AGRICULTURA

1. UNIVERDIDAD NACIONAL DE
AGRICULTURA
CLASE
FITOMEJORAMIENTO.
TEMA
CULTIVO IN VITRO.
CATEDRÁTICO
M.SC. ISRAEL RODAS.
INGENIERIAAGRONOMICA
SECCION A
PRESENTADO POR:
DIEGO GARCIA -20A0056.
ISELA BANEGAS - 21A0085.
YEIMY AYALA - 21A0155.
CRISTIAN BACA - 21A0219.
EMILIO GARCIA - 21A0240.
JOSUE GARCIA - 21A0435.
MALCON VALENTIN - 21A0383.

2. INTRODUCCIÓN
El cultivo in vitro es una técnica utilizada para cultivar y mantener
células fuera de su entorno, generalmente en un entorno de
laboratorio controlado. Este método permite a los investigadores
estudiar el comportamiento celular en diferentes condiciones. Sus
aplicaciones son varias. También podría mencionar la importancia
del control de la contaminación y la garantía de calidad cuando se
trabaja con organismos vivos en un laboratorio.

3. OBJETIVO
Dar a conocer que es cultivo in vitro, explicar las
diferentes técnicas que se emplean para realizar este
procedimiento, así como también mencionar las
condiciones asépticas que se necesitan para el desarrollo
eficiente de las plantas.

4. 02
Biotecnología Vegetal
Cultivo in vitro de tejidos vegetales
Micropropagación
Ciencia que permite la producción de manera más
rápida nuevas variedades de plantas y estas poseen
características mejoradas.
Esta es una práctica que su objetivo es la propagación de plantas
de manera asexual, a través de este método se pueden clonar
plantas a partir de un explante.

5. QUÉ ES CULTIVO IN VITRO?
Consiste en tomar una porción de
una planta (ápice, una hoja o
segmento de ella, segmento de
tallo, meristemo, embrión, nudo,
semilla, antera, etc.) y colocarla
en un medio nutritivo estéril
(usualmente gelificado,
semisólido) donde se regenerará
una o muchas plantas.

6. El cultivo in vitro se basa en el aislamiento de órganos, tejidos o células
vegetales y en el ajuste de las condiciones necesarias para la obtención de
respuestas fisiológicas o morfogénicas a partir de estos explantes.
El explante es un tejido vivo el cual es
separado de la planta madre y este es
transferido a un medio artificial de
crecimiento para que este pueda
desarrollarse dentro del mismo e iniciar el
cultivo in vitro.

7. LA TOTIPOTENCIA
Capacidad de una célula de generar un individuo
completamente idéntico a la célula madre, la cual tiene la
misma información genética y la misma función, es
decir, indica que cualquier célula vegetal contiene una copia
íntegra del material genético de la planta a la que pertenece
sin importar su función o posición en ella, y por lo tanto tiene
el potencial para regenerar una nueva planta completa.

8. CONDICIONES
REGULADAS
Luz
Temperatura
Humedad
pH
Nutrientes
Un laboratorio debe tener como mínimo:
Un área de crecimiento.
Un área para la preparación de medios de cultivo.
Un área de descarte.
Un área para siembra de tejidos vegetales.
Un área destinada para el material del vidrio del
laboratorio.
Un área para el almacenamiento de los reactivos.
Cuarto de crecimiento o de incubación vegetal.

9. Equipos requeridos en cada una de las áreas del laboratorio

10. Equipos
requeridos en
cada una de
las áreas del
laboratorio

11. Explantes más usado para los procesos de propagación in vitro
Yemas vegetativas: Son los explantes más
utilizados, ya que son capaces de generar
nuevas plantas a partir de una sola célula. Las
yemas vegetativas pueden ser apicales,
axilares o adventicias. Las yemas apicales
son las más utilizadas, ya que son las que
tienen mayor capacidad de crecimiento y
desarrollo.

12. Explantes más usado para los procesos de propagación in vitro
Segmentos de tallo: Los segmentos de
tallo se utilizan para propagar plantas que
son difíciles de propagar a partir de
yemas vegetativas. Los segmentos de
tallo deben ser de al menos 2 cm de
longitud y deben tener al menos un nudo.

13. Explantes más usado para los procesos de propagación in vitro
Hojas
Las hojas se utilizan para propagar
plantas que tienen un crecimiento lento o
que son difíciles de propagar a partir de
yemas vegetativas o segmentos de tallo.
Las hojas deben ser sanas y libres de
enfermedades.

14. Explantes más usado para los procesos de propagación in vitro
Meristemas
Los meristemas son tejidos de
crecimiento que se encuentran en las
puntas de las raíces y tallos. Los
meristemas son muy utilizados para
propagar plantas que son susceptibles a
enfermedades o que son difíciles de
propagar a partir de otros explantes.

15. MEDIOS DE CULTIVOS
Los medios de cultivos son
soluciones acuosas donde se
desarrollan microorganismo o
células, o tejidos vegetales y
animales. El desarrollo de estos
solo ocurre en presencia de los
nutrientes requeridos (que
dependen del microorganismo o
tipo de células o tejido en
particular
Necesidades nutricionales y
hormonales de los cultivos de órganos
y tejidos vegetales
 Agua
 Azucares
 Aminoácidos
 Vitaminas
 Auxinas
 Citocininas
 Giberelinas
 Macronutrientes
 Micronutrientes

16. Organogenesis
Embriogénesis somática
TECNICAS MAS UTILIZADAS EN EL CULTIVO IN VITRO
Cultivos de callos.
Cultivo de células y suspensión
celulares.
MICROPROPAGACIÓN.

17. FASES DE LA MICROPROPAGACIÓN
Selección y preparación
de la planta madre
Se busca la que tenga
mejores caracteres para
tener mejores
resultados.
Establecimiento del
cultivo in vitro
Debe desinfectarse el
material vegetal, aquí
comienza el ciclo in
vitro.
Desarrollo y
multiplicación de brotes
Los explantes inician a
desarrollarse con varias
hojas, los brotes que se
sub cultivan en frascos
adecuados.
Enraizamiento
Cuando los brotes comienzan
a nacer, este paso consiste en
aplicar un enraizante para
estimular el crecimiento de las
raíces.
Aclimatación de las plántulas
La aceptación de la producción
depende de este paso ya que
permite la adaptación de las
plantas para que puedan vivir en
condiciones naturales.

19. VENTAJAS DE LA
MICROPROPAGACIÓN
• Posibilita incrementar rápidamente nuevos materiales.
• Permite controlar las condiciones ambientales, debido a su
independencia de los mismos (luz, temperatura y humedad
controlada).
• Permite estudiar diversos procesos fisiológicos.
• Evita el riesgo de contaminación con patógenos, ya que se realiza
en medios esterilizados.
• Se pueden obtener gran cantidad de individuos en espacios
reducidos.
• Permite la obtención de individuos uniformes.

20. PROBLEMAS QUE SE PUEDEN
PRESENTAR:
La contaminación en los cultivos in vitro y esta puede tener dos
orígenes:
• Microorganismos que colonizan la superficie o el interior del
explante (endófitos)
• Microorganismos introducidos durante la manipulación en el
laboratorio.
En algunos casos el porcentaje de mortalidad está relacionado a
errores que comete el operario, tales como, el mal seguimiento de
los protocolos durante el establecimiento, refrescamiento y
multiplicación.(Gálvez L. & Elizalde O. 2021)

22. Multiplicación in vitro de plátano (Musa × paradisiaca L.)
Variable evaluada
Número de brotes por
explante
El objetivo de la investigación fue determinar la dosis adecuada de
auxinas y citoquininas.
Observar el efecto en la producción del número de brotes por explante.
Suplementos usados
Acido indolacético
Bencilaminopurina
Se evaluaron 12 tratamientos

23. OBTENCIÓN DEL MATERIAL VEGETAL
Se utilizó la variedad Curaré enano, el cual tiene mayor aceptación
en el mercado y tiene mayores rendimientos en campo en
comparación a otras variedades.
Meristemos apicales fueron extraídos de cormos de hijuelos de la
plantación de plátano. Zamorano, Honduras.
Se utilizo 360 cormos utilizando como criterio altura de 30 cm y 20
cm de diámetro, que no presentaran daño mecánico, ni síntomas de
enfermedades.

24. Diseño Experimental
Se usó un diseño completamente al azar (DCA) los tratamientos
evaluados fueron 12, seis dosis de BAP (0, 4, 5, 6, 7, 8 mg/L)
combinadas con AIA 0.2 mg/L o sin AIA. Se evaluaron 12
tratamientos con 30 repeticiones por tratamiento, para un total de
360 unidades observacionales.
Análisis Estadístico
Se utilizó un análisis de varianza con separación de medias por el
método Duncan, con una probabilidad ≤ 0.05. (Gálvez L. & Elizalde
O. 2021)

25. RESULTADOS Y DISCUSION
(Gálvez L. & Elizalde O. 2021)

26. El cultivo in vitro es una tecnología que a través del tiempo se ha
puesto en práctica con varias especies vegetales para poder obtener
una mejor calidad de plantas también mencionar que a través de esta
técnica se puede tener un alto rendimiento de tejidos vegetales donde
saldrán plantas clonadas por medio de una célula madre, este
procedimiento como antes se mencionó se puede realizar de manera
directa e indirecta con la finalidad de tener una producción de
calidad donde se obtendrán plantas sin ningún tipo de enfermedad
COMENTARIOS FINALES

27. - Rápida producción de plantas geneticamente idénticas. Permite
propagar especies de plantas que presentan dificultad por los
métodos tradicionales.
- Permite controlar las condiciones ambientales, debido a su
independencia de los mismos (luz, temperatura y humedad
controlada).
CONCLUSIONES

28. 1.Que es un explante?
2. Que tipos de explantes son los mas usados?
PREGUNTAS

29. REFERENCIAS
 García, L. R., Pérez, M. M. H., Rivero, L., Rodríguez, M., La O, M., Padrón, Y., Mirabal,
D., & Moreno-Bermúdez, L. J. (2020). Protocolo para la macropropagación de Kalanchoe
blossfeldiana Poelln. Biotecnologia Vegetal, 20(2), 129-134.
https://revista.ibp.co.cu/index.php/BV/article/view/664
 Cultivo In Vitro de Células y Tejidos Vegetal. (s. f.). Intagri.com.
https://www.intagri.com/articulos/nutricion-vegetal/cultivo-in-vitro-de-celulas-y-tejidos-
vegetal
 María, L., & Segretín, E. (s. f.). Los cultivos celulares y sus aplicaciones II (cultivos de
células vegetales).
Argenbio.org. https://www.argenbio.org/images/La_biotecnologia/Cap_2/Cultivos_celular
es_II.pdf
 Gálvez L. & Elizalde O. 2021. Multiplicación in vitro de plátano (Musa × paradisiaca L.).
EAP, Zamorano.