La vía de la pentosa fosfato genera NADPH que se utiliza en la biosíntesis de ácidos grasos, colesterol y protección contra la toxicidad del oxígeno. También produce azúcares de 5 carbonos para la biosíntesis de nucleótidos, ARN y ADN. El documento analiza los tipos de inhibidores enzimáticos y determina que el inhibidor en el ejemplo presentado es competitivo al disminuir la V máxima y aumentar el KM.

1. Vía de la Pentosa Fosfato Prof. Italo Chiffelle G. Bioquímico, Dr.

2. Funciones: • Generar NADPH + H + , que se útiliza en la biosíntesis de ácidos grasos o de colesterol. Además el NAHPH tiene un efecto proctector contra la toxicidad del oxígeno en los eritrocitos • Biosíntesos de los azúcares de 5 carbonos encontrados en los nucleótidos (ATP, NAD + , NAPD + , Coenzima A, FAD), RNA y DNA. Estequiometría general: 3G-6-P + 6NADP + 3CO 2 + 6NADPH + 6H + + 2F-6-P +Glic-3-P

3. Glucosa G-6-P Fructosa-6-P Gliceraldehido-3-P Piruvato Glucólisis Ribulosa-5-P Ribosa-5-P Biosíntesis de Ácidos Núcleicos 2 NADP + 2 NADPH CO 2 Oxidativa No-oxidativa Biosíntesis de Ácidos Grasos Protección de O 2 Otras reacciones NADH ATP Vía de la Pentosa Fosfato

4. _ CO 2 + Glucosa 6-P 6-P gluconato lactonasa 6-P gluconato Ribulosa 5-P Glucosa 6-P deshidrogenasa NADPH NADPH H 2 O H + 2-     2- 2- 2- _ 2-

5. + + Gliceraldehido-3-P + Xilulosa-5-P Ribulosa-5-P 5-P de ribosa Fructosa-6-P Sedoheptulosa-7-P Fructosa-6-P Eritrosa-4-P 2- 2- 2- 2- 2- 2- 2- 2- 2-

6. Xilulosa-5-P Ribosa-5-P Xilulosa-5-P Gliceraldeido-3-P Sedoheptulosa-7-P Fructosa-6-P Fructosa-6-P Eritrosa-4-P Gliceraldehido-3-P Glucólisis 6 NADPH 3 CO 2 epimerasa epimerasa isomerasa transcetolasa transaldolasa transcetolasa 3 Glucosa-6-P 3 Ribulosa-5-P

7. Observaciones de la vía: * Todas las reacciones de la porción no-oxidativa de la vía son isoergónicas y bidirecionales . Por ende, son reac- ciones reversibles y brindan gran flexibilidad metabólica * En la vía de la pentosa fosfato, en contraste, con la glicólisis, debe notarse que no se genera ATP por si mismo * La trascetolasa tiene al pirofosfato de tiamina como grupo prostético. Esta enzima son clave en la vía, transfiere unidades de 2C (-COCH 2 OH).

8. Metabolismo de la Manosa: Manosa 6-P Fructosa 6-P ATP Hexoquinasa Fosfomanosa isomerasa Glucólisis * La manosa no es muy abundante en la dieta humana

9. Metabolismo de la Fructosa: Fructosa 1-P Dihidroxiacetona P Gliceraldehido + Gliceraldehido 3-P Fructosa 6-P Glucólisis ATP ATP ATP La fructosa puede proveer entre 30 a 60% de los hidratos de carbono de la diéta, ingestión típica 100 g al día Hexoquinasa Fructosaquinasa HOCH 2 CH 2 OH OH OH OH 2-

10. Metabolismo de la Galactosa: Galactosa 1-P Glucosa 1-P Glucosa 6-P UDP-Glucosa UDP-Galactosa ATP Galactoquinasa Galactosa 1-P uridintransferasa Glucólisis Epimerasa Fosfoglucomutasa

11. Se investigó el efecto de un inhibidor I sobre la velocidad de una reacción catalizada enzimaticamente sobre un solo sustrato, obteniéndose los siguientes resultados: Concentración de sustrato [S] (mM) Concentración del Inhibidor [I] (mM) 0 0,5 1,0 0,33 0,20 0,14 0,50 0,33 0,25 0,67 0,50 0,40 0,80 0,67 0,57 0,83 0,71 0,63 0,05 0,10 0,20 0,40 0,80 Velocidad de reacción (  M/ min) a) Determine K M y V máxima de la enzima b) Qué tipo de inhibidor está presente

12. Solución) a) Primero se determina las constantes a través del método de los recíprocos. 20 10 5 2,5 1,25 1/ [S] 3 2 1,5 1,3 1,2 1/ v [I]= 0 0,5 1,0 5 3 1 1,5 1,4 7 4 2,5 1,8 1,6

13. Del gráfico se ve que V máxima no varia pero si K M con la presencia del inhibidor, luego el tipo de inhibición es competitiva 10 0 -5 -10 10 5 20 Intersección: -1/K M = -10  K M =0,1 Intersección: 1/Vmáx= 0,93  V máx=1,08 1/ v 1/ [S] [I]= 0 [I]= 0,5 [I]= 1

14. Características de los Diferentes Tipos de Inhibidores Tipo de inhibición Inhibidor se combina con: Efecto aparente sobre V máx. Efecto aparente sobre K M Efecto sobre las gráficas 1/V v/s 1/ [S] E Ninguno  CONVERGENTE EN el eje de la ORDENADA ES   Rectas PARALELAS Competitiva Acompetitiva No-competitiva: a) Simple (K ESI =K EI ) b) Mixta 1 (K ESI  K EI ) c) Mixta 2 (K ESI  K EI ) E y ES      Ninguno CONVERGENTE EN el eje de la ABSCISA CONVERGENTE por ENCIMA de la ABSCISA CONVERGENTE por DEBAJO de la ABSCISA