial
puede explicar la presencia de esa bacteria en los pescados. Es importante conocer el origen de
los alimentos y en aquellos que los posean, leer muy bien los rótulos, cómo han sido conservados
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28
LAS ENTEROBACTERIAS
y procesados, observar la higiene, el cumplimiento de la cadena de frío y el grado de cocción. En
esta situación lo más valioso es la prevención. La contaminación fecal del agua y otros alimentos
y la contaminación cruzada durante la preparación de los alimentos son rutas importantes en la
transmisión de la infección.
En Wisconsin (EE.UU.), se encontró que STEC estaba presente en carne bovina (1 – 2%), carne
picada bovina (1-3%), en pollo (1-2%), y en carne de cerdo (1-2%) (Doyle, 1994). También fue
aislado de leche y carne de ciervo. Agri-Food de Canadá informó que STEC tiene una prevalencia
del 36% en carne vacuna y del 10% en carne de cerdo.
Es importante destacar que STEC sobrevive a las temperaturas de refrigeración y congelación y
puede desarrollar a 8ºC (Palumbo y col., 1995). Esta característica tiene un tremendo impacto
tanto en la industria de la carne, como en los sectores de comercialización en donde el uso del
frío está muy extendido. Cepas de E. coli enterohemorrágica (EHEC) han sido aisladas de una
gran variedad de alimentos y del medio ambiente, esto implica distintas condiciones en término
de nutrientes, pH, salinidad y temperatura.
Recientes brotes de diarrea y SUH han sido asociados al consumo de alimentos como el jugo de
manzana, mayonesa y embutidos fermentados, alimentos de naturaleza ácida. Benjamin y Datta
han demostrado que E. coli O157:H7 posee una gran tolerancia a pH menores a 3 sin pérdida de
la viabilidad. Si bien la carne vacuna resulta la principal fuente de contagio, el consumo de
lácteos y jugos de fruta no pasteurizados o de verduras y agua contaminada (que hayan estado en
contacto con las heces de los animales), también puede desencadenar la enfermedad.
Incluso, un estudio realizado en nuestro país sobre 34 pacientes con SUH y 95 convivientes
demostró que el 24 % de los afectados tuvo, al menos, un familiar con diarrea. Para evitar la vía
de contagio de persona a persona (la que se produce por el contacto con la materia fecal del
enfermo), los especialistas insisten en la necesidad de lavarse las manos, con agua y jabón, luego
de ir al baño y antes de manipular los alimentos.
Estas bacterias producen unas potentes citotoxinas que destruyen in vitro las células en cultivo de
la línea continua llamada Vero (que proviene de células de riñón de mono verde africano) razón
por la cual han sido bautizadas como verocitotoxinas. También se conocen como (SLT) Shiga-
like toxins (toxinas parecidas a la Shiga), porque pertenecen a la misma familia que la citotoxina
Shiga sintetizada por la bacteria Shigella dysenteriae tipo 1 causante de la disentería bacteriana.
La producción de verocitotoxinas está codificada por los ácidos nucleicos de distintos
bacteriófagos, que son virus que infectan a las bacterias, los que incorporan instrucciones en
Escherichia coli para sintetizar nuevos compuestos. Hay dos tipos de verocitotoxinas, las VT1
(SLT-I) y las VT2 (SLT-II) con sus variantes que incluyen a la VT2e, producida por las bacterias
que causan la enfermedad de los edemas en el cerdo. Las verocitotoxinas ejercen su acción sobre
una amplia variedad de células endoteliales que tapizan el interior de los vasos sanguíneos y
sobre células epiteliales, incluyendo aquellas que tapizan el interior del íleon (parte final del
intestino delgado) y colon (intestino grueso), células endoteliales glomerulares (los glomérulos
son la estructura renal encargada de filtrar el plasma sanguíneo).

29
LAS ENTEROBACTERIAS
También actúan sobre los glóbulos rojos que presentan en su membrana el grupo glicolipídico P1.
Las verocitotoxinas actúan sobre las células uniéndose específicamente a componentes de la
membrana celular llamados receptores. Se sabe ahora que estos receptores son glicolípidos
(componentes de la membrana celular formados por lípidos y azúcares) específicos.
El receptor habitual para VT1 y VT2 es una ceramida trihexosida llamada Gb3; la VT2e puede
unirse a un glicolípido neutro diferente denominado Gb4. Las verocitotoxinas están formadas por
dos subunidades llamadas A y B. La subunidad B es la encargada de asociar a la VCT con el
glicolípido. Luego, la subunidad A de la toxina inicia la inhibición de la síntesis proteica en la
célula llevando a la muerte celular por apoptosis (ver Ciencia Hoy, 53:12-21, 1999); la inhibición
se produce por inactivación de la fracción llamada 60S de los ribosomas encargados de la síntesis
de proteínas.
Cuando esto sucede a nivel de las células que constituyen el endotelio de los vasos sanguíneos, el
daño produce coagulación intravascular principalmente en el sistema nervioso central, el tubo
digestivo y los riñones.
En nuestro país, el síndrome urémico hemolítico (SUH) es una enfermedad que puede aparecer a
lo largo de todo el año. La República Argentina es el país donde se diagnostica la mayor cantidad
de casos en todo el mundo, alrededor de 300 a 350 casos nuevos por año. Generalmente afecta a
lactantes, niños entre 6 a 36 meses de edad. Existen brotes en los meses más cálidos, pero
aparecen nuevos casos durante todo el año. Comienza con una diarrea con moco, sangre o ambos
en niños previamente sanos.
Luego de tres o cuatro días aparece palidez, como expresión de anemia, es decir, que el niño se ve
pálido porque empiezan a bajar los glóbulos rojos. Los riñones empiezan a fallar en su trabajo
para eliminar sustancias tóxicas, por eso aumentan en la sangre la urea y la creatinina. En la mitad
de los niños con esta enfermedad, esa falla de la función del riñón puede ser tan grave que el niño
deje de orinar. En ese caso es necesario tratarlo con diálisis.
Siempre que un niño menor de cinco años presente un cuadro de diarrea es necesario consultar al
pediatra, dado el riesgo de deshidratación. Si, además, es mucosa o mucosanguinolenta puede que
se esté en presencia de un caso de Síndrome Urémico Hemolítico. En los casos más graves
también se pueden afectar otros órganos, presentarse convulsiones o coma, puede subir la presión
arterial o se corre el riesgo de que el intestino se perfore, con riesgo de vida. Esta enfermedad
puede ser muy grave. El niño debe estar internado y ser tratado por un equipo especialista en
nefrología infantil.
La tasa de incidencia es de 7,8 pacientes por cada 100.000 niños menores de 5 años, habiéndose
acumulado más de 6.000 casos desde 1965 hasta el presente. Ambos valores son los más altos de
mundo. La tasa de letalidad ha disminuido de un 30%, registrado en los primeros años de la
década del 60, hasta un porcentaje que en la actualidad es de 2,5% aproximadamente. Esto se
debe a un diagnóstico precoz de la enfermedad y a un mejor manejo de la insuficiencia renal
aguda y de la anemia. El niño debe continuar bajo control del especialista, además del pediatra,
ya que la mayoría de los niños afectados por esta enfermedad cura definitivamente; aunque el
30% de ellos podrá tener problemas en algún momento de la vida, tales como hipertensión

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LAS ENTEROBACTERIAS
arterial, fallo renal o ambos (esta es la segunda causa de insuficiencia renal crónica en niños en
nuestro país).
Este síndrome puede derivar, además, en anemia y alteraciones neurológicas: "lo que debemos
lograr es que los chicos no lleguen a estas instancias y al tratamiento que, en definitiva, será sólo
de apoyo, porque el síndrome en sí no tiene una cura específica". En los primeros días de
desarrollo de la enfermedad, los signos que deben motivar la consulta médica son: diarrea, sangre
en las heces, irritabilidad, debilidad letárgica y heces con olor fétido.
Los síntomas posteriores son: disminución de la orina, palidez, distensión abdominal o aumento
en el perímetro abdominal (debido al agrandamiento del hígado y del bazo), magulladuras,
erupción cutánea en forma de pequeños puntos rojos (petequias), coloración amarillenta de la piel
(ictericia), disminución del nivel de estado consciente y convulsiones (Sociedad Argentina de
Pediatría. Comité Nacional de Nefrología).
Además, puede mimetizar desórdenes no infecciosos como intususcepción, apendicitis,
diverticulosis, colitis isquémica e Infección por E. coli O157:H7 (3-4 días), Calambres
abdominales, diarrea no sanguinolenta (1-2 días), Diarrea sanguinolenta (5-7 días), 90-95% 5-
10% Resolución SUH ulcerativa, como así también colitis infecciosas causadas por Salmonella,
Shigella, Campylobacter, Clostridium difficile, Yersinia enterocolytica o Entamoeba histolytica
(Tarr, 1995).
La asociación entre SUH e infección por STEC se establece empleando tres criterios
diagnósticos:
a. Aislamiento y caracterización de los factores de virulencia de STEC;
b. Aislamiento de E.Coli por cultivo en materia fecal - Confirmación serológica posterior,
c.Premier EHEC: EIA ràpido "in vitro" para la detección de toxinas "shiga like I y II"
(verotoxinas) producidas por la Escherichia coli enterohemorrágica.
Detecta más de 60 serotipos conocidos de la bacteria (incluyendo la O157 H7). Se realiza en una
muestra de material fecal con un resultado en aproximadamente 3 hs. Utiliza anticuerpo
monoclonal específico antitoxina “shiga like”. Es adaptable a cualquier laboratorio. Su
sensibilidad y especificidad es del 78,9% y del 95% respectivamente vs el ensayo de
citotoxicidad.
ImmunoCard STAT! O157 Plus: prueba rápida para la detección “directamente de materia fecal”
de la bacteria Escherichia coli O157 productora de verotoxina. Se realiza en muestra sin
necesidad de tratamiento previo (ni filtración ni centrifugación). Utiliza anticuerpos
monoclonales y se obtienen resultados en 10 minutos. Su sensibilidad es del 85% y su
especificidad del 99% vs cultivo.

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LAS ENTEROBACTERIAS
El diagnóstico ràpido tanto para la toxina como para la E.coli O157:
• Permite un diagnóstico rápido clínico precoz con un manejo adecuado de la patologia
• Evita tratamientos inadecuados
• Minimiza complicaciones y eventuales secuelas.
• Disminuye la morbimortalidad.
• Identifica la toxina, principal factor virulento de la enfermedad.
Se destaca que son productos utilizados en USA y aprobados por FDA. (Fuente: Laboratorio Elea
SACIFyA).
Detección de Stx libre en materia fecal y Detección de anticuerpos antilipopolisacárido de los
serogrupos prevalentes y anti-Stx: Las cepas enterohemorrágicas del serotipo O157:H7 poseen
una serie de características que las diferencian del resto de las VTEC y facilitan su cultivo y
detección. En oposición a la mayoría de las cepas de E. coli, no fermentan el sorbitol, son b
glucuronidasa negativas y crecen en presencia de telurito y cefixima.
Basándose en estas propiedades se ha desarrollado un medio de cultivo específico para estas
cepas. Para poder detectar el total de VTEC es necesario investigar la presencia de genes que
confieran virulencia o la producción de verocitotoxinas determinando su toxicidad en células en
cultivo o por métodos inmunológicos.
No se dispone aún de un tratamiento específico. El tratamiento de los pacientes con SUH en el
período agudo es de mantenimiento. Se requiere atención sobre la hidratación, el balance de
electrolitos, el adecuado aporte calóricoproteico, el tratamiento de la anemia y la diálisis
peritoneal en los casos severos de oliguria y anuria. Durante la diarrea está contraindicado el uso
de agentes que reduzcan la motilidad intestinal. Si bien la E coli es sensible a varios antibióticos,
éstos no deben administrarse (algunos trabajos demuestran que los antimicrobianos favorecen la
aparición del SUH, probablemente - entre otras causas - por liberación de las verotoxinas).
Hasta el presente los estudios clínicos realizados no han demostrado que la aplicación de una
terapia antimicrobiana en el tratamiento de las infecciones por STEC aporte algún beneficio para
el paciente. Por otra parte, algunos autores han postulado que dicho tratamiento puede precipitar
la evolución a SUH. Se ha demostrado que trimetoprimasulfametoxazol estimula, in vitro, la
liberación de Stx. Por lo tanto, hasta que no se realice un estudio multicéntrico, randomizado, que
demuestre la eficacia del tratamiento, se aconseja no suministrar antibióticos durante el período
prodrómico o de estado. Se halla en fase de prueba un producto capaz de fijar e inactivar la Stx en
la luz intestinal constituido por un oligosacárido sintético, con estructura similar al receptor
natural de la citotoxina adherido a diatomeas (Synsorb-PK). También se encuentran avanzados
estudios de humanización de anticuerpos murinos a Stx.
Dentro de los distintos grupos de bovinos estudiados en la Argentina, el ternero fue portador de
las cepas con los serotipos más patógenos para el hombre: O20:H19, O26:H11, O103:H-,
O103:H2, O111:H- y OX3:H21.

LAS ENTEROBACTERIAS
En el bovino adulto, en pastoreo o en matadero, se cuentan los serotipos: O20:H19, O91:H21,
O113:H21, O116:H21, O117:H7, O171:H2, OX3:H21 que son los que han sido detectados en
alimentos cárneos (carne molida y hamburguesas). Estos datos permiten suponer que la
contaminación de la carne con la flora intestinal se produce durante el proceso de faena.
Si bien esta contaminación primaria o endógena, en la que el material infeccioso proviene del
propio animal no puede evitarse totalmente, es posible reducirla considerablemente si se
extreman las medidas higiénicas, siguiendo las normas establecidas en el Reglamento de
Inspección de Productos, Subproductos y Derivados de Origen Animal (decreto 4238/68 del
Ministerio de Economía, Secretaría de Agricultura y Ganadería, SENASA).
Medidas de prevención:
•Asegurar la correcta cocción de la carne; la bacteria se
destruye a los 70º C. Esto se consigue cuando la carne tiene
una cocción homogénea cuando no quedan partes rojas).
• Tener especial cuidado con la cocción de la carne picada
•Utilizar distintos utensilios de cocina para cortar o tomar
la carne cruda y la carne una vez cocida (Contaminación
cruzada indirecta)
• Evitar el contacto de las carnes crudas con otros
alimentos; tener en cuenta cómo se disponen dentro de la
heladera y en mesadas. (Contaminación cruzada directa).
•Consumir leche, derivados lácteos y jugos de frutas
pasteurizados y conservar la cadena de frío
• Lavar cuidadosamente las verduras y frutas.
•Asegurar la correcta higiene de las manos (deben lavarse
con agua y jabón), antes de preparar los alimentos y luego
de ir al baño como mínimo.
•Se sugiere que los menores de 2 años no ingieran comidas
rápidas.
• Respetar la prohibición de bañarse en aguas contaminadas.
Concurrir a piletas de natación habilitadas para tal fin.
•Consumir agua potable. Ante la duda, hervirla y agregar lavandina concentrada. Por este motivo,
se aconseja consumir agua potable o de lo contrario; hervir agua en un recipiente limpio
y tapado de tres a cinco minutos y no más; dejar enfriar el agua y conservarla en el mismo
recipiente o agregar dos gotas de lavandina concentrada por cada litro de agua y esperar 30
minutos para ser consumida.
•Ante cualquier duda o síntoma, consultar al médico o dirigirse al centro de salud más cercano a
su domicilio.
Las medidas preventivas para controlar la transmisión de la infección son:
a) de higiene durante el faenamiento del ganado;
b) aplicación de controles en los puntos críticos de la elaboración de alimentos;
f)evitar el hacinamiento en comunidades cerradas (jardines maternales, jardines de infantes,
cárceles, etc.);
g) no concurrencia a comunidades cerradas de personas con diagnóstico bacteriológico positivo;
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LAS ENTEROBACTERIAS
h) evitar el uso de antimicrobianos y antidiarreicos, considerados factores de riesgo en la
evolución de diarrea a SUH;
i) educación de médicos, veterinarios, microbiólogos, personal de plantas elaboradoras de
alimentos y restaurantes, de jardines maternales, de infantes y geriátricos y la comunidad en
general sobre los riesgos que implica la infección por STEC.
En relación al número de habitantes, la tasa de incidencia de la enfermedad en la Argentina es
mayor y el país se ubica en primer lugar entre el resto de los países.
Esta cifra puede subestimar el problema, ya que la enfermedad no siempre se denuncia. Si
trasladamos los costos a la Argentina, es obvio que esta enfermedad se lleva un importante
porcentaje del gasto en salud.
Y si consideramos que el SUH ocurre en uno de cada 10 niños que son infectados con esta
bacteria y que pueden tener una diarrea aguda, resulta claro que las infecciones por E coli
0157:H7 o similares resultan un problema de alto riesgo y costo. La disposición reciente de la
Senasa reglamentando la obligatoriedad de los frigoríficos de investigar la presencia de Ecoli 0H7
en las carnes durante y después del faenamiento, es un paso importante; pero debemos reconocer
que es una medida un tanto tardía y que en la Argentina es muy alta la tasa de faenamiento
clandestino.
Queda también un bache importante. El control a nivel minorista, las llamadas “comida chatarra”
y el problema de la venta callejera de alimentos. Estos son puntos críticos y no pueden ser
dejados de lado si queremos hacer un intento de prevención fuerte para reducir el número de
casos. No se han reportado casos de recurrencia en pacientes que han padecido SUH postentérico.
Hasta el momento no se dispone de una vacuna humana efectiva. Se hallan en etapa de desarrollo
la producción de vacunas para prevenir la infección por STEC. Existen distintas vacunas
candidatas basadas en:
a) utilización del lipopolisacárido bacteriano como inmunógeno;
b) toxoides de Stx;
c) utilización de cepas mutantes atóxicas;
d) la inserción de la subunidad B de Stx en una cepa de Vibrio cholerae como vector.
Vacunas desarrolladas utilizando toxoides han demostrado ser efectivas en prevenir las
enfermedades relacionadas a STEC en animales.
El consumidor debe saber que las cepas VTEC, además de ser capaces de crecer en ambientes
muy ácidos (pH 2,5 a 3,0), pueden multiplicarse a temperaturas tan bajas como 7oC (la
temperatura habitual de una heladera) y mantenerse viables durante meses en carne congelada a -
20oC (la temperatura habitual de un freezer de uso doméstico). En cambio, las bacterias se
inactivan fácilmente por calentamiento. Esto justifica recomendar que durante la cocción de la
carne la temperatura en su interior no deba ser inferior a 68oC y que se debe evitar la ingestión de
alimentos cárneos excesivamente rojos y jugosos por cocción insuficiente.

LAS ENTEROBACTERIAS
Shigella sp
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LAS ENTEROBACTERIAS
3. Género Shigella:
En el caso de Shigella, éstas son bacterias estrictamente humanas. Como sucede
frecuentemente esta adaptación se produce con pérdida de funciones. Shigella que por
hibridación se encuentran tan cercano a E.coli que podrían todos pertenecer a una misma especie,
a diferencia de éste son auxótrofos, inmóviles, poco glucidolíticos y prácticamente no producen
gas en la fermentación de glucosa.
Shigella, que debe su nombre al científico japonés que la descubrió en 1897, es un tipo de
bacteria que puede infectar el aparato digestivo. Hay cuatro grupos diferentes de Shigella que
pueden infectar a los humanos, algunos de ellos provocan una enfermedad leve, y en otros más
grave.
En base a los caracteres bioquímicos y antigénicos se describen 4 especies: S. dysenteriae, S.
flexneri, S. boydii y S. sonnei. Estas especies se subdividen en serotipos sobre la base de un factor
somático O característico.
Desarrollo de Shigella en Agar Mac Conkey
Shigella produce una enfermedad inflamatoria aguda del colon con diarrea sanguinolenta, que en
su presentación más característica se manifiesta como una disentería. Este síndrome clínico está
caracterizado por deposiciones de poco volumen con mucus, pus y sangre; cólicos y tenesmo,
acompañados de fiebre.
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LAS ENTEROBACTERIAS
Se trasmite de persona a persona directamente por las manos contaminadas o indirectamente por
alimentos o agua contaminados con heces humanas. Se necesita una dosis infectante pequeña
para causar enfermedad; frecuentemente unas pocas centenas de bacterias ingeridas son
suficientes para provocarla.
En el adulto sano es una enfermedad autolimitada aunque molesta; en los niños pequeños y de
poblaciones marginadas puede ser una enfermedad grave que lleve al niño a la muerte. Se trata de
una enfermedad más frecuente en poblaciones con mal saneamiento. Un porcentaje de los
enfermos pueden complicarse, presentando alteraciones neurológicas o fallo renal (SUH), esto
ultimo cuando se trata de S. dysenteriae.
Shigella es un buen modelo de enfermedades en las cuales la bacteria invade las células del
hospedero, se replica en el citoplasma de estas células y se disemina de célula a célula. Existen
dificultades al no poseer un modelo animal claro, salvo el mono, para estudiar los factores de
virulencia. La mayoría de las investigaciones han utilizado cultivos celulares (células HeLa,
macrófagos o fibroblastos de pollo), el test de la queratoconjuntivitis de Sereny realizado en el
ojo del cobayo y ensayos en asa ileal aislada de conejo.
En estudios realizados en células HeLa, la bacteria se adhiere en una primera etapa a las células
del hospedero. Probablemente los receptores sean proteínas llamadas integrinas. Esta adherencia
provoca reorganización de la actina (proteína mayor del citoesqueleto de la célula del huésped),
polimerización y formación de filamentos no solubles en la vecindad de la unión bacteriana.
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LAS ENTEROBACTERIAS
Esto provoca la formación de seudópodos y de esta forma células normalmente no fagocíticas de
la mucosa ingieren las bacterias adheridas.
Esta invasión es mejor descrita como fagocitosis inducida. Jugando el papel activo la célula del
hospedero, la bacteria tiene un papel relativamente pasivo luego de la estimulación inicial. Luego
de ingeridas, las bacterias se liberan de su vesícula de endocitosis y se multiplican en el
citoplasma de las células. Posteriormente las bacterias utilizan filamentos de actina en su
vecindad y comienzan a moverse a través de la célula del hospedero. Eventualmente las bacterias
pueden diseminarse a células adyacentes. Esto se ha llamado Ics (diseminación intercelular, en
inglés: intercellular spread). En este movimiento se polimeralizan filamentos de actina en uno de
los extremos de la bacteria, creando colas similares a cometas que propelen las bacterias a través
del citoplasma.
Una proteína bacteriana alojada en la membrana externa, llamada IcsA se requiere para este
movimiento. IcsA se localiza en un extremo de la bacteria y tiene actividad ATPasa.
Eventualmente la bacteria puede tomar contacto con la membrana que separa dos células, protruir
y escapar a la célula vecina. En trabajos realizados en células polares, Shigella no se une a los
polos apicales de estas células diferenciadas. Las integrinas se encuentran solo en la superficie
basal de la mucosa. Por lo que otro modelo se ha propuesto para la entrada inicial de Shigella.
Esta se haría en tres etapas.
En primer lugar Shigella atraviesa la mucosa través de las células M de las placas de Peyer,
células fagocíticas naturales cuyo papel principal es tomar antígenos del lumen intestinal por
fagocitosis y presentarlos al tejido linfoide subyacente de las placas de Peyer. En una segunda
etapa Shigella usa sus invasinas para invadir las células de la mucosa desde abajo, donde están
ubicadas las integrinas, para en una tercera etapa diseminarse a células adyacentes, causando la
muerte de estas células e inflamación.
La forma como se produce la muerte de las células no esta del todo aclarada. Por un lado cuando
las bacterias están multiplicándose en forma intracelular disminuyen los niveles de ATP de la
célula y aumentan dramáticamente los niveles de piruvato indicando una alteración del
metabolismo energético. Por otra parte Shigella puede inducir la muerte celular programada en
los macrófagos, un fenómeno llamada apoptosis lo que sugiere otra vía de muerte celular y, por
supuesto, de inflamación. LPS contribuiría también al daño celular.
La toxina Shiga producida por S. dysenteriae es uno de los factores aun no del todo aclarados.
Experimentalmente actúa como enterotoxina pero también como neurotoxina y como citotoxina
sistémica. No parece importante ni en la invasión ni en la muerte de las células de la mucosa. Su
papel más importante parece estar en una de las complicaciones de las shigellosis, el HUS, donde
dañaría las paredes de los vasos sanguíneos.
Muchos de los genes que intervienen en la adherencia, invasión de la mucosa y diseminación se
encuentran en un gran plásmido de virulencia. Los genes que intervienen en la invasión son
llamados Ipa. Dos de las proteínas codificadas por estos genes, IpaB y IpaC se encuentran
expuestas en la superficie de la bacteria y pueden encontrarse libres en el líquido extracelular.
Otras proteínas no están aun bien estudiadas.

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LAS ENTEROBACTERIAS
IpaB no sólo intervendría en la invasión sino que también lo haría en la liberación en el
citoplasma por lisis de las vesículas, probablemente por formación de poros en la pared de las
mismas. Algunos loci cromosómicos contribuyen a la invasión pero codifican sobretodo proteínas
reguladoras. Otros genes involucrados en las etapas posteriores de la patogénesis de Shigella se
encuentran también en el cromosoma (por ejemplo: toxina Shiga).
Shigella puede provocar diversos síntomas. Algunas personas con una forma leve de la
enfermedad sólo tienen heces blandas y acuosas, y otras no presentan ningún síntoma. Otras
desarrollan una enfermedad más grave conocida como disentería, con retortijones, fiebre alta,
pérdida de apetito, náuseas, vómitos y diarrea, que puede contener mucosidades y sangre.
Algunos niños con formas graves de infección por Shigella pueden requerir hospitalización. La
principal complicación es la deshidratación (un nivel de líquidos en el cuerpo anormalmente
bajo). En contadas ocasiones, las bacterias del tipo Shigella pueden afectar a otros órganos
corporales aparte del aparato digestivo, pudiendo provocar artritis, erupciones cutáneas,
insuficiencia renal o problemas neurológicos, como convulsiones, rigidez de cuello, dolor de
cabeza, letargo, confusión y alucinaciones.
Las infecciones por Shigella son muy contagiosas. Las personas infectadas transmiten la
infección a través de las heces. Otras personas se pueden infectar al entrar en contacto con
cualquier cosa que se haya contaminado con heces infectadas. Esto incluye los juguetes, las
superficies de las habitaciones de descanso e incluso la comida preparada por una persona
infectada. Por ejemplo, si un niño toca una superficie contaminada, como un inodoro o un
juguete, y luego se mete los dedos en la boca, se puede infectar. Shigella se puede contagiar
incluso a través de las moscas que han estado en contacto con heces contaminadas.
Puesto que no hacen falta muchas bacterias de Shigella para provocar una infección, la
enfermedad se extiende fácilmente en familias y guarderías. La bacteria también se puede
contagiar a través de la red del suministro de agua cuando las medidas higiénicas son
insuficientes. El contagio se puede producir a través de las heces de la persona infectada durante
aproximadamente 4 semanas, incluso después de que los síntomas obvios de enfermedad hayan
remitido (aunque el tratamiento antibiótico puede reducir la excreción de bacterias de Shigella a
través de las heces).
La mejor forma de evitar el contagio de Shigella es lavándose las manos con jabón
frecuentemente y a conciencia. Esto es importante en todos los grupos de edad. A los niños se les
debe recordar que se laven las manos, sobre todo después de utilizar el váter y antes de comer.
Esto es especialmente importante en los centros de preescolar.
También es importante cómo se manipulan, almacenan y preparan los alimentos: los platos fríos
deben conservarse en frío y los calientes en caliente para prevenir la proliferación de bacterias.
Los síntomas pueden aparecer entre 1 y 7 días después de la exposición, pero suelen ocurrir
durante los 2 o 3 días inmediatamente posteriores a la misma. Aunque a veces remite sola al cabo
de unos pocos días, la diarrea no tratada puede durar una o dos semanas. De todos modos, los
antibióticos pueden acortar la enfermedad.

LAS ENTEROBACTERIAS
Salmonella sp
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LAS ENTEROBACTERIAS
4. Género Salmonella:
Son bacterias que, para la mayoría de los serotipos habitan el intestino del hombre y los
animales. Hay algunos serotipos que se encuentran adaptados a una sola especie animal, como
por ejemplo Salmonella typhi, responsable de la Fiebre Tifoidea que se encuentra solamente en el
hombre. El género salmonela se nombra después de que el bacteriólogo americano Daniel E.
Salmon, junto con algunos colegas, aislara en 1886 bacterias de cerdos (ahora conocida como
Salmonella choleraesuis) que consideraban eran la causa de la fiebre de los cerdos (peste
porcina). Daniel E. Salmon (1850-1914), organizador de la oficina (los E.E.U.U.) de la industria
animal, y director de la misma desde 1884 hasta 1905, fundó la Universidad Veterinaria Nacional
(NVC) de los Estados Unidos en 1892.
Las características patogénicas son tan variadas como su hábitat natural. Se pueden dividir según
las presentaciones clínicas en:
a. Formas digestivas, gastroenteritis, el más frecuente de los cuadros clínicos causados por
Salmonella. Estas son las diarreas del niño pequeño y las clásicas toxiinfecciones alimentarias,
consecutivas a la ingestión de alimentos contaminados con una cepa de Salmonella.
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LAS ENTEROBACTERIAS
b. Formas septicémicas, graves, prototipo de las cuales es la Fiebre Tifoidea.
c. Formas diversas de gravedad variable: meningitis, osteítis, etc., mucho menos frecuentes.
La clasificación de Salmonella es compleja. Dentro del género Salmonella prácticamente una
única especie tiene importancia en patología humana y animal y una única subespecie llamada
Salmonella enterica subespecie enterica, pero se describen aproximadamente 2000 serotipos
dentro de esta subespecie, por lo que corrientemente se los llama por el nombre del serotipo, por
ejemplo Salmonella Typhi ya mencionada o Salmonella enteritidis.
Salmonella es móvil y salvo los serotipos bien adaptados a una especie animal son protótrofos.
Desde el punto de vista antigénico, poseen antígenos O somáticos, antígenos de envoltura y
antígenos flagelares H con dos especificidades antigénicas expresadas alternativamente como ya
fue descrito.
Los síntomas aparecen 6 a 24 horas luego de
la ingestión del alimento o agua
contaminados y pueden durar hasta una
semana o más. Náuseas, vómitos, dolor
abdominal y diarrea, son los síntomas
principales. La severidad varía de una
persona a otra, pudiendo llegar a presentar
dolores que hagan pensar en apendicitis y
diarreas severas inclusive con sangre.
La infección puede volverse sistémica. La
infección sistémica es más frecuente en
lactantes o enfermos inmunocomprometidos
(cáncer, SIDA). En general se trata de una enfermedad molesta pero poco peligrosa, aunque
durante los grandes brotes se ven algunos enfermos graves y pueden morir algunos pacientes.
S. enteritidis y S. typhimurium son los serotipos más
frecuentes aislados en toxiinfecciones alimentarias.
Diversos alimentos están involucrados. Derivados
cárnicos y huevos son algunos de los más frecuentes.
hacinamiento, dietas hiperproteicas llevan a
Técnicas modernas en la cría de las aves,
altos
niveles de portación intestinal de Salmonella. En los
mataderos es frecuente la contaminación de las
carcasas y de las superficies de los huevos.
Se ha demostrado también la transmisión transovárica
de Salmonella de las gallinas a sus huevos. La idea de
que huevos de cáscara sana son seguros es por lo tanto
falsa.
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LAS ENTEROBACTERIAS
La enfermedad resulta del consumo de alimentos contaminados mal cocidos o de contaminación
cruzada con alimentos crudos en las cocinas.
Otra forma de propagación de la enfermedad, no desdeñable, dejando de lado las toxiinfecciones
alimentarias es la transmisión interhumana, de persona a persona por medio de las manos
contaminadas. S. typhi es el serotipo específico que causa la Fiebre Tifoidea. El hombre la
adquiere por consumir alimentos o agua contaminados por heces humanas. La contaminación de
los alimentos puede también ocurrir durante su preparación con manipuladores de alimentos
portadores de S. typhi y que eliminan gran número de bacterias en sus materias fecales.
Infectados asintomáticos y portadores que han padecido la enfermedad previamente son los que
mantienen la fuente de infección. En los países desarrollados y aquellos que han logrado buenos
niveles de saneamiento y educación no es un problema de Salud Pública. El período de
incubación es de 1 semana a 1 mes. Puede presentar diarrea. Posteriormente el paciente presenta
fiebre y anorexia que puede durar hasta 2 o 3 semanas.
La enfermedad sin tratamiento antibiótico puede llevar al paciente a la muerte. Es sorprendente lo
limitado del conocimiento en la patogenia de las infecciones causadas por Salmonella. S. typhi
atravesaría la mucosa por medio de las células M, se multiplicaría en la submucosa y de allí se
diseminaría. Las bacterias se multiplican en hígado y bazo y pasarían desde allí a la circulación
general. Se han visto, en otros serotipos, bacterias dentro de las células mucosas absortivas y en
macrófagos asociados a la mucosa. No es claro el mecanismo por el que se produce la diarrea.
S. typhimurium produce en el ratón un cuadro muy similar al de la Fiebre Tifoidea en el hombre
por lo que se lo ha aceptado como un buen modelo para su estudio. Salmonella al igual que otros
patógenos digestivos, induce a las células del huésped a englobarlos, pero parece algo diferente a
la fagocitosis inducida de otros patógenos, ya descrita. Luego de adherida la bacteria a la
superficie celular, se produce un pliegue en la célula, que la rodea y la introduce en una vesícula
de endocitosis.
Hay intensa polimerización de actina en la vecindad y
luego de introducida, ésta desaparece. La bacteria no
escapa de la vesícula ni entra en el citoplasma, se
multiplica en este fagosoma para ser posteriormente
liberadas. Por otra parte, estas bacterias pueden
sobrevivir a la fagocitosis, resisten la muerte por el
complemento. Al menos 200 genes se encuentran
involucrados. S. typhimurium posee un plásmido de
virulencia cuya presencia otorga a la bacteria la
capacidad de causar enfermedad sistémica en el ratón.
En S. typhi todos los genes son cromosómicos. Los
genes de virulencia de Salmonella están regulados por
un gran número de factores ambientales, tales como falta de nutrientes, anaerobiosis, pH, etc.
LPS tiene un papel importante en la respuesta inflamatoria durante la invasión de la mucosa y es
responsable de los síntomas de la infección sistémica.
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LAS ENTEROBACTERIAS
De salmonela se han identificado cinco
islas de patogenicidad, grupos de genes
que codifican factores patogénicos y que
están implicados en los mecanismos que
usa la bacteria para penetrar en las células
que infecta. Hace unos años que se viene
estudiando estos genes. El Instituto de
Alimentos de Norwich (Reino Unido)
comunicaba que habían obtenido la
imagen completa de la expresión de los
genes de Salmonella typhimurium, el
serotipo que puede derivar en fiebres
tifoideas durante la infección. Los
investigadores hallaron que del total de
4.644 genes que forman el ADN de la
bacteria, 919 se activaban en la infección
y que 400 de ellos tenían una función aun
desconocida.
Existen 2400 serotipos distintos de
salmonella, lo que dificulta dar
con una vacuna
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IMPORTANCIA DE SALMONELLA EN LA SEGURIDAD ALIMENTARIA
Salmonella es el microorganismo patógeno más habitual en las toxiinfecciones alimentarias que
se registran en los hospitales de la mayor parte de países de nuestro entorno. Pese a que resiste
mal en condiciones ambientales normales, su rápida adaptación al medio donde habita explica su
alta frecuencia. Una adecuada higiene personal continúa siendo la mejor medida preventiva.
De todos los microorganismos patógenos responsables de toxiinfecciones alimentarias que
habitualmente se referencian en la literatura médica, Salmonella es, con toda seguridad, el que
ocupa un lugar más destacado. Pero no sólo en los anales médicos copa los índices más altos de
incidencia; también en los medios de comunicación es habitual su presencia, sobre todo en verano
o coincidiendo con la llegada de los primeros calores. Y cuando ello ocurre, al menos tres son las
preguntas que se repiten: ¿es tan peligrosa como se dice?, ¿se puede prevenir? Y lo más
importante, ¿se puede eliminar?
Salmonella es una bacteria no demasiado resistente a las condiciones ambientales, en especial a la
luz solar intensa, la desecación, concentraciones elevadas de sal o altas temperaturas. Sin
embargo, es la responsable de casi la mitad de los casos de infecciones de origen alimentario que
se diagnostican en los hospitales españoles. Esta misma situación se describe en el resto de los
países de nuestro entorno.
La explicación a este fenómeno tiene mucho que ver con la facilidad con que este
microorganismo se adapta tanto a animales como al ser humano. En efecto, cuando llega al
intestino de cualquier individuo puede colonizarlo, dando lugar a una infección, o simplemente
llegar a un equilibrio con otros microorganismos intestinales, sobreviviendo y multiplicándose en
los restos de alimentos que van a ir pasando por el tubo digestivo.

44
LAS ENTEROBACTERIAS
Tanto las personas enfermas, como los animales y personas no enfermas pero que tienen
Salmonella en su intestino, resultan portadoras por un periodo que puede abarcar desde unos
pocos meses hasta años. Como consecuencia, la materia fecal de individuos enfermos o incluso
de los simplemente portadores, contendrá una elevada concentración de este patógeno. De ahí
que una higiene personal adecuada sea la mejor de las medidas preventivas, sobre todo cuando se
van a manipular alimentos crudos o procesados para su puesta a la venta o, simplemente, para su
consumo inmediato.
Lavarse las manos de forma intensa con agua y jabón abundantes tras la utilización del aseo,
antes y después de manipular alimentos frescos o de cambiar de actividad, se convierte en un
punto fundamental en el mapa de la prevención de los peligros alimentarios. No hay que olvidar,
por otra parte, que durante la manipulación, la contaminación puede proceder de los propios
manipuladores, pero también de los alimentos que se están procesando. Por ello es recomendable
que se protejan las fosas nasales y la boca con mascarillas, las manos con guantes, y el cabello
con gorros adecuados, teniendo en cuenta que estos elementos han de ser cambiados con
frecuencia.
Cualquier resto orgánico puede constituir un vehículo de diseminación o de multiplicación de este
patógeno. Cuando Salmonella llega a los alimentos, puede multiplicarse en cualquier producto
fresco a una velocidad muy elevada, ya que puede duplicar su número cada 15 ó 20 minutos si la
temperatura es elevada (superior a 20 ºC). Si los alimentos no se refrigeran rápidamente y a baja
temperatura (el límite de crecimiento está en 8 ºC) el microorganismo se multiplicará, con el
consiguiente riesgo para los consumidores.
El producto que mayoritariamente está implicado en la salmonelosis, la enfermedad causada por
este patógeno, son las salsas tipo mahonesa elaboradas con huevo fresco. El huevo puede llevar
Salmonella en su cáscara, ya que las gallinas, al igual que otros animales o el ser humano, pueden
ser portadoras.
En este caso, el microorganismo puede llegar a la superficie de la cáscara por contaminación
desde la materia fecal de los animales. Cuando la cáscara está contaminada, la bacteria puede
pasar al producto tras cascar el huevo y extender la contaminación a cualquier producto que se
elabore con él.
Dado que la presencia de este microorganismo en mamíferos de todo tipo es más que frecuente,
su erradicación completa se considera como algo prácticamente imposible. De ahí que, de nuevo,
deba insistirse en la necesidad de mantener el control a partir de medidas de prevención de la
contaminación, en la higiene personal y en adecuadas manipulaciones de productos. Es la única
manera de prevenir los brotes de salmonelosis.
La mayoría de las personas infectadas con Salmonella contraen diarrea, fiebre y calambres
abdominales de 12 a 72 horas después de la infección. La enfermedad dura de ordinario de 4 a 7
días y la mayoría de las personas se recuperan sin tratamiento. Sin embargo, en algunas personas
la diarrea puede ser tan aguda que el paciente necesite hospitalización.

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LAS ENTEROBACTERIAS
En estos pacientes, la infección con Salmonella puede propagarse de los intestinos a la corriente
sanguínea y, después, a otras partes del cuerpo y puede ocasionar la muerte a menos que la
persona reciba tratamiento expedito con antibióticos. Los ancianos, los lactantes y quienes tienen
el sistema inmunológico deteriorado son las personas más susceptibles de contraer una
enfermedad grave.
Por lo común, las personas con diarrea se recuperan totalmente, aunque puede llevar varios meses
antes de que se normalicen totalmente sus hábitos de deposición. Un pequeño número de personas
que son infectadas con la Salmonella adquirirán dolor de las articulaciones, irritación de los ojos
y dolores al orinar. A esto se conoce por el nombre de síndrome de Reiter. Puede durar meses o
años y puede conducir a artritis crónica que es difícil de tratar. El tratamiento con antibióticos no
hace diferencia alguna en el hecho de si una persona adquiere o no posteriormente artritis.
No hay vacuna para prevenir la salmonelosis. Puesto que los alimentos de origen animal pueden
estar contaminados con Salmonella, las personas no deberían comer huevos, pollo, o carne que
estén crudos o que estén insuficientemente cocinados. Los huevos crudos pueden no ser
reconocidos en algunos alimentos tales como la salsa holandesa de fabricación casera, las salsas
de ensaladas tipo cesar y otras salsas, tiramisu, el helado de fabricación casera, la mayonesa
fabricada en casa, la pasta de pastelillos y la crema de pasteles. El pollo y la carne, incluidas las
hamburguesas, deberían cocinarse bien, de forma que no estén rosadas en el interior. Las personas
tampoco deberían consumir leche cruda o no pasteurizada ni otros productos lácteos en las
mismas condiciones. Las verduras o legumbres deberían lavarse bien antes de consumirlas de
ordinario.
Debería evitarse la contaminación cruzada de los alimentos. Las carnes no cocinadas deberían
mantenerse separadas de las legumbres, las carnes cocinadas y los alimentos listos para comer.
Las manos, los tableros de cortar, los mostradores de cocina, los cuchillos y otros utensilios
deberían lavarse bien después de utilizarlos para cortar alimentos no cocinados. Las manos
deberían lavarse antes de manipular cualquier alimento y entre la manipulación de artículos
alimenticios diferentes. Las personas que tienen salmonelosis no deberían preparar alimentos o
servir agua a otros hasta que se haya demostrado que han dejado de ser portadoras de la bacteria
Salmonella.
Cada año, unos 40.000 casos de salmonelosis se notifican en los Estados Unidos. Debido a que
muchos casos más leves no se diagnostican o notifican, el número real de infecciones puede ser
veinte o más veces elevado. La salmonelosis es más común en el verano que en el invierno. Los
niños son los más susceptibles de contraer la salmonelosis. Los niños de corta edad, los ancianos
y las personas que tienen el sistema inmunológico disminuido son las que tienen mayor
probabilidad de contraer infecciones graves. Se estima que cada año unas 1.000 personas mueren
de salmonelosis aguda.
Una mejor educación de los trabajadores de la industria en los procedimientos básicos de
inspección de la seguridad de alimentos y restaurantes puede prevenir la contaminación cruzada y
otros errores de manipulación de alimentos que pueden conducir a brotes.

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LAS ENTEROBACTERIAS
Un uso más generalizado de huevos pasteurizados en los restaurantes, hospitales y hogares de
ancianos constituye una medida importante de prevención. En el futuro, la irradiación y otros
tratamientos pueden reducir en gran medida la contaminación de la carne cruda.
La bacteria Salmonella puede ser encontrada en el exterior de la cáscara de un huevo, debido a
que este pasa por el mismo conducto que las heces al ser expulsado del cuerpo de la gallina. Es
por esta razón que los huevos son limpiados en la planta de procesamiento; pero a pesar de ello,
las bacterias pueden aún estar presentes, por lo que es necesario una apropiada cocción, así como
también el correcto lavado de las manos con el fin de prevenir la enfermedad. Específicamente, la
bacteria Salmonella enteritidis puede ser encontrada al interior de un huevo aún así éste no esté
rajado o partido, debido a que dicha bacteria está presente en el ovario de la gallina o en el
oviducto aún antes de que se forme la cáscara alrededor de la yema y de la clara del huevo.
Además, es importante resaltar que la Salmonella enteriditis no necesariamente provoca alguna
enfermedad en la gallina. Con la finalidad de prevenir la multiplicación de estos organismos al
interior de los huevos, se recomienda su adecuada refrigeración. Los huevos contaminados,
deberán ser cocidos por seis minutos para obtener un producto sano. Por ello, nunca se deben
servir los huevos crudos o insuficientemente cocidos sea cualquiera su presentación, para obtener
así un producto seguro.

LAS ENTEROBACTERIAS
Klebsiella sp
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LAS ENTEROBACTERIAS
5. Género Klebsiella:
La principal especie de este género es Klebsiella pneumoniae, muy expandida en la naturaleza.
Se la aísla frecuentemente de materias fecales del hombre y los animales, pero también de aguas,
vegetales y alimentos. Son bacilos Gram negativos inmóviles, a menudo capsulados. La cápsula
es de naturaleza polisacarídica.
Desde el punto de vista antigénico, es útil en epidemiología la determinación de los antígenos
capsulares. Existen más de 70 tipos capsulares diferentes. Pueden existir reacciones cruzadas con
antígenos capsulares de otras especies bacterianas. El poseer cápsula otorga a estas bacterias un
aspecto colonial mucoide.
Se trata de patógenos oportunistas, pueden provocar
diversos cuadros clínicos en el hombre: infecciones
urinarias, bacteriemias, neumonías, infecciones
hepato-biliares, etc. Un porcentaje elevado de
aislamientos de Klebsiella, particularmente aquellos
de infecciones nosocomiales, contienen plásmidos
de resistencia a los antibióticos. Puede ser
resistencia a betalactámicos, aminoglucósidos, etc.
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LAS ENTEROBACTERIAS
Todos tenemos millones de bacterias en nuestros aparatos gastrointestinales, sobre todo en el
intestino grueso. Estas bacterias son importantes para la salud normal y la función del intestino.
Klebsiella es el género nombre para una de estas bacterias encontradas en las zonas respiratorias,
intestinales, y urinogenital de animales y del hombre.
Klebsiella pneumoniae, se conoce como residente intestinal en cerca del 40% del hombre y de los
animales domésticos. Se considera un gérmen oportunista, que bajo ciertas condiciones puede
causar la enfermedad.
Klebsiella se puede cultivar de suelo, del agua y de alimentos. De hecho, es probable que
tengamos K. pneumoniae en nuestro intestino de comer los alimentos crudos tales como
ensaladas. Dos investigaciones en exámenes de bacterias de brotes ETA encontraron K.
pneumoniae: en el 4% de la lechuga cruda investigada, se aisló K. pneumoniae.
Como regla general, las infecciones por Klebsiella tienden a ocurrir en la gente con sistemas
inmunes debilitados. Muchas de estas infecciones se obtienen cuando una persona está en el
hospital por una cierta otra razón. La infección más común causada por las bacterias de Klebsiella
fuera del hospital es pulmonía.
La pulmonía por Klebsiella tiende a afectar a
pacientes con enfermedades subyacentes, tales como
alcoholismo, diabetes y enfermedad pulmonar
crónica.
Las personas infectadas desarrollan generalmente
elevada fiebre, síntomas semejantes a la gripe y una
tos productiva de mucho mucus. El esputo estará a
menudo teñido con sangre.
La mortalidad por pulmonía a Klebsiella es el alrededor 50% debido a la enfermedad subyacente
que tiende para estar presente en personas afectadas. Mientras que son normales en pulmonías
típicas las resoluciones sin complicación, la pulmonía a Klebsiella causa con frecuencia la
destrucción del pulmón y “bolsillos de pus” en el pulmón (conocido como abscesos). El índice de
mortalidad para éstos casos es de alrededor del 90%.
Puede también haber pus que rodee al pulmón (conocido como empiema), que puede ser muy
irritante al tejido pulmonar delicado y puede causar finalmente una cicatriz. Klebsiella es
finalmente una parte de la vida normal y viven en el interior de todos nosotros.
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LAS ENTEROBACTERIAS
Enterobacter sp
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LAS ENTEROBACTERIAS
6. Género Enterobacter:
El Enterobacter es una bacteria perteneciente a la familia de las Enterobacterias, que contiene
una serie de especies bacterianas halladas en el intestino humano y animal y en el medio
ambiente. Este microorganismo ha estado ligado a brotes de meningitis o enteritis, en especial en
los lactantes.
En los escasos brotes relatados últimamente, se observó una mortalidad del 20% al 50% de los
lactantes que contrajeron la enfermedad. Los lactantes sobrevivientes presentaron complicaciones
duraderas severas incluyendo trastornos neurológicos. Las
consecuencias ligadas a la morbilidad en adultos
parecerían ser significativamente más leve.
Existen ciertas dudas respecto al hábitat natural del
Enterobacter Sakasaki, principal responsable aislado de
éstas patologías. Esta bacteria es detectada en el intestino
humano saludable, probablemente como huésped
intermitente. Asimismo, es posible hallarla en el intestino
de animales como así también en el medio ambiente.
El Enterobacter ha sido detectado en otros tipos de
alimentos, pero únicamente la fórmula infantil en polvo
ha estado ligada a brotes de la enfermedad.
El Enterobacter está ligado a la morbilidad en todos los grupos por edad. A partir de la
distribución por edad de los casos relatados se deduce que los lactantes (niños y niñas menores de
un año) se encuentran especialmente en riesgo. Entre los lactantes en mayor riesgo de padecer la
infección por el Enterobacter se encuentran los recién nacidos (primeros 28 días), en particular los
lactantes prematuros, los lactantes de bajo peso al nacer o los inmunodeprimidos. Los lactantes de
madres infectadas con el VIH también se encuentran en riesgo debido tanto a que son vulnerables
a la infección como al hecho de necesitar imperiosamente la fórmula infantil. Esto, y el bajo peso
al nacer, podrían resultar de gran preocupación para algunos países en vías de desarrollo, lugares
en los que la proporción de lactantes es mayor que en los países desarrollados.
La reunión de expertos recientemente realizada recomendó que las personas a cargo del cuidado
del niño, en especial aquellos en alto riesgo, deberían ser alertados con regularidad acerca del
hecho que la fórmula infantil en polvo no es un producto estéril.
En aquellas situaciones en las que la madre no puede amamantar, o escoge no hacerlo por
determinadas razones, las personas que cuidan del niño deberían utilizar, siempre que sea posible
y factible, una fórmula líquida comercialmente estéril o incluir alguna medida de
descontaminación en la preparación de la fórmula infantil en polvo (como ser reconstituyendo la
misma con agua hervida o entibiando la fórmula reconstituida).
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LAS ENTEROBACTERIAS
Una evaluación preliminar del riesgo determinó que un menor tiempo empleado en la
manipulación (tiempo entre la rehidratación de la fórmula y su consumo) y el suministro de la
fórmula reconstituida disminuye el riesgo de infección en los lactantes. Combinando las medidas
de control se produciría el mayor impacto en la reducción del riesgo.
Con la tecnología actual, no parece ser posible producir una fórmula infantil en polvo estéril. Sin
embargo, se ha recomendado a la industria las maneras a través de las cuales mejorar la seguridad
de la fórmula infantil en polvo.
La Comisión del Codex Alimentarius de FAO / OMS establece lineamientos internacionales
sobre los alimentos. Las actuales especificaciones microbiológicas del Codex respecto de la
fórmula infantil en polvo limitan la cantidad de bacterias denominadas coliformes, entre las
cuales se encuentra el Enterobacter sakazakii. Si bien este límite probablemente ayude a evitar
una serie de brotes, no otorga el nivel de seguridad suficiente en vista de los brotes causados por
la fórmula infantil en polvo que cumple con las especificaciones actuales. Teniendo en cuenta la
nueva información sobre este problema emergente, la reciente reunión de expertos recomendó
que el Codex revisase los lineamientos internacionales para abordar de mejor manera los riesgos
microbiológicos derivados de la fórmula infantil en polvo, incluyendo el establecimiento de una
especificación microbiana para el Enterobacter sakazakii.
Se han relatado casos de infecciones con Enterobacter sakazakii debido a fórmulas infantiles
contaminadas únicamente en algunos países desarrollados. Probablemente exista una baja tasa de
relatos de infección en todos los países. La ausencia de casos relatados se debe tal vez a la falta
de conciencia respecto del problema y no a la ausencia de enfermedad. En general, las
limitaciones de los sistemas actuales de vigilancia en la mayoría de los países permitirían explicar
también la falta de casos relatados. Dado que la fórmula infantil en polvo se utiliza con mucha
frecuencia, la presencia del Enterobacter sakazakii en la fórmula infantil y sus posibles efectos en
los lactantes podrían representar un significativo problema de salud pública en la mayoría de los
países.
Los actuales estándares del Codex no permiten la presencia de patógenos como la Salmonella en
la fórmula infantil en polvo. La actual especificación microbiológica del Codex para la
Salmonella consiste en la ausencia de la misma en 60 muestras de 25 gramos cada una. Sin
embargo, se han relatado casos ligados a la Salmonella en la fórmula infantil en polvo.
De acuerdo con la información que existe hasta el momento, no se han relatado casos de
infecciones con Enterobacter sakazakii en lactantes amamantados exclusivamente. Se sabe que,
en 50 % – 80 % de los casos la fórmula infantil en polvo es tanto el vehículo como el origen
(directo o indirecto) de la enfermedad ocasionada por el E. sakazakii. La lactancia materna
beneficia a los lactantes en todas las circunstancias. OMS recomienda que los lactantes sean
amamantados exclusivamente durante los primeros seis meses de vida y continúen siéndolo al
tiempo que se introducen alimentos complementarios hasta los dos años de edad o más. Existe
sobrada evidencia para afirmar que los lactantes amamantados en forma parcial o no
amamantados se encuentran en un riesgo significativamente mayor de morbimortalidad por
enfermedades diarreicas.

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LAS ENTEROBACTERIAS
Desde que FAO y OMS tomaron conocimiento del tema, las dos organizaciones, conjuntamente
con los Estados Miembro, han estado trabajando para reunir datos y la experiencia relevante para
abordar esta cuestión. Esta labor se inició en el año 2003 y hoy cuentan con evidencia suficiente
para avanzar en el tema. La reunión de expertos de FAO / OMS realizada en febrero del 2004, en
Ginebra, examinó la información que se conoce acerca de los métodos de producción, los factores
de riesgo, la incidencia de enfermedades, entre otras cosas, y se han elaborado una serie de
recomendaciones para elevar a FAO / OMS, al Codex y a los Países Miembro acerca de opciones
de consideración para manejar y evitar este riesgo.
Se desconoce la verdadera magnitud del problema dada la falta de vigilancia y de sistemas para
tomar conocimiento de los relatos sobre el Enterobacter sakazakii en la mayoría de los países. A
menudo, la magnitud del problema se describe en cuanto a la frecuencia y a la gravedad. La
frecuencia de enfermedad en los lactantes parecería ser baja, si bien la enfermedad es
devastadora. Una reseña de la literatura en idioma inglés de casos relatados en lactantes realizada
entre 1961 y el año 2003 halló 48 casos de enfermedad causada por el Enterobacter sakazakii en
lactantes. La encuesta US FoodNet 2002 halló que la tasa de infección invasiva por Enterobacter
sakazakii entre lactantes menores de un año de edad era de 1 cada 100.000.
Las tasas relatadas de mortalidad por infecciones causadas por el Enterobacter sakazakii son del
20% al 50%. La infección sería responsable de significativos efectos en el largo plazo
manifestados en trastornos neurológicos, en especial entre aquellos con meningitis severa y
encefalitis.
Naciones Unidas establece que, en el caso de estos lactantes, siempre que la alimentación de
reemplazo sea aceptable, factible, asequible, sostenible y segura, ase recomienda evitar la
lactancia materna y utilizar la fórmula infantil como opción. Algunos de estos lactantes podrían
estar infectados con el VIH y, por lo tanto, encontrarse inmunodeprimidos.
Es preciso tener en cuenta ciertos factores nutricionales y otros tantos, como ser la alteración del
contenido nutricional, el riesgo de quemaduras debido al manejo del agua hervida o caliente o de
la fórmula. La fórmula debería enfriarse y manejarse en forma apropiada.

LAS ENTEROBACTERIAS
Serratia sp
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LAS ENTEROBACTERIAS
7. Género Serratia:
Serratia sp., es un género que pertenece a la familia Enterobacteriaceae y como tal, es un
bacilo Gram negativo, anaeróbico facultativo, oxidasa negativo, que crece abundantemente sobre
agar sangre, agar chocolate y agar McConkey, produciendo colonias que pueden ser pigrnentadas,
especialmente Serratia marcescens y Serratia rubias, las cuales producen un pigmento rojo muy
característico llamado prodigiosita.
Serratia marcescens forma colonias lactosa negativo en
el agar McConkey y puede ser B-hemolítica en el agar
sangre. Crece adecuadamente en hemocultivos, en
especial, cuando se emplean sistemas automatizados
con botellas aeróbicas.
La clasificación actual del género Serratia, nos habla
de 8 especies: Serratia entomophila, Serratia ficaria,
Serratia fonticola, grupo Serratia liquefaciens
(liquefaciens, proteamaculans y grimesii), Serratia
marcescens y Serratia marcescens biogrupo 1, Serratia
odorífero biogrupos 1 y 2, Serratiaplymuthica y
Serratia rubidae.
En cuanto a su potencial patogénico, S. entomophila, no ha sido asociada con problemas en el
humano, S. plymuthica y S. fonticola muy raramente, mientras que el grupo S. liquefaciens, es la
que se presenta con mayor frecuencia, pero es S. Marcescens quien presenta mayor importancia
clínica y mayor resistencia antimicrobiana.
El género Serratia, es un oportunista que ha sido reconocido
como patógeno humano solamente desde los años 60. Antes,
con la presunción de que el microorganismo no era patógeno,
el pigmento rojo hallado en algunas cepas las volvió
atractivas como microorganismos marcadores, para estudiar
algunas cuestiones importantes que involucraban la
transmisión bacteriana.
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LAS ENTEROBACTERIAS
La epidemiología de Serratia es algo diferente a la de otras Enterobacteriaceae (bacterias que
reciben ese nombre por que infectan principalmente el tracto gastrointestinal), ya que parece
menos probable que Serratia colonice el tracto gastrointestinal, pero es más probable que
colonice los tractos respiratorio y urinario de los adultos hospitalizados.
Entre las infecciones hospitalarias, se ha descubierto que Serratia produce aproximadamente el
4% de las bacteremias y de las infecciones del tracto respiratorio inferior y el 2% de las
infecciones del tracto urinario, de las heridas quirúrgicas y las infecciones cutáneas.
Además de la importancia como oportunista hospitalario, se ha asociado específicamente con
infecciones en adictos a la heroína. En un estudio realizado en los años 70, se informó que
Serratia fue aislada en el 14% de las endocarditis asociadas con drogadictos en San Francisco. La
mayoría de los casos de adquisición hospitalaria se asocia con catéteres intravenosos,
intraperitoneales o sondas urinarias y con la instrumentación de los tractos urinario y respiratorio.
El tratamiento antibiótico de las infecciones por Serratia se complica por la elevada frecuencia de
resistencia antibiótica múltiple observada en estas bacterias.

LAS ENTEROBACTERIAS
Citrobacter sp
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LAS ENTEROBACTERIAS
8. Género Citrobacter:
Este género comprenden a diversas especies presentes en general en el tubo digestivo del
hombre y los animales, en el suelo, vegetales y en aguas. Son patógenos oportunistas. Al igual
que Klebsiella los aislamientos hospitalarios generalmente presentan resistencias a múltiples
antibióticos.
El citrobacter junto con el enterobacter, klebsiella y escherichia forma el grupo coliforme de
bacterias entéricas.
El género citrobacter es un grupo de bacilos gramnegativos aerobios que se encuentran
frecuentemente en el agua, suelo, comida y el tracto intestinal de animales y humanos. Se sabe
que estos microorganismos pueden producir infecciones importantes, especialmente en huéspedes
inmunodepresivos. Son organismos ubicuos y son causa frecuente de infecciones en el hombre.
Destruyen las microvellosidades, formando lesiones muy características denominadas de
adherencia y eliminación.
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LAS ENTEROBACTERIAS
Edwarsiella sp
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LAS ENTEROBACTERIAS
9. Género Edwarsiella:
El género Edwardsiella incluye un grupo de organismos móviles, productores de SH2, lactosa
– negativos que se asemejan a las salmonellas en algunos aspectos bioquímicos y a veces en su
patogenicidad. La Edwardsiella tarda o tardía, se ha aislado de diversos mamíferos y reptiles. A
veces se encuentra en el tracto intestinal humano, especialmente en gastroenteritis agudas, y se ha
asociado con cuadros de meningitis, septicemia e infecciones de heridas.
No dejan de ser, no obstante raras en el organismo humano y muy probablemente no sean
patógenas ex extremo. Los fármacos de elección son kanamicina, amplicilina, cefalotina y
cloranfenicol.
Son móviles, SH2 e Indol (+) y fermentan a la glucosa con producción de gas. No producen ß
galactosidasa.

LAS ENTEROBACTERIAS
Proteus sp
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LAS ENTEROBACTERIAS
10. Género Proteus:
Proteus penneri, denominado con anterioridad como Proteus vulgaris biogrupo 1 o como P.
vulgaris indol – negativo, fue reconocido como una especie nueva en 1982. Tradicionalmente, se
ha considerado como un representante menor del género Proteus debido a su escasa incidencia
epidemiológica. No obstante, se asocia a procesos similares a los que producen Proteus mirabilis
o P. vulgaris y tiene factores de patogenicidad análogos a los de éstos. Desde el punto de vista de
la resistencia a los antimicrobianos, presenta unas características particulares que, unido a algunas
peculiaridades en sus perfiles bioquímicos, le hacen fácilmente reconocible en el laboratorio de
microbiología.
El género Proteus forma parte de la familia Enterobacteriaceae. El Bergey’s Manual of
Deteminative Bacteriology define este género como bacilos gramnegativos, móviles, con flagelos
perítricos, aerobios y facultativos anaerobios. Tradicionalmente a este género se le ha encuadrado
en la tribu Proteae que incluye también a los géneros Providencia y Morganella. Todos ellos se
caracterizan por su capacidad para desaminar la fenilalanina trasformándola en ácido
fenilpirúvico debido a la producción de fenilalanina desaminasa, hidrolizar la tirosina, desdoblar
en casi todos los casos la urea y ser resistentes a la colistina. En la tabla 1 aparecen reflejadas las
diferentes especies de este género y las pruebas bioquímicas que les caracterizan. Dentro de este
género, también se encuadran otras tres especies, denominadas como genomoespecies,
diferenciadas por técnicas de biología molecular y que aún carecen de un nombre. Asimismo, se
incluyen las diferentes especies y
subespecies de los géneros Providencia y
Morganella. La separación de P. penneri
de P. vulgaris se propuso en el año 1982
por estudios de homología de secuencia
de DNA.
Al igual que en el caso de P. mirabilis y
P. vulgaris, se ha establecido una
clasificación epidemiológica de los
aislados clínicos de P. penneri, utilizando
antisueros frente a antígenos somáticos
O (lipopolisacárido). También
tipificación
se han desarrollado
utilizando
sistemas de
proteínas de
membrana, el ribotipado y técnicas de
PCR (rep-PCR y RAPD-PCR), que han
demostrado una estructura poblacional
con una elevada diversidad.
El reconocimiento inicial en las placas de cultivo de los microorganismos adscritos al género
Proteus es relativamente sencillo, ya que se caracterizan por su crecimiento en ondas en la
superficie del agar, bien formado círculos concéntricos a partir de un botón de inoculación o con
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LAS ENTEROBACTERIAS
una película uniforme. Este efecto se conoce como swarming. Esta característica es debida a
cambios en los procesos de elongación durante la división celular, formándose células alargadas
no septadas y a la hiperexpresión de la síntesis de flagelina, que determina un recubrimiento
profuso de las células de estos microorganismos por flagelos. Estos procesos se producen para
conseguir una mejor adaptación de los integrantes del género Proteus a los diferentes
microambientes en los que se desarrollan. Esta característica se pierde en medios deficientes en
electrolitos, como el medio de CLED, con concentraciones subinhibitorias de diferentes
alcoholes, como el medio PEA (phenyl-ethyl alcohol agar, habitualmente utilizado en la
búsqueda de microorganismos anaerobios) o añadiendo mayor cantidad de agar a los medios de
cultivo. La propiedad de producir swarming es común a todas las especies del género Proteus,
aunque en algunas cepas de P. penneri está disminuida, siendo necesario reducir la concentración
de agar del medio para que se manifieste. Muchos medios cromogénicos actuales, utilizados para
la siembra de orinas, están diseñados para evitar este crecimiento en ondas en las placas de
cultivo. Algunos de ellos requieren la realización posterior de pruebas adicionales para la
diferenciación de las especies con resultado positivo en la prueba del indol, de aquellos que
presentan un resultado negativo.
Proteus penneri es indistinguible en los medios de cultivo habituales de P. mirabilis y P. vulgaris.
En medio de agar sangre presenta el típico crecimiento en ondas, en ocasiones menos acentuado,
y colonias lactosa negativa planas con bordes irregulares en medio de McConkey. Al igual que los
anteriores, tiene un olor característico y, como P. vulgaris, es capaz de producir indol a partir del
triptófano. No obstante, puede diferenciarse de éste por su negatividad en las pruebas de la
ornitina decarboxilasa y su imposibilidad para utilizar la maltosa (tabla 1). P. penneri también se
caracteriza por su negatividad en la utilización de la salicina y la esculina. Algunos autores han
señalado que, tras una incubación prolongada de tres días de los caldos utilizados para la prueba
de indol, se produce un color verde característico al revelarlo con el reactivo de Kovacs y no el
color rojo habitual.
En algunos sistemas de identificación que no utilizan inicialmente la prueba del indol para
diferenciar las distintas enterobacterias, puede producirse una falsa identificación de P. penneri
como P. mirabilis. En estos casos, puede también utilizarse como criterio diferenciador el
fenotipo de sensibilidad a los antibióticos ß – lactamicos. Proteus penneri es naturalmente
resistente a la amoxicilina y la cefuroxima, mientras que P. mirabilis puede ser sensible o
resistente a la amoxicilina pero habitualmente sensible a la cefuroxima (con la excepción de las
cepas que producen ß – lactamasas de espectro extendido (BLEE)).
En general la eficiencia en la identificación del género Proteus que realizan los sistemas
comerciales automáticos y las galerías de identificación, habitualmente utilizadas en los
laboratorios de microbiología, es superior al 95% cuando se considera el género en su conjunto.
No hay descritos problemas específicos asociados a P. penneri que no sean los reseñados con
anterioridad. Tan sólo se describen problemas importantes con Proteus hauseri, extremadamente
infrecuente en el laboratorio de Microbiología Clínica. Este último estaba anteriormente
encuadrado como un subgrupo de P. vulgaris, aunque puede diferenciarse fenotípicamente de éste
por su resultado negativo en la utilización de salicina o esculina. Con otros microorganismos
cercanos, Morganella y Providencia, la eficiencia en la identificación puede ser inferior al 80%,
sobre todo cuando se consideran las especies más infrecuentes en el laboratorio.

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LAS ENTEROBACTERIAS
El genero Proteus está ampliamente difundido en la naturaleza y forma parte de la microbiota
intestinal. Se ha aislado en muestras ambientales, incluyendo tierras, abonos y aguas
contaminadas, y en una gran variedad de muestras de animales. Proteus myxofaciens sólo ha sido
aislado en insectos. Entre todas las especies que pertenecen a este género es sin duda P. mirabilis
la especie mas común, seguido de P. vulgaris.
Proteus penneri ha sido aislado mayoritariamente en muestras del tracto urinario y se ha asociado
a infecciones urinarias no complicadas, a pielonefritis aguda y cuadros de urolitiasis. Aunque
Proteus, Providencia y Morganella se aíslan con mayor frecuencia en muestras de heces de
pacientes con gastroenteritis que en individuos sin esta complicación, su papel patogénico a este
nivel es incierto. De entre todos los microorganismos relacionados, sólo ha sido sugerida la
implicación de Providencia alcalifaciens en cuadros de diarrea. En ensayos de cultivos celulares
este microorganismo tiene capacidad para invadir las células, así como la de producir cuadros de
diarrea en animales de experimentación. Con P. penneri no se han realizado estos estudios.
Protetus penneri también se ha relacionado con las infecciones nosocomiales, sobre todo en
pacientes ingresados en unidades de cuidados intensivos o con factores de riesgo como diabetes o
inmunosupresión. En estos casos se ha aislado de orina, muestras respiratorias, incluyendo
secreciones de aspiraciones bronquiales y lavados broncoalveolares, muestras del sistema
nervioso central, piel y tejidos blandos, heridas quirúrgicas y en pacientes quemados. En muchas
ocasiones forma parte de cultivos mixtos, sobre todo en abscesos abdominales. También se ha
aislado de muestras de sangre obtenidas por punción venosa y a través de catéteres.
La última edición del Manual de Microbiología Clínica de la Sociedad Americana de
Microbiología (octava edición) adjudica a P. penneri una significación patogénica con valor 1
(patógeno reconocido para el hombre) de entre tres categorías diferentes. La categoría 2 indica
patogenicidad probada en contadas ocasiones y la 3 indica que el microorganismo se ha aislado
en humanos pero con significación incierta. En la categoría 1 también se incluye otras especies
del genero Proteus como P. mirabilis y P. vulgaris mientras que en la categoría 3 se destaca
Providencia heimbachae y Providencia rustigianii, generalmente aislados en heces de animales y
en el hombre. Esta significación patogénica es diferente de la frecuencia con la que se aíslan en
las muestras clínicas que se procesan en los laboratorios de microbiología.
La patogenicidad de P. penneri se asimila a la de P. mirabilis o P. vulgaris y se asocia a la
presencia de fimbrias, flagelos, proteínas de membrana externa específicas, lipopolisacárido,
enzimas proteolíticas, incluyendo gelatinasas y proteasas, hemolisinas y sobre todo a la
producción de ureasa. En la tabla 3 se indican los diferentes factores de patogenicidad asociados a
P. penneri y su contribución a la virulencia. La mayoría están presentes en el resto de las especies
del género Proteus.
La producción de fimbrias en P. penneri le permiten persistir en el tracto urinario sin ser
eliminado eficazmente por los sistemas de defensa. Sus fimbrias son algo diferentes de las que se
encuentran en P. mirabilis. En el primero se asocian con su capacidad de adherencia a células de
los glomérulos y membranas tubulares en el riñón y a materiales plásticos propios de los
catéteres. Esta última propiedad también la presenta P. stuartii. Las fimbrias de P. mirabilis se
asocian con su adherencia al epitelio que recubre el trato urinario superior y la colonización de la
vejiga urinaria.

LAS ENTEROBACTERIAS
La producción de ureasa por parte de las especies del género Proteus es considerada como de
gran importancia para su patogenicidad y se relaciona con procesos de urolitiasis infectiva o
cistitis alcalina incrustante, en los que aparecen sedimentos urinarios asociados a cálculos de
estruvita. La ureasa es capaz de desdoblar eficazmente la urea presente en la orina y producir
la alcalinización de la misma por producción de hidróxido amónico. Con la alcalinización
precipitan Mg2+
y Ca2+
que habitualmente son solubles a pH fisiológico urinario. Como
consecuencia de ello se producen los cálculos de estruvita (MgNH4PO4.6H2O). La presencia
de exopolisacáridos en la orina y la posibilidad de crecimiento en biopelículas (biofilms)
facilita los procesos de nucleación de los cálculos.
Aunque este efecto se ha asociado mayoritariamente a P. mirabilis, también se ha observado
con P. vulgaris y P. penneri. En estudios de caracterización de proteínas se ha demostrado que
la ureasa de P. penneri es similar desde el punto de vista funcional a la del resto de las
especies que integran el género Proteus, pero puede diferenciarse bioquímicamente de la del
resto de especies de Proteus y de la presente en las cepas de de Morganella o Providencia que
producen esta enzima. En modelos in vitro, se ha confirmado que su expresión puede
inducirse por la presencia de urea, a diferencia de la de P. mirabilis cuya producción es
constitutiva. También en modelos in vitro, se ha demostrado que la ureasa de P. penneri
participa en la formación de los cálculos de estruvita y que su actividad ureásica es inhibida
por el ácido acetohidroxámico.
Factores de virulencia asociados a Proteus penneri
Factor de virulencia Contribución a la patogenicidad
Fimbrias Adherencia a tejidos y material protésico
Flagelos Movilidad ascendente desde el uréter al riñón
Ureasa
Desdoblamiento de la urea
Alcalinización del pH de la orina
Formación de cálculos de estruvita
Citotoxicidad
Proteasas Proteasas de IgA
Desaminasas Producción de -cetoácidos que actúan como sideróforos
Invasividad Internalización en células del hospedador
Hemolisinas
Adherencia e invasión celular
Citotoxicidad
Polisacárido capsular
Formación de biofilms
Nucleación de cálculos
Lipopolisacárido Endotoxicidad. Resistencia al suero
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LAS ENTEROBACTERIAS
Se ha destacado la capacidad de P. penneri de producir proteasas de IgA como factor
coadyuvante en su patogenicidad en el tracto urinario. También la producción de ureasa
facilita la alcalización de la orina y las condiciones adecuadas para la actuación de la proteasa
de IgA.
A diferencia de otros miembros del género, P. penneri produce al menos dos hemolisinas de
codificación cromosómica que se relacionan parcialmente con las de Escherichia coli y P.
mirabilis y facilitan la adherencia a los tejidos del tracto urinario. Parte de la hemolisina
permanece ligada a la célula bacteriana, mientras que otra es eliminada al exterior.
Curiosamente, parte de la hemolisina liberada puede degradarse por la proteasa de IgA del
mismo microorganismo. Este hecho estaría relacionado con un proceso de eliminación o
regulación fisiológica. En ensayos in vitro se ha demostrado que la capacidad de invasión
celular que demuestra P. penneri también depende de la producción de hemolisinas y del
efecto citotóxico asociado.
Se ha demostrado que P. penneri también produce sideróforos, sustancias capaces de
secuestrar iones Fe, esenciales para la supervivencia metabólica de las bacterias.
Proteus penneri, al igual que P. vulgaris, es intrínsecamente resistente a la amoxicilina y a las
cefalosporinas de espectro reducido, siendo característica su resistencia a la cefuroxima. Este
perfil de sensibilidad es debido esencialmente a la producción de una ß-lactamasa denominada
HugA similar a la ß-lactamasa CumA de P. vulgaris. Por la resistencia que confieren a la
cefuroxima, es frecuente referirse a ellas como cefuroximasas. HugA y CumA son penicilinasas
cromosómicas de clase A (con centro activo de serina), que se inhiben por el ácido clavulánico y
que se incluyen en el grupo 2e de la clasificación de ß-lactamasas de Bush, Jacoby y Medeiros
publicada en el año 1995. En este grupo también se integran la ß-lactamasa de Citrobacter koseri.
Desde el punto de vista fenotípico e hidrolítico, este grupo se encuentra cercano a las ß-
lactamasas de Klebsiella oxytoca (ß-lactamasas K1) del grupo 2be, en el que también se
encuadran las BLEE. Las ß-lactamasas HugA, CumA, K1 y la de C. koseri tienen un perfil
hidrolítico amplio que incluye las penicilinas, cefuroxima, ceftriaxona y cefotaxima, pero no la
ceftazidima, cefamicinas (cefotixitina) y carbapenemas.
En resumen, podemos decir que el perfil de resistencia a los antibióticos ß-lactámicos en P.
penneri y P. vulgaris es tan característico que puede utilizarse como control de la identificación
realizada con los sistemas automáticos que ofrecen simultáneamente la identidad del
microorganismo estudiado y su sensibilidad a los antimicrobianos. Este perfil se emplea como
ejemplo típico en el proceso de lectura interpretada del antibiograma.
Proteus penneri, al igual que el resto de los integrantes del género Proteus, es resistente a la
colistina y a las tetraciclinas. El primer caso está relacionado con la presencia de un LPS
característico con gran cantidad de grupos 4-amino-L-arabinosa que reducen su afinidad por los
antibióticos polipeptídicos. Con ello se impide el desplazamiento de los iónes Ca2+
y Mg2+
del
LPS, la desorganización de las membranas externas e internas de la pared de la bacteria y la
muerte celular. Otras enterobacterias con resistencia similar a la colistina son Providencia,
Morganella, Serratia y Cedecea.

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LAS ENTEROBACTERIAS
El género Proteus tiene resistencia natural a las tetraciclinas. Se han caracterizado diversos
mecanismos responsables de la resistencia. Uno de ellos, TetJ, participa en mecanismos de
expulsión. El gen asociado es cromosómico y su expresión inducible por la presencia de
tetraciclinas, aunque también se han descrito mecanismos de expulsión con expresión
constitutiva. Asimismo, se ha detectado resistencia transferible asociada a plásmidos. El sistema
de transporte AcrAB también se asocia a la resistencia intrínseca de algunas especies del género
Proteus a las tetraciclinas y a la pérdida de sensibilidad frente a las glicilciclinas (tigeciclina).
Proteus penneri es resistente al cloranfenicol, aunque pueden existir discrepancias en los
resultados de sensibilidad según el método utilizado para su estudio. Con un disco de 30 µg suele
producir halos de inhibición de menos de 14 mm. En algunos casos se ha demostrado que esta
resistencia es plasmídica al igual que la resistencia a las sulfonamidas.
La resistencia a los aminoglucósidos en P. penneri no difiere de la encontrada en P. mirabilis y es
debida mayoritariamente a enzimas modificantes de aminoglucósidos. Recientemente, y de modo
similar a lo que ocurre con otros patógenos urinarios, la resistencia a las quinolonas está
incrementándose, aunque no alcanza cifras tan alarmantes como en E. coli. El mecanismo de
resistencia es debido a mutaciones simples o dobles en las subunidades de topoisomerasas gyrA y
parC. Al contrario de lo que sucede habitualmente en E. coli, existen trabajos que demuestran un
alto número de aislamientos con mutaciones simples y dobles en gyrB y la inserción de
nucleotidos que confieren resistencia a las quinolonas. En la figura 1 se indica comparativamente
el porcentaje de aislamientos de P. mirabilis, P. vulgaris y P. penneri resistentes a diversos
antimicrobianos obtenidos en el Hospital Universitario Ramón y Cajal durante los años 2003 y
2004.
Por último, los microorganismos integrantes del género Proteus deben ser considerados
resistentes a la nitrofurantoína con independencia del valor de la CMI obtenido en las pruebas de
sensibilidad. La producción de ureasa por estos microorganismos provoca la alcalinización de la
orina. A pH alcalino, la nitrofurantoína pierde actividad antibacteriana.

LAS ENTEROBACTERIAS
Morganella sp
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LAS ENTEROBACTERIAS
11. Género Morganella:
El género Morganella, pertenece a la familia Enterobacteriaceae y hasta el momento, presenta
una sola especie: morganii. Inicialmente, Morganella morganii recibió el nombre de Proteus
morganii, pero por estudios genéticos, se le sacó del género Proteus y se creo el género
Morganella.
Este último género, presenta un INVIC: + + - - , es capaz de hidrolizar la urea, tiene una
movilidad variable a 37° C y produce ácido y gas a partir de la glucosa.
Además, es capaz de reducir los nitratos a nitritos, de fermentar la manosa y como tidos los
integrantes de la familia Enterobacteriaceae, es oxidasa negativo.
Las cepas de Morganella morganii, crecen bien en los medios de aislamiento primarios como el
agar sangre y el agar McConkey, no son hemolíticas y usualmente no producen el fenómeno de
"swarming" como Proteus.
En épocas recientes, se propuso la creación de una sub clasificación de este género en dos sub
especies: Morganella morganii ssp. morganii y Morganella morganii ssp. sibonii.
M morganii, es causa conocida de infecciones del tracto urinario y fuera del tracto urinario, puede
producir diversos tipos de infecciones. Por otra parte, se le ha relacionado como un patógeno
entérico, sin embargo aquí, su papel etiológico es dudoso.
En forma reciente, se documentó un caso de una corioamnionitis y sepsis asociada, caso
complicado con un síndrome de distress respiratorio, además de infecciones en el recién nacido.
Este agente, rara vez es causa de infecciones invasivas en personas inmunocompetentes, pero sí
puede ser una causa probable de infecciones nosocomiales en personas irimunocomprometidas.
Esta bacteria, presenta una resistencia intrínseca a la polimixina, ampicilina y a cefalotina y se ha
documentado que es capaz de producir una beta lactamasa inducible o la beta lactainasa de efecto
expandido.
Todo esto, claro está, cuando el agente se ve expuesto a un agente inductor y las enzimas
producidas, hidrolizan a las penicilinas y cefalosporinas de efecto expandido. Generalmente, estas
bacterias dejan de producir la enzima cuando el agente inductor es removido, aún cuando,
algunas cepas mutan a un estado de continua producción de beta lactamasa.
Todo esto nos habla de un agente con una alta resistencia antimicrobiana, tanto natural
(intrínseca) como adquirida.

LAS ENTEROBACTERIAS
Providencia sp
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LAS ENTEROBACTERIAS
12. Género Providencia:
Providencia rettgeri (antes Proteus rettgeri) es una bacteria móvil perteneciente al género
Providencia, que junto a Proteus y Morganella forman la tribu Proteeae o Pro. Componente
normal de la flora colónica en el hombre, se diferencia de otras especies de Providencia en que
hidroliza rápida y abundantemente la urea
Como patógeno humano se ha descripto como causante de infecciones urinarias, sobre todo en
pacientes mayores y con catéteres uretrales, y en infecciones de heridas en pacientes
inmunodeprimidos y quemados. A diferencia de P. stuartii son muy escasas las publicaciones de
bacteremias causadas por este microorganismo.
En una revisión bibliográfica en PubMed utilizando los términos ''Bacteriemia y Providencia
rettgeri'' aparecen sólo 2 casos de sepsis fatal en probable relación a contaminación de
hemoderivados y algún caso aislado en grandes series de bacteriemias.
Por otra parte, Providencia alcalifaciens es un miembro bastante semejante al anterior y
perteneciente también a la familia Enterobacteriaceae.
Hay informes que P. alcalifaciens puede causar diarrea, pero el mecanismo por el que la causa no
es bien conocido. El modelo de condensación de la actina era diferente del producido por la
toxina enteropatogénica de Escherichia coli pero similar a Shigella flexneri.
Se concluye que algunas algunas subespecies de P. alcalifaciens son los enteropatogénicos y que
ellos causarían los cuadros de diarrea invadiendo el epitelio de la mucosa intestinal.

LAS ENTEROBACTERIAS
Yersinia sp
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LAS ENTEROBACTERIAS
13. Género Yersinia:
Este género comprende varias especies entre ellas Yersinia pestis, agente de la Peste Negra o
Plaga Bubónica o Neumónica, comúnmente llamada la Muerte Negra, enfermedad de los
roedores, trasmitida ocasionalmente al hombre por las pulgas, con pandemias históricas desde el
siglo VI, donde mató a un tercio de la población en Europa. Luego de la Edad Media ha habido
brotes en diversas partes del mundo, sobre todo en relación con las guerras.
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LAS ENTEROBACTERIAS
Se han denunciado en 1995 y comienzos de 1996 casos en India, Madagascar y otros países
africanos, en Brasil y Perú. Y. pestis es endémica en algunas regiones tales como Irán y el oeste
de Estados Unidos.
Otra especie, Y. enterocolitica es muy ubiquitaria, se ingiere con agua o alimentos contaminados.
Algunos biotipos están relacionados con enterocolitis en el hombre. Raramente presenta
infecciones sistémicas. Sin embargo, las bacterias atraviesan con frecuencia la mucosa y se
multiplican en los nódulos linfáticos mesentéricos. Debido a los intensos dolores abdominales el
cuadro puede confundirse con apendicitis. Ocasionalmente puede haber una artritis reactiva 2 a 6
semanas luego de la infección. Esto se ve frecuentemente en pacientes con antígeno HLA-B27 de
histocompatibilidad. Cepas virulentas de las 2 especies poseen al menos un gran plásmido de
virulencia.
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LAS ENTEROBACTERIAS
Yersinia enterocolitica
Características generales
Y. enterocolitica es una bacteria pequeña de forma redonda y Gram-negativa, la cual es aislada
frecuentemente de los especímenes clínicos tales como las heridas, las heces fecales, el esputo o
las glándulas linfáticas mesentéricas. Sin embargo, no forma parte normal de la flora humana. Por
otro lado, Y. pseudotuberculosis ha sido aislada del apéndice infectado en los humanos.
Ambos organismos han sido aislados frecuentemente de los animales, tales como los cerdos, las
aves, los castores, los gatos y los perros. Solamente la bacteria Y. enterocolitica se ha encontrado
en muestras ambientales de lagunas y lagos, y en alimentos como la carne, los helados y la leche.
La mayoría de los organismos aislados no han sido catalogados como patógenos.
El nombre de la enfermedad causada por este microorganismo es yersiniosis.
Existen tres especies patogénicas dentro del género Yersinia, pero sólo Y. enterocolitica y Y.
pseudotuberculosis causan gastroenteritis. Hasta el momento, se han reportado muy pocos casos
de brotes causados por Y. pseudotuberculosis, como por ejemplo las presentadas en Japón, donde
se reportaron infecciones en humanos transmitidas por alimentos y por aguas contaminadas.
La yersiniosis se caracteriza generalmente por síntomas tales como la gastroenteritis con diarrea
y/o con vómito; sin embargo, la fiebre y el dolor abdominal son los síntomas que la definen. Las
infecciones causadas por Yersinia son similares a la apendicitis y a la linfadenitis mesentérica,
pero esta bacteria también puede causar infecciones en otras áreas como en las heridas, en las
articulaciones y en el tracto urinario.
La dosis infecciosa es desconocida. La aparición de la enfermedad se da entre las 24 y 48 horas
después de la ingestión, la cual es la ruta usual de infección (los alimentos y las bebidas son los
vehiculos de transmisión).
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LAS ENTEROBACTERIAS
El diagnóstico de la yersiniosis se inicia con el aislamiento del microorganismo a partir de las
heces fecales, de la sangre, o del vómito de la víctima, y a veces la muestra es tomada durante la
apendicectomía. La confirmación se realiza con el aislamiento y la posterior identificación
bioquímica y serológica de Y. enterocolitica, provenientes tanto del hospedero humano como del
alimento ingerido. Se ha reportado que la diarrea ocurre en el 80% de los casos; y que los
síntomas más confiables son el dolor abdominal y la fiebre.
Dada la dificultad para el aislamiento de yersiniae de las heces fecales, muchos países dependen
de la serología. Para ello, a los pacientes críticos y convalecientes se les realiza un análisis en
busca del serotipo de Yersinia spp. sospechoso.
Las cepas de Y. enterocolitica se pueden encontrar en las carnes (de cerdo, la de carne de vaca, la
de cordero, etc.), en las ostras, el pescado, y la leche cruda. La causa exacta de la contaminación
de los alimentos es desconocida. Sin embargo, la prevalencia de este organismo en el suelo y el
agua, así como también en ciertos animales como los castores, los cerdos, y las ardillas, ofrece
grandes oportunidades para que este organismo ingrese a la cadena alimentaria. La falta de
higiene de los manipuladores de alimentos y las técnicas de esterilización inadecuadas, además
del almacenamiento inapropiado, son también importantes fuentes que contribuyen a la
contaminación.
La Yersinia es sensible al calor y como resultado morirá durante el calentamiento (mayor a 70°C).
L as principales causas de infección son el consumo de los alimentos crudos o parcialmente
cocidos y así como la contaminación cruzada, que ocurre cuando los productos cocidos entran en
contacto con los materiales crudos o contaminados (tablas para cortar). Por esta razón, la cocción
adecuada y la higiene en el manejo de los alimentos pueden prevenir las infecciones causadas por
Yersinia en una gran medida.
Las poblaciones más susceptibles a la enfermedad principal y a sus posibles complicaciones son
las más jóvenes, también los débiles, los ancianos y las personas que se encuentren bajo terapias
inmunodepresivas.
El nombre del género Yersinia viene dado por su descubridor, en 1894, Alexandre Yersin,
bacteriólogo franco-suizo del Instituto Pasteur. Originalmente, este microorganismo fue
denominado Pasteurella pestis, pero en el año 1967 fue renombrado como Yersinia pestis en
honor a su descubridor.
Yersinia pestis es un agente infeccioso que ha sido directamente responsable de más muertes
humanas que cualquier otra enfermedad infecciosa, salvo la malaria. Ha originado diversas
pandemias a lo largo de la historia, entre las que cabe destacar: la Plaga de Justiniano (541-542
dC), que asoló Asia, el norte de África, Arabia y parte de Europa; la Peste Negra (1347-1351 dC),
que acabó con la vida de un tercio de la población de Europa; y la Tercera Pandemia (1855-
1959), que comenzó en China e India y terminó por extenderse por el resto de Asia, África y
América.

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LAS ENTEROBACTERIAS
El papel de Y. pestis en la Peste Negra se ha debatido entre los historiadores; algunos han
sugerido que la Peste Negra se propagó muy rápido para haber sido causada por Y. pestis. Se ha
encontrado ADN de Y. pestis en los dientes de aquellos que murieron de Peste Negra pero, sin
embargo, cadáveres medievales que murieron de otras causas no dieron positivo a Y. pestis. Esto
sugiere que Y. pestis fue un factor que contribuyó a las plagas europeas, pero probablemente no el
único. Es posible que las presiones selectivas inducidas por la plaga puedan haber cambiado el
modo en que el patógeno se manifiesta en humanos, seleccionándose en contra de individuos o
poblaciones que eran más susceptibles.
 Yersinia pestis, agente de la denominada peste bubónica o peste negra, que asoló Europa a
mediados del siglo XIV. Esta especie presenta tres subespecies: Y. pestis antiqua, Y pestis
medievalis y Y. pestis orientalis.
 Yersinia pseudotuberculosis, agente de una enfermedad parecida a la tuberculosis que
afecta a los nódulos linfáticos en animales y raramente en humanos.
 Yersinia enterocolitica, agente de ciertas infecciones intestinales (a veces también
sistémicas) en humanos y animales.
El género Yersinia pertenece a las bacterias Gram-negativas aeróbicas facultativas con
metabolismo fermentativo. Es un cocobacilo de tinción bipolar similar a otras Enterobacterias.
Durante el proceso infeccioso genera viscosidad antifagocítica. El organismo presenta motilidad
cuando es aislado, pero pierde esta capacidad mientras permanece en el mamífero húesped.
La peste es una enfermedad natural de los roedores, siendo las ratas el principal reservorio de la
enfermedad. Tras ser infectadas, la mayoría de las ratas mueren, pero un pequeño porcentaje
consigue sobrevivir, quedando como una fuente de Y. pestis.
Las ratas son infectadas a través de un vector, que en este caso es la pulga de rata (Xenopssylla
cheopis). La pulga chupa la sangre de un animal infectado e ingiere a la vez células de Y. pestis,
las cuales se multiplican en el intestino de la pulga y serán transmitidas a otra rata en la siguiente
picadura de la pulga.
La enfermedad se irá extendiendo de forma que la mortalidad entre las ratas se hace tan elevada
que la pulga busca nuevos hospedadores, entre los que se encuentra el hombre. A continuación se
exponen los tres tipos de infecciones a las que puede dar lugar Y. pestis:
Peste bubónica: En el tipo de infección más común. Una vez que las células bacterianas han sido
introducidas mediante la picadura de una pulga dentro de un ser humano, las células bacterianas
se desplazan por el torrente sanguíneo hasta los nódulos linfáticos donde generan pequeñas
hinchazones denominadas bubones, que están llenos de partículas bacterianas. La cápsula viscosa
que rodea a las células de Y. pestis evita que estas sean fagocitadas por los macrófagos.
En poco tiempo, los nódulos linfáticos periféricos se ven invadidos por bubones secundarios,
hasta que se rompen y las células pasan de nuevo al torrente circulatorio, pero ahora en un
número mucho más elevado, lo que causa una septicemia generalizada.

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LAS ENTEROBACTERIAS
En este estado, se producen múltiples hemorragias que dan lugar a manchas negras sobre la piel,
procesos de gangrena en los extremos distales de las extremidades, fuerte dolor en nódulos
linfáticos, postración, shock y delirio. Si la peste no es tratada antes del estado septicémico, la
muerte sobreviene al cabo de 3-5 días.
Peste Neumónica: Este tipo de infección se produce cuando las células de Y. pestis son inhaladas
directamente, o bien llegan a los pulmones durante la peste bubónica. La infección suele
transcurrir sin síntomas hasta los dos últimos días del proceso infectivo, en los cuales se emiten
gran cantidad de esputos con sangre. En ausencia de tratamiento la muerte sobreviene en 2-3 días.
Peste septicémica: Esta infección implica una rápida dispersión de Y. pestis por todo el cuerpo, a
través del torrente circulatorio, sin tiempo para que se formen los bubones. La muerte suele
sobrevenir en 1 día, por lo que habitualmente no da tiempo a ser diagnosticada.
Las células de Y. pestis producen ciertas moléculas antigénicas que contribuyen en mayor o
menor medida al proceso de la enfermedad.
 En la pared bacteriana se encuentran unos complejos de proteína-lipoproteína,
denominados antígenos VW y F1, cuya función es evitar la fagocitosis por parte de los
macrófagos y otras células fagocíticas.
 Las cepas virulentas de Y. pestis producen y secretan una exotoxina denominada toxina
murina (debido a su extrema toxicidad para el ratón), cuyo modo de acción se basa en
inhibir la respiración, bloqueando las reacciones de transporte de electrones en las
mitocondrias, a nivel de la coenzima Q. Aunque no está claro que la toxina murina esté
implicada en la patogénesis de la peste humana, los síntomas que produce en el ratón son
similares a los que produce en humanos.
 Y. pestis también produce una endotoxina altamente inmunogénica que puede dar lugar a
una potente respuesta inmune en humanos.
Y. pestis presenta resistencia natural a la penicilina, pero la mayoría de las cepas son sensibles a la
estreptomicina, el cloranfenicol y las tetraciclinas. Actualmente hay ciertas evidencias de la
sensibilidad de Y. pestis a gentamicina y doxiciclina.
Si el tratamiento se inicia rápidamente, la mortalidad de la peste bubónica puede reducirse hasta
el 1-5% de los infectados. La peste neumónica y septicémica también puede tratarse, pero suelen
progresar tan rápidamente que los antibióticos siempre llegan tarde.

LAS ENTEROBACTERIAS
Gram (-) no
fermentadores
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LAS ENTEROBACTERIAS
14. Bacilos Gram (-) no fermentadores:
Este gran grupo de bacilos Gram negativos incluye a gérmenes pertenecientes a diferentes
familias y otros géneros de incierta clasificación. Pseudomonas, Flavobacterium, Alcaligenes,
Acinetobacter, son algunos de ellos, en general desprovistos de grandes atributos de virulencia
demostrables, no producen enfermedad en el individuo sano pero pueden comportarse como
oportunistas en enfermos inmunodeprimidos.
De las numerosas especies de Pseudomonas descritas sólo unas pocas tienen importancia en
patología humana. Pseudomonas mallei y P.pseudomallei causan enfermedad severa en el hombre
pero se aíslan raramente en el Hemisferio Occidental. Por otra parte P. cepacia es un oportunista
poco frecuentemente asociado con enfermedad en el hombre.
Nos referiremos en particular a la especie Pseudomonas aeruginosa por su frecuencia en
patología humana y estar mejor estudiada que otros. Es un microorganismo versátil, ampliamente
distribuido en el suelo, agua, plantas e intestino de animales. Puede causar enfermedad en el
hombre, ciertos animales, plantas e insectos.
El agua contaminada puede ser una fuente de infección para el hombre. Es susceptible a la
desecasión, pero sus habilidades metabólicas le permiten
sobrevivir y multiplicarse en líquidos y ambientes húmedos
de los hospitales. Sus requerimientos nutricionales son
variados, se ha aislado P. aeruginosa de aguas termales, e
incluso de soluciones desinfectantes en el hospital.
Las infecciones humanas están la mayoría restringidas a los
pacientes hospitalizados que adquieren el microorganismo
de fuentes ambientales (infección exógena) por contacto
con vectores humanos o inanimados. P. aeruginosa
desarrolla bien en medios simples, utilizándose para su
aislamiento los medios de cultivo de uso corriente en el
laboratorio clínico.
La identificación de cepas de P. aeruginosa típicamente productoras de pigmento no es difícil,
pero las cepas no pigmentadas pueden presentar un problema. La mayoría se identifican por la
producción de un pigmento, pyocyanina (Bacilo piociánico), soluble en agua,
fluorescente. P. aeruginosa produce además otro pigmento, pyoverdina, soluble
verdeamarillento, fluorescente; otras especies del género Pseudomonas también
azul, no
en agua,
producen
pyoverdina. Otros pigmentos, menos frecuentes pueden ser producidos por P. aeruginosa.
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LAS ENTEROBACTERIAS
La morfología colonial y el olor frutado de aminoacetofenona son elementos de una
identificación sencilla, y aunque existen caracteres de identificación confirmatorios, son de uso
poco corriente.
Son bacilos Gram negativos, rectos o ligeramente curvos, móviles, con un solo flagelo polar.
Oxidasa y catalasa positivas, aerobias estrictas, no fermentan glucosa, utilizan diversos azúcares
oxidativamente con producción de ácido. Uno de los caracteres más constantes es su capacidad
de desarrollar a 42ºC. Producen varias enzimas, proteasas, lipasas, lecitinasas.
Las defensas inespecíficas del huésped son en general suficientes para prevenir la infección por
P. aeruginosa, pero brechas en esta barrera permiten a P. aeruginosa invadir y causar infecciones
de diversa gravedad. Producen el 10% de las infecciones nosocomiales, infectan heridas y
quemaduras y causan infecciones pulmonares, sobre todo neumonía nosocomial e infecciones
respiratorias en pacientes con fibrosis quística.
La fibrosis quística es una enfermedad genética asociada a un defecto en la secreción de cloro,
caracterizada por la producción de mucina con una alteración de su composición iónica,
inusualmente espesa. Esto lleva a una menor eficiencia de la mucina para limpiar las bacterias del
pulmón y las vías aéreas y puede impedir el movimiento de las células fagocíticas. Estos hechos
explican la susceptibilidad de los pacientes con fibrosis quística a la colonización con P.
aeruginosa. Si los enfermos son tratados los síntomas pueden desaparecer pero las bacterias
permanecen, presentando infecciones recurrentes. Las condiciones del paciente se ven agravadas
con la infección a P. aeruginosa por las dificultades terapéuticas que se plantean debido a su alta
resistencia a los antimicrobianos.
P. aeruginosa posee los mismos tipos de factores de virulencia que otras bacterias capaces de
causar enfermedad en el hombre inmunocompetente. Pero algo
interesante es ¿por qué P. aeruginosa no es un patógeno franco y es
sólo capaz de producir infecciones oportunistas?
Es probable que P. aeruginosa sea ineficiente en su habilidad para
llevar a cabo los primeros pasos de la infección; puede colonizar pero
no invadir piel y mucosas sanas y tampoco dar infecciones
persistentes con producción concomitante de factores tóxicos que
dañen los tejidos del huésped.
Adhesinas. Produce dos tipos de adhesinas proteicas, pili y adhesinas
no pili. Los pili son pili tipo 4 similares a los de N. gonorrhoeae y se
parecen también a los pili Tcp de V. cholerae. Permiten a la bacteria
adherirse a las células epiteliales, preferentemente a receptores asialo-GM1. P. aeruginosa
produce una neuraminidasa que saca los residuos de ácido siálico de GM1, creando sitios de
unión para la pilina.
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82
LAS ENTEROBACTERIAS
Por otra parte, P. aeruginosa es capaz de unirse a la mucina y lo hace por medio de las adhesinas
no pili. Además del gen que codifica para la proteína estructural del pili otros genes codifican
proteínas ensambladoras y reguladoras. Exoenzima S. Es una enzima excretada que puede actuar
como exotoxina. Tiene actividad de ADPribosilación como otras toxinas, pero aplicada en forma
exógena no daña las células del huésped.
Al igual que la toxina colérica intervienen proteínas de las células del huésped en la activación de
la toxina para lograr su máxima actividad. Se sostiene que actuaría dificultando la acción de los
fagocitos lo que facilitaría la sobrevida de P. aeruginosa en el torrente sanguíneo y órganos. En el
pulmón actuaría inhibiendo la muerte intrafagocítica de las bacterias y promoviendo la
infiltración fagocítica en el área. También puede presentar efecto tóxico directo en los pulmones.
Exotoxina A. Esta exotoxina tiene el mismo mecanismo que la toxina diftérica. Es una toxina A-
B con tres unidades funcionales:
- dominio R (región de unión al receptor celular),
- dominio T (región que media la translocación de la porción enzimática al interior de la célula),
- dominio C (región catalítica).
Los dominios R y T se localizan en la cadena B y el dominio C en la cadena A. La cadena A es
enzimáticamente activa por ADPribosilación del factor de elongación 2 (EF-2) de la síntesis
proteica, que lo vuelve inactivo. Su receptor es una glicoproteína de las células del hospedero. La
mayoría de los aislamientos clínicos la producen, y actuaría produciendo daño en los tejidos y
disminuyendo la actividad de los fagocitos.
Elastasas. Elastina es el 30% de las proteínas del tejido pulmonar. Está también presente en la
pared de los vasos sanguíneos. Es responsable de las propiedades elásticas de estos órganos que
se expanden y contraen. P. aeruginosa tiene actividad elastolítica, produce dos enzimas que
actuarían concertadamente: LasA y LasB. LasA actuaría clivando la elastina y permitiendo la
acción de LasB, que es una zinc metaloproteasa, uno de cuyos substratos es la elastina.
Estas enzimas actuarían en las etapas tempranas de la enfermedad, por daño directo de los tejidos
pero no en infecciones crónicas, debido a la presencia de anticuerpos antielastasas. También
pueden intervenir degradando componentes del complemento e inhibidores de 1 proteinasa
(inhibe el daño de los tejidos por las proteasas de los polimorfonucleares (PMNs)). En las
infecciones crónicas, altos niveles de anticuerpos producidos pueden llevar a la formación de
complejos inmunes y su depósito en el pulmón activar complemento y atraer PMNs. Los PMNs
producen su propia elastasa, más potente que LasA-LasB.
Pequeñas cantidades de LasA pueden facilitar la degradación de la elastina pulmonar causada por
la elastasa de los PMNs. Otras enzimas extracelulares. Produce varias enzimas además de las
mencionadas. Una lipasa alcalina y dos fosfolipasas, no bien estudiadas. Por otra parte,
pyocianina puede funcionar como factor de virulencia. Puede dañar el tejido endotelial in vitro, lo
que sugiere una acción in vivo.

LAS ENTEROBACTERIAS
Un atributo de virulencia muy interesante es la producción de alginato. Es un polímero de ácido
mannurónico y gulurónico que forma un gel viscoso alrededor de la bacteria. Las colonias que lo
producen tienen aspecto mucoide. Para las bacterias marinas esto es un atributo importante para
su supervivencia. P. aeruginosa ha adaptado esto a su supervivencia en el pulmón. En medios de
cultivo ricos pierde esta propiedad.
Esta capa que rodea a la bacteria y a las colonias de bacterias en el pulmón puede actuar como
adhesina y probablemente previene la ingestión fagocítica de la bacteria. Los genes que
intervienen en su codificación están agrupados en un sector del cromosoma y organizados en un
operón, poseen un sistema de regulación extremadamente complejo.
El LPS también varía durante la transición mucoide – no mucoide. En cepas no mucoides el
antígeno O del LPS tiene cadenas largas y carga negativa mientras que las cepas mucoides tienen
cadenas más cortas y una composición de azúcares que lo hacen mucho más neutro; esto sería
importante en la alta resistencia a algunos antibióticos que presenta P. aeruginosa, situación
problemática en pacientes internados, pero dramática en los pacientes con fibrosis quística, que
muchas veces presentan infecciones por P. aeruginosa resistente a todos los antibióticos
disponibles.
APARIENCIA DE COLIFORMES EN AGAR SS (SALMONELLA – SHIGELLA)
A. Klebsiella pneumoniae
B.Escherichia coli
C: Salmonella sp.
D: Proteus mirabilis
E: Pseudomona aeruginosa
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LAS ENTEROBACTERIAS
Hafnia sp
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LAS ENTEROBACTERIAS
15. Género Hafnia:
Hafnia alvei es un bacilo gram negativo, única especie del género Hafnia, de la familia
Enterobacteriaceae, y que durante mucho tiempo fue incluida en el género Enterobacter, hasta el
desarrollo de las técnicas de biología molecular, que determinaron su separación, con definición
de un nuevo género. Se encuentra ampliamente disperso en la naturaleza, en lugares como aguas
residuales, suelo, oro – faringe humana, intestino delgado y heces de personas y animales siendo
habitualmente un microorganismo colonizador
Se trata de un microorganismo facultativo, usualmente no patógeno, que se ha aislado de cultivos
orgánicos (faringe, bronquio, sangre, orina y heces), produciendo infecciones en la gran mayoría
de los casos, en pacientes con enfermedad crónica de base, inmunodeprimidos y en relación con
estancias hospitalarias y utilización de antibioterapia de amplio espectro.
En los casos descriptos en la literatura el aislamiento de Hafnia alvei se asocia a flora
polimicrobiana, siendo difícil establecer su implicación como agente causal. En la bibliografía
revisada (MEDLINE de los últimos 10 años) se han descrito casos de gastroenteritis, enterocolitis
necrotizante, colecistitis piógena, peritonitis, meningitis, infecciones del tracto urinario, abscesos
cutáneos, endoftalmitis, bacteriemias, endocarditis, neumonía, empiema e infecciones de heridas
en enfermos hospitalizados.
H. alvei es un bacilo cuyo nombre es enterobacter hafniae y puede ser responsable de infecciones
graves adquiridas en la comunidad o en el hospital, constituyendo Enterobacter y Hafnia, agentes
de infección nosocomial en el 5% de los casos. En adultos se considera una causa excepcional de
bacteremia, neumonía, infección nosocomial de tejidos blandos, colonización de catéteres
centrales, infección postransplante, endocarditis protésica, septicemia con shock y coagulación
intravascular diseminada.
Esto es así porque los sujetos con infección por H. alvei, excepto aquéllos con afectación
intestinal, suelen tener una enfermedad grave de base, enfermedad pulmonar obstructiva crónica,
diabetes mellitus, insuficiencia renal crónica, cáncer o una serología VIH positiva.

LAS ENTEROBACTERIAS
Ewinella sp
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LAS ENTEROBACTERIAS
16. Ewinella:
Ewingella, previamente conocido como Grupo Entérico 40, es un nuevo género en la familia
de Enterobacteriaceae y se describió primero por Grimont y colaboradores en 1983.
Este género incluye sólo una especie, la Ewingella americana. Este microorganismo raramente se
encuentra en las muestras clínicas humanas. La fuente más común de humano aisla ha sido
sangre, pero también se ha aislado del esputo, orina y heridas.
En la mayoría de los casos, la importancia de la patogenia de este organismo, aunque sugestivo,
no se ha establecido. Recientemente, informes esparcidos de infecciones debidas a E. americana
han aparecido en la literatura.
Ahora es más frecuente observar su desarrollo en peritonitis causado por E. americana en
pacientes con fases finales de enfermedad renal que sufren la diálisis peritoneal ambulante
continua desde hace más de 12 años. La causa primaria de fracaso renal era la enfermedad del
riñón poliquístico.

LAS ENTEROBACTERIAS
Kluyvera sp
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LAS ENTEROBACTERIAS
17. Kluyvera:
Kluyvera corresponde a un nuevo género llamado: Grupo Entérico 8. Se divide en tres grupos:
•Kluyvera ascorbata, que sería la especie tipo y que se aísla preferentemente de especímenes
clínicos, es incapaz de crecer a 5º C, e in vitro es inhibida por cefalotina y carbenicilina. Es test
de ascorbato positivo a diferencia de la segunda especie,
•Kluyvera cryocrescens que es negativa ante este test y que se aísla más del medio ambiente que
del paciente.
•Finalmente existe un grupo heterogéneo, sin nombre específico llamado Kluyvera especie grupo
tres, distinto genéticamente de los anteriores.
Las cepas de Kluyvera tienen las mismas características de la familia Enterobacteriaceae a la cual
pertenecen, son bacilos Gram (-) con flagelos perítricos lo que la hacen móviles, catalasa (+) y
oxidasa (-), crecen en agar de Mc Conkey, fermentan la glucosa y son indol (+), rojo metilo (+).
Vogues Proskauer (-), citrato (+), H2S (-), ureasa (-), fenilalanina deaminasa (-) y arginina
dihidrolasa (-), lisina (+) y ornitina descarboxilasa (+).
Es dificil diferenciarlas de Escherichia coli. Según resultados a través del Microscan, pudimos
apreciar que es una colonia más seca y rugosa y con un fenotipo de mayor resistencia a
antimicrobianos que E. coli.
Todavía se requiere mayor información para que podamos adjudicarle un significado clínico a
este género.

LAS ENTEROBACTERIAS
Cedecea sp
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LAS ENTEROBACTERIAS
18. Cedecea:
Cedecea davisae es un bacilo gramnegativo, que pertenece a la familia de las
Enterobacteriaceae; aunque tiene diferencias fenotípicas con los otros microorganismos de esta
familia de bacterias, tiene grandes similitudes con la Serratia.
Es lipasa positiva, siendo resistente a la acción antimicrobiana de algunas cefalosporinas y de la
colistina. Se han comunicado aislamientos por este infrecuente microorganismo en esputo, tracto
gastrointestinal, heridas de las manos, escroto y ojos y también se ha aislado en algunos casos de
bacteriemias.
No se ha encontrado a la fecha ningún caso de absceso de puerta de entrada de laparoscopia en el
que se haya aislado este microorganismo, pero no es de extrañar que sea un oportunista en éste
tipo de técnicas quirúrgicas.
El nombre de Cedecea fue propuesto recientemente para un único nuevo género en el ancho
mundo de las Enterobacteriaceae, previamente conocido como Grupo Entérico 15. Los
extendidos de Cedecea se parecen a los de Serratia porque ellos son lipasas positivas y resistentes
al cephalothin y colistin.
Sin embargo, Serratia difiere de Cedecea al no hidrolizar la gelatina y el ADN. Dos especies se
nombraron originalmente en Cedecea: C. davisae y C. lapagei, pero la hibridación de ADN indicó
que otro grupo era distinto y debe ser considerado entonces como un tercero adicional.

LAS ENTEROBACTERIAS
Moellerella sp
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LAS ENTEROBACTERIAS
19. Moellerella:
El nombre de Moellerella wisconsensis se propone previamente para un grupo de la familia
Enterobacteriaceae llamado los Grupos Entéricos 46. La especie wisconsensis se acuñó porque se
aislaron seis de las nueve especies reconocidas en Wisconsin (USA).
Estas especies de wisconsensis eran negativas para: la producción del indol, Voges – Proskauer,
producción de SH2, urea, deaminasa de la felilalanina, lisina y decarboxilasa de la ornitina,
dihidrolasa de la arginina, la producción de gas de la D – glucosa, la producción ácida de la
trealosa y la motilidad.
En cambio, eran positivas para: el rojo de metilo, citrato (Simmons), producción ácida de la
lactosa y rafinosa y resistente al colistin.
La información clínica sobre un caso de un paciente internado encontrado en USA puede a priori
ser asociado con un caso de diarrea del mismo no por su patogenicidad sino por su oportunismo.
En el agar de MacConkey, las colonias de M. wisconsensis eran luminosas y rojas con la bilis
precipitada alrededor de ellos y así eran indistinguible de las colonias de Escherichia coli. Los
estudios futuros deben enfocar en el aislamiento de este nuevo organismo y su relación a la
enfermedad humana, por sobre todo a la trasmisión por los alimentos (ETA).

LAS ENTEROBACTERIAS
Rahnella sp
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LAS ENTEROBACTERIAS
20. Rahnella:
Entre los cambios que ha experimentado el trabajo con bacterias y hongos tenemos los
adelantos en la identificación, que ha pasa o rápidamente manual a automatizada, lo que ha
permitido crear una serie de bases de datos con las cuales se aumentan las posibilidades de
identificación correcta de un organismo.
La primera de esas bases de datos es la utilizada por el sistema API de la Casa BioMerieux, la
cual ha mejorado e introducido una serie de nuevos organismos. Esta misma base de datos se
utiliza en los sistemas automatizados como el Vitek de la misma casa comercial y otras bases de
datos de características similares se emplean en sistemas como el MicroScan de la Casa Dade.
Unido a esta mejoría en la identificación de los microorganismos y como un paso más adelante,
está el hecho de que el futuro en la clasificación de los microorganismos parece dirigirse al uso
de los métodos moleculares, ya sea PCR o hibridización.
Este futuro ya casi está entre nosotros y técnicas como el ribotipeo o técnicas para la detección de
genes de resistencia bacterianos ya son de uso en algunos laboratorios de investigación
costarricenses.
Todo esto ha permitido ampliar la gama de organismos que los laboratorios clínicos costarricenses
pueden identificar, entre ellos los de muy baja frecuencia de aislamiento a nivel mundial, como es
el caso de la Rahnella aquatilis que es un raro bacilo Gram negativo que pertenece a la familia
Enterobacteriaceae y fue aislado por primera vez en 1979. Ha sido aislado principalmente de
agua fresca y los aislamientos clínicos son sumamente escasos.
Ha sido encontrado en el catéter de un paciente con bacteremia posterior a un transplante de
médula ósea, en orinas de pacientes que han recibido un transplante renal, en heridas quirúrgicas
infectadas, en sangre, en muestras respiratorias y en heces. Algunos de estos pacientes estaban
infectados con el virus de la inmunodeficiencia adquirida.
Es importante mencionar que dada la rareza de los aislamientos de Rahnella aquatilis en
muestras humanas, no es posible establecer, con algún grado de certeza, su verdadera capacidad
patogénica.

LAS ENTEROBACTERIAS
Desarrollo en
medios de cultivo
tradicionales
96

LAS ENTEROBACTERIAS
MacConkey Agar
Contains crystal violet & bile salts to inhibit Gram (+) bacteria, lactose & a pH indicator (neutral
red) to determine ability to ferment lactose
LACTOSE FERMENTERS: RED / PINK S
Escherichia coli: Enterobacter cloacae: Klebsiella pneumoniae
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LAS ENTEROBACTERIAS
NON-LACTOSE FERMENTERS: COLOURLESS COLONIES
Salmonella typhi: Shigella sonnei: Proteus vulgaris
Pseudomonas aeruginosa (Blue-green colonies = pyocyanin)
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LAS ENTEROBACTERIAS
Eosin Methylene Blue (EMB) Agar
Contains eosin & methylene blue to inhibit Gram (+) bacteria. Eosin also acts as an indicator for
fermentation. Lacotse & sucrose are the sugars
Uninoculated Plate
LACTOSE FERMENTERS
Escherichia coli: Enterobacter cloacae: Klebsiella pneumoniae
(E. coli Green metallic sheen)
99

LAS ENTEROBACTERIAS
NON-LACTOSE FERMENTERS
Salmonella typhi: Shigella sonnei: Proteus vulgaris
Pseudomonas aeruginosa
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LAS ENTEROBACTERIAS
Pruebas
Bioquímicas
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LAS ENTEROBACTERIAS
Tabla de Pruebas Biquímicas base en Enterobacterias
Escherichiacoli
Shigella
Edwarsiella
Salmonella
Citrobacter Klebsiella Enterob.
Hafnia
Serratiamarcescens
Proteus Yersinia
freundi
intermediusa
intermediusb
pneumoniae
ozaenae
rhinoescleromatis
cloacae
aerogenes
vulgaris
miriabilis
morgani
rettgeri
inconstansA
inconstansB
enterocolitica
pseudotuberculosis
pestis
TSI(SH2) - - + + + - - - - - - - - - + + - - - - - - +
INDOL + + + - - + + - - - - - - - + - + + + + - - -
UREA - - - - + + + + + - + - - - + + + + - - + + -
CITRATO - - - + + + + + + - + + + + + + - + - - - - -
MALONATO - - - + - - + - + + + + + - - - - - - - - - -
MOVILIDAD + - + + + + + - - - + + + + + + + + + + + + +
FENILALANINA - - - - - - - - - - - - - - + + + + + + - - -
LISINA + - + + - - - + + - - + + + + + + + + + - - -
LACTOSA + - + + + + + + - + + - - - - - - - - - - -
GAS/GLUCOSA + - + + + + + + + - + + + + + + + + + + - - -
ROJOMETILO + + + + + + + - + + - - - - + + + + + + + + +

LAS ENTEROBACTERIAS
TRIPLE SUGAR IRON AGAR TUBES
Media contains 1% lactose, 0.1% sucrose, iron salts & phenol red. Determines
fermentation of lactose, sucrose or glucose with the formation of acid and gas. An
acid produced indicated by yellow pH indicator. Also determines ability to produce
H2S.
Acid Slant : Acid Butt
Alkaline Slants
103

LAS ENTEROBACTERIAS
Acid Butt: Salmonella & Shigella
Alkaline Butt: Pseudomonas
104

LAS ENTEROBACTERIAS
UREA TUBES
Determination of Urease production
NEGATIVE RESULT: E. coli; Enterobacter, Salmonella, Shigella &
Pseudomonas
POSITIVE RESULT: Klebsiella & Proteus
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LAS ENTEROBACTERIAS
SIM (SULPHUR INDOLE MOTILITY) MEDIUM
SULPHUR
POSITIVE: P. vulgaris & Salmonella
INDOLE
POSITIVE: E. coli & P. vulgaris
106

LAS ENTEROBACTERIAS
NEGATIVE: E. cloacae, K. pneumoniae, Ps. aeruginosa, S. sonnei, S. typhi
MOTILITY
Determined by turbidity in semi solid media
POSITIVE: E. coli, E. cloaceae, Ps. aeruginosa
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LAS ENTEROBACTERIAS
NON MOTILE: Demonstrated by growth on the inoculum line (S. sonnei, K.
pneumoniae)
SIMMON'S CITRATE AGAR
Citrate sole carbon source. Methylene blue as a pH indicator
NEGATIVE: P. vulgaris, S. sonnei, E. coli
108

LAS ENTEROBACTERIAS
POSITIVE: S. typhi. E. cloaceae, K. pneumoniae, Ps. aeruginosa
109

LAS ENTEROBACTERIAS
Ejemplo de marcha
para el aislamiento
de una
Enterobacteria
110

LAS ENTEROBACTERIAS
Aislamiento e Identificación de
Shigella Sp en una muestra de
agua
Materiales:
o Matraces Erlenmeyer.
o Pipetas estériles de 10 ml y 1 ml.
o Gradillas. Tubos de ensayo de 16 x 160 mm.
o Asa de cultivo.
o Placas de Petri de 90 mm.
o Estufa de cultivo.
o Baño Maria.
Medios de cultivo y reactivos:
 Caldo de cultivo pH 8
 Agar Salmonella-Shigella (SS)
 Agar Xilosa-Lisina-Desoxicolato (Xylose Lysine Desoxycholate: XLD)
 Agar MacConkey
 Agar Lisina Hierro (Lysine Iron Agar: LIA)
 Agar TSI ó Kligler
 Caldo Urea
Fases del aislamiento e identificación de Shigella:
1. Filtración de Membrana de la muestra de agua (100 ml) y preenriquecimiento en
medio líquido.
2. Aislamiento diferencial sobre medios sólidos selectivos.
3. Confirmación bioquímica de las colonias sospechosas.
111

LAS ENTEROBACTERIAS
Fase 1: Filtración de Membrana y Preenriquecimiento en medio líquido líquido
Se utiliza la filtración de membrana para concentrar las bacterias existentes en 100 ml de agua.
En condiciones asépticas, se utiliza un filto de membrana de
0,45 µm de tamaño de poro que se coloca en el portafiltros de
la rampa de filtración de vacío.
Se coloca el embudo del filtro previamente esterilizado.
Se inicia la filtración de los 100 ml de agua.
112

LAS ENTEROBACTERIAS
Una vez finalizado, se recoge el filtro con unas pinzas
estériles y se coloca dentro de un matraz con Caldo de
Cultivo pH 8.
Se incuba el matraz a 37ºC durante 1 – 5 días.
113

LAS ENTEROBACTERIAS
Fase 2: Aislamiento diferencial en medios sólidos selectivos
En esta etapa se utilizan medios de cultivo diferenciales que por su composición permiten que las colonias de Shigella crezcan con
un aspecto característico en cada uno de ellos (colonias típicas)
A partir del cultivo obtenido en el preenriquecimiento sembrar,
por duplicado, con asa de cultivo sobre:
Agar Salmonella-Shigella (SS)
Agar Xilosa – Lisina
Desoxycholate: XLD)
– Desoxicolato (Xylose Lysine
Agar MacConkey
114

LAS ENTEROBACTERIAS
AGAR SALMONELLA-SHIGELLA (SS): CRECIMIENTO CARACTERÍSTICO
Las colonias sospechosas de Shigella crecidas en Agar
Salmonella-Shigella son transparentes, translúcidas u opacas
y suelen ser lisas. En este medio las colonias de otros
microorganismos que fermentan la lactosa (coliformes) son
colonias rojizas y en muchos casos mucoides.
COLONIAS SOSPECHOSAS
AGAR XILOSA-LISINA-DESOXICOLATO (XLD): CRECIMIENTO
CARACTERÍSTICO
Las colonias sospechosas de Shigella crecidas sobre Agar
Xilosa Lisina Desoxicolato (XLD) son transparentes y del
mismo color que el medio de cultivo (rojo).
Este género bacteriano al no fermentar la xilosa, la lactosa ni
la sacarosa, no da lugar a que vire a amarillo el rojo fenol.
Como tampoco decarboxilan la lisina, no se produce color
rojo púrpura alrededor de las colonias, al no haberse
producido cadaverina.
115

LAS ENTEROBACTERIAS
AGAR MAC CONKEY: CRECIMIENTO CARACTERÍSTICO
Las colonias sospechosas de Shigella en Agar MacConkey
son incoloras y transparentes. En este medio las colonias de
otros microorganismos que fermentan la lactos (coliformes)
son colonias rojizas.
116

LAS ENTEROBACTERIAS
Fase 3: Identificación Bioquímica
Esta identificación se suele realizar en 2 subfases:
Subfase 4A: Identificación bioquímica inicial con unas pruebas determinadas: Generalmente,
fermentación de glucosa y lactosa (TSI), descarboxilación de la lisina (LIA) y utilización de la
urea.
Subfase 4B: Identificación bioquímica final con un sistema multipruebas: Generalmente con las
20 pruebas de la galería API20E. Esta subfase sólo se realiza con las cepas seleccionadas en la
subfase anterior.
Subfase 4A. Identificación bioquímica inicial
Aislar, como mínimo, dos colonias con aspecto típico de Shigella de cada uno de los medios de aislamiento selectivo utilizados.
Sembrar cada colonia en Agar Hierro Triple Azúcar (TSI),
con aguja de cultivo, primero en el fondo por picadura y
luego, en la superficie inclinada por estría.
Sembrar, por picadura en el fondo y por estría en la superficie
inclinada del medio Agar Lisina Hierro (LIA).
117

LAS ENTEROBACTERIAS
Sembrar, con asa de siembra en Caldo Urea.
Incubar los tubos de TSI y Urea a 37º C durante 24 horas y
los de agar LIA a 37º C durante 24 – 48 horas.
118

LAS ENTEROBACTERIAS
REACCIONES POSITIVAS DE LAS PRUEBAS BIOQUÍMICAS:
AGAR TRIPLE-AZUCAR-HIERRO
Shigella da la siguiente reacción sobre TSI:
Alcalina (rojo) en la superficie inclinada.
Ácida (amarillo) en el fondo.
Sin producción de SH2 (sin ennegrecimiento del fondo del
tubo).
Lactosa (-), Glucosa (+), SH2 (-) con o sin gas
AGAR LISINA-HIERRO
Shigella da la siguiente reacción sobre LIA:
Alcalina (color púrpura) en la superficie inclinada.
Ácida (amarillo) en el fondo.
Sin Producción de SH2 (ennegrecimiento del fondo del tubo).
LCD (-), SH2 (-)
CALDO UREA
Las Shigella no son capaces de utilizar urea.
El medio urea continen contiene un indicador de pH que vira a
color rosa fuerte cuando la reaccion es positiva.
La reacción debe ser negativa: urea (-).
Permanece el mismo color que antes de la incubación
REACCIÓN NEGATIVA
REACCIÓN POSITIVA
119

LAS ENTEROBACTERIAS
Subfase 4B. Identificación bioquímica final (Ver vídeo galería API)
Con las colonias seleccionadas en la identificación bioquímica inicial se efectúa lo siguiente:
A partir de los tubos positivos de TSI o LIA, sembrar una galería
de identificación bioquímica partiendo de los cultivos
seleccionados.
Habitualmente se hace una galería API 20E que consiste en 20
pruebas bioquímicas y que permite identificar el microorganismo
al menos a nivel de Género y en muchos casos también a nivel de
Especie.
Fase 5: Expresión de los resultados
Si la confirmación bioquímica ha resultado positiva para alguna de las cepas:
a. Expresar los resultados como: Presencia de Shigella en 100 ml de agua.
b. En casi contrario, expresar los reultados como: Ausencia de Shigella en 100 ml de agua
120

LAS ENTEROBACTERIAS
Bibliografía
121

122
LAS ENTEROBACTERIAS
24. Bibliografía:
1.BROOKS GF, BUTEL JN, ORNSTON NL, JAWETZ E. MELNICK J. ADELBERG E. 1992.
Microbiología Médica. Ed. El Manual Moderno. S.A. de C.V. México D.F.
2.MURRAY, P, KOBAYASHI, G. PFALLER, M. AND ROSENTHAL, K. 1997. Microbiología
Médica. Segunda edición. Harcourt Brace de España, S.A. Madrid, España.
3. PRESCOTT LM, HARLEY JP, KLEIN DA. 1996. Microbiology. 3ª edition, WCB Publishers.
4.TORTORA GJ, FUNKE RB, CASE CL. 1993. Introducción a la Microbiología 3era Ed.
Acribia, S.A. España.
5.J.M. AGUADO GARCÍA Y C. LUMBRERAS BERMEJO: Infecciones por enterobacterias –
Unidad de Enfermedades Infecciosas. Hospital 12 de Octubre. Madrid. Medicine 1998; 7(78):
3622-3628.
6.EISENSTEIN BI. Enterobacteriaceae. En: Mandell GL, Douglas RG, Bennett JE eds. Principles
and Practice of Infections Diseases (3d ed). New York: Churchill Livingstone, 1990.
7. ANÓNIMO. Escherichia coli infections. N Engl J Med 1985; 313: 445-457.
8.CROSS AS, GEMSKI P, SADOFF JC, ORSKOE I. The importante of the K1 capsule in
invasive infections caused by Escherichia coli. J Infect Dis 1984; 149: 184-193.
9.AGATA N, OHTA M, MIYAZAWA M, MORI M, KIDO N, KATO N. Serological response to P.
fimbriae of E. coli in patients with urinary tract infections. Eur J Clin Microbiol Infect Dis 1989;
8: 156-159.
10.JOHNSON JR. Virulence factors in Escherichia coli urinary tract infection. Clin Microbiol
1991; 4: 80.
11.EISENSTEIN BI. Diseases caused by Gram-negative enteric bacilli. En: Isselbacher KJ,
Braunwald E, Wilson JD, Petersdorf RG, Martin JB, Fauci AJ, Root RK. eds. Harrison’s
Principles of Internal Medicine (13 th ed.). New York: Mc Graw-Hill 1994; 661-669.
12.GARCÍA SAN MIGUEL J. Principales infecciones causadas por enterobacterias. En: Farreras
F, Rozman C eds. Medicina Interna. Barcelona: Mosby/Doyma, 1995; 2.277-2.285.
13.MURRAY BE. New aspects of antimicrobial resistance and the reuslting therapeutic
dilemmas. J Infec Dis 1991; 163: 1.184.

123
LAS ENTEROBACTERIAS
14.BLANCO J, ALONSO MR, BLANCO M, GONZÁLEZ EA. Mecanismos de patogénesis de
Escherichia coli causantes de infecciones gastrointestinales. Enferm Infecc Microbiol Clin 1991;
9: 641-651.
15. BONE RC. The pathogenesis of sepsis. Ann Intern Med 1991; 115: 457.
16.OSTROFF SM, KOBAYASHI JM, LEWIS JH. Infections with E. coli 0157:H7 in Washington
State. JAMA 1989; 262: 355-359.
17.DU PONT HL, ERICHSON CD. Drug therapy: Prevention and treatment of traveler’s
diarrhea. N Engl J Med 1993; 328: 1.821-1.827.
18.GRANSDEN WR, EYKYN SJ, PHILLIPS J et al. Bacteriemia due to Escherichia coli: A study
of 861 episodes. Rev Infect Dis 1990; 12: 1.008.
19. RUBINOFF MJ, FIELD M. Infectious diarrhea. Annu Rev Med 1991; 42. 403.
20.CARPENTER JL. Klebsiella pulmonary infections: Occurrence at one medical center and
review. Rev Infect Dis 1990; 12: 672.
21.CARLSON JR, THORTON SA, DUPONT HL, WEST AM MATHEWSON JJ. Comparative in
vitro activities of ten antimicrobial agents against bacterial enteropathogens. Antimirob Agents
Chemoter 1983; 24: 509-513.
22.GUARGA A, URRUTIA A, MUGA R, et al. Bacteriemia por Enterobacter agglomerans
(Erwinia herbicola). Med Clin (Barc) 1984; 82: 579-580.
23.CHOW JW, FINE MJ, SCHLAES DM, et al. Enterobacter bacteremia: Clinical features and
emergence of antibiotic resistance during therapy. Ann Intern Med 1991; 115:585.
24.CRUMP J, CANSDALF S. Enterobacter resistant to amoxycillin/clavulanate. Lancet 1982; II:
500.
25.RAIMONDI A et al. Imipenem and meropenem resistant mutnts of Enterobacter cloacae and
Proteus rettgeri lack porins. Antimicrob Agents Chemother 1991; 35: 1.174.
26.SCHABERG DR. Major trends in the microbial etiology of nosocomial infection. Am J Med
1991; 91 (suppl 3B): 72S. 3628 ENFERMEDADES INFECCIOSAS (V) © Idepsa 98 ©
27.HSU WY, SIMONNE A, JITAREERAT P. 2006. Fates of seeded Escherichia coli O157:H7
and Salmonella on selected fresh culinary herbs during refrigerated storage. J. Food Prot.
69(8):1997-2001

124
LAS ENTEROBACTERIAS
28.PRATS, G. (Editor). 2001. Guia per a la prevenció i el control de la infección per Escherichia
coli O157:H7 i altres Echerichia coli verotoxigenes. Barcelona: Direcció General de Salut
Pública.
29.AABO, S.; ANDERSEN, J.K. AND OLSEN, J.E. 1995. Detection of Salmonella in minced
meat by the polymerase chain reaction method. Lett. Appl. Microbiol. 21:180-182.
30.ARROYO, G. AND ARROYO, J.A. 1995. Efficiency of different enrichment and isolation
procedures for the detection of Salmonella serotypes in edible offal. J. Appl. Bacteriol. 79:360-
367.
31.MCKAY, A.L. AND PETERS, A.C. 1995. The effect of sodium chloride concentration and pH
on the growth of Salmonella typhimurium colonies on solid medium. J. Appl. Bacteriol. 79:353-
359.
32.RODRÍGUEZ-JEREZ, J.J.; ROIG-SAGUES, A.X.; MORA-VENTURA, M.T.; GARCIA-
MAROTO, A. AND ALVAREZ-QUINTANA, M.A. 1996. A comparison between traditional
plating methods, VIDAS system and Bactometer for rapid detection of Salmonella in poultry.
16th International Symposium of the International Committee on Food Microbiology and
Hygiene. Budapest (Hungary). 1996.
33.I.C.M.S.F. 1983. Ecología microbiana de los alimentos. Vol. I. Factores que afectan a la
supervivencia de los microorganismos en los alimentos. Acribia. Zaragoza
34.EICKHOFF, T.C. 1972. Infección de los pneumoniae del Klebsiella: una revisión referente a la
significación epidemiológica flotante de la presencia de los pneumoniae del K. en el ambiente
natural. Consejo nacional de la industria de papel para Air y boletín técnico no 254, Nueva York,
N.Y. de Stream Improvement, Inc.
35.MARTIN W.J., P., K.W. YU, Y J.A. Washington. 1971. Significación epidemiológica de los
pneumoniae del Klebsiella - un estudio de 3 meses. Mayo C.in. Proc. 46:785 - 793. 3) SELDEN,
R., HECES DEL S., W.L.L. WANG, J. V. BENNETT Y T.C. EICKHOFF. 1971. Infecciones
nosocomiales del Klebsiella: colonización intestinal como resevoir. Anuncio Interno. Med.
74:657 - 664.]
36. PATTERSON Y M.J. WOODBURN, 1980. Diario de la ciencia de alimento 45:492 - 495 y
D.F. SPLITTSTOESSER, D.T. QUEALE Y B.W. ANDALORO. 1983. La microbiología de los
brotes vegetales durante la producción comercial. Diario de la seguridad 5:79 - 86 del alimento.

125
LAS ENTEROBACTERIAS
37.SORIANO JM, RICO H, MOLTO JC, MELENAS J., Microbiología interna del alimento de J
2000 30 Jun; 58 (1-2): 123-8, Gravamen de la calidad microbiológica y tratamientos de la colada
de la lechuga servidos en restaurantes de la Universidad – Comunicación Personal TERRY
PETERS, Salud – Canadá.
38.Recomendaciones del Comité de Nefrología de la Sociedad Argentina de Pediatría para la
prevención del Síndrome Urémico Hemolítico (febrero 1999).
39.Síndrome Urémico Hemolítico: Estudio anatomoclínico de 59 pacientes. G.GALLO, F.
MENDILAHARZU Y N. DELGADO.
40. Oficina de Prensa y Comunicación Ministerio de Salud de la Nación.
41.Comité de Nefrología. Incidencia del Síndrome Urémico Hemolítico (SUH) en la República
Argentina. Arch Arg Pediatr 1995; 93: 409-11.
42. DRA. MARTA RIVAS, Servicio de Fisiopatogenia, INEI – ANLISMALBRAN.
43.Ciencia y Técnica UNL - Fuente: Prensa Institucional UNL) - Importancia del diagnóstico
precoz del Síndrome Urémico Hemolítico.
44. LABORATORIO ELEA SACIFYA. Gallo 238 PB - Buenos Aires – Argentina.
45.MARÍA ROSA VIÑAS, MARCELO E. SANZ, NORA L. PADOLA, ANALÍA I.
ETCHEVERRÍA, ALBERTO E. PARMA - Laboratorio de Inmunoquímica y Biotecnología,
Facultad de Ciencias Veterinarias Universidad Nacional del Centro y CIC, Tandil - Escherichia
coli verotoxigénica (VTEC): su transmisión por alimentos – Ciencia Hoy Volumen 10 Nro. 55 -
Febrero / Marzo 2000.
46 SANZ, M. E., VIÑAS, M. R. & PARMA, A. E., 1997, "Prevalencia de E. coli verotoxigénica
(VTEC) en bovinos de Argentina". Libro de resúmenes del I Congreso Internacional de
Infectología y Microbiología Clínica (SADI-SADEBAC), E53.
47.Temas de zoonosis y enfermedades emergentes, Asoc. Arg. de Zoonosis, Buenos Aires, pp. 46-
49.
48.ABBOTT SL. Klebsiella, Enterobacter, Citrobacter, Serratia, Plesiomonas, and other
Enterobacteriaceae. En: Murray PR., Baron EJ, Jorgensen JH, Pfaller MA, Yolken RH (eds).
Manual of clinical microbiology (8ª ed). American Society for Microbiology: Washington, 2003;
pp 684-700.

126
LAS ENTEROBACTERIAS
49.HICKMAN FW, STEIGERWALT AG, FARMER JJ 3RD, BRENNER DJ. Identification of
Proteus penneri sp. nov., formerly known as Proteus vulgaris indole negative or as Proteus
vulgaris biogroup 1. J Clin Microbiol 1982; 15:1097-1102.
50.LIASSINE N, MADEC S, NINET B, et al. Postneurosurgical meningitis due to Proteus
penneri with selection of a ceftriaxone-resistant isolate: analysis of chromosomal class A beta-
lactamase HugA and its LysR-type regulatory protein HugR. Antimicrob Agents Chemother
2002; 46: 216-219.
51.LIVERMORE DM, Winstanley TG, Shannon KP. Interpretative reading: recognizing the
unusual and inferring resistance mechanisms from resistance phenotypes. J Antimicrob
Chemother 2001; 48 (Supl 1):87-102.
52.OHNO A, ISHII Y, MA L, YAMAGUCHI K. Problems related to determination of MICs of
oximino-type expanded-spectrum cephems for Proteus vulgaris. J Clin Microbiol 2000; 38:677-
681.
53.PÉDUZZI J, REYNAUD A, BARON P, BARTHÉLÉMY M, LABIA R. Chromosomally
encoded cephalosporin-hydrolyzing beta-lactamase of Proteus vulgaris RO104 belongs to
Ambler's class A. Biochim Biophys Acta 1994; 1207:31-39.
54.ROZALSKI A, SIDORCZYK Z, KOTELKO K. Potential virulence factors of Proteus bacilli.
Microbiol Mol Biol Rev 1997;61:65-89.
55.SZABO D, PATERSON DL. Proteus species. En: Yu VL, Weber R, Raoult D (eds).
Antimicrobial therapy and vaccines. Volume I: Microbes. Apple Trees Productions, Maryland.
2002; pp 537-544.
56.ORTEGA M, DELGADO R, FERNANDEZ P, ELGORRIAGA L, DEL VALLE L,
GUTIERREZ J. Kluyvera cryocrescens: a positive urine culture in a young girl with persistent
proteinuria. Actas Urol Esp. 1999; 23(6): 528-31.
57.WEST B, VIJAYAN H, SHEKAR R. Kluyvera cryocrescens finger infection: case report and
review of eighteen Kluyvera infections in human beings. Diagn Microbiol Infect Dis Nov 1998;
32(3): 237-41.
58.SEZER M, GULTEKIN M, GUNSEREN F, ERKILIC M, ERSOY F. A case of Kluyvera
cryocrescens peritonitis in a CAPD patient. Perit Dial Int 1996; 16(3): 326-7.

127
LAS ENTEROBACTERIAS
59. THALLER R, BERLUTTI F, THALLER M. A Kluyvera cryocrescens strain from the foods.
CORDOBA, 22 de agosto de 2007.
Teniente Coronel Veterinario SANTIAGO PABLO BAGGINI
JEFE del SERVICIO de BROMATOLOGÍA – HOSPITAL MILITAR REGIONAL CÓRDOBA
F I R M A D O

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