Este documento describe dos prácticas de laboratorio sobre las pruebas de Coombs. La práctica 19 describe la prueba de Coombs directa, que detecta anticuerpos unidos directamente a los eritrocitos. La práctica 20 describe la prueba de Coombs indirecta, que detecta anticuerpos en suero que se unen a antígenos en eritrocitos de otras personas. Ambas pruebas involucran lavados de eritrocitos, mezclas con reactivos y observación para detectar aglutinación.

1. INSTITUTO SUPERIOR TECNOLÓGICO PÚBLICO “CAP. FAP, JOSÉ ABELARDO
QUIÑONES” “DE TUMBES”
CARRERA : LABORATORIO CLINICO Y ANATOMIA
PATOLOGICA
PERIODO : 2023 - II
SEMESTRE : SEXTO
TURNO : TARDE
CURSO : HEMOTERAPIA Y BANCO DE SANGRE
TAREA : PRÁCTICA N° 19 PRUEBA DE COOMBS DIRECTA y
CONTROL / PRACTICA N° 20 PRUEBA DE COOMBS INDIRECTA
DOCENTE : MARLENI INGA BARRETO.
ESTUDIANTE : INFANTE ZAPATA JUANA LOURDES
TUMBES _ PERÙ
2023

2. PRÁCTICA N° 19 PRUEBA DE COOMBS DIRECTA y CONTROL
Esta prueba se usa para determinar si hay complemento o anticuerpos ya fijados alos eritrocitos
tomados directamente del paciente. Estas células, alcanzadas de una venopunción, se lavan y se
agrega el reactivo de Coombs. Los anticuerpos del reactivo se unen a IgG, IgM, o complemento que
está unido a la superficie de los glóbulos rojos. Estos se aglutinan, produciendo grupos de células
que indican un resultado positivo.
material de bioseguridad:
● guardapolvo
● guantes
● mascarilla
● toca
materiales y equipos:
● tubos de ensayo
● viales
● gradilla
● centrífuga
● micropipetas
● pipetas
● jeringas
● incubadora
muestras:
● dos muestras de diferente paciente donante y receptor
reactivos:
● suero de coombs color verde
● albumina color transparente
PROCEDIMIENTO:
1. Lavado de manos.
2. Calzado de guante correctamente.
3. Extraer la muestra, rotulamos.
4. Centrifugamos y hacemos el fraccionamiento que consiste en separar el

3. plasma y los eritrocitos de ambos tubos del donante y receptor.
5. Luego ya separado procedemos a realizar los lavados de eritrocitos.
6. En un tubo colocamos 2ml de eritrocitos y 3 ml de sangre.
7. Se tapa el tubo con parafina y luego Homogenizamos suavemente
Y centrifugamos manualmente o llevamos a refrigerar por 4 minutos.
8. Primer lavado.
9. Luego con un gotero procedemos a eliminar la solución salina que quedó
suspendida en la fase superior.
10.Luego para el segundo lavado se añade 3ml de solución salina se tapa con
parafina y se homogeniza suavemente y se centrifuga manualmente.
11. Segundo lavado
12.Luego con un gotero procedemos a eliminar la solución salina que quedó
suspendida en la fase superior
13.Luego para el segundo lavado se añade 3ml de solución salina se tapa
y se homogeniza suavemente y se centrifuga manualmente.
14.Tercer lavado.
15.Luego con un gotero procedemos a eliminar la solución salina que quedó
suspendida en la fase superior.
Luego procedemos hacer la solución 5 %
16.Realizar el método directo.
17.Colocar en un tubo de ensayo una o dos gotas de suero de coombs.
18.Luego agregar una gota de eritrocitos lavados al tubo.
19.Luego se mezclan
Anexos
Preparación de eritrocitos al 5%
5----100
x----2
5x2 =10/100 =0.1 100 ul de sangre
100 1900 ul de ssf
2000 ul de suspensión de eritrocitos al 5%

5. PRÁCTICA N° 20 MÉTODO INDIRECTO DE COOMBS
PRUEBA DE COOMBS INDIRECTA:
Se detectan anticuerpos específicos de ciertos antígenos que no necesariamente están
presentados en los glóbulos rojos del paciente, pero puede estar en glóbulos rojos de otras personas.
Si se mezcla suero tomado de un paciente que contiene estos anticuerpos con glóbulos rojos que sí
muestran estos antígenos específicos, los glóbulos rojos se van a cubrir con anticuerpo. Una vez
cubiertas, las células se van a aglutinar después de una exposición al reactivo de Coombs. En el
diagnóstico de eritroblastosis fetal, el suero tomado de la madre Rh- no reacciona con su propia
sangre, sino con la de su feto Rh+. El suero de la madre, que contiene anticuerpos específicos del
factor Rh, se mezcla con glóbulos rojos Rh+. Los anticuerpos del suero se unen a las células. Luego,
se agregan anticuerpos antihumanos para aglutinar los glóbulos rojos. Se puede diluir el suero y
hacer la prueba repetidas veces, para cuantificar los anticuerpos en el suero.
MATERIAL DE BIOSEGURIDAD:
● GUARDAPOLVO
● GUANTES
● MASCARILLA
● TOCA
MATERIALES:
● TUBOS DE ENSAYO
● VIALES
● BAÑO MARIA
● GRADILLA
● CENTRÍFUGA
● PIPETAS
● JERINGAS
MUESTRAS
● DOS MUESTRAS DEL PACIENTE: DONANTE Y RECEPTOR EN EL TUBO LILA Y SUERO DEL TUBO ROJO.
REACTIVOS:
● Suero de Coombs color verde.
● Albúmina color transparente.
● Suero Fisiológico

6. 1. Lavado de manos.
2. Calzado de guante correctamente..
3. Extraer la muestra, rotulamos.
4. Centrifugamos y hacemos el fraccionamiento que consiste en separar el plasma y los eritrocitos de ambos
tubos del donante y receptor..
5. Luego ya separado procedemos a realizar los lavados de eritrocitos..
6. En un tubo colocamos 2 ml de eritrocitos y 3 ml de sangre.
7. Se tapa el tubo con parafina y luego Homogenizamos suavemente. Y centrifugamos manualmente o
llevamos a refrigerar por 4 minutos.
8. Primer lavado del donante y el receptor.
9. Luego con un gotero procedemos a eliminar la solución salina que quedó suspendida en la fase superior.
10.Luego para el segundo lavado se añade 3 ml de solución salina se tapa y se centrifuga manualmente
11. Segundo lavado del donante y el receptor.
12.Luego con un gotero procedemos a eliminar la solución salina que quedó suspendida en la fase superior.
13.Luego para el segundo lavado se añade 3 ml de solución salina se tapa con parafina y se homogeniza
suavemente y se centrifuga manualmente.
Tercer lavado del donante y el receptor Luego con un gotero procedemos a eliminar la solución salina que
quedó suspendida en la fase superior

7. Luego procedemos hacer la solución 5% del donante y 5% el receptor

8. Luego se mezclan suavemente.
Para llévalos al baño maría a 37°C
a luego cumpliendo el tiempo en el baño maria.
Se añade 2 gotas de reactivo albúmina al tubo auto testigo e indirecto no se mezcla se incuba durante 20
o 30 minutos . Luego se retiran del baño maría
Observar aglutinación
Anexos
Preparación de eritrocitos al 5%
5----100
x----2
5x2 =10/100 =0.1 100 ul de sangre
100 1900 ul de ssf
2000 ul de suspensión de eritrocitos al 5%