conceptos básicos, biotecnología clásica, historia, Definición, Fundamento, Esquema de proceso, Medios utilizados, Aplicaciones, Articulo relacionado, referencias

1. UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE NUEVO LEÓN
Facultad de Ciencias Químicas
Químico Farmacéutico Biólogo
Aplicaciones de biotecnología
Tema: Micropropagación
Alumno: Eduardo Esparza Huerta
Profesora: M.C. Jessica Judith Gómez Lugo

2. Biotecnología
Biotecnología
Vegetal
Constituye el empleo de plantas para producir bienes y servicios, esto incluye todas las técnicas
agrónomas y hortícolas tradicionales.
Es una extensión de esta tradición permite la transferencia de una mayor variedad de
información genética de una manera más precisa y controlada.
Micropropagación
Embriogenesis
Mutagenesis
Hibridación y clonaje
Métodos clásicos Métodos modernos
ADN recombinante
Cultivos trasgenicos
Etc.
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3. Historia
Micropropagación
En 1878 Vochting: observó que células de tallos eran capaces de
rediferenciarse y formar raíces y brotes.
En 1898 Gottlieb Haberlandt: propuso que era posible cultivar juntas
células vegetativas libres y túbulos de polen adicionando soluciones
nutrientes suplementadas con extractos de ápices vegetativos o con
fluidos de sacos embrionarios.
Es por ello que ahora se considera a Haberlandt como el padre de la
técnica de cultivo de células y tejidos vegetales, la cual se ha
convertido en el dogma central de la Biotecnología Vegetal.
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4. Definición
Micropropagación
Consiste en la propagación de plantas en un ambiente artificial
controlado, empleando un medio de cultivo adecuado.
Conjunto de técnicas y métodos de cultivo de tejidos utilizados para
multiplicar plantas asexualmente en forma rápida, eficiente y en grandes
cantidades.
Conjunto de técnicas usadas para crecer células, tejidos u órganos
vegetales in vitro, bajo condiciones asépticas, controladas y libres de
microorganismos.
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5. Se basa en el principio de totipotencia, que indica que cualquier célula
vegetal contiene una copia íntegra del material genético de la planta a
la que pertenece sin importar su función o posición en ella, y por lo
tanto tiene el potencial para regenerar una nueva planta completa.
Fundamento
Micropropagación
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6. Fases de la micropropagación:
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Proceso
Micropropagación
Preparación de la planta madre
Establecimiento del cultivo en
condiciones de asepsia
Multiplicación de brotes
EnraizamientoAclimatación

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Proceso
Micropropagación
Preparación de la planta madre:
Mantener a las plantas madre, es decir la planta donante de yemas,
durante un período que puede oscilar entre unas semanas o varios
meses en un invernadero bajo condiciones controladas. En ese
ambiente se cultiva la planta en condiciones sanitarias óptimas y con
un control de la nutrición y riego adecuados para permitir un
crecimiento vigoroso y libre de enfermedades.
En esta etapa se realizan estudios mediante pruebas serológicas debido
a que pueden ser portadoras de enfermedades endófitas

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Proceso
Micropropagación
Establecimiento del cultivo en condiciones de asepsia
Los explantos pueden ser yemas,
trozos de hojas, porciones de
raíces o semillas.
Antes de extraer los explantos se
hará una desinfección de los
fragmentos de planta madre para
eliminar los contaminantes
externos
Se debe mantener en condiciones de
asepsia.
A efectos de obtener tales
condiciones, se trabaja en cabinas de
flujo laminar para extraer los
explantos a partir del material
vegetal.
Estos explantes se introducirán en
un tubo de cultivo conteniendo
medio de cultivo para poder
controlar la sanidad y la viabilidad
luego de realizar la desinfección del
material con hipoclorito de sodio
(agua clorada comercial), pura o
diluida durante un período de 5 a 15
minutos, seguido por 3 a 4
enjuagues en agua esterilizada.

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Proceso
Micropropagación
Multiplicación de brotes
Se espera que los explantes
que sobrevivieron las fases
anteriores originen brotes
con varias hojas.
En la base de cada hoja hay
una yema que se desarrollará
luego de ser puesta en
contacto con el medio de
cultivo.
Periódicamente estos nuevos
brotes se deben subcultivar
en un nuevo medio por
resiembras en tubos de
cultivo u otros recipientes
adecuados.
El número de plantas que se
obtiene dependerá de la
especie vegetal y de las
condiciones del medio de
cultivo.
permite alcanzar incrementos
exponenciales, considerando
que todos los factores que
afectan el crecimiento hayan
sido optimizados.

10. 13/05/2016 Eduardo Esparza Huerta 10
Proceso
Micropropagación
Enraizamiento
El enraizamiento puede realizarse tanto en condiciones in vitro como ex vitro. En el primer caso pueden
emplearse varios tipos de sustratos y reguladores de crecimiento (auxinas) para promover la rizogénesis.
A fin de proceder a su enraizamiento, los vástagos de buen tamaño provenientes de la etapa de
multiplicación y provistos de al menos 4-5 yemas, se colocan durante períodos cortos en soluciones con
concentraciones elevadas de auxinas.
La auxina más utilizada es el IBA (ácido 3- indolbutírico), que puede utilizarse a concentraciones de 1-10 mM
durante pocas horas. Luego los vástagos se transfieren a un medio de cultivo basal desprovisto de
reguladores de crecimiento para permitir el desarrollo de las raíces.

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Proceso
Micropropagación
Aclimatación
Consiste en el paso de las plantas del cultivo al medio
natural.
Este es extremadamente importante, ya que si no se
realiza cuidadosamente se pueden perder gran número de
plantas.
Las plantas en condiciones de cultivo están en una
atmósfera con alta humedad y baja intensidad luminosa,
por tanto el tejido epitelial se caracterizará por tener
menos ceras que protejan a las plantas contra la
deshidratación.
El acondicionamiento de nuevo al medio exterior se
efectuará por tanto cuidadosamente, utilizando para ello
invernaderos.

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Proceso
Micropropagación

13. 13/05/2016 Eduardo Esparza Huerta 13
Proceso
Micropropagación

14. 13/05/2016 Eduardo Esparza Huerta 14
Medios
Micropropagación
Contiene los elementos abióticos que integran las sustancias nutritivas de diversa
consistencia.
Suministra anclaje, nutrición y la estimulación del desarrollo al Explante según sea
la técnica empleada.
Comercialmente se consiguen ya elaborados:
• Murashige and Skoog (MS)
• White´s, Gamborgs, Schenk and Kilderbran, Nitzch, Orchid.

15. 13/05/2016 Eduardo Esparza Huerta 15
Medios
Micropropagación
Un medio de cultivo en forma general está compuesto de:
Componentes de medio Ejemplos
Sales minerales N, K, P, Ca, Mg, S , Fe, Mn, Cu, Zn, Cu, Mo
Fuentes de energía Sacarosa o glucosa, fructosa, lactosa
Agentes solidificantes Agares
Vitaminas Thiaminina, Ácido Nicotínico, peroxidina
Aminoácidos Caseína Hidrolizada, Asparagidina,
Adenina
Suplementos orgánicos jugo de tomate, de naranja, de zanahoria
Antioxidantes carbón activado o sisteina-HCl
Ácidos orgánicos TCA, Citrato, malato

16. • Conservación de especies raras endémicas o amenazadas
• Propagación masiva de plantas, especialmente para especies de difícil
propagación por otros métodos
• Obtención de un producto “superior”
• Obtención de plantas libres de viru
• Aplicable a un amplio espectro de especies
• Obtención de metabolitos secundarios
Aplicaciones
Micropropagación
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17. Articulo
Micropropagación
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18. Articulo
Micropropagación
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19. Articulo
Micropropagación
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20. • Calva Calva G, Pérez Vargas J. CULTIVO DE CÉLULAS Y TEJIDOS VEGETALES: FUENTE DE ALIMENTOS PARA EL FUTURO.
RDU. 2005 Nov 10; 6 (11): 2-16. URL disponible en: http://www.revista.unam.mx/vol.6/num11/art104a/nov_art104a.pdf
• McCulloch S, Olympia, WA. MICROPROPAGATION OF RHODODENDRONS. JARS. 1984; 38 (2) . URL disponible en:
http://scholar.lib.vt.edu/ejournals/JARS/v38n2/v38n2-mcculloch.htm
• Salvador Rojas Gonzales, Jairo García Lozano, melva Alarcón Rojas. Propagación asexual de plantas, corpoica, pag. 31-35 URL
disponible en: https://books.google.com.mx/books?id=lK_KuQR9H8AC&printsec=frontcover&hl=es#v=onepage&q&f=false
• CALDERON BALTIERRA X. ALESSANDRO ROTELLA, PEREZ F. Micropropagación de una especie chilena en peligro
de extinción: Gomortega keule (Mol.) Baillon (Magnoliopsidae, Gomortegaceae). BOSQUE 14(1): 23-28, 1993 URL
disponible en: http://mingaonline.uach.cl/pdf/bosque/v14n1/art03.pdf..
Referencias
Micropropagación
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