3. Fundamento
Electrones son emitidos por un cátodo de
tungsteno pasando a través de una columna
con vacío de alrededor de 10-7 Torr.
Haz concentrado por una serie de lentes
electromagnéticas 25,000 nm- 50,000 nm
hasta hacerse puntual.
El haz puntual se desplaza sobre toda la
superficie a manera de pincel idas-venidas
gracias a la bobina de barrido.
Lente
electro
magnéti
ca
4. Recubrimiento de muestras en alto vacío
Consigue recubrimientos de grano mucho más fino y
preparado” con distintos metales.
También trabaja por el método de evaporación, con lo que
el rango de posibles elementos de recubrimiento.
el alto vacío permite que los e no interactúen con nada en su
camino e interferir en la formación de la imagen.
spputtering
5. Condiciones de la muestra
1. Muestras secas, conductoras y
muertas.
2. El proceso de secado ha de
llevarse a cabo preservando al
máximo la estructura original de la
muestra.
3. En ambos casos la muestra
necesita recubrirse después con
un material que la haga
conductora y permita su
observación en el microscopio.
Recubrimiento de oro para
mejorar la condición de la imagen. “spputtering”
7. Interacción
haz superficie
muestra
Captados
por un
detector
Los e
inciden
sobre un
scinllator
Cada e
dará varios
fotones
serán
dirigidos a
un
fotomultip
licador
Formación
fotoelectrón
Los dinodos
formaran e
secundarios
Amplificación de
la información
sobre la
muestra
suministrada de
e
oceso formación de la imagen
8. Formación de la imagen
la imagen será dividida en muchos
elementos fotográficos los cuales
serían captados por el sistema
fotográfico instalado en el instrumento
e integrados en una sola imagen que
nos informa sobre la apariencia cúbica
de material en estudio.
Las señales de interés son aquellas
compuesta por e secundarios y los
reflejados.
Estos serán recogidos por el detector en
términos de brillos y oscuros sobre la
pantalla del ORC.
10. Observación de muestras crio fijadas crio-SEM
El microscopio electrónico de barrido (SEM) puede dotarse de un sistema capaz de
observar la muestra a muy baja temperatura de forma que su preservación estructural
es máxima y la capacidad de trabajo del microscopio no se afecta en absoluto, pues ya
ya no tratamos con una muestra hidratada sino congelada.
proceso inicia fuera del microscopio, enfriando la muestra a la máxima velocidad
esta se puede fracturar, sublimar el hielo superficial y recubrir con oro o carbono para
observación.
ventaja se puede observar cualquier muestra biológica o hidratada con una
preparación mínima y rápida con una buena preservación estructural.
11. Las técnicas de crio preparación de
muestras para la microscopía
electrónica de barrido son esenciales
para la observación de especímenes
húmedos o sensibles al haz de
electrones. El crio-SEM permite la
observación de los especímenes en su
estado natural, evitando
encogimientos, distorsiones y el uso
de los agentes tóxicos requeridos para
la fijación de materiales biológicos. Es
una técnica excelente para la
observación de líquidos o semilíquidos
en el microscopio electrónico de
barrido. -180 oC
12. Pulverización catódica
comienza cuando un sustrato a recubrir se coloca en una cámara de vacío que
contiene un gas inerte, generalmente argón, y se aplica una carga negativa a un
material fuente objetivo que se depositará sobre el sustrato y hará que el
plasma brille.
Los átomos de gas inerte se convierten en iones con carga positiva atraídos por
el material objetivo cargado
La pulverización catódica está causada principalmente por el intercambio de
momento entre los iones y los átomos del material, debido a colisiones.
la pulverización mediante iones de muy alta energía o iones pesados altamente
cargados que transfieren energía al sólido principalmente mediante una
irradiación de partículas en la que la excitación electrónica produce la
pulverización.
15. Desventajas:
-Costo y
mantenimiento
del
microscopio.
-El limitado
diámetro de la
apertura no
permite que la
información
detallada
alcance la
imagen,
limitando de
este modo la
resolución.
Existen
también
distintas
aberraciones
producidas por
las lentes.
En el material
biológico
presenta dos
problemas
fundamentales:
el entorno de
vacío y la
transferencia
de energía.
Notas del editor
TENDRA MAS O MENOS FUNCIONALIDAD SEGÚN EL NUMERO DE DETECTORES QUE TENGA
Las lentes electromagnéticas son la lente condensadora y la objetiva focalizan el haz de electrones haciendo mas pequeño su diametro