histología humana

1. Microscopio Electrónico de
Transmisión
Miguel Moreno
Stephanie Silva

2. Un microscopio electrónico de transmisión (TEM, por sus siglas en inglés, o MET, en español) es
un microscopio que utiliza un haz de electrones para visualizar un objeto. Debido a que la
potencia amplificadora de un microscopio óptico está limitada por la longitud de onda de la luz
visible.
Se caracteriza
 Uso de una muestra ultrafina.
 Útil para visualizar los detalles internos de
una muestra.
 Pueden aumentar un objeto hasta un millón
de veces.
Microscopio electrónico de transmisión
 No permite extraer información de la su
perficie de la muestra.
 Tiene un limite de resolución de cerca de 2 nm
 Los electrones son conducidos hacia la muestra
mediante las lentes electromagnéticas.
Aparato de Golgi

3. Reseña Histórica
 El primer microscopio electrónico de
transmisión fue desarrollado por Ernst Ruska y
Max Knoll en Alemania en 1931.
El primer microscopio electrónico comercial
fue producido en 1938 por Siemens y en 1939
produjo un microscopio electrónico de
transmisión.
Max Knoll
Ernst Ruska

4. Las partes principales
Muestra la imagen que producen los
electrones, que suele ser un ordenador.
Cañón de electrones
Emite los electrones que chocan o atraviesan
el espécimen.
Lentes magnéticas
Crear campos que dirigen y enfocan el
haz de electrones.
Sistema de vacío
Los electrones pueden ser desviados por las
moléculas del aire, se debe hacer un vacío casi
total en el interior de un microscopio de estas
características.
Sistema de registro

5. Preparación de los especímenes
• Fijación
El tejido debe ser fijado, endurecido y preservado con tetraóxido de
osmio (OsO4) y glutaraldehído, con un cuidadoso manejo del pH (con
cacodilato de sodio)
• Contraste:
Las organelas y estructuras de interés deben ser electrón-densas y
contrastar con el fondo (background).
• Deshidratación
El espécimen va a estar en el vacío y no puede contener agua, pues
esta se evaporará y dispersará los electrones.
• Inclusión
El espécimen deshidratado se coloca en óxido de propileno y resinas
epóxicas o acrílicas, las cuales se endurecen y forman un bloque sólido
de plástico muy duro.
• Corte
Se emplea un ultramicrótomo que permite rebanar el tejido en cortes
ultrafinos con una cuchilla de diamante, logrando cortes del orden de
los 100 nm

6. Funcionamiento
• En el microscopio electrónico, el tungsteno se
calienta aplicando una corriente de alto voltaje,
los electrones forman una corriente continua,
que se utiliza como un haz de luz. Las lentes
utilizadas son bobinas magnéticas capaces de
enfocar el haz de electrones sobre la muestra e
iluminarla.

7. • Cuando emerge del espécimen el haz de electrones transporta
información sobre la estructura del espécimen que es
magnificado por el sistema objetivo del microscopio.
• Esta información puede ser vista proyectando la imagen del
electrón magnificado en una pantalla de visualización
fluorescente cubierta con un material del fósforo tal o el sulfuro
del Zinc.
• La imagen puede ser grabada fotográficamente exponiendo una
película o una placa fotográfica directamente al haz de electrones
• La imagen detectada por la cámara digital puede visualizarse en
un monitor o en un ordenador.

8. Ventajas y desventajas
• Los elevados costos de los
equipos y la debida
adecuación de una
infraestructura para el buen
funcionamiento.
• La manipulación de
reactivos se torna peligroso
por la elevada condición
toxica de los mismos.
• Proporciona resultados muy
precisos de amplia resolución y
magnificación.